乳酸乳球菌同源整合载体的构建及鉴定

构建乳酸乳球菌同源整合载体,实现外源基因在乳酸菌中的同源重组和转入。PCR扩增红霉素抗性基因,连接到T载体中,构建载体pMDE;根据乳酸乳球菌Lactococcus lactis1.2472全基因组中usp基因序列设计引物,PCR扩增usp基因两端的同源重组臂LB和RB基因序列,PCR产物经回收后,克隆至pMDE载体中,获得同源重组载体pMDELR,电转化至Lactococcus lactis1.2472感受态细胞中,挑选阳性克隆,采用PCR和SDS-PAGE方法进行鉴定。结果表明:成功扩增同源重组臂LB和RB,红霉素抗性基因替换了乳球菌中的usp基因,整合到了乳球菌基因组中。     

同源四倍体的连锁遗传

同源四倍体的遗传比一般二倍体要复杂得多,本文介绍了同源四倍体不同基因型依染色体随机分离、依染色单体随机分离以及完全均衡分离的遗传方式。同时也讨论了“双减数值”以及利用它测定基因与着丝点之间重组值的方法。此外还讨论了测定基因与基因之间重组值的方法。这些对于同源四倍体的遗传育种研究都有重要参考价值。     

茄子同源四倍体相关研究进展

多倍体在植物界普遍存在,多倍体育种作为一种育种手段,有着独特的优越性,且已在多种作物上获得了成功。本文对茄子同源四倍体研究进展进行了综述,重点综述了茄子同源四倍体的诱变技术、植株特征、鉴定方法,总结了育种相关研究,最后提出同源四倍体育种中存在的问题,以期为同源四倍体更好地应用于茄子育种提供参考。     

诱导番茄同源四倍体的研究

人工诱导番茄四倍体,当作遗传传递的工具,有重要的育种用途。籍助染色体重组工程,诱导番茄多倍化,实现基因转移,不仅可获得座果多而品质好的番茄新品系。还可克服远缘杂交中的不亲和性、杂种不孕性等,从而培育新品种。试验结果表明:用中等剂量的秋水仙素处理减数分裂前的细胞,并结合涂抹幼苗生长点的方法,产生番茄四倍体的频率大,植株茎部粗壮,叶色深而宽厚,座果多而果实大。但需加强田间管理,才可在生产中应用。     

2 种甘蔗病害胁迫果蔗NBS 类抗病基因 同源序列的表达分析

在眼斑病和轮斑病病原菌侵染下,分析果蔗NBS类抗病基因同源序列在侵染初期的表达情况,为后续克隆关键抗病基因、研究抗病机理提供理论依据。已克隆的7条果蔗RGAs可视为来源不同的3个基因片段。将2种病原菌分别针刺接种到感病基因型黔糖3号和抗病基因型黔糖5号叶片后,3条果蔗RGAs在2种病害侵染初期均受到不同程度的上调,RGA12478对两种病害的响应最为迅速,RGA5的表达量最高,尤其在轮斑病菌的胁迫下,RGA5在胁迫后12 h的表达量大约分别是同时间点RGA12478和RGA36表达量的16倍和6倍。因此,RGA5可认为是果蔗在抵御轮斑病和眼斑病侵染初期发挥主要作用的抗病基因片段,后续应结合RACE技术获得基因全长,作为关键抗病候选基因研究其功能和在外源信号因子作用下的表达情况,全面了解该抗病基因的抗病机理。     

特异水稻同源多倍体的染色体行为

用从水稻双胚苗中筛选出来的同源三倍体和同源四倍体株系为材料,和正常的二倍体进行杂交,在后代得到了稳定二倍体株系,对母本多倍体的研究发现,在多倍体的花粉母细胞减数分裂中,除了大量的染色体落后等现象外,还可以形成12个二价体;在多倍体自交后代的根尖细胞中发现有嵌合体存在,为多倍体的进一步研究提供了细胞学依据.     

张良姜同源四倍体诱导

为解决张良姜繁殖系数低、容易感染病菌的问题,进一步加快张良姜育种进程,以河南省鲁山县张良镇种姜为材料,首先建立张良姜茎尖离体培养再生体系,进一步利用秋水仙碱对其体细胞染色体进行诱导加倍.结果表明,张良姜茎尖不定芽诱导的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,不定芽诱导率达83.33％.不...     

