蛋白酶和淀粉酶活性检测方法探讨

随着酶制剂在养殖业中应用日益增多，产品质量也参差不齐，市场上时有低劣酶制剂出现，而酶制剂酶活的测定比较繁琐，有关酶活的定义、测定方法、测定条件尚不统一，给广大用户在选购和使用时造成很多不便，难免上当受骗造成不必要的经济损失。本文就蛋白酶（中性蛋白酶和酸性蛋白酶）和淀粉酶活力简便、快速测定方法简介如下：１蛋白酶活力的测定１．１原理 采用福林－酚试剂法。福林－酚试剂在碱性条件下可被酚类化合物还原呈蓝色（钼蓝和钨蓝混合物），由于蛋白质分子中有含酚基的氨基酸（如酪氨酸、色氨酸等），可使蛋白质及其水解产物…     

苜蓿草粉对禾花鲤蛋白酶和淀粉酶活性影响的研究

选取来源一致、规格整齐的2龄禾花鲤1 200尾,采用单因子完全随机设计,分为5个处理,每处理3个重复,每重复80尾鱼,分置于15个试验池中。各处理苜蓿Medicago sativa草粉的添加量分别为0（对照组）、40（试验Ⅰ组）、80（试验Ⅱ组）、120（试验Ⅲ组）和160 g/kg（试验Ⅳ组）,正试期50 d,观测苜蓿草粉对禾花鲤前、中、后肠及肝胰脏蛋白酶和淀粉酶活性的影响。结果表明：1）添加苜蓿草粉对前肠蛋白酶活性有显著影响 (P<0.05),其中试验II组显著高于对照组和试验Ⅳ组,但和试验Ⅰ、Ⅲ组差异不显著 (P>0.05)。添加苜蓿草粉对中、后肠及肝胰脏蛋白酶活性均无显著影响 (P>0.05),但它们有相同的变化趋势,即试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组鱼的蛋白酶活性均高于对照组。2）鲤鱼的前肠、中肠、后肠蛋白酶活性依次减弱,而肝胰脏的蛋白酶活性远低于肠道。3）添加苜蓿草粉后前肠及中肠淀粉酶活性比较,试验II组显著高于对照组 (P<0.05),其余各组与对照组差异不显著 (P>0.05),后肠淀粉酶活性与对照组无显著差异 (P>0.05)。添加苜蓿草粉能提高鲤鱼肝胰脏淀粉酶活性,其中试验Ⅱ组显著高于对照组 (P<0.05),其余试验组与对照组无显著差异 (P>0.05)。4）禾花鲤前、中、后肠及肝胰脏4部分淀粉酶的活性有较大的不同,肝胰脏>后肠>中肠>前肠。     

非淀粉多糖酶对奥尼罗非鱼蛋白酶、淀粉酶活性影响的研究

本文从生长性能角度研究了非淀粉多糖酶对奥尼罗非鱼肝胰脏、肠道(前、中后肠)蛋白酶和淀粉酶的影响.试验选用体重约60 g的奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus×O.aureus)560尾,随机分成4组,每组7个重复,每重复20尾鱼,分别饲喂添加了不同水平非淀粉多糖复合酶制剂(0、0.01%、0.02%、0.04%)的基础日粮,喂料后0,1、3、5 h对各组进行组织采样,研究非淀粉多精酶对罗非鱼肝胰脏、肠道(前、中后肠)蛋白酶和淀粉酶的影响.结果表明:(1)添加0.02%和0.04%非淀粉多糖酶显著提高了奥尼罗非鱼的特定生长率、显著降低了饵料系数(P<0.05);(2)蛋白酶活性分别按肝胰脏、胃、肠道依次升高;(3)添加0.04%非淀粉多糖酶组罗非鱼肝胰脏、胃蛋白酶活性最大,均显著高于对照组;(4)除喂后5 h采样结果外,其它时间采样检测结果均以添加0.01%非淀粉多糖酶组中后肠蛋白酶活性最高,显著高于对照组(P<0.05);(5)适量添加非淀粉多糖酶对肝胰脏淀粉酶活性影响不大,高量添加非淀粉多糖酶(0.04%)对肝胰脏淀粉酶活性具有抑制作用,在一定程度上提高了前、中后肠淀粉酶活性.     

