金属离子对霍山石斛类原球茎增殖及植株再生的影响

 采用单因素浓度试验和正交试验研究了Mg²⁺ 、Ca²⁺ 、Fe²⁺ 、Mn²⁺和Zn²⁺离子对液体培养霍山石斛类原球茎增殖的影响。结果表明, 5种金属离子对类原球茎增殖影响的主次顺序为Fe²⁺ >Mn²⁺ >Mg²⁺ >Ca²⁺ > Zn^{2 +} , 促进类原球茎增殖的优化组合为Mg²⁺ 1.5 mmol·L ^-1、Ca²⁺ 4.5 mmol·L ^-1、Fe²⁺ 0.1 mmol·L ^-1、Mn²⁺ 0.5 mmol·L ^-1、Zn²⁺ 0.06 mmol·L ^-1。经优化的液体培养基增殖的类原球茎能保持植株再生能力, 平均每克类原球茎增殖后可再生植株1 985.2株, 是相同时间内对照类原球茎再生植株数的4.2倍。     

从菠萝薄细胞层切片直接诱导体细胞胚

 以菠萝(Ananas comosus L. Merrill) 杂交种MD1 无菌苗为材料, 通过培养薄细胞层切片 (Thin cell layer, TCL) 的方法, 研究直接再生胚的固体培养体系。结果证明, 预培养的设计2 (在预培养基PT上黑暗预培养无菌苗1周后, 从预培养苗茎顶端切取TCL, 在MS + 2, 4-D 2 mg·L ^{- 1}或1 mg·L ^{- 1}胚诱导培养基EI2上黑暗培养1周, 然后转到光照条件下继续诱导胚1周, 再在成熟胚培养基EM上培养2周, 最后转入幼苗培养基PL上培养) 是直接诱导获得体胚的最佳途径; 诱导的体胚最初均来自于薄细胞层上微管束附近的细胞; picloram有利于芽的诱导, 2, 4-D有利于直接再生胚, 但如果球形胚形成后一直培养在较高浓度的2, 4-D培养基中, 将阻碍球形胚和心形胚进一步发育为成熟胚, 反而促进芽的生成。     

秋水仙素离体诱导同源四倍体青花菜

 以青花菜品种‘海兹’高频再生试管苗为外植体, 利用秋水仙素离体诱导四倍体。结果表明: 用含秋水仙素200 mg·L ^{- 1}的MS + 0.1 mg·L ^-1NAA + 6.0 mg·L ^{- 1} 6-BA液体培养基处理2 cm长的再生苗48 h, 每个外植体平均可产芽2.1个, 再生植株变异率为83.33% , 四倍体诱导率达79.17%。与二倍体相比, 四倍体植株叶片、花冠、气孔等均表现巨大性; 流式细胞仪倍性鉴定显示, 对照DNA相对含量为200, 四倍体再生植株为400。四倍体根尖染色体2n = 4x = 36。     

白芨种子的无菌萌发过程观察和组培快繁研究

以白芨种子为培养材料,对白芨种子无菌非共生萌发过程中原球茎发育进行了研究;并以白芨组培苗的原球茎和叶片为外植体,进行白芨组织培养快速繁殖技术研究.结果表明:在白芨的种子发育过程中,种胚发育成幼苗有2种方式,1种是小球体经原球茎发育成小苗;第2种是小球体伸长成根状茎后发育成小苗.组培苗的原球茎经切割后在诱导培养基上培养,可产生增殖分化,形成丛芽.原球茎诱导的最适培养基为1/2MS+6-BA5.0 mg/L+NAA0.2 mg/L,增殖倍数为2.71.以叶片为外植体,未获得组培苗.     

不同培养条件对金钗石斛原球茎增殖的影响

本试验研究了基本培养基、培养天数及培养方式、激素浓度对金钗石斛原球茎增殖的影响,采用方差分析方法来探讨不同培养条件与原球茎增殖的影响关系。结果表明:B 5培养基为最佳培养基;4个培养天数之间存在极显著差异,培养期为30 d时显示最好;4种培养方式之间存在显著差异,固体培养和液体悬浮培养是较好的培养方式;原球茎最佳增殖激素浓度为6-BA 0.5 m g/L+NAA 0.2 m g/L。     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+蔗糖20g·L^-1最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖20g·L^-1,继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L^-1+KT 0.5mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖30g·L^-1+活性碳1.0g·L^-1,培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。     

象牙白花兰种子及茎尖培养与原球茎形态发生

 象牙白花兰授粉后5 个月的种子开始具有较高的萌发率; 椰乳或适量激素有利于种子的萌发;种子在萌发后胚发育形成原球茎, 原球茎经过增殖, 分化出叶片和根系, 形成完整的小植株。从播种到小植株的形成历时约7 个月。茎尖在MS + NAA 0. 1 + BA 3. 0 (单位: mg·L^-1 , 下同) + 椰乳10 %的培养基上诱导产生原球茎; 原球茎在MS + NAA 0. 1 + BA 5. 0 的培养基上增殖, 在无激素培养基上分化成芽; 小芽在附加7 %香蕉汁和3 %马铃薯汁的1/ 2 MS 培养基上诱导出根而再生完整小植株。不同pH 值、光照强度和培养方式对增殖效果有显著影响。     

