浅谈纸片扩散法药敏试验

纸片扩散法药敏试验主要是观察兽医临床用药中抗生素的抑菌效果的一种检测方法，是基层单位选择药物治疗经常进行的工作之一。药敏试验的方法很多，常用的方法有纸片扩散法、肉汤稀释法、琼脂稀释法、Etest法、自动化药敏仪测定等。目前正在研制和推广的方法还有DNA异源双链分析法、     

对纸片扩散法药敏试验的再认识

兽医临床同样存在病原菌耐药性明显增多的威胁 ,尽管新的抗菌药不断问世 ,但常见病原菌的耐用药性也随之增加 ,因此 ,有效的抗生素治疗更加有赖于准确的抗菌药敏试验。药敏试验有纸片扩散法、肉汤稀释法、琼脂稀释法及新推出的Ｅｔｅｓｔ法等方法。纸片扩散法 (Ｋｅｒｂｙ-Ｂａｕｅｒ纸片扩散法 ,简称Ｋ -Ｂ法 )是 4 0年代建立的 ,操作方便 ,费用不多 ,测定的药物随意可变 ,灵活性强 ,一直是兽医临床常用的一种药敏试验方法。近来 ,这种古老的方法 ,不断增添新的内容 ,很有重新认识的必要。1　方法日趋标准化纸片扩散法是以测量抑菌环直径来…     

兽医临床纸片法药敏试验结果的影响因素

纸片法药敏试验是将抗菌药物吸收到特定的纸片中,然后置于已接种待测定菌的固体培养基上,抗菌药物通过向培养基内的扩散,抑制敏感细菌的生长,从而出现抑菌环(带)。由于药物扩散的距离越远,达到该距离的药物浓度越低,可根据抑菌环的大小,判断细菌对药物的敏感度。通过药物敏感试验,我们可找出针对于某些致病菌的敏感药物,从而对兽医临床中的细菌性疾病的治疗提供指导。该法只是一种药物敏感性定性试验,临床中此种试验常受到抗菌药物、培养基、细菌、试纸片及培养条件等因素的影响。本文就以上影响因素逐一进行说明。1药物因素1.1药物理化性质…     

临床纸片法药敏试验结果影响因素的分析

纸片法药敏试验眼1演是将抗菌药物吸收到特定的纸片中,然后置于已接种待测定菌的固体培养基上,抗菌药物通过向培养基内的扩散,抑制敏感细菌的生长,从而出现抑菌环(带)。由于药物扩散的距离越远,达到该距离的药物浓度越低,故可以根据抑菌环的大小,判断细菌对药物的敏感度。通过药物敏感试验,我们可以找出针对于某些致病菌的敏感药物,从而对临床中的细菌性疾病的治疗提供指导。纸片法药敏试验具有操作简便、容易掌握等特点。目前,随着我国养殖业的发展以及整个养殖业管理水平的提高,纸片法药物敏感性试验逐渐被广大兽医人士所认可,许多养殖场(…     

鸡大肠杆菌TTC快速菊敏试验方法研究

细菌药敏试验结果是临床治疗细菌性感染时合理选用药物、提高疗效和避免滥用抗菌药物的重要依据。目前，兽因临床上进行药敏试验通常采用纸片扩散法（K—B法）和试管稀释法，但这两种方法均需16～18h才能报告试验结果。几十年来，医学界不断对体外药敏试验方法进行探索、研究，希望能找到更加快速、实用的方法。经过我国兽医工作者的不懈努力，最终找到了一种试验成本低、报告时间不及K—B法1／3的鸡大肠杆菌TTC显色快速药敏试验方法。     

细菌对抗菌药物敏感性检测方法研究进展

药敏试验(antibiotic susceptibility testing, AST)为兽医提供临床菌株对抗菌药物的敏感性等信息。然而,临床上为快速治疗患病动物,又碍于传统药敏试验的“漫长”的过程,兽医常以经验为导向诊断后直接开具处方,这成为细菌对抗菌药物产生耐药性的重要原因之一。随着耐药性的不断加剧,并危及公共卫生健康,缩短药敏试验的检测时长就显示出越来越重要的意义。现简要介绍稀释法、扩散法、E-test法等传统药敏试验检测方法,着重阐述新兴的快速药敏试验技术的原理、优缺点等,最后进行展望。     

鸭源大肠杆菌抗生素敏感性试验研究

采用纸片扩散法和试管稀释法,对重庆地区分离的14株鸭源大肠杆菌进行抗生素敏感试验。纸片扩散法结果显示,鸭源大肠杆菌对头孢哌酮、头孢三嗪最敏感,对利福平、头孢呋辛、青霉素类极不敏感。试管稀释法对8种头孢类药物进行最小抑菌浓度测定,结果表明,鸭源大肠杆菌对头孢唑肟最敏感,其次是头孢他啶、头孢噻肟、头孢哌酮,最不敏感的为头孢拉定。     

