A3α肽聚糖对受免彭泽鲫免疫应答影响的研究

给彭泽鲫注射接种灭活嗜水气单胞菌苗，然后投喂含有肽聚糖的饲料，测定鲫鱼白细胞吞噬活性、血清和体表粘液溶菌酶活性、抗体效价以及活菌攻毒后的免疫保护率等免疫指标。结果：各项免疫指标显著提高，表明A3α肽聚糖可增强受免彭泽鲫的免疫应答效果。     

黄芪多糖对杂交鲌的非特异性免疫作用

在饲料中添加定量的黄芪多糖,探讨黄芪多糖对杂交鲌的免疫调节作用。用添加不同含量黄芪多糖的饲料,连续投喂杂交鲌30 d,测定试验鱼的增重、血清凝集抗体效价、溶菌酶的活性、谷丙转氨酶的活性、血清总蛋白含量和白细胞吞噬活性。进行攻毒嗜水气单胞菌活菌的复感染试验,测定相对免疫保护率。结果显示添加黄芪多糖的饲料投喂杂交鲌生长速度较对照组稍快;试验组鱼体的溶菌酶活性和白细胞吞噬活性,比对照组鱼体均有所提高;谷丙转氨酶活性的检测结果表明试验组鱼体的肝功能有所改善;对嗜水气单胞菌的抵抗能力,与空白对照组相比有所增强。说明黄芪多糖对杂交鲌免疫机能具有调节作用。     

荧光假单胞菌疫苗对异育银鲫的免疫保护效应

为探讨荧光假单胞菌疫苗对异育银鲫的免疫保护作用,为其在赤皮病防治上的应用提供理论依据,以福尔马林灭活的荧光假单胞菌(Pseudamonas fluoroscens)全菌疫苗、菌体外膜蛋白(OMP)疫苗作为免疫原,以平均体重100.0g±15.0g的健康异育银鲫(Carassius auratus gibelio)为试验对象,通过腹腔注射免疫原(浓度分别为1.0×108/mL、0.2mg/mL)免疫,剂量为0.2mL/尾,对照组注射等量灭菌生理盐水。分别在免疫注射1、2、4、7、14、21、28、35d后对试验鱼尾静脉采血,进行外周血细胞计数、吞噬活性和抗体效价的测定。结果2种免疫原均可诱导异育银鲫外周血液红细胞、白细胞数量增加,吞噬细胞的吞噬活性和血清抗体效价均升高。免疫注射35d后活菌攻毒,福尔马林灭活荧光假单胞菌苗(F-PF)组的免疫保护率为61.1%,OMP组的免疫保护率为72.2%,OMP组的免疫保护效果优于F-PF组。证明2种免疫原均通过促进异育银鲫血细胞增殖,产生特异性抗体的方式提高机体的免疫保护力。     

巴基斯坦不同新城疫疫苗株及两种途径免疫效果的比较

通过两种途径（点眼和饮水）给６组１２日龄雏鸡分别免疫３株新城疫（ＮＤ）疫苗，第６不接苗作为对照，连续７周每周检一次血清中血凝抑制（ＨＩ）抗体效价并研究其对攻内脏型强毒ＮＤＶ的保护情况。研究结果显示，攻毒前ＬａＳｏｔａ株通过点眼途径产生的ＨＩ抗体途径最高而Ｍｕｄｔｅｓｗａｒ株通过饮水途径产生的ＨＩ抗体效价最低。从攻毒保护情况看，所有３株疫苗点眼比饮水途径的保护率高，同时注意到攻毒前后的ＨＩ抗体效价呈     

