鳜鱼苗种免疫预防传染性脾肾坏死病生产试验

<正>鳜鱼传染性脾肾坏死病,又称鳜鱼暴发性传染病,是以脾肾坏死、肿大,鳃、肝失血变白,肝出血为主要特征的一种病毒性疫病,其病原为传染性脾肾坏死病毒(Infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)。2013—2016年扬州市水产生产技术指导站与扬州市江都区水生动物预防控制中心协作,对鳜鱼传染性脾肾坏死病进行了流行性病学调查、病原检测、疫苗免疫等研究和生产试验工作。试     

鳜鱼传染性脾肾坏死病流行病学调查与综合防治技术

<正>鳜鱼传染性脾肾坏死病,俗称鳜鱼暴发性传染病,是以脾、肾坏死为主要特征的一种病毒性疾病,可引起淡水养殖鳜暴发性死亡,被农业部列为二类动物疫病,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须申报的疫病。2011-2013年,扬州市江都区水产管理站对鳜鱼传染性脾肾坏死病进行了流行病学调查,并采取     

鳜鱼脾肾坏死病毒功能基因研究

鳜鱼脾肾坏死病毒（ISKNV）是引起养殖鳜鱼大量死亡的传染性疾病的病原体,经研究证实其为虹彩病毒科中的一种.概括了近年国内外有关鳜鱼脾肾坏死病毒分子生物学的研究进展,重点论述了病毒功能基因及调控的相关研究,同时介绍了目前采用的几种特异的病毒检测方法,并指出其各自的优缺点.     

两种检测方法对高邮地区常见病毒病的比较

<正>鲫造血器官坏死病毒(CYH-2)、鳜鱼虹彩病毒(ISKNV)和白斑综合征病毒(WSSV)是危害高邮市水产养殖生产的三种重要病毒,严重制约我市水产养殖健康发展,目前常用的检测方法为聚合酶链式反应(PCR),此检测方法精确性较高,但用时较长。为了更好地服务于养殖生产,更快速、方便地检测这三种病毒,试验采用恒温荧光PCR仪快速检测方法进行检测,并用聚合酶链式反应(PCR)进     

蛙病毒PCR检测方法的建立与比较分析

为了进一步丰富蛙虹彩病毒检测方法，实验针对蛙病毒3型(frog virus 3,FV3)核衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因保守区设计一对特异性引物，并选取另外2种蛙病毒PCR检测方法进行对比实验，通过反应体系的优化、反应特异性和敏感性实验，建立了一种针对FV3的PCR检测方法。结果显示，该方法最低检测限可达1.2个拷贝数的病毒粒子，与神经坏死病毒、虾血细胞虹彩病毒、大口黑鲈虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒、鲤浮肿病毒、传染性脾肾坏死病毒、加州鲈弹状病毒等常见水产动物致病毒株无交叉反应。临床样品检测表明，该方法所获得的检测结果与另外2种方法一致，结果可靠。本研究所建立的FV3 PCR检测方法，具有简便、快速、敏感度好、特异性高、低成本等特点，可用于FV3蛙病毒的快速诊断和分子流行病学调研。     

传染性脾肾坏死病

<正>传染性脾肾坏死病(Infectious spleen and kidney necrosis,ISKN)俗名鳜暴发性出血病。是一种严重危害淡水养殖鳜的传染性、病毒性疾病,可引起暴发性死亡。我国将其列为二类疫病。一、病原学病原为虹彩病毒,目前称为传染性脾肾坏死病毒     

笋壳鱼暴发传染性脾肾坏死病毒病的风险评估

正笋壳鱼暴发传染性脾肾坏死病毒病的病原为传染性脾肾坏死病毒(Infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)。自从1997年首次从鳜鱼上发现报道ISKNV以来,该病已经在中国大部分的地方被确诊,同时在笋壳鱼、乌鳢、加州鲈等鱼类上都发现了该病,对我国水产养殖业造成了巨大的损失。本文主要分析评估ISKNV在笋壳鱼上感染暴发的风险。     

PCR检测鳜虹彩病毒在生产中的应用探索

<正>随着鳜鱼人工繁殖和育苗技术的成功,鳜鱼的人工养殖业发展迅速,但同时病害问题也日渐突出。其中病毒病流行快、发病率高、致死率高,且目前尚无有效预防控制措施,对水产养殖业造成了严重的经济损失。20世纪90年代广东地区的养殖鳜鱼就发生了大面积暴发性流行病,何建国等将其命名为传染性脾肾坏死病毒(ISKNV),证实了该病毒属于虹彩病毒,并被确定为虹彩病毒的一个新属——细胞肿大病毒属的     