花鲔肠道和肝胰脏蛋白酶、淀粉酶活力的研究

花[鱼骨]（Hemibarbus maculates Bleeker）前、中、后肠及肝胰脏的蛋白酶的最适温度为40℃；前、中、后肠及肝胰脏的淀粉酶的最适温度为40℃。前、中、后肠蛋白酶的最适pH值分别为5．0、7．0、7．0．肝胰脏蛋白酶最适pH值为7．0；前、中、后肠淀粉酶的最适pH值分别为5．0、7．0、7．0，肝胰脏淀粉酶最适pH值为7．0。     

花肠道和肝胰脏蛋白酶、淀粉酶活力的研究

花(Hemibarbus maculates Bleeker)前、中、后肠及肝胰脏的蛋白酶的最适温度为40℃;前、中、后肠及肝胰脏的淀粉酶的最适温度为40℃。前、中、后肠蛋白酶的最适pH值分别为5.0、7.0、7.0,肝胰脏蛋白酶最适pH值为7.0;前、中、后肠淀粉酶的最适pH值分别为5.0、7.0、7.0,肝胰脏淀粉酶最适pH值为7.0。     

尿素酶活性的初步探讨

<正> 可用“尿素酶活性”来表示热处理破坏豆饼(粕)中抗营养因子的程度。本文以科学研究和生产实践中的实例,说明豆饼(粕)中尿素酶活性水平对某些动物日粮蛋白质消化吸收的影响。     

花(鱼骨)肠道和肝胰脏蛋白酶、淀粉酶活力的研究

花(鱼骨)(Hemibarbus maculates Bleeker)前、中、后肠及肝胰脏的蛋白酶的最适温度为40℃;前、中、后肠及肝胰脏的淀粉酶的最适温度为40℃.前、中、后肠蛋白酶的最适pH值分别为5.0、7.0、7.0,肝胰脏蛋白酶最适pH值为7.0;前、中、后肠淀粉酶的最适pH值分别为5.0、7.0、7.0,肝胰脏淀粉酶最适pH值为7.0.     

饲料中添加蛋白酶AG对鲤鱼鱼种生长和蛋白质消化酶活性的影响

通过2个试验研究了饲料中添加蛋白酶AG对鲤鱼生长和前肠蛋白质消化酶活性的影响.试验Ⅰ选用540尾均重11.7 g的鲤鱼,随机均分为6组,随机选取3组分别饲喂鱼粉含量为10%、15%、20%的3种等蛋白基础饲料,另外3组分别饲喂添加有175 mg/kg蛋白酶AG的以上3种饲料,试验期60 d.试验Ⅱ选取120尾均重48.7 g的鲤鱼,随机分为2组,一组饲喂鱼粉含量6%的基础饲料为对照组,另外一组饲喂添加175 mg/kg蛋白酶AG的基础饲料为试验组,试验期为30 d.试验Ⅰ结果表明:摄食10%鱼粉饲料和20%鱼粉 175 mg/kg蛋白酶AG饲料的鲤鱼分别具有最低和最高的增重率;在10%鱼粉饲料中添加蛋白酶AG显著提高了鱼体增重率(P<0.05),但在15%、20%鱼粉饲料中添加蛋白酶AG,对鱼体增重率没有显著影响.试验Ⅱ结果表明:相比于对照组,试验组鲤鱼增重率提高了6.4%(P<0.05),饲料系数降低了5.4%(P<0.05).试验Ⅰ和试验Ⅱ中,添加蛋白酶AG对鱼体肌肉水分、粗脂肪、粗蛋白质含量均无显著影响(P>0.05);对消化酶活性的测定表明,在鱼粉含量为10%、6%的基础饲料中添加蛋白酶AG,可显著提高前肠组织蛋白酶活性和食糜蛋白酶活性(P<0.05),但在鱼粉含量为15%、20%的基础饲料中添加蛋白酶AG,对前肠组织蛋白酶活性和食糜蛋白酶活性没有影响.综上所述,在鱼粉含量较低的饲料中添加蛋白酶AG,可提高鲤鱼消化道蛋白酶活性,改善生长性能.     

