石河子地区临床奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定与药敏试验

为研究新疆石河子地区某奶牛养殖场临床奶牛乳房炎的病原菌及耐药情况,对送检的15份乳样进行病原菌的分离鉴定、形态学观察、16S rRNA基因序列对比以及药物敏感性试验。结果显示,分离到1株大肠杆菌和5株金黄色葡萄球菌。菌株16S rRNA序列比对,大肠杆菌同源性大于99.9%,金黄色葡萄球菌的同源性在97.49%～99.71%之间。将两类分离菌对临床上常用的20种药物进行药物敏感性试验,结果显示金黄色葡萄球菌对17种药物敏感,对3种药作用尚不清楚;大肠杆菌对9种药物敏感,对7种药作用尚不清楚,对剩余的4种药物表现为中介。试验结果为临床治疗奶牛乳房炎的合理用药提供了理论依据。     

呼和浩特地区乳中金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏性试验研究

对呼和浩特地区的部分原料乳进行调查,共采集到34个乳样,对其中金黄色葡萄球菌进行分离鉴定和药敏试验结果表明,原料乳中的主要致病菌为金黄色葡萄球菌,它们对红霉素、青霉素、链霉素、阿米卡星和氨苄西林有耐药性对头孢唑林高度敏感,对头孢噻肟钠中度敏感,对氧氟沙星、环丙沙星耐药性较弱。     

一例鸡金黄色葡萄球菌感染的分离与药敏试验

采集鸡关节肿胀渗出液、骨髓等进行细菌分离,对分离菌进行形态学观察、革兰氏染色、PCR鉴定、16S rDNA序列测定和药敏试验。经分离培养试验,从病鸡采集样品中分离出1株,在LB固体培养基上呈圆形,表面光滑湿润整齐有隆起,普通PCR检测16S rDNA结果呈阳性,细菌16S rDNA核酸序列Blast比对结果显示为葡萄球菌。分离菌对萘啶酸、磺胺复合物、氧氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星具有耐药性。     

防治奶牛乳房炎中药乳膏剂的研制与质量鉴定

研究氮酮在中药乳膏剂中的最适添加量。测定中药乳膏剂的稳定性及安全性,为临床提供安全有效药物奠定试验基础。应用色谱法对不同氮酮添加量乳膏剂中咖啡酸体外透皮量进行测定,通过稳定性试验、安全性试验对乳膏剂质量进行测定。中药乳膏剂中咖啡酸的透皮量未随着氮酮量的增加而增加．经最小二乘法拟合发现其最适添加量为4．33％;通过稳定性试验（离心试验、耐寒耐热试验与加速试验）未见中药乳膏出现分层破乳、霉败以及色泽、均匀性改变等现象;通过安全性试验（皮肤刺激性试验和过敏性试验）未见豚鼠出现红斑、水肿等皮肤过敏现象。中药乳膏剂中透皮剂氮酮的添加量为433％：此中药乳膏剂具较高的稳定性及安全性,为理想的防治乳房炎外用制剂。     

PCR方法与其他快速检测乳中金黄色葡萄球菌方法的比较

对乳中金黄色葡萄球菌进行PCR与2种快速检测致病性金黄色葡萄球菌的培养基以及GB4789.10—94方法进行比较,结果表明,PCR方法的敏感性为100%,特异性为85%,符合率为90%;petrfilm RSA方法的敏感性为100%,特异性为95%,符合率为96.7%;Baird-Parker RPF方法的敏感性为100%,特异性为90%,符合率为93.3%。     

