双酶水解鱼鳞蛋白制备ACE抑制肽的工艺优化研究

本试验的原料为脱钙鱼鳞粉,以ACE抑制率为指标,用胃蛋白酶、胰蛋白酶先后水解并进行单因素和正交优化试验,确定制备ACE抑制肽的最佳条件。结果表明,胃蛋白酶水解脱钙鱼鳞粉的最佳酶解条件:当胃蛋白酶的添加量为6%,料液比1∶50(g/ml),水解时间2 h时,鱼鳞蛋白的ACE抑制率为84.89%;胰蛋白酶水解脱钙鱼鳞蛋白的最佳酶解条件:胰蛋白酶的添加量为6%,水解时间2 h,此时ACE抑制率为93.37%。     

胃蛋白酶水解草鱼鱼鳞制备胶原肽的工艺优化

以草鱼鱼鳞为材料,研究蛋白酶种类、酶解条件对鱼鳞酶水解的水解度、氮收率和凝胶强度的影响,并采用正交试验对鱼鳞胶原肽制备工艺进行优化,以获得较高凝胶强度的鱼鳞胶原肽.结果表明:在胃蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶4种蛋白酶中,采用胃蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白时氮收率较高,且水解产物具有凝胶形成能力;酶解条件对鱼鳞胶原蛋白的水解度、氮收率和凝胶强度均有显著影响;胃蛋白酶在底物质量分数为5%、起始pH值为4.0、加酶量为140 U/g、水解温度为65℃条件下,水解鱼鳞120 min,鱼鳞水解产物的凝胶强度和氮收率都较好,其中水解度为1.46%、氮收率为64.38%、凝胶强度为2 051 g.     

胃蛋白酶制备鲤鱼鳞胶原肽及其特性研究

以鲤鱼鳞为原料,用胃蛋白酶制备胶原肽。以水解度为指标,采用正交试验的方法对酶解条件进行优化。对制备的胶原肽的抗氧化性、清除羟自由基能力以及清除DPPH的能力进行测定。结果表明：胃蛋白酶水解鲤鱼鱼鳞的最佳水解条件为：底物浓度为8％、酶的添加量为8％、水解温度为35℃、水解时间为48h、此时的水解度为47．06％,且具备以上特性。     

响应曲面法优化卵白蛋白抗氧化肽制备工艺研究

为优化酶解卵白蛋白制备抗氧化肽的工艺条件.以酶解物羟自由基(HO·)清除率为指标,在单因素实验的基础上选取实验因素和水平,根据Box - Behnken设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,研究底物浓度,酶添加量和水解时间工艺的影响,对酶解条件进行优化研究.结果胃蛋白酶酶解卵白蛋白制备抗氧化肽的最优条件为:底物浓度3.24%、胃蛋白酶添加量11 332.12U/g蛋白、水解时间7.8h.酶解液的羟自由基清除率为44.20%,与预测值的相对误差为4.088%,理论值与预测值基本一致,与模型预测具有较好的拟合性.结论建立的模型在实践中进行预测是可行的.     

响应面法优化牡蛎复合酶水解工艺研究

采用响应面法优化牡蛎的复合酶水解工艺.结果表明:中性蛋白酶与风味蛋白酶按照2∶1复配,在水解温度40℃,水解时间5.68h,水解pH值7.0条件下,牡蛎蛋白水解度可达到32.24%,水解效果最优.验证试验表明,实际蛋白质的水解度与模型预测值相近,因此采用响应面法优化牡蛎酶解工艺,准确可靠.     

鲶鱼骨蛋白酶解产物抗菌性的酶解工艺优化

采用四因子二次通用旋转设计,以抑菌率为测定指标,对胃蛋白酶水解革胡子鲶Claris lareza鱼骨蛋白的条件进行了优化,同时测定了酶解产物中可溶性肽的含量,以分析抑菌率与可溶性肽含量之间的相关关系。经Design Expert7．1．2软件优化,得出胃蛋白酶酶解鲶鱼骨蛋白的最优条件为：底物浓度0．277kg／L,加酶量1408U／g,水解温度39．2℃,水解时间4．86h,在此条件下获得的水解物,对大肠杆菌、藤黄微球菌及枯草芽孢杆菌的抑菌率分别为71．40％、56．88％和64．54％。通过SAS软件分析二者的相关性,发现可溶性肽含量和抑菌率之间并不存在相关性。     

复合蛋白酶水解低值淡水鱼工艺的响应面优化

采用复合蛋白酶对鲢鱼蛋白进行水解研究,应用响应面分析法对水解条件进行优化。选用蛋白酶用量、温度、pH值、水解时间4个因素,以蛋白质的水解度为评价指标,在单因素工艺试验的基础上,通过4因素3水平的Box-Behnken响应面分析法优化鲢鱼蛋白质的水解条件。结果表明,最优水解条件为蛋白酶用量2.0 g/100 g,温度54.3℃,pH值7.46,时间6 h,在此条件下,水解度为38.42%,与模型的预测值38.45%基本一致。     