猪链球菌和猪大肠杆菌对19种药物的敏感性分析

选取19种临床常用抗菌药物,采用纸片扩散法及试管二倍稀释法分别对猪链球菌和猪大肠杆菌韶关分离株进行药物敏感性分析,旨在为兽医临床用药提供参考。结果表明,猪链球菌和猪大肠杆菌对所选药物呈多重耐药,且耐药谱广。其中,猪链球菌对环丙沙星、呋喃妥因、菌必治、氨苄青霉素、青霉素G等高度敏感,对阿奇霉素、罗红霉素、先锋霉素Ⅴ、氯霉素、林可霉素耐药,耐药率为26.3%;猪大肠杆菌对先锋霉素Ⅴ、菌必治、阿米卡星、复达欣高度敏感,对罗红霉素、氨苄青霉素、青霉素G、羧苄青霉素、林可霉素、氯霉素和阿莫西林耐药,耐药率为36.8%。     

药敏纸片法和打孔法检测细菌耐药性的方法比较

目的:进行药敏纸片法和打孔法检测细菌耐药性的方法比较。方法:将青霉素、链霉素、硫酸庆大霉素配成浓度为100单位/m L时,通过药敏纸片法和打孔法,测定其抑菌圈直径来进行比较两种方法对细菌的耐药性。结果:在100单位/m L的药液浓度时,抑菌效果打孔法优于药敏纸片法。结论:在同一浓度时打孔法的抑菌效果优于纸片法。     

药敏滤纸片饱和吸水量的测定

纸片扩散法(K-B法)是一种十分切合生产实际的药敏试验方法,但试验结果易受纸片含药量、菌液浓度、培养基厚度等因素的影响。其中纸片含药量是一个重要的影响因素。虽然有市售的药敏纸片,但都是医学用的,而且其抗菌药物种类与动物临床用药相差甚远,很不切合生产实际。很多生产单     

复方抗菌药物药敏试验方法的建立

在WTO推荐的纸片扩散法(K-B法)的基础上,建立对不明成分和含量的抗菌药物复方制剂的药敏试验方法,为抗菌药物临床选择提供科学依据,并便于在临床兽医中推广应用。试验设4组(每组6个重复),分别以浓度为1/2.5a(a为产品使用说明指导的容水量(L/g)),1/5a,1/10a和1/20a(g/mL)的复方抗菌药物溶液制备药敏纸片。受试菌为2株禽致病性大肠杆菌。试验结果表明:1/5a组制备的药敏纸片(药物剂量(mg/kg)为药敏片含量的250倍),药敏结果更为稳定,不同药物间抑菌圈直径平均数差异也较大,可为兽医临床抗菌药物对比选择提供较好的量化依据;标示成分及含量相同的不同抗菌制剂(甚至同一厂家生产)的药敏试验结果差异极显著(P0.01),说明主成分相同的不同抗菌制剂对同一株病菌的抗菌效力差异很大,也进一步证明用药敏试验结果指导临床选择用药的科学性和必要性。     

氟苯尼考胁迫对土壤细菌耐药性的影响

为了了解土壤中残留氟苯尼考对土壤中细菌耐药性的影响,在土壤中添加不同浓度的氟苯尼考,于添加药物后第14天、28天、56天采集土壤样品分离细菌,采用微量肉汤二倍稀释法进行细菌对氟苯尼考的敏感性试验,并采用药敏纸片扩散法对用药前后分离的氟苯尼考敏感菌和耐药菌进行抗菌药物的敏感性试验。结果表明氟苯尼考残留的浓度越大,耐药菌的数量也就越多;在供试的18种抗菌药中,氟苯尼考敏感菌对其中的9种药物的敏感性均显著高于氟苯尼考耐药菌(P<0.01)。     

兽用药物敏感性纸片的研制

选取临床上常用的抗菌药物,按照标准浓度制成药敏纸片,采用纸片扩散法,以大肠杆菌和葡萄球菌为标准菌株测其抑菌程度,并与市售药敏纸片进行对比实验,研制出自制的具有临床指导意义的药敏纸片,为指导实践中科学、正确地用药增加检测手段.     