团头鲂对3种致病菌外膜蛋白(OMP)的免疫应答

利用从柱状黄杆菌(Flavobacterium columnare)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和温和气单胞菌(Aeromonas sobria)中提取的外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)作为免疫原,注射接种团头鲂(Megalobrama amblycephala)后,通过测定受免鱼的交叉凝集抗体效价、肾脏和血液中吞噬细胞的吞噬活性和采用A.hydrophila活菌攻毒方法,比较了3种致病菌OMP对团头鲂的免疫原性。试验结果表明,从3种致病菌中提取的OMP对团头鲂均具有较强的免疫原性,受免鱼的血清中存在对3种致病菌的交叉凝集抗体,与对照鱼相比,肾脏和血液中吞噬细胞对吞噬原的吞噬活性和对A.hy-drophila活菌攻毒的相对免疫保护率(relative percent survival,RPS)明显上升。说明在3种致病菌的OMP上不同程度地存在共同保护性抗原。     

牛传染性鼻气管炎弱毒疫苗免疫抗体水平与保护效力的关系

利用微量血清中和试验和攻毒试验、牛传染性鼻气管炎弱毒活疫苗检测免疫后牛血清中牛传染性鼻气管炎病毒的抗体效价及其与保护效力的平衡关系。40头牛其中弱毒活疫苗免疫牛30头,对照牛（抗体阴性牛）10头,采用不同剂量免疫（10^3.5～10^6.5TCID50／mL）,按抗体效价高低将实验动物分,并用IBRV LN01／08强毒株攻击,将攻毒保护结果与攻毒时抗体效价结果平行比较分析,结果显示,当IBRV抗体效价高于1：6时,疫苗免疫可以对牛产生良好的保护效力,保护率在80％以上,低于1：6但高于1：3时,免疫苗抗体阳性牛攻毒后保护率近78％。试验结果显示牛传染性鼻气管炎活疫苗的抗体水平于保护效力之间存在一定的平行关系。     

超声灭活大肠杆菌制造禽大肠杆菌病疫苗

超声灭活大肠杆菌继之以辐射处理是一种制备大肠杆菌病疫苗最有效的方法。该法制备的疫苗比用其他方法（热，甲醛，辐射等）灭活制备的疫苗的保护率都高，该法制的O2：1株超声疫苗同时能抵抗同源菌株O73：K80的攻击，其保护率与攻毒当天测得的大肠杆菌抗体效价成正相关，免疫后5天仅能测得低效价抗体，保护率为20％，免疫后5－18天可 得高效价抗体，攻毒后只有极少数出现病变，每个攻毒组中，无病变鸡比有病变鸡抗体效价高，显示鸡病变程度与抗体效价之间存在相关性。     

鸡新城疫灭活疫苗免疫攻毒试验与血清学(HI)试验的平行关系研究

对19批鸡新城疫(ND)灭活疫苗进行了效力检验,在测定PD50的同时,进行了HI抗体效价的测定,以寻找血清学与抗攻毒保护的平行关系.结果表明,免疫剂量与GMHI抗体效价和攻毒保护率呈正相关:免疫1/12.5剂量组共保护54/60(90%),GMHI抗体效价为5.6 log2;免疫1/25剂量组共保护152/191(79.6%),GMHI抗体效价为4.9 log2;免疫1/50剂量组共保护123/183(67.2%),GMHI抗体效价为4.0 log2;免疫1/100剂量组共保护46/139(33%),GMHI抗体效价为3.0 log2;对照组保护0/89(0),GMHI抗体效价≤2.0 log2.采用PD50测定的18批疫苗中,有15批合格,3批不合格;按照我国现有质量标准,即免疫1/25剂量攻毒的方法进行检验,19批疫苗中有16批合格,3批不合格;血清学方法检验19批疫苗中有17批合格,2批不合格.其中免疫攻毒效检方法与PD50测定方法的不合格疫苗批次完全相同,其中2批为免疫胚制造的疫苗,1批为进口的灭活疫苗,血清学检验不合格的2批疫苗包含在其中,三种检验方法结果基本一致.试验还发现,HI抗体效价和抗攻毒保护呈正相关:未免疫对照组鸡血清HI抗体效价≤2.0 log2,攻毒保护率为0(0/89);免疫ND灭活疫苗后如果血清HI抗体效价＜3.0 log2,攻毒保护率为3.5%(4/113);HI为3.0 log2,攻毒保护率为16.1%(14/87);HI为4.0 log2,攻毒保护率为86.7%(86/99);HI达到5.0 log2,攻毒保护率为97.2%(103/106),HI≥6.0 log2,攻毒保护率为100%(168/168).     