胃蛋白酶水解藏羊血清蛋白工艺研究

为进一步利用血液资源,以藏羊血清为原料,采用胃蛋白酶对其进行水解。以水解度为指标,研究pH、温度、加酶量3个因素对藏羊血清水解度的影响规律;在此基础上,采用Box-Benhnken响应面试验优化胃蛋白酶水解藏羊血清蛋白工艺条件。结果表明：底物浓度为5%、加酶量为6 200 U时,最佳水解条件：温度为46℃、pH为2.25、酶解时间2 h,水解度为(23.41±0.23)%。     

胃蛋白酶水解松仁蛋白的研究

[目的]优化得到胃蛋白酶水解松仁蛋白的酶解工艺,并检验水解蛋白清除自由基的效果。[方法]选用胃蛋白酶水解松仁蛋白,并进行酶解工艺优化,同时检测了松仁蛋白胃蛋白酶水解物的还原能力和清除羟基自由基的效果。以可溶性蛋白质量浓度为响应值,进行了单因素及正交试验。[结果]确定了胃蛋白酶水解松仁蛋白的最佳水解条件:酶添加量7.5 U/g干蛋白质、水解温度50℃、水解时间3.75 h、pH 2.0,各因素对结果的影响程度大小依次为pH、水解时间、酶添加量、温度。抗氧化试验表明,松仁蛋白胃蛋白酶酶解物具有清除羟基自由基的能力和还原能力。[结论]研究可为松仁的精深开发利用提供参考依据。     

响应面法对酶解法提取鲤鱼多肽工艺的优化

用胃蛋白酶对鲤鱼鱼肉进行水解,并在单因素试验的基础上选取酶浓度、pH值、反应温度、反应时间作为影响蛋白提取率的因素。根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,采用4因素3水平响应面分析法对鲤鱼多肽的提取工艺进行优化研究,确定胃蛋白酶提取鲤鱼多肽时的最佳工艺参数。结果表明,胃蛋白酶酶解的最佳条件为酶质量浓度17.77 mg/m L、温度36.65℃、时间3.7 h、pH值1.07,在该条件下多肽提取质量浓度为1.97 mg/m L。     

鳕鱼皮胶原蛋白酶解液的制备及抗氧化研究

[目的]利用酶解法从鳕鱼皮中提取胶原蛋白肽,研究其抗氧化能力。[方法]以鳕鱼鱼皮为原料,采用胃蛋白酶进行酶解,通过正交试验研究pH、水解温度、加酶量及水解时间4个因素对酶解鳕鱼皮的影响,确定胃蛋白酶酶解鳕鱼皮的最佳条件,并采用试剂盒法对酶解产物进行抗氧化活性研究。[结果]各因素对酶解鳕鱼皮的影响为水解时间〉水解温度〉加酶量〉pH,胃蛋白酶酶解鳕鱼皮的最佳工艺条件为：加酶量4%、温度37℃、pH 3、时间3 h。此条件下,蛋白质水解度可达到6.91%。胃蛋白酶酶解鳕鱼皮得到的胶原肽粗品具有一定的抗氧化能力,并对超氧阴离子自由基具有较强的清除作用。[结论]该研究为开发新的抗氧化剂提供科学参考。     

酶法水解鲤鱼工艺条件的研究

采用蛋白酶水解鲤鱼,对蛋白酶进行筛选,并对酶解的工艺条件进行优化研究,分析酶的添加量、温度、pH、反应时间等因素对鱼蛋白水解的影响。试验结果表明:对鱼蛋白作用最适的酶是胃蛋白酶,胃蛋白酶在磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液中,在温度为35℃,pH 3.2,作用时间4.5 h,鱼蛋白肉:酶干粉=100:1.0时可得出较好的效果,此时,水解上清液中氨基氮含量为23.08 mg/L,蛋白质提取率为31.2%。通过酶解获得的水解物含有丰富的营养物质,为进一步开发和利用水解蛋白提供了一定的依据。     

沙蚕不同酶解产物抗氧化效果研究

海洋生物蛋白资源是海洋生物资源的重要组成部分,对其进行高值化加工利用是海洋生物技术研究的重要内容,酶解是提高海洋蛋白功能性的有效方式,但酶种类不同,其作用位点不同,可能对酶解产物的活性有一定影响。为了探究了沙蚕不同酶解产物的抗氧化性,采用6种蛋白酶（碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶）酶解沙蚕,测定了不同酶解时间下的水解度、分子量分布、3种自由基（DPPH、O-2·、·OH）的清除率等反映抗氧化水平的指标。结果表明：胰蛋白酶小分子肽得率最高,为70.47%;胃蛋白酶次之,为68.12%。酶解液浓度为5 mg·mL-1时,胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解4 h时,DPPH清除率效果较好,分别为90.87%和90.52%。胃蛋白酶酶解3 h时,O-2·清除率效果最佳,为89.78%;木瓜蛋白酶酶解3 h时,O-2·清除率效果次之,为57.99%。碱性蛋白酶酶解4 h和胃蛋白酶酶解2 h时,·OH清除率效果较好,分别为85.07%和83.37%。胰蛋白酶和胃蛋白酶对提高酶解液水解度和小肽生成作用明显,胃蛋白酶的酶解产物对3种自由基清除率较好,更适用于制备沙蚕抗氧化肽。     