端粒酶活性检测方法的研究进展

端粒(Telomere)是真核细胞染色体末端的特异结构。由重复的端粒特异DNA和与它们特异结合的蛋白组成。在人类端粒特异DNA为5’～r丌AGGG～3’，这些重复序列的长度山种系细胞的15～20Kb到外周血白细胞的5～12Kb不等。它可以保护染色体不完全复制、防止DNA重组、被核酸酶降解，以及在复制过程中末端—末端融合。由于末断复制问题的存     

中草药添加剂对异育银鲫蛋白酶和淀粉酶活性的影响

设计中草药添加剂配方I和Ⅱ，各以0．5、1、2％剂量添加到基础饲料中饲喂异育银鲫（体重1．6－2．2g)，2个月后，测定肠道和肝胰脏的蛋白酶、淀粉酶活性。结果表明，异育银鲫的肠道、肝胰脏的蛋白酶和淀粉酶活性都有明显的提高，其中中草药添加剂对蛋白酶活性的影响更为明显。配方I组中，蛋白酶、淀粉酶活性最高的是2％组，肠道、肝胰脏的蛋白酶活性分别比对照组提高116.22%和94．26％，淀粉酶活性分别比对照组提高50.58%和39．9％。配方Ⅱ组中，蛋白酶、淀粉酶活性最高的是2％组，肠道、肝胰脏蛋白酶活性分别比对照组提高143．64％和138．41％，淀粉酶活性比对照组提高70．37％和56．63％。中草药添加剂主要影响蛋白酶的活性，尤其是肠道的蛋白酶活性。     

一种检测蛋白酶活性的荧光素酶报告基因系统的构建及应用

为建立一种检测蛋白酶活性的方法,本研究将IL-1β前体基因和荧光素酶基因融合,克隆至p CAGGS真核载体,构建了基于荧光素酶的报告基因系统(iGLuc),同时构建GLuc真核表达质粒作为对照。以PRRSV nsp4和ASFV S273R蛋白酶为检测对象,利用该报告基因系统对病毒蛋白酶活性进行检测,将iGLuc中蛋白酶酶切位点(FVCDAN)相对应的基因序列替换为Kpn I酶切位点,构建重组质粒Kpn I-iGLuc,然后分别将PRRSV nsp4和ASFV S273R蛋白酶切割位点对应的核酸序列插入至报告基因Kpn I-iGLuc中的Kpn I位点,构建重组质粒nsp4-iGLuc和S273R-i GLuc。分别将报告基因质粒(iGLuc、GLuc、Kpn I-i GLuc、nsp4-i GLuc和S273R-iGLuc)与不同剂量的相应蛋白酶真核表达质粒共转染HEK293T细胞,24 h后检测上清中荧光素酶GLuc的活性。结果显示,转染i GLuc、nsp4-iGLuc或S273R-iGLuc质粒的上清中荧光信号随着相应蛋白酶的剂量增加而升高,呈现剂量依赖性,而缺失蛋白酶切位点的对...     

中华蜜蜂与意大利蜜蜂中肠消化酶活性差异性探讨

本试验对中华蜜蜂(A.c.cerana Fab.)和意大利蜜蜂(A.m.ligustica Spinola)的成年工蜂、幼虫中肠内蛋白酶、淀粉酶、蔗糖酶的活性进行了比较.试验结果显示:中华蜜蜂、意大利蜜蜂幼虫之间三种酶活性差异均不显著;而中华蜜蜂、意大利蜜蜂的成蜂间蛋白酶活性差异显著(P＜0.05),意大利蜜蜂高于中华蜜蜂;淀粉酶和蔗糖酶的活性分别为差异显著(P＜0.05)、差异极显著(P＜0.01),中华蜜蜂高于意大利蜜蜂;同一蜂种内,成年蜂中肠液内的三种酶活性,均高于大、小幼虫,且差异极显著(P＜0.01).     

金属离子对饲料复合酶中蛋白酶活性的影响

近年来养殖业的规模扩大使得饲料工业得到迅猛发展,由此产生了对饲料的巨大需求。饲料中相当一部分的营养物质如粗蛋白质、果胶质、纤维素、半纤维素和爪质素很难被畜禽直接利川,这样不仅浪费饲料、提高成本,而且污染环境。酶制剂能利用潜在的饲料资源、破坏或去除常用饲料中的抗营养因子、能开发新的饲料资源、能调节理想氨基酸的平衡以降低日粮中的蛋白水平、消除氮、磷等所造成的环境污染问题（麻丽坤,2006）。因此,     

鱼粉新鲜度检测方法的探讨

鱼粉新鲜度检测方法的探讨福建省淡水水产研究所林建斌制造鱼粉的原料鲜度差或鱼粉在运输、贮藏过程中，发生蛋白质分解、脂肪氧化酸败等，会使鱼粉产品营养价值下降，影响饲养效果。因此在作鱼粉品质分析时，不仅要作常规营养测定和氨基酸分析，还要测定其新鲜度。凭感官...     