巢式PCR检测鳜传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)

鳜(Siniperca chuatsi)传染性脾肾坏死病毒(infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)是鳜暴发性传染病的主要病原,给鳜养殖业造成了严重的经济损失,因此快速、灵敏的检测方法对鳜养殖业的发展具有非常重要的意义.根据鳜ISKNV主要衣壳蛋白(MCP)基因序列设计了2对引物,利用巢式PCR方法对病鱼脾肾组织进行扩增,建立了ISKNV快速特异的巢式PCR检测方法.应用该方法对含MCP基因的质粒进行倍比稀释后检测扩增的灵敏度可达到5 fg;巢式PCR检测的灵敏度是一步法PCR的104倍以上.     

2021下半年加州鲈病毒检测总结与建议

1 检测总结 2021下半年,活宝源鱼病室共检测185份加州鲈样本,大口黑鲈虹彩病毒阳性率为30.80％,传染性脾肾坏死病毒阳性率为1.08％,鳜鱼弹状病毒阳性率为1.08％,神经坏死总检出率为0.00％. 1.1 大口黑鲈虹彩病毒病(LMBV) 该病为下半年加州鲈最主要病毒病,平均阳性率高达30.80％,6月份阳性率...     

蛙虹彩病毒巢式 PCR检测方法的建立

蛙虹彩病毒属(Ranavirus)病毒宿主广泛,可以感染爬行类、鱼类和两栖类,大部分病毒对宿主都有较强的致病性和致死性.为建立一种快速高效的蛙虹彩病毒的检测方法,本研究利用中华鳖虹彩病毒(soft-shelled Turtle Iridovirus,STIV)核衣壳蛋白(Major Capsid Protein,MCP)基因保守区设计内引物和外引物,建立了特异性检测流行性造血器官坏死病毒(Epizootic Haematopoietic Necrosis Virus,EHNV)、中华鳖虹彩病毒和虎纹蛙虹彩病毒(Tiger Frog Virus,TFV)的巢式PCR(巢式PCR)检测方法,并制备了重组质粒pGem-T-S作为阳性对照标准品.检测限试验结果显示,该方法可以检测102拷贝的病毒粒子.而且与传染性造血器官坏死病毒、鲤春病毒、病毒性出血性败血症病毒、斑点叉尾(鱼回)病毒、传染性胰脏坏死病毒、真鲷虹彩病毒、牙鲆弹状病毒以及锦鲤疱疹病毒等其他非蛙虹彩病毒无交叉反应.该体系具有简便、快速、敏感、特异性高、低成本等特点,为诊断与预防蛙虹彩病毒提供了一项重要的技术手段.     

鳜鱼暴发性病毒传染病防治技术

<正>鳜鱼暴发性病毒传染病是一种以脾、肾坏死为主要病理特征的病毒性疾病,其主要病原是鳜传染性脾肾坏死病毒。该病可引起鳜集中爆发性死亡,死亡率高达90%,给鳜养殖业带来严重危害。目前,尚无针对该病的特效药物或治疗措施,本文介绍了在实际生产中如何防治此病。     

大口黑鲈溃疡综合征病毒MCP基因序列分析及PCR快速检测方法的建立

为了早期快速诊断近年来流行于广东省养殖大口黑鲈(Micropterussalmoides)中的病毒性溃疡综合征,本研究用基因组步移的方法获得了大口黑鲈溃疡综合征病毒(Largemouthbassulcerativesyndromevirus,LBUSV)主要衣壳蛋白(MCP)基因,该基因编码区全长1392bp。通过序列比较分析,在MCP基因内确定了一段241bp的特异性较强的片段作为靶序列,设计并合成引物,经过优化PCR反应条件,建立了可以快速检测大口黑鲈溃疡综合征病毒的PCR方法。实验表明,在PCR进行到30个循环反应时可以检测到的质粒最小浓度是104拷贝数/μL,相当于104个病毒粒子。利用该方法,从天然感染LBUSV的大口黑鲈脾脏组织DNA可扩增出241bp的片段,而健康大口黑鲈和感染了传染性脾肾坏死病毒样病毒的大口黑鲈脾脏组织则没有扩增条带。本研究建立的PCR检测方法具有检测快速、成本低、准确性高的特点,适用于大范围早期病害诊断的推广应用。     