正交试验法优化大麻哈鱼脂肪线中鱼油的提取工艺

[目的]优化从大麻哈鱼（Oncorhynchus keta Walbaum）加工废弃物———脂肪线中提取鱼油的工艺。[方法]考察不同pH值、水解温度、水解时间、盐析时间和硝酸钾用量对提油率的影响。以鱼油提取率为指标,选择水解温度、pH值、硝酸钾用量和盐析时间4个因素进行正交试验设计,优化钾法从大麻哈鱼脂肪线中提取鱼油的工艺。最后,对提取的粗鱼油进行理化性质分析。[结果]钾盐提取鱼油的最佳工艺条件为：水解温度75℃,水解pH值8.0,水解时间55min,硝酸钾用量5.5%。在该条件下鱼油的提取率达到64.7%,理化指标均达到SC/T3502-2000的粗鱼油二级标准。[结论]该研究可为大麻哈鱼的综合利用提供理论基础。     

大豆蛋白酶解物的抗癌活性研究

以大豆分离蛋白为原料,用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和胃蛋白酶分别对其进行酶解,得到具有抗癌活性的酶解物,测定大豆分离蛋白的水解度和酶解物对胃癌细胞的生长抑制率。结果表明,木瓜蛋白酶酶解物的癌细胞生长抑制率为27.36%,显著高于其他三种酶解物的抗癌活性,其次是中性蛋白酶(21.20%)和碱性蛋白酶(18.01%),酶解物抗癌活性最低的是胃蛋白酶(11.20%)。四种蛋白酶在最适水解条件下作用于大豆分离蛋白时,水解度的排列次序为:碱性蛋白酶中性蛋白酶木瓜蛋白酶胃蛋白酶。大豆分离蛋白的水解度与酶解物的细胞生长抑制率不呈线性关系。     

响应面法优化蛋白酶提取贻贝蛋白的工艺参数

以贻贝蛋白质为原料,对比研究了pH值、加酶量、物料比、时间、温度等对木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶和风味蛋白酶提取贻贝蛋白质的影响。结果表明,中性蛋白酶的蛋白质回收率最高。对中性蛋白酶进行优化试验,得出最佳的提取条件:pH值为6.3,加酶量为0.75%,酶解温度为42.9℃,184.9 min的酶解时间,可得到最大蛋白质回收率(72.2%)。通过氨基酸全自动分析仪分析,得出氨基酸含量酶解前后变化了1.453%。     

响应面法优化酶解海洋低值鱼肉制备抗氧化肽工艺

[目的]优化碱性蛋白酶制备海洋低值鱼抗氧化肽的工艺。[方法]以DPPH自由基清除率为指标,在酶解温度、pH、加酶量、底物浓度等条件下进行单因素试验,在此基础上运用响应面法优化碱性蛋白酶酶解低值鱼肉制备抗氧化肽的工艺条件。[结果]在温度54℃、pH 8.8、底物浓度200 g/L、加酶量2 500 U/g的条件下酶解3 h,得到抗氧化肽的DPPH自由基清除率理论值为62.66%,实际值为61.87%,相对误差为1.26%。[结论]该研究为低值鱼抗氧化肽的开发利用提供理论依据。     

菜籽粕蛋白肽制备工艺条件优化

试验改进了菜籽粕蛋白的酶解工艺,并对改进后的工艺条件进行了优化。采用2709碱性蛋白酶水解菜籽粕蛋白,分别考察了pH值、酶用量、酶解时间、温度、底物浓度对蛋白回收率的影响规律,在此基础上,利用响应面分析法对菜籽粕蛋白的酶解条件进行了优化。结果表明,2709碱性蛋白酶水解菜籽粕蛋白的较优条件为pH11.5、温度50℃、底物浓度4%、水解时间173min、酶用量5778U·g-1,此时蛋白回收率可达87.18%。     

响应面优化超声波辅助酶法提取小米蛋白工艺

以小米为原料,采用超声波辅助酶法提取小米蛋白,通过单因素试验研究加酶量、酶解温度、超声波功率、超声时间、酶解时间对小米蛋白提取率的影响,从而优化提取蛋白质的最佳工艺条件。在单因素试验的基础上,选取加酶量、酶解温度、超声波功率为影响小米蛋白提取率的主要因素,以提取率为响应值进行分析,构建数学回归模型。结果表明:提取的最佳工艺条件:酶解温度为43℃、加酶量为2.5%,超声波功率为420 W,超声时间25 min,酶解时间为100 min。在此条件下得到蛋白质的提取率为43.26%,提取率明显提高。