嘉定白蒜脱毒微鳞茎诱导的快繁技术研究

以嘉定白蒜为试材,研究了不同茎尖脱毒方法与不同外植体启动培养基对嘉定白蒜无菌苗建立与脱毒率的影响、不 同增殖培养基与切割方式对潜伏芽激活与增殖的影响,以及组培苗分株等级标准与培养基配方对诱导组培微鳞茎形成的影 响。结果显示：带1 个叶原基的茎尖,在MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1 的培养基上成苗率高,达76%;采用单株 假茎去顶后,取其基部1.0 cm 假茎茎段,再沿中轴线对半纵切的方式,在MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1 的培养基 上能较好地激活叶腋潜伏芽,增殖倍数达3.22;1 个叶原基包裹的芽原基茎尖脱毒成效最好,达100%;假茎茎粗3 mm 的组 培苗单株,在MS+NAA 0.1 mg·L^-1+ 糖90 g·L^-1、pH 为7.0 的培养基中微鳞茎诱导率最高,达94.8%。茎尖脱毒方式、叶腋 潜伏芽激活切割方式和组培微鳞茎诱导的培养基配方,是嘉定白蒜脱毒与快繁的技术关键。     

铁皮石斛的种子培养

以铁皮石斛成熟种子为外植体,研究原球茎的诱导、增殖、分化和生根的最佳培养条件。结果表明:1/2 MS基础培养基最适合铁皮石斛的种子培养,45 d时原球茎诱导率达到95%;原球茎增殖的最佳培养基为1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+20%马铃薯提取液,每代增殖16倍,原球茎形态好、变异少;原球茎团于1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.25 mg/L+20%马铃薯提取液的培养基上可诱导丛芽分化,于MS+NAA 0.5 mg/L+20%香蕉汁+活性炭5g/L的培养基上易于诱导不定根的形成,60 d后可形成健壮的完整小植株。     

兰州百合高效再生体系的建立

以兰州百合新鲜鳞片为试材进行高效再生体系的研究。结果表明：兰州百合中层、内层鳞片比外层鳞片容易再生不定芽,更适于作为外植体。鳞片在MS+0.5 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA 的诱导培养基上再生频率最高,可达90%;不定芽在MS+0.8 mg·L^-1 6-BA+0.05 mg·L^-1 NAA 的增殖培养基上增殖率最高,平均每芽新增芽4.5 个;不定芽在MS+0.8 mg·L^-16-BA+0.05 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-1 AC 的壮苗生根培养基上鳞茎的膨大倍数最高,生根数量较多,小苗长势优,移栽后成活率达98% 以上。     

杂交兰‘韩国桃花’×蕙兰种间杂交种子无菌萌发特征研究

 以大花蕙兰和墨兰杂交育成的品种‘韩国桃花’为母本, 再与蕙兰进行种间远缘杂交, 取其不同成熟度的种子进行无菌播种, 研究了杂交种子萌发、原球茎和根状茎的增殖与分化特征。结果表明: 授粉后240 d的种胚具有较好的萌发能力, 在所试的4种培养基中, 以1/2MS添加6-BA 0.5 mg·L^-1和NAA 2.0 mg·L^-1的处理萌发效果较好; 萌发的种子可以通过原球茎和根状茎两条途径增殖; 1/2MS培养基添加6-BA 0.5 mg·L^-1和NAA 2.0 mg·L^-1适于原球茎增殖, 培养30 d后增殖系数可达4.25; 而NAA 0.5、1.0 mg·L^-1适宜原球茎的发育和植株再生; 根状茎的增殖以NAA:6-BA = 2:1较适宜, 培养40 d后增殖系数可达6. 0以上; 当NAA浓度为1.0 mg·L^-1时, 根状茎发育及植株再生效果佳, 培养70 d后超过80%的根状茎茎端分化成苗。杂交后代通过原球茎和根状茎均可获得再生植株, 且形态无明显差别。     

桂花离体培养与快速繁殖技术的初步研究

 以桂花(Osmanthus fragrans Lour. ) 胚和新梢茎段为外植体进行了离体培养与快速繁殖研究,筛选出最适培养基——— (1) 胚萌发: MS +BA 1.00 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; ( 2) 新梢茎段启动培养: LMc +KT 8.00 mg·L ^{- 1}+NAA 0.10 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; ( 3) 继代增殖培养: LMc + TDZ 0.50 mg·L ^{- 1} +NAA0.10 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; (4) 生根培养: 1/2MS +NAA 2.00 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%。采用腐殖质土为栽培基质, 移栽成活率可达80%以上。     