核酸探针斑点杂交检测对虾传染性肌肉坏死病毒

通过PCR方法制备了对虾传染性肌肉坏死病毒地高辛标记探针,探针长度123 bp,通过核酸探针斑点杂交检测方法对此探针特异性及灵敏度进行验证.结果表明,该方法检测对虾传染性肌肉坏死病毒cDNA的检出灵敏度为108拷贝,可检出1拷贝的传染性肌肉坏死病毒cDNA的PCR产物.本方法可应用于健康亲虾、苗种的培育和无特定病原(SPF)对虾种群的选育及传染性肌肉坏死病毒流行病学调查,具有较高的应用价值.     

鳜鱼传染性脾肾坏死病毒病防控关键措施

<正>2014年,鳜鱼传染性脾肾坏死病毒病(Infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)在江苏省常州市经济开发区(原武进区)横山桥镇鳜鱼主产区大面积暴发,鳜鱼发病率达95%以上,病死率达80%以上,给养殖户造成严重经济损失。为确保鳜鱼养殖业的健康持续发展,武进区水产站经过近3年的积极探索,总结出一些防控关键措施,使     

对虾WSSV和IHHNV多重PCR检测试剂盒的研究与应用

在对虾白斑综合征病毒(WSSV)和传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)二温式PCR检测技术前期研究的基础上,将这2种病原的特异性引物与PCR基础反应液一起组装成快速检测试剂盒。通过对试剂盒敏感性、稳定性和保存期等技术指标的测定以及对临床样品的检测试验,该试剂盒对同一样品中的WSSV和IHHNV DNA模板均能特异性地扩增出2条与实验设计相符的593 bp(WSSV)和356 bp(IHHNV)的DNA片段,而对其它对虾病原的扩增结果均为阴性;该试剂盒最低能检测到102pg的WSSV DNA和10 pg的IHHNV DNA。对WSSV和IHHNV DNA的检出量分别为102~103pg和10~102pg。     

传染性胰坏死病毒的生物学研究进展

传染性胰坏死病(infectious pancreatic necrosis,IPN)是一种危害多种水产动物的急性传染性疫病,能造成鲑鳟稚鱼大量死亡,造成世界范围内鲑鳟养殖业重大经济损失。IPN的病原为双链RNA病毒科(Birnaviridae)水生双链RNA病毒属(Aquabirnavirus)的传染性胰脏坏死病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)。本文概述了该病原的基因组结构、生物学特征、诊断技术及免疫防治等研究进展,以期为IPN的防治提供参考。     

鳜SIRT3蛋白在传染性脾肾坏死病毒感染中的作用

沉默交配型信息调节因子2同源蛋白3 (silent mating type information regulation 2 homolog 3,SIRT3)是一种去乙酰化酶,可调节线粒体氧化代谢.为探讨鳜(Siniperca chuatsi) SIRT3在传染性脾肾坏死病毒(infectious spleen and...     

超分支滚环扩增法检测传染性脾肾坏死病毒

用超分支滚环扩增法检出传染性脾肾坏死病毒。超分支滚环扩增法包括锁式探针的连接及超分支滚环扩增法扩增两部分,通过研究锁式探针的最佳连接体系和连接条件,并进行超分支滚环扩增法反应条件的优化,得出的本研究最适反应条件为:锁式探针在T4 DNA连接酶作用下37℃连接20 min,接下来的超分支滚环扩增法在Bst DNA聚合酶大片段作用下61℃反应40 min,即能够实现靶序列的有效检出。灵敏度试验表明,超分支滚环扩增法所能检测到的最低模板量接近1 copy。在4种病毒中进行的特异性试验表明,本方法能够保证对传染性脾肾坏死病的特异性检测。     

翘嘴鳜“华康1号”苗种培育和成鱼养殖试验

正近年来,鳜鱼养殖业面临的主要问题是病害频发,尤其鳜鱼传染性脾肾坏死病暴发,不仅直接导致鳜鱼养殖户严重亏损,而且因病害过度用药,给鳜鱼养殖带来产品质量安全隐患,因此,目前鳜鱼产业发展已遇到瓶颈。华中农业大学水产学研究团队利用天然湖泊和长江水系中野生翘嘴鳜构建基础群体,通过翘嘴鳜与斑鳜杂交及雌