一株牛源醋酸钙不动杆菌的分离鉴定、药敏试验及耐药基因检测

为研究醋酸钙不动杆菌的致病机制及防控措施,对疑似患有醋酸钙不动杆菌的病死牛肺脏组织进行病原分离,得到了1株优势菌命名为9-1。对分离菌株进行形态学观察、生化试验、16S rDNA基因序列测定,动物致病性试验和药敏试验。结果显示,分离菌株为革兰阴性杆菌且对试验小鼠具有较强的致病性,经生化试验和16S r DNA基因序列测定分析确定为醋酸钙不动杆菌。药敏试验结果显示该分离菌株对氟苯尼考、头孢噻肟、头孢氨苄、阿奇霉素耐药,对其余8种测试药物敏感。经β-内酰胺类(TEM、DHA、OXA-23、OXA-58)耐药基因检测结果显示均为阴性。为醋酸钙不动杆菌引起的疾病选择合理的抗菌药物提供了一定科学依据,并为进一步研究其耐药机制奠定了基础。     

纳豆中γ-PGA的分离纯化和鉴定

采用野生和诱变的纳豆枯草芽孢杆菌菌株,经固体发酵生产γ-PGA,比较了得率和纯度的差异。通过乙醇沉淀、离心和真空冷冻干燥方法对γ-PGA进行分离纯化,并采用薄层层析的方法鉴定,选择不同分配剂的配比和不同的载体,获得了最佳层析步骤。     

食品中金黄色葡萄球菌检测方法的研究进展

金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的第二大细菌,因此检测食品中金黄色葡萄球菌有重要的意义。分析和论述了传统的反向胶乳凝结法、酶联免疫吸附法、PCR法,以及最新发展起来的VIDAS系统检测法、傅里叶变换红外光谱法、基质辅助激光解吸—电离飞行时间质谱法等金黄色葡萄球菌检测方法的优缺点。     

酸菜汁中乳酸菌的分离与鉴定研究

为明确自然发酵酸菜中乳酸菌的种类,采用添加溴甲酚紫的SL分离培养基对其中的产酸菌进行分离,结合表型形态测定筛选其中的乳酸菌,并根据《伯杰氏系统细菌学手册》,对筛选到的乳酸菌进行形态学与生理生化鉴定。结果表明,自然发酵酸菜汁中的产酸优势菌为G+菌,且它们大多属于乳酸菌;筛选到9株乳酸菌SY1～SY9,其中SY4为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),SY6为植物乳球菌(Lactococcus plantarum),其他7株都为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。     

双歧杆菌的分离与鉴定

采用选择性改良NPNL培养基和YQX—II型厌氧培养箱,分别对母乳喂养健康婴儿的粪便和惠尔康AB乳中的双歧杆菌进行分离培养,经过革兰氏染色和镜检,再利用生化鉴定试剂管,进行属和种的系统生化鉴定,最终确认获得了9株疑似双歧杆菌菌株,除了B-2和B-7难以判断,其余都是两歧双歧杆菌,为以后的产品开发奠定了基础。     

动物源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其耐药性分析

摘 要：为了了解动物源金黄色葡萄球菌的耐药情况,采集不同地区动物源临床样品,采用科玛嘉金黄色葡萄球菌显色培养基对样品中的金葡菌进行分离鉴定,微量肉汤稀释法对分离出的部分金葡菌进行耐药性分析。结果显示,青岛、济南和扬州等地犬源及山东平度鸡源总样品中金葡菌的分离率分别为8.2%、9.5%、5.8%、3.3%;犬源金葡菌对苯唑西林钠、头孢唑林钠、头孢曲松钠、氨苄西林钠、阿莫西林+克拉维酸钾、庆大霉素和阿米卡星的耐药率较低,而对磺胺甲噁唑钠、林可霉素、青霉素钾、硫氰酸红霉素、磷酸替米考星的耐药率均高于68.0%;鸡源金葡菌对多数药物产生高度耐药性,仅对庆大霉素和阿米卡星的耐药率较低,均为25%。表明,动物源金葡菌的分离率较低,鸡源金葡菌的分离率低于犬源临床样品;不同地区动物源金葡菌对临床常用药物产生了不同程度的耐药性,与犬源金葡菌的耐药情况相比,鸡源金葡菌的耐药性范围大、耐药程度严重。本研究为这些地区临床用药提供了一定的参考。     