提高反刍动物尿素利用率和安全性的方法

随着养殖业和饲料工业的发展,对各种饲料资源的需求量越来越大,特别是蛋白质饲料会越来越紧缺,制约着畜牧业的发展。开发新的饲料资源成了当务之急。尿素含氮量高,且价格较其他蛋白质饲料低廉,只要加以合适的利用,将是一种值得研究推广的反刍动物蛋白替代饲料。近几十年来,用做     

丙酸钙的防霉性及其检测方法探讨

随饲料行业的发展,饲料市场的竞争日益激烈。对于一个大企业来说,就必须有好的品牌、好的品质作后盾。品控不仅表现在饲料的内在质量而且还表现在饲料的外观、色泽、粒度等。而在雨季,饲料的保质期的长短则摆在了第一位。1防霉的重要性据报道,饲料中的微生物有数百种,而这些微生物在适宜的温度及湿度条件下,将大量繁殖,从饲料中吸取营养,使饲料的营养成分被破坏,饲料的适口性降低,使动物不爱采食,影响动物的正常生长。肥育、繁殖。此外,霉变严重的饲料还可能引起动物中毒。故此,必须采取措施防止饲料变质。现在,应用化学防腐…     

饲料中尿素的检测方法探讨

饲料工业从小到大 ,从冷门行业发展成投资热门产业 ,竞争也越来越激烈 ,利润也越来越薄。一些不法之徒采取各种手段人为掺杂使假 ,坑害用户 ,给生产者、养殖户造成巨大的经济损失。现在主要往鱼粉、酵母粉、猪饲料中添加一定量的尿素 ,以提高粗蛋白质的含量 ,用一般的检测方法很难测出 ,用户很容易上当受骗。下面介绍一种在实践工作中有效的尿素检测方法 ,供有关部门及检测者参考。1　原理样品中尿素 ,在强酸条件下与二乙酰 -肟和硫氨脲共煮 ,生成红色复合物。其反应十分灵敏 ,特异性强。2　仪器72型或 72 1、72 2型分光光度计 ,沸水浴锅。3…     

饲料淀粉水平对淡水黑鲷生长和消化酶活性的影响

配制五组不同淀粉水平(26%、30%、34%、38%、42%)、等脂肪以及等蛋白质的饲料,将淡水黑鲷放置在网箱里面养殖两个月,放置网箱进行养殖之前的体重是(4.02±0.11)克,主要是研究分析饲养过程中饲料中适宜添加的淀粉量.结果表明,34%的淀粉量组相对蛋白质的增重效率都明显比其它各组要高,具有统计学意义,P<0.05,其饲料系数明显比其它各组要低,具有统计学意义,(P<0.05);各个研究小组之间的脂肪酶以及肠道胰蛋白酶的活性不存在明显的差异,不具有统计学意义,(P>0.05),38%和42%组肠道淀粉酶活性明显比26%和30%组的要高,(P<0.05);34%组肌肉以及全鱼的粗脂肪含量明显比26%、30%和42%组要高,(P<0.05),各组间的粗灰分、粗蛋白、肌肉水分以及全鱼含量不存在明显的差异,不具有统计学意义,(P>0.05);各组淡水黑鲷脏体比和肥满度无显著差异(P>0.05),42%组肝体比显著高于26%、30%和34%组(P<0.05);各组间成活率无显差异(P>0.05).综合实验结果分析,淡水黑鲷饲中淀粉适宜添加量为34%至38%.     

饲料霉菌总数的检测

我国现代饲料工业随着畜禽养殖业向专业化、集约化的转化而蓬勃兴起。在饲料资源得到广泛的开发与利用的同时,饲料安全性问题也越来越引起广泛的关注。其中微生物中的霉菌污染是比较重要的一个方面。霉菌的主要危害有：（1）降低饲料营养价值,霉菌能利用饲料（谷物）中的营养进行生长繁殖．可以造成10％左右的饲料损失,降低了饲料原有的营养价值．降低了营养成分和适口性;