苏云金芽孢杆菌对黄河鲤鱼血液免疫效果的研究

本试验研究苏云金芽孢杆菌对黄河鲤鱼血液免疫应答强度的影响。将苏云金芽孢杆菌按1．0×10^11、3．0×10^11、5．0×10^11cfu／kg3个浓度添加在鱼用配合颗粒饲料中,投喂经嗜水气单胞菌（A．hydrophila）苗免疫（A0-3）和未免疫组（B0-3）黄河鲤鱼,分别于第0、15、30、40d时检测各组鲤鱼白细胞吞噬活性、血清溶菌酶活性、血清凝集抗体效价,并进行攻毒试验。结果表明,投喂苏云金芽孢杆菌对黄河鲤鱼血液免疫应答有明显促进作用．     

鸡新城疫基因Ⅶ型灭活标记疫苗（MG7株）最小有效免疫剂量的研究

为科学指导鸡新城疫基因Ⅶ型灭活标记疫苗（MG7株）的临床免疫剂量,通过测定免疫鸡HI抗体滴度和攻毒保护试验,进行了10日龄和30日龄SPF鸡最小有效免疫剂量的研究。动物实验使用10 μL、20 μL和40 μL三种不同免疫剂量,免疫疫苗后21 d检测HI抗体效价,10日龄SPF鸡001批次疫苗HI抗体平均效价依次为：4.8、6.2和6.5,攻毒保护率依次为80%、100%和100%,30日龄SPF鸡HI抗体平均效价依次为：5.0、6.3和6.5,攻毒保护率依次为70%、100%和100%,结果表明,新城疫灭活标记疫苗（MG7株）HI 抗体效价和保护效力呈正相关, 免疫剂量与HI 抗体效价和保护效力也呈正相关。用NDV基因Ⅶ型强毒G7株进行攻毒保护试验,两种日龄鸡在20 μL的免疫剂量下,疫苗仍能达到良好的免疫保护效果。     

PEG对嗜水气单胞菌疫苗制备与免疫效果影响的研究

为评价聚乙二醇(PEG)作为超声介质及疫苗佐剂对嗜水气单胞菌疫苗免疫效果的影响,本研究将该疫苗与常规疫苗分别经腹腔注射免疫接种锦鲤成鱼,检测血细胞吞噬百分率、吞噬指数、抗菌活力、抗体效价及免疫保护力等指标,评价疫苗效果.结果表明PEG6000作为佐剂制备的疫苗,其各指标均高于对照组及其他试验组.PEG6000疫苗免疫保护力达到77.8％,高于常规灭活疫苗22.2％,表明PEG6000作为佐剂制备的疫苗效果最好.     

Adjuvant and immunostimulatory effects of beta-glucan administration in combination with lipopolysaccharide enhances survival and some immune parameters in carp challenged with Aeromonas hydrophila