甘草甜素对金黄色葡萄球菌诱发小鼠实验性乳腺炎的影响

【目的】探讨甘草甜素对金葡菌所致小鼠乳腺炎控制效果；【方法】30只BALB/C雌孕鼠随机分成正常对照组（Con,n=10）、阳性对照组（P,n=10）和试验组（T,n=10）。阳性对照组和试验组母鼠于产后8-10d经乳头管注入50μl 7.0×102CFU细菌悬液，生理盐水组注入50μl 灭菌生理盐水。30只母鼠于接菌-12h、0h、12h、36h腹腔注射甘草甜素88mg/kg或生理盐水0.2ml。接菌后66h处死小鼠，取乳腺组织固定，进行组织学观察；【结果】观察显示P组的小鼠乳腺组织破坏得最为严重。P组小鼠乳腺组织间质宽度与正常对照组相比极显著增加（p＜0.01）,T组小鼠乳腺组织间质宽度极显著高于正常对照组（p＜0.01），与P组相比极显著减少（p＜0.01）；与正常对照组相比，P组小鼠乳腺组织中TNF-α、INF-γ含量极显著升高（p＜0.01），T组小鼠乳腺组织中TNF-α、INF-γ含量与P组相比极显著降低（p＜0.01）。【结论】结果表明，甘草甜素不仅减少乳腺内的细菌数，降低对组织的损伤，而且减轻乳腺炎症变化及全身反应，对乳腺具有一定的保护作用。     

金黄色葡萄球菌荚膜多糖的提取及其多糖含量的测定

本实验目的在于提取纯化金黄色葡萄球菌荚膜多糖,并测定多糖含量。采用超声波破碎的菌液,用CTAB结合其中的多糖,CaCl2解离,乙醇沉淀等化学方法提取纯化金葡菌荚膜多糖,利用苯酚-硫酸法测定其含量。结果显示,得到荚膜多糖0.31g,含量为65.06%。结果表明,成功提取金葡菌荚膜多糖,并对其含量进行了测定,初步确定了粗提金葡菌荚膜多糖的方法。     

市售草鱼鳃中细菌的分离鉴定及耐药性分析

对徐州市售草鱼细菌带染状况及耐药性分析,结果表明从其鳃中分离到4 株革兰氏阴性短杆菌,暂时编号为ZYF-1、ZYF-2、ZYF-3 和ZYF-4,查阅数值编码鉴定ZYF-1 菌株为志贺（Shigella sp.）,ZYF-2、ZYF-3 菌株为大肠埃希菌（Escherichia coli）,ZYF-4 菌株为泉居沙雷菌（Serratia fonticola）。药敏试验结果表明,4 株分离菌的耐药率分别为75.8%、72.4%、65.5%和82.8%,均对氨苄西林、阿莫西林、复方新诺明、磺胺异恶唑和甲氧苄啶等11 种抗生素耐药。本研究显示市售草鱼存在志贺菌、大肠埃希菌带染现象,对多种抗生素耐药,这为食源性细菌鉴定及鱼病防治提供参考。     

沙棘内生菌的分离与初步鉴定

植物内生菌广泛存在于各种植物中,在与宿主的协同进化过程中形成了两者的互惠共生关系。通过对采集的野生沙棘健康的根、茎、叶进行组织分离共计获得内生真菌327株,分别归属于链格孢属、青霉属、根霉属、芽枝霉属、毛壳菌属、曲霉菌属、盘多毛孢属、向基孢属、枝顶孢属、头孢霉属等10个真菌属,内生菌表现出丰富生物多样性。从组织分离以及对内生真菌初步鉴定的结果看一些物种还具有组织专化性。     