无核葡萄与中国野生葡萄杂种的胚挽救技术研究

 通过无核葡萄与中国野生葡萄杂交, 获得了4个杂交组合的后代植株, 确定了各杂交组合取胚珠培养的最佳时期。1Flame ×山葡萄; 2红宝石×爱莫无核; 3红宝石×北醇; 4爱莫无核×山葡萄在授粉后45 d取样培养效果较佳; 5长穗无核白×山葡萄授粉后30 d; 6无核白自交在授粉后35 d培养效果较佳。以NitSchs为基本培养基, 附加0.5 mg·L ^{- 1} 6-BA + 0.5 mg·L^-1 GA₃ + 2.5 mg·L ^{- 1} IBA + 0.1 mg·L^-1ZT, 适合于1、3、5号杂交组合; 而0.5 mg·L^-1 6-BA + 0.5 mg·L^-1 GA₃ + 2.0 mg·L^-1 IBA + 0.1 mg·L^-1ZT适合2、4、6号杂交组合; 胚萌发培养基为2.0 mg·L^-1 IBA + 1.0 mg·L^-1 6-BA +0.2 mg·L^-1 GA₃ , 适合1、2、3、5、6号杂交组合, 而爱莫×山葡萄在1.5 mg·L ^{- 1} IBA + 1.0 mg·L^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 GA₃培养基上表现较佳, 生根培养基为1 /2MS基本培养基添加0.15 mg·L^-1 IBA + 0.02 mg·L^-1 6-BA, 它适合1号与5号组合, 0.10 mg·L^-1 IBA + 0.02 mg·L^-1 6-BA适合4号与6号组合。     

秋石斛同源四倍体诱导与鉴定

 为了创制秋石斛同源四倍体新种质, 以秋石斛同株异花授粉种子为材料, 用组织培养方法,通过种子非共生萌发与原球茎诱导, 在原球茎发育的原胚期, 以低浓度混合诱变剂进行多倍体诱导。结果用0.01%秋水仙素+ 5 mg·L ^{- 1}氨磺灵处理8～10 d, 四倍体(2n = 4X = 76) 诱变率达90%以上, 未发现嵌合体。与二倍体对照比较, 四倍体植株粗壮, 叶色深绿, 叶片宽厚。     

桂花胚的离体培养

 以不同发育时期的桂花胚为试材, 研究了不同生长调节剂组合、基本培养基、光照时间、蔗糖浓度对离体胚萌发, 以及不同培养基对萌发幼苗生根的影响。结果表明: 诱导胚萌发较理想的培养基为B5 + 6-BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1 +蔗糖3% ～5% , 光照12 h·d^{- 1} ; 生根较合适的培养基为B5 + IBA 2.0 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%。     

蝴蝶兰未受精胚珠离体培养的研究

 以蝴蝶兰大孢子母细胞时期的胚珠为外植体进行了离体培养的研究。结果表明, 在VW +BA0.2 mg·L ^{- 1} +NAA 0.2 mg·L ^{- 1} +蔗糖2.0% +植物凝胶0.3%中蝴蝶兰的大孢子母细胞可以发育至二核胚囊; 在VW +BA 0.2 mg·L ^{- 1} +NAA 0.2 mg·L ^{- 1} +蔗糖2.0% +植物凝胶0.3% +椰子汁10%中大孢子母细胞可以发育至四核胚囊或形成胚性细胞团, 这些胚性细胞团有可能发育成单倍体植株。     

‘富有’和‘次郎’甜柿叶片再生植株的研究

 比较了不同生长调节剂及其种类浓度和培养时间对‘富有’和‘次郎’两个甜柿(Diospyros kaki Thunb. ) 品种的叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。TDZ诱导叶片愈伤组织和不定芽再生的能力很强, 在含ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的培养基中, 愈伤组织的形成率达96% , 愈伤组织不定芽分化率达80%以上,由0.5 mg·L ^{- 1} TDZ诱导形成的富有和次郎愈伤组织, 在含有ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的1/2DKW培养基培养30 d,不定芽分化率均达96%以上, 平均芽数分别为7.8和5.4, 所得再生苗的生根率近75%。     

枣离体叶片高效再生植株的研究

 以‘黄骅冬枣’组培苗叶片为试材, 研究了叶片幼嫩程度、叶片来源、组培苗状态以及植物生长调节剂等对离体叶片诱导不定芽再生的影响, 并获得了完整的再生植株。结果表明, 以未生根组培苗中上部叶片再生效果较好; TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于BA; 离体叶片在MS + TDZ 1.0 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中诱导培养28 d后, 转入MS + IBA 0.1 mg·L ^{- 1} + GA₃ 0.05 mg·L ^{- 1}培养基中二次培养, 叶片再生效果最好, 再生率可达92.45%。将叶片再生植株转入MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} + KT0.5 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中继代增殖培养, 增殖系数达3.64。以1 /2MS + IAA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基诱导生根, 生根率87.1%。生根苗大田移栽成活率达到57%。