李痘病毒适生区预测及模型选择

李痘病毒是危害核果类果树的重要病原物,具有传播迅速的特点,已被多个国家列为检疫性有害生物.本文尝试利用Dymex模型和Maxent模型预测李痘病毒在中国的潜在适生区,通过试验验证和对预测模型技术参数AUC的比较分析,认定利用Maxent模型预测的李痘病毒在中国的潜在适生区具有一定的科学性,对我国制定植物检疫法规具有一定的参考价值,同时也为今后其它植物病毒的定量风险分析工作提供有益的借鉴.     

李痘病毒单克隆抗体及TAS-ELISA试剂盒的研制

将纯化的李痘病毒(Plum pox virus,PPV)制剂免疫BALB/c小鼠,用SP2/0骨髓瘤细胞与经李痘病毒免疫的BALB/c小鼠的脾细胞融合,有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选出2株稳定分泌李痘病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株3F1,7A8。用间接ELISA方法对所获得的2个杂交瘤细胞株进行亚型鉴定分别为IgG1、IgG3。间接ELISA方法测定腹水效价分别为3F1:1.0×106,7A8:1.0×105。以多克隆抗体为包被抗体、单克隆抗体为检测抗体的TAS-ELISA试剂盒与李痘病毒的D株系、M株系的病毒分离物均有反应,与同属的马铃薯A病毒、莴苣花叶病毒、西瓜花叶病毒2号、马铃薯Y病毒坏死株系不发生交叉反应。     

从德国虞美人花卉中检测到李痘病毒

虞美人(ＰａｐａｖｅｒｒｂｏｅａｓＬ.)为罂粟科的常见栽培花卉植物。采集自世博会德国园的虞美人(ＰａｐａｖｅｒｒｂｏｅａｓＬ.)病株,表现明显的细花叶症状,具有典型的病毒病症状。因而我们采用电镜负染,生物接种实验,初步认为侵染德国虞美人引起花叶的病原为李痘病毒(Ｐｌ     

运用纳米磁珠技术结合RT-PCR方法检测李痘病毒

以李痘病毒为对象,研究探索采用RT-PCR方法结合纳米磁珠技术来提高植物病毒的检出率.结果表明该技术不仅能够检测到极低浓度的病毒,而且操作简单快速,非常适合口岸一线对病毒的检测要求.     

用二重PCR方法检测李痘病毒和李坏死环斑病毒

以我国两种重要的检疫性木本植物病毒李痘病毒和李坏死环斑病毒为对象,研究了二重PCR的检测方法,为我国口岸对这两种病毒的检疫提供了一条更为灵敏有效的新方法。     

半巢式-RT-Realtime PCR检测李痘病毒

李痘病毒(Plum pox virus,PPV)是我国重要的植物检疫性有害生物。本研究根据PPV中CP基因(coat protein gene)的保守序列,设计了3条PCR引物和1条TaqMan探针,建立了半巢式-RT-RealtimePCR检测PPV的方法。该方法有机地结合了巢式PCR和实时荧光PCR技术;3条引物形成的2套PCR体系相互验证,有效提高了结果的准确性;荧光探针有效提高了检测的灵敏度。实验结果表明,本方法准确、灵敏、简便、快速,检出低限可达37fg/μL植物总RNA。     

李痘病毒CP基因在大肠杆菌中的表达、纯化及其抗血清制备

用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其连接到原核表达载体pET29(a)上,得到pET29a-PPV重组载体,将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)后,IPTG诱导表达产物经过SDS-PAGE分析,结果表明PPV CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达.分别用亲和柱法和切胶法回收特异性表达蛋白,再免疫家兔,获得PPV特异性抗血清,经过酶联免疫吸附法测定其效价分别为3.2×104和4×103,且具有较高的特异性.     

李痘病毒及其2个主要流行株系的分子鉴定

通过分析李痘病毒及其2个不同株系核酸的保守序列,设计出3对引物,即1对通用引物和2对株系特异性引物对李痘病毒进行RT-PCR检测,结果显示通用引物可以同时检测该病毒的2个最主要的流行株系,即D株系和M株系,而D株系引物只能检测出D株系病毒,M株系只能检测出M株系病毒,为口岸对进境种子、苗木及果实等中的李痘病毒准确快速的检测提供了一个有效的方法。     

马铃薯A病毒及其风险分析

马铃薯A病毒是是马铃薯生产上危害较严重的病毒之一,新修订的《中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录》将其列为检疫性病毒病害。本文介绍了该病毒的分布、寄主范围、危害症状、诊断与检测、防治方法等,通过分析该病毒的侵染循环与传播途径,对其传入我国及在我国定殖和扩散的可能性进行风险分析,结果表明其传入的可能性较大,需要制定严格的检疫措施。     

亚洲小车蝗痘病毒田间杀虫效果

１９９４～１９９６年间在内蒙古利用亚洲小车蝗痘病毒防治草原蝗虫的初步试验结果：田间罩笼试验用５×１０７ＯＢＳ／ｍｌ的病毒包涵体悬浮液喷雾，２４～２６天校正虫口减退率为７２．９％～７３．３％；虫口减退进程曲线呈Ｓ型；处理１０天后虫口减退率即呈明显的上升趋势，处理后２０天虫口减退趋势逐步减缓，田间小面积试验用７．５×１０９、７．５×１０８和７．５×１０７ＯＢＳ／ｈｍ２分别与麦麸ｌ．５ｋｇ配成饵剂撒施，处理后３８天校正虫口减退率达５８．０％、４２．０％和３２．７％。