氯嘧磺隆降解细菌的分离鉴定及其降解特性

为了解决大豆田除草剂氯嘧磺隆在土壤中残留时间长的问题,为氯嘧磺隆污染的土壤的生物修复提供菌源,利用富集培养技术,从多年使用氯嘧磺隆的土壤中分离得到1株能以氯嘧磺隆作为唯一氮源生长的细菌,命名为SN10菌株。通过对该菌株的生理生化鉴定和16S rDNA序列分析,初步鉴定菌株SN10为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。以SN10菌体生长量、氯嘧磺隆降解率为指标,研究了（温度、pH、接菌量、培养时间）对SN10生长量和降解能力的影响。结果表明,SN10最佳生长量和降解条件为28℃,pH为7,培养时间4天,接菌量为7%,在此条件下,SN10菌株对氯嘧磺隆的降解率达到87.2%。通过氯嘧磺隆降解菌的修复效果评价试验,得出加菌加药处理组的玉米种子的发芽率、株高菌均高于仅加药的处理。SN10对土壤中氯嘧磺隆的降解效果明显。     

甘草总黄酮对金黄色葡萄球菌的作用研究

为了研究甘草总黄酮对金葡菌的抗菌活性以及亚抑菌浓度的甘草总黄酮对金黄色葡萄球菌α-溶血素分泌的影响。首先,采用微量肉汤稀释法测定了甘草总黄酮对6株金葡菌标准菌株的最小抑菌浓度;其次,采用溶血试验、蛋白免疫印迹试验以及荧光定量PCR试验分别在表型功能、蛋白表达和基因转录3个层次确证了其对α-溶血素表达的影响。结果表明：甘草总黄酮具有良好的抗金葡菌作用,其最小抑菌浓度范围为4~16 μg/mL,而亚抑菌浓度的甘草总黄酮能浓度依赖性地降低金葡菌α-溶血素的分泌。     

新疆薄皮核桃污染霉菌的分离鉴定

为了解新疆薄皮核桃受霉菌污染情况及污染微生物种类,以新2核桃为试材,采用稀释涂布法和三点法对污染霉菌进行分离纯化,经形态学和ITS序列分子分析法相结合进行鉴定。结果表明,薄皮核桃污染霉菌共有10种,通过菌株的生长特性得出米根霉（Rhizopus oryzae）、深绿木霉（Trichoderma atroviride）、黑曲霉（Aspergillus niger）和黄曲霉（Aspergillus flavus）4种霉菌是影响核桃品质变化的优势霉菌,其他6种霉菌分别为扩展青霉（Penicillium expansum）、腐皮镰刀菌（Fusarium solani）、拟轮枝镰刀菌（Fusarium verticillioides）、红贝俄氏孔菌（Earliella scabrosa）、歧皱青霉（Peni-cillium dierckxii）和交链格孢菌（Alternaria alternata）。研究结果可为薄皮核桃品质劣变问题的研究及防治提供参考。     

草鱼肝胆综合症并发细菌疾病病原分离鉴定及药敏试验

对2016年6月江西省鄱阳县高家岭一个养殖场养殖草鱼发生的暴发性疾病进行病原分离鉴定及药敏试验,旨在确定其病因,为今后生产中有效防控该疾病提供参考。利用细菌分离方法在无菌条件下从患肝胆综合症草鱼体内分离、纯化致病菌,通过形态学、生化鉴定和16SrDNA序列分析、gyrB基因序列分析进行菌株鉴定,用攻毒试验找出草鱼的半致死浓度,并采用滤纸片扩散法进行药敏试验。从患肝胆综合症草鱼体内分离、纯化到一株致病菌,经鉴定为维氏气单胞菌,命名为PYG1。攻毒试验表明该菌能感染草鱼,且半致死浓度为1.5×10⁴CFU/g鱼体质量。药敏试验结果表明该菌只对氨基糖苷类、第二代和第三代头孢类以及喹诺酮类的氧氟沙星共9种药物表现出敏感或中度敏感,对所测的其他药物耐药,为强耐药菌株。维氏气单胞菌PYG1是引起此次草鱼发病的致病菌,可选用氨基糖苷类、头孢类及喹诺酮类的氧氟沙星等药物进行防治。