抗菌药物的药敏试验方法

1药敏纸片法药敏纸片法是最常用的一种试验方法,能直接体现出抗菌药物的抗菌效用,其优点是:直观明显、对比鲜明,有一定的实验依据。缺点是:仅表现体外抗菌效果,由于抗菌药物在体内受体液环境、代谢分布、组织扩散浓度、半衰期等因素的影响,个别药物并不能真实反应出实际的抗菌疗效。下面介绍抗菌药物的药敏纸片法。1.1药敏纸片的制作方法将要试验的抗菌药物按其有效浓度稀释成1mL备用,脂溶性的抗菌药物使用乙醇或丙酮溶解。用打孔器将滤纸打成6mm直径的圆片100张高压灭菌,加入到抗菌药物有效浓度1mL稀释液中充分混合,阴凉处干燥备用。多种…     

凤尾草乙醇提取物体外抑菌试验方法的筛选

为了筛选凤尾草乙醇提取物体外抑菌试验最佳方法,通过打洞法、牛津杯法、干、湿纸片法、二倍稀释法测定乙醇以及中药凤尾草乙醇提取物对大肠杆菌的体外抗菌效果。结果二倍稀释法中乙醇的最低抑菌浓度为6.25%;无水乙醇在打洞法、牛津杯法、纸片法、二倍稀释法中均无抑菌圈;凤尾草乙醇提取物在打洞法、牛津杯法、湿纸片法中抑菌圈直径分别为20±1 mm、14±1 mm、13±2 mm;凤尾草乙醇提取物在干纸片法中无抑菌圈。表明无水乙醇可作中药提取物的溶剂用于打洞法、牛津杯法、湿纸片法;打洞法用于凤尾草乙醇提取物的体外抑菌试验重复性好,抑菌圈质量高。     

兽用药物敏感性纸片的研制

选取临床上常用的抗菌药物，按照标准浓度制成药敏纸片，采用纸片扩散法，以大肠杆菌和葡萄球菌为标准菌株测其抑菌程度，并与市售药敏纸片进行对比实验，研制出自制的具有临床指导意义的药敏纸片，为指导实践中科学、正确地用药增加检测手段。     

广东地区2007～2009年禽源大肠杆菌的耐药性演变

通过对2007～2009年内从广东省10多个地市分离得到的378株禽源大肠杆菌进行15种兽医临床常用抗生素的药物敏感性试验(MIC),调查该区域禽类大肠杆菌的耐药性演变情况.采用琼脂稀释法对临床分离株开展MIC测试.结果显示临床分离株对多数兽医临床常用抗生素耐药率在30 ％以上,且有逐年上升的趋势,多数药物的半数抑菌浓度( MIC50)和有效抑菌浓度( MIC90)水平高且保持逐年升高的趋势;细菌的多重耐药情况严重,多集中在5～12耐,提示细菌的耐药能力逐渐提高.表明,广东地区禽源大肠杆菌的耐药水平已经达到了较为严重的程度,应加强食用动物源细菌耐药性的监测.     

9种抗菌药物对大肠埃希菌最小抑菌浓度的测定

畜禽养殖中会用到一些抗菌药物,而药物选用需要进行药物敏感性试验,目前市售的药敏纸片多为人用抗菌药物,为了制备兽用抗菌药物的药敏纸片,需要对药物的最小抑菌浓度(MIC)进行测定。该研究筛选了国家兽用药物名录中规定的、兽医临床上常用6类共9种抗菌药物(头孢噻呋钠、硫酸链霉素、强力霉素、土霉素、氨苄西林、氟苯尼考、替米考星、硫酸新霉素、青霉素),以大肠埃希菌为指标菌,通过微量肉汤稀释法分别测定了9种常用抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,头孢噻呋钠、硫酸链霉素、强力霉素、土霉素、氨苄西林、氟苯尼考、替米考星、硫酸新霉素、青霉素对指标菌的MIC值分别为为2、4、4、16、8、16、64、32、250μg/mL。研究结果为这些药物的临床应用和药敏纸片的研制提供了基础资料。     

致病性大肠杆菌对庆大霉素的耐药性研究

将致病性大肠杆菌(E.coli)标准菌株C83907接种在含庆大霉素药物4种浓度的普通琼脂平板上进行细菌传代,同时设对照板传代,对各代次细菌分别进行纸片琼脂扩散法和最小抑菌浓度法(MIC)的药敏性测定。用3种不同代次的细菌感染3组小白鼠,发病后对其治疗。结果显示,各代次细菌经琼脂扩散法的抑菌圈直径由大变小,最小抑菌浓度由小变大,致病后的小白鼠治疗效果明显降低。从而表明,细菌长期处于药物环境中,会逐渐产生对该药物的耐受性。     

利用三种不同抑菌方法研究中药地榆对奶牛乳房炎常见病原菌抑菌效果的影响

本试验以地榆水煎液为试验药物,以标准金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、大肠杆菌为试验菌株,采用琼脂平板扩散法（打孔法）、液体培养基连续稀释法（试管法）和固体培养基连续稀释法,观察中药地榆对奶牛乳房炎常见病原菌抑菌效果的影响。结果表明,药物固体培养基连续稀释法比其他两种方法敏感性高,重复性好,能直接定量测出抗菌药物对奶牛乳房炎常见病原菌的最低MIC值,更适于中药体外抑菌作用的研究。