首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 156 毫秒
1.
2.
3.
本文介绍了应用酶标单抗(HRP-McAb)的涂片法、双抗体夹心 ELISA、斑点 ELISA 和微量细胞培养联合免疫酶测定法检测猪瘟病毒抗原,结果4种方法检出率基本一致,具有快速、特异、敏感、准确、简便、经济和判断客观的诊断价值,可作为疫区流行病检查和检测猪瘟病毒抗原应用。  相似文献   

4.
蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体研制   总被引:2,自引:0,他引:2  
用蚕豆萎蔫病毒提纯病毒粒子免疫BAL B/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用纯化的BBWV病毒对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经三次有稀释法克隆,成功获得了2株BBWV特异性单克隆抗体的细胞株,分别命名为4D11,3G12.2株单抗腹水间接ELISA效价高达1:640000,抗体类型均为IgG1,经Western-blotting分析表明,2株单抗均是针对BBWV 44.7kD的外壳蛋白  相似文献   

5.
抗猪口蹄疫病毒单克隆抗体的研制及其生物学特性鉴定   总被引:5,自引:0,他引:5  
猪口蹄疫病毒毒株(FMDV-B,FMDB-D,FMDV-G,FMDV-S)经乳鼠和PK15传代细胞适应传代,通过差速离心和蒸糖密度梯度离心纯化抗原,免疫BALB/C小鼠,取脾细胞和SP2/O在PEG4000作用下融合,经间接免疫荧光技术检测,有限稀释法克隆,筛选得到6株能特异分泌抗FMDV的单克隆抗体(McAb),其中McAb-B43,McAb-B62属IgM,BcAb-D16,McAb-D16,McAb-G17属IgG1,McAb-G52,McAb-S25属IgG2b,在液氮中保存6个月,单抗效价基本保持不变,McAb0G17,McAb-G52有很强的中和特性。  相似文献   

6.
蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体研制   总被引:11,自引:3,他引:11  
用蚕豆萎蔫病毒(BBWV)提纯病毒粒子免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用纯化的BBWV病毒对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经三次有限稀释法克隆,成功获得2株BB-WV特异性单克隆抗体的细胞株,分别命名为4D11,3G12.2株单抗腹水间接ELISA效价高达1∶640000,抗体类型均为IgG1,经Western-bloting分析表明,2株单抗均是针对BBWV44.7kD的外壳蛋白大亚基的特异性抗体.单抗抗原结合位点分析表明4D11和3G12两单抗作用于同一抗原决定簇  相似文献   

7.
抗牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的研制   总被引:1,自引:0,他引:1  
将含有牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV1)囊膜糖蛋白E2编码基因的真核表达质粒pEC143免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,以重组E2蛋白纯化产物为检测抗原,经间接ELISA法筛选和3次有限稀释法克隆,得到1株能稳定分泌抗BVDV1和BVDV2单克隆抗体的杂交瘤细胞株.该3D8株单抗能识别BVDV1标准毒株(NADL、OregonC24V)、BVDV2标准毒株(890、104)、2株BVDV1分离株和3株BVDV2分离株,而不能识别牛轮状病毒、牛疱疹病毒1型,显示出良好的特异性.阳性杂交瘤细胞的上清液、腹水ELISA抗体效价分别为2~9和10×2~7,为IgM亚类.其单克隆抗体杂交瘤细胞株的获得,为建立单抗介导的检测BVDV1和BVDV2抗原和抗体的血清学方法和实现标准化诊断奠定基础.  相似文献   

8.
经多角体碱溶超离心和柱层析纯化的棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒(HaSNPV)粒子作为抗原,通过细胞融合,得到3株分泌抗HaSNPV单克隆抗体的杂交瘤细胞D_2、B_8和D_7,相应抗体的效价MAD_2为10,MAB_8为50,MAD_7为1000。其中MAB_8为构象决定簇抗体,MAD_2和MAD_7为顺序决定簇抗体。用SDS-PAGE,Western-blot和ELISA方法确定MAD_2对应的抗原决定簇多肽大小为56kd和96kd,MAD_7对应56kd多肽。在不同病毒株系鉴别中发现MAD_2,MAD_8为HaSNPV特异,而MAD_7则对大袋蛾单粒包埋核型多角体病毒(CvNPV)发生交叉反应。另外用ELISA法检测了HaSNPV在体外细胞系统中的增殖动态。  相似文献   

9.
以ADV-G为抗原,利用细胞融合技术,建立了5株特异的抗ADV单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞,其中Y_9、Y_(19)和Y_(13)酶印迹(Western Blot)阳性,均与ADV-G的85K和75K蛋白反应。B_4和Y_(21)单克隆抗体为间接ELISA阳性。  相似文献   

10.
[目的]筛选出稳定分泌抗犬瘟热病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。[方法]用纯化的犬瘟热病毒(CDV)抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA和有限稀释法克隆杂交瘤细胞。研究了杂交瘤细胞的稳定性和染色体数,测定了单克隆抗体的效价并鉴定其特异性和亚型。[结果]经反复筛选和亚克隆后,共获得3株能稳定分泌抗CDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。3株单抗对CDV均有较高的特异性,与犬传染性肝炎病毒、犬细小病毒均不反应。3株杂交瘤细胞的腹水效价为1∶(8 000~128 000),细胞培养上清效价为1∶(256~512),染色体数为80~100。3株单克隆抗体重链均属于IgG1,轻链均属于κ链。[结论]该研究为研制CDV快速检测试剂盒奠定了基础。  相似文献   