芝麻NBS - LRR类抗病基因同源序列的分离与分析

分离和分析芝麻抗、感茎点枯病材料的抗病基因同源序列(resistance gene analogs,RGAs),可以为芝麻抗茎点枯病相关基因的克隆奠定基础.根据已知植物抗病基因的NBS - LRR类保守结构域,合成了1对简并引物和2对特异引物,对6个抗茎点枯病芝麻品种中的抗病基因进行扩增,结果得到11条抗病基因同源序列...     

同源四倍体芦荟的诱导研究

取库拉索芦荟 ( Aloe vera L .)的茎段、叶片作外植体接种于 MS附加不同激素的培养基上 ,诱导出丛生芽、微块茎、愈伤组织 ,将丛生芽、微块茎、愈伤组织分别用浓度为 0 .0 1% ,0 .0 2 % ,0 .0 5 %的秋水仙素以不同的方法和时间处理 ,丛生芽和微块茎能较好地诱出变异体 ,其中以 0 .0 2 %的秋水仙素棉球覆盖处理丛生芽 4 8h诱变效果最好 .变异体叶片肥厚、根粗壮 .筛选稳定的变异体继代 ,经染色体数目观察 ,二倍体植株染色体数目为 2 n=2×x=14 ,x=7,不同变异体染色体数目不同 ,其中 80 %以上的变异体细胞染色体数 2 n=4×x=2 8,x=7,为同源四倍体 .四倍体气孔器明显大于二倍体 .四倍体试管苗在 MS BA4 mg/l NAA0 .2 mg/l可以大量增殖 ,并于 1/2 MS NAA0 .3mg/l IAA0 .3mg/l培养基上诱大量根 .试管苗移栽成活率达 90 %以上 .     

同源异型盒基因研究

同源异型盒基因家族（homeobox gene family）均含有一个高度保守的同源异型盒,用于编码转录调控因子（同源异型盒蛋白）,在细胞的增殖分化中起着精密的调节作用。同源异型盒基因的突变不仅会导致发育畸形,而且还与某些肿瘤的发生发展密切相关。就同源异型盒基因的结构特点及其在肿瘤发生中的作用进行了综述。     

奶牛泌乳性能与乳中尿素氮的相关性分析

选择90头中国荷斯坦奶牛作为试验对象,按照产奶量分为3组,研究奶牛泌乳性能与乳中尿素氮的关系。结果表明:高产奶牛乳中尿素氮含量高于中产奶牛与低产奶牛,但差异不显著,奶牛泌乳性能与乳中尿素氮存在弱正相关。     

论城市规划中的旧城更新与千城一面现象

综述了旧城更新的发展历程,阐述了旧城更新中千城一面现象及形成的原因,并分析了旧城更新、历史文化保护与千城一面的关系,以期为城市规划中旧城更新提供参考。     

奶山羊血浆催乳素(PRL)水平及其与产奶量的关系

对40只奶山羊分娩前后血浆PRL水平测定结果表明,头胎羊血浆PRL水平于分娩前一天开始升高(n=20),经产羊血浆PRL水平于分娩前2～3天开始升高(n=20)但均在分娩之日达到峰值。分娩后第3天血浆PRL水平大幅度降低。经产羊分娩前后血浆PRL水平显著高于头胎羊(P<0.05)。头胎羊分娩之日和泌乳的54～64d血浆PRL水平与分娩后的产奶量无显著相关性(P>0.0);经产羊分娩之日和泌乳的40～66d血浆PRL水平与分娩后的产奶量呈显著相关性(P<0.05)。     

豆乳酸豆乳及豆乳冰淇淋的研制

本课题研制了豆乳、乳酸发酵豆乳、豆乳冰淇淋,并探讨了较佳的脱腥方式、生产工艺、原料配方,基本获得成功。结果显示:产品感官评定良好,营养丰富,成本低廉,其生产工艺简单易行。这为大豆综合利用提供了新的可行途径。     

相同HMW-GS组成春小麦相关亚基形成和积累规律的研究

选用Glu-D1位点组成相同的春小麦品种,在相同的HMW-GS遗传背景下研究相关亚基形成和积累规律。结果表明:在籽粒灌浆过程中,HMW-GS的积累基本以龙麦26、龙辐麦12较高,龙辐98N2和龙-4081较低。而且前二者的优质亚基Glu-D15+10积累量高,所占比值也高。而龙辐98N2不但积累水平低,其所占比值也较低。龙-4081的Glu-D15+10在HMW-GS总量中所占比值较高,但其积累量最低。     