Combined effects of beta-glucan and lipopolysaccharide (LPS) on survival and immune response were studied in Cyprinus carpio that were challenged with the pathogen Aeromonas hydrophila. beta-Glucan from Saccharomyces cervisiae and LPS from a virulent strain of A. hydrophila were used in this study. Different concentrations of beta-glucan+LPS mixture were administered on days 1, 7, and 14 through different routes (intraperitoneal injection, bathing, and oral administration). Control and test fish were challenged by intraperitoneal injection of LD50 concentration of A. hydrophila on day 16 and subsequently, mortality and relative percent survival (RPS) were recorded. Intraperitoneal injection elicited 100% RPS even at the lowest concentration (100 microg beta-glucan+10 microg LPS); whereas, oral administration improved RPS rate of carps at higher concentration (1% beta-glucan+0.25% LPS). Bathing did not improve the RPS. Test animals injected with even the minimum dose of the immunomodulators (100 microg beta-glucan+10 microg LPS/fish) had a significant increase in total blood leukocyte counts and an increase in the proportion of neutrophils and monocytes. Superoxide anion production by macrophages was also elevated, which presumably aided the efficient killing of bacterial pathogen. Lower concentration of beta-glucan+LPS had an adjuvant effect on antibody production as pretreatment by injection of 100 microg beta-glucan+10 microg LPS/fish resulted in higher antibody titer against A. hydrophila following vaccination. RT-PCR analyses showed that the expression of interleukin-1beta mRNA did not increase in test fish when compared with the control. Classical and alternative complement pathways were not affected by either the dose or the route of administration of the compounds. It may be concluded that intraperitoneal injection and oral administration, and not the bathing, of beta-glucan+LPS mixture in carp could enhance resistance to challenge by A. hydrophila through changes in several non-specific and specific immune responses.     

嗜温气单胞菌的鉴定及其外膜蛋白型研究

从病鳖、鳗鱼体内分离到2株嗜温气单胞菌(TAh-3、EAs-1),经形态学观察、生理生化特性等鉴定,确定TAh-3为嗜水气单胞菌,EAs-1为温和气单胞菌。动物感染试验结果表明,TAh-3株为致病性嗜水气单胞菌,对鲫鱼的致死率100%,EAs-1株为非致病性温和气单胞菌。SDS-PAGE电泳结果显示,TAh-3株外膜蛋白(OMPs)型由7条蛋白带组成,其中1条主带大小为40.0kDa;EAs-1株OMPs型由8条蛋白带组成,其中2条主带大小为38.0kDa、45.0kDa。     

嗜水气单胞菌研究进展

嗜水气单胞菌属于弧菌科气单胞菌属,在自然界分布广泛,可以感染多种水生及陆生动物并引起不同的疾病,是一种重要的人—兽—鱼共患病病原菌,本文概述了嗜水气单胞菌的分类地位和生物学性状,并对其鉴定方法、致病因子和由其引起的疾病进行了综述。     

蛋氨酸对幼建鲤疾病抵抗能力及免疫应答的影响

本试验旨在研究蛋氨酸对幼建鲤疾病抵抗能力及免疫应答的影响.选择体重为(12.34±0.02)g健康建鲤864尾,平均分成6组,每组144尾(每组设3个重复,每个重复48尾),分别饲喂蛋氨酸水平为0.39%、0.70%、1.00%、1.30%、1.60%和1.90%的饲料,饲养60 d后用嗜水气单胞菌攻毒17 d,考察蛋氨酸对幼建鲤免疫功能的影响.结果表明:适宜蛋氨酸水平极显著提高了攻毒前头肾体指数、后肾体指数、脾体指数、血液红、白细胞数量和攻毒后红细胞数量(P<0.01);显著提高了攻毒前白细胞吞噬率和攻毒后成活率、白细胞数量、白细胞吞噬率、血清酸性磷酸酶活力、溶菌酶含量、补体C3含量、凝集素水平和抗嗜水气单胞菌抗体效价(P<0.05).由此得出,蛋氨酸通过增强白细胞吞噬能力和提高特异性抗体效价从而提高幼建鲤的非特异性和特异性免疫力,增强疾病抵抗力.     