11.
减蛋综合征1976病毒单克隆抗体的制备及其初步鉴定   总被引:4,自引:1,他引:4  
采用经层析方法提纯的减蛋综合征1976(EDS‘76)病毒免疫BLAB/c小鼠。最后一次加强免疫后第3d制备脾脏细胞,然后用50%的聚乙二醇(PEG,分子量400)融合脾脏细胞和SP2/0骨髓瘤细胞。通过选择培养、特异性抗体检测、筛选和克隆詈笾票赋觯抵攴置诳固宓南赴辏停玻停常停保埃停保春停停保怠N⒘垦种剖匝椋ǎ龋桑┲っ鳎停保档タ寺】固寰哂醒种苹钚裕龋杉畚叮ǎ欤铮纾玻  相似文献   

12.
抗禽流感病毒H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制   总被引:7,自引:4,他引:7  
以H9亚型禽流感病毒免疫Balb/C小鼠,细胞融合后用血凝抑制试验检测细胞培养上清,结果获得3株阳性细胞株,分别命名为6E6、6B6、5B4。经2次亚克隆后,所有杂交瘤细胞保持了分泌抗禽流感H9亚型特异抗体的能力。特异性试验证明,3株单克隆抗体仅与试验的H9病毒株反应,与H5亚型禽流感病毒、鸡新城疫病毒和鹅源腺病毒等不反应。间接免疫荧光试验(IFA)结果表明,3株单克隆细胞的上清均能与感染H9亚型病毒的鸡成纤维细胞呈特异性绿色荧光反应。实验性病毒检测结果表明,IFA方法检测H9禽流感比鸡胚接种分离病毒的效果好、灵敏度高,是一种经济实用的方法。获得的单克隆抗体可在禽流感流行病学的监测及预警预报中发挥重要作用。  相似文献   

13.
用氟利昂去除法氏囊组织杂蛋白,并经甘油-酒石酸钾密度梯度离心进一步纯化,通过电镜观察、光密度测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE).证明得到的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)形态完整。将纯化的IBDV 免疫 BALB/C 鼠,取其脾细胞与 SP2/0骨髓瘤细胞融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和病毒中和试验(VNT)检测分泌抗体,获得了6株稳定分泌抗 IBDV 中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为 NIB_1、NIB_2、NIB_3、NIB_4、NIB_5、NIB_6。还建立了检测 IBDV 的单克隆抗体双抗体 ELISA。  相似文献   

14.
取抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体.经饱和硫酸铵盐析,透析除盐、葡聚糖凝胶过滤粗提后,经DEAE—22纤维素离子交换层析,获得纯化的单抗,ELISA效价达10(-6)以上.双向琼扩效价达1:64以上;抗体回收率达60%以上;最高浓度达1.2mg/ml.经抗鼠全血清双向琼扩结果证明所提取物为纯一的IgG.  相似文献   

15.
兔出血症病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过ELISA迭加试验对5株抗兔出血症病毒(RHDV)单克隆抗体(McAb)的抗原表位进行了分析。抗体反应增值结果表明,6株单抗分别针对3类不同的抗原决定簇。CG4-1、CH3-1和AA8-1针对病毒结构多肽上的同一决定簇,CF2-1和RM-17针对另一决定族,而RM-14针对第3种决定簇;其识别表位可能与AA8-1非常接近。单抗的识别表位与其生物学活性密切相关。  相似文献   

16.
减蛋综合征病毒单克隆抗体的生物学特性鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
该研究在建立分泌减蛋综合征病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的基础上,鉴定了10株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体(4B1,1D4,2D6,3D6,2A1,3A5,3C6,3C1,1B3和2C5)和生物学活性,这10株杂交瘤细胞分泌的抗体有高度的特异性,只特异地作用于减蛋综合征病毒,微量血凝抑制试验(HI)发现4B1,3C1,2C5和3C6有血凝抑制活性,腹水效价分别为24(log2),4(log2),7(l  相似文献   

17.
用经蔗糖密度梯度离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒(IBV,M41)作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过常规淋巴细胞杂交瘤技术产生杂交瘤细胞,经ELISA筛选,获得了4株能分泌特异性抗IBV单克隆抗体的细胞系,分别命名为4AC1、4AF1、6DH8及2DH10。4株单抗的亚类都属于IgG2b,在Westernblotting试验中,4AF1、6DH82株单抗特异性地识别IBV的核衣壳蛋白(N);经ELISA测定,各株单抗40h培养上清效价达10-2~10-4,第7天腹水效价达10-5~10-6,4AF1、6DH8与所试7个IBV标准株及2个IBV分离株都发生反应  相似文献   

18.
利用 1 2株不同来源的抗传染性法氏囊病病毒 (IBDV)单克隆抗体 ,采用斑点酶联免疫吸附试验方法 ,对 1 992~1 999年从全国不同地区收集的 63株 IBDV毒株进行单抗反应性检测 ,建立各分离毒的单抗反应谱 ,以分析各毒株的抗原性。根据各分离株的单抗反应谱 ,可将 63个分离毒株分成 1 0组  相似文献   

19.
鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
以提纯的IBV-M病毒抗原免疫BALB/C小鼠,末次免疫后三天取脾细胞与SP_2/O细胞在50%PEG2000作用下融合,三次融合两次获得成功。经抗体检测、筛选和克隆化培养,最后获得三株分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞系。三株杂交癌细胞经体外连续传代培养2个多月,以及液氮冻存4个月后复苏培养,仍能稳定地分泌抗体。  相似文献   

20.
本文应用辣根过氧化物酶标记抗仙台病毒的单克隆抗体,建立了抗体夹心法检测小鼠体内仙台病毒抗体的方法,与间接 ELISA 进行比较,检出率提高6%左右,敏感度提高四倍以上。样本结果的变异系数小于10%,重复性良好。直接用酶标记单克隆抗体有简便、廉价、生物活性高等优点。  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号