相同HMW-GS组分春小麦谷蛋白大聚合体研究

高分子量麦谷蛋白亚基（HMW-GS）组成与小麦品质密切相关。其中Glu-ID5＋10已作为重要,选择标记应用于优质育种。但实践表明,虽然有些品种（系）的HMW-GS评分很高,但品质类型并不理想。而且有的相差很大。因此,为了探讨在优质亚基（1Dx5＋1Dy10）存在条件下小麦品质差异形成的原因．选用了4个HMW-GS组成相同的强筋小麦,在相同的HMW-GS遗传背景下,结合不同的施肥水平,对麦谷蛋白大聚合体含量进行了分析。结果表明,在低肥和中肥条件下,龙辐970189的GMP含量表现最高．龙麦26次之。龙辐98N2或龙-4081为最低。在高肥条件下为：龙麦26〉龙辐970189〉龙-4081〉龙辐98N2。而且4个品种（系）的GMP／蛋白质比值也存在显著差异。综合研究表明,龙麦26和龙辐970189的GMP含量及其与蛋白质的比值更大。这与黑龙江省多年生产结果相一致,即龙麦26和龙辐970189的品质表现更为突出。     

酒精阳性乳牛血清皮质醇含量变化及其与代谢关系的探讨

本文通过酒精阳性乳牛与阴性乳牛血清中皮质醇，蛋白质及其代谢产物尿素氮，血糖和游离脂酸（ＦＦＡ）的测定，发现在阳性牛血中皮质醇含量的消涨规律的同时，出现阳性牛血糖升高，蛋白质降低，尿素氮升高，ＦＦＡ升高。结果表明，酒精阳性乳牛体内糖，脂质和蛋白质代谢发生了变化。这个变化与皮质醇等激素消涨有直接关系，为研究酒精阳性乳的发生机理提供了可靠的依据。     

奶牛产奶量与乳成分的多元回归分析

通过SAS 8.2软件分析了20头胎次相同、泌乳期相近荷斯坦泌乳牛产奶量与乳成分中乳蛋白质率、乳脂率、干物质、体细胞数和乳中尿素氮的多元回归分析。结果表明:从产奶量与乳成分的单项指标回归分析表明,产奶量与乳脂率、体细胞数和干物质含量呈显著性的负相关,而与乳蛋白率和乳中尿素氮差异不显著;从产奶量与乳成分的多元回归分析表明,乳蛋白率、乳脂率和干物质含量对产奶量的影响高于体细胞数和乳中尿素氮,同时乳蛋白率、乳脂率、体细胞数和乳中尿素氮与产奶量成反比。     

辽宁地区辣椒疫病菌鉴定及同源性分析

对采集到的辣椒疫病病原菌通过形态学观察和rDNA-ITS序列分析进行鉴定及同源性研究。利用真菌通用引物ITS4、ITS5对病菌基因组进行PCR扩增,将测序结果与已知序列进行比对,并利用Clustalx1.83及MEGA4.0软件进行聚类分析。试验结果表明:病菌菌落为白色,菌丝呈鹅毛绒状,无隔膜,孢子囊卵圆形或梨形,乳突单生;测得病菌ITS序列为805～877bp,rDNA-ITS序列同源性高,致病菌病原均为辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici Leonian)。     

Effect of Different Roughages on Milk Protein and Milk Fat Synthesis in Dairy Cows

The main purpose of this study was to determine the effect of a corn straw or mixed diet on milk production, milk composition and the expression of genes associated with lactation in mid-lactation Chinese Holstein cows. In this study, 10 healthy Chinese Holstein cows were randomly assigned to two groups and fed with different diets respectively, corn straw(CS) or mixed forage(MF) diet. CS group was fed roughage consisting of 53.8% corn straw only and the forge to concentrate(F : C) ratio [dry matter(DM)] was about 40: 60. MF group was fed roughage consisting of 3.7% Chinese wildrye and 23.4% alfalfa hay, the forge to concentrate(F : C) ratio(DM) was 70: 30. All the cows were fed 8 weeks and body weight, dry matter intake, body condition score, fat, protein, lactose, milk yield, total solid and somatic cell count(SCC) were recorded. Quantitative real-time PCR(q RT-PCR) was used to analyze cow mammary gland samples representing two different diets. The results suggested that different diet types had significant effects on milk yield, lactose, milk fat, milk protein, dry matter intake and somatic cell count in dairy cows, and cows fed MF diet improved milk production and lactation performance clearly(P0.05). In addition, m RNA expression of genes ACC, m TOR, STAT5, CSN2, PPARγ, FABP3 and PTEN in MF group was extremely significantly higher than that in CS group(P0.05). m RNA expression of AKT1, FAS, SCD and SREBP1 c in MF group was significantly higher than that in CS group(P0.01). In summary, the milk yield and composition in mixed forage group were significantly improved than those in corn straw group.