不同硒水平对幼鲤生产性能和免疫功能的影响

选择体重约10.4 g的健康幼鲤960尾,随机分为8组,每组3个重复,每个重复40尾,分别饲喂添加硒(亚硒酸钠,分析纯)0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7 mg/kg的8种不同饵料,试验期90 d。结果表明:随着饵料中硒添加水平的增加,幼鲤的增重和成活率提高,饵料系数降低,添加硒0.4mg/kg时,幼鲤生产性能最佳(P<0.05);添加0.3～0.5 mg/kg硒,可显著提高幼鲤头肾和脾脏重及其体指数,增加血液红细胞数量,降低白细胞数量,提高血清IgM水平和攻毒后成活率、血清溶菌酶活力及血清凝集抗体效价(P<0.05),从而增强幼鲤免疫功能和对疾病的抵抗力。幼鲤体增重、饵料系数、头肾重量、脾脏重量、血清溶菌酶活力和IgM抗体水平与饵料硒添加量呈显著的二次曲线相关。根据上述指标确定的最适硒水平为0.396～0.529 mg/kg。     

斑鳢细菌性败血症病原菌的分离与鉴定

由患细菌性败血症的斑鳢分离到１１株菌,根据直接荧光抗体法鉴定结果,对其中７株菌的菌落特性进行了观察,分析了菌株的生化特性,并测试了其对斑鳢、乌鳢和鲫的致病力。结果证明,斑鳢的细菌性败血症是由嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）引起的     

三味中药水煎液单用及联用对鲫鱼免疫保护作用的研究

试验旨在探讨黄芪、地榆、五倍子三味中药水煎液单用及联用对鲫鱼的免疫保护作用.选取200尾鲫鱼,随机为5组,每组40尾.对照组鲫鱼饲喂基础饵料,试验组鲫鱼饲喂中药包被的饵料,黄芪、地榆、五倍子、联用浓度分别为2.500、2.500、1.250、0.625 g/mL,中药水煎液与饵料按1∶1比例混合,对鲫鱼进行定时定量饲喂...     

Gut microbial status induced by antibiotic growth promoter alters the prebiotic effects of dietary DVAQUA® on Aeromonas hydrophila-infected tilapia: production, intestinal bacterial community and non-specific immunity

The purpose of the present study was to investigate whether dietary antibiotic-induced changes in the fish intestinal microbiota altered host physiological responses to the infection with Aeromonas hydrophila in hybrid tilapia (Oreochromis niloticus ♀ × O. aureus ♂). After an 8-week induction period with an antibiotic-supplemented or antibiotic-non-supplemented diet, 160 hybrid tilapias in 16 tanks were each injected with phosphate buffered saline (PBS) or A. hydrophila at a dose of one-half of the LD(50). Then, all of the diets were changed to a prebiotic-supplemented one for the sequential 8-week response period. Parameters including production, gut microbial diversity and count, and non-specific immunity were determined at the end of the response period. Our results showed that A. hydrophila infection had no effects on the growth and diet conversion of tilapia, but it caused the decrease of the gut bacterial count, the number of visual bands, and the Shannon diversity and equitability indexes of gut bacteria in antibiotic-non-supplemented fish based on PCR-DGGE fingerprints. Infection with A. hydrophila reduced the gut bacterial evenness (lower Shannon equitability index), and slightly improved the gut bacterial richness (more visual bands) in antibiotic-supplemented tilapia. In addition, A. hydrophila infection affected non-specific immunity such as serum lysozyme activity and serum alternative complement pathway (C3 and C4) activities regardless of hybrid tilapia fed antibiotic-supplemented diets. These changes varied based on the intestinal microbial status of the fish before infection with A. hydrophila.     

致病性嗜水气单胞菌PCR快速检测方法的建立

本试验根据GenBank已登录的致病性嗜水气单胞菌保守序列16S rDNA和Aero,设计2对引物,以嗜水气单胞菌纯培养物为起始材料,建立PCR检测方法。从12株分离物中均扩增到16S rDNA片段,从3株分离物中均扩增到Aero片段,经序列测定和分析,所扩增的片段均为嗜水气单胞菌的核苷酸序列。结果表明,建立的PCR方法可用于检测致病性嗜水气单胞菌。