棉花体细胞胚萌发及植株再生的研究

对棉花体细胞胚萌发规律及其影响因素进行研究结果,棉花体细胞胚的葫发可分为3种类型:①先出根,后出芽;②先出茅,后出根;③根、芽平衡生长,且3种类型所占的比例不同.不同基础培养基、不同激素种类和浓度,以及不同蔗糖浓度对棉花体细胞胚的萌发和植株再生的影响不同.BT培养基有利于根的发育,MS培养基有利于芽的发育,而SH培养基则有利于根、芽的平衡生长.KT的使用显著降低了棉花体细胞胚的生根率、生芽率、葫发率及再生植株率.低浓度的NAA有利于胚的葫发和再生植株,其最佳浓度为0.1 mg/L;MS培养基中添加0.1mg/L NAA,可使芽的分化率提高83.3%,再生植株率提高50.0%;而高浓度的NAA又抑制了芽的发育.在棉花体细胞胚萌发中蔗糖的最佳使用量为20g/L.     

甘薯不同外植体体细胞胚的发生及植株再生

[目的]分别以甘薯品种徐薯22的叶片与茎尖作为外植体,研究利用不同外植体通过体细胞胚胎再生途径得到再生植株的方法。[方法]将徐薯22的叶片和茎尖分别置于MSB和MSD培养基中诱导胚性愈伤,再将胚性愈伤置于MS培养基培养,观察体细胞胚的发生情况,最后对不同外植体得到的植株再生频率进行比较。[结果]用叶片作为外植体得到的胚性愈伤平均诱导频率为95.69%,而茎尖的则为30.56%;不同外植体在体细胞胚发生途径中的形态特征有一定差异;用叶片作为外植体的植株再生频率为60.61%,用茎尖的则为22.00%,且采用不同外植体诱导得到的再生植株无形态变化。[结论]在该试验中,体细胞胚的发生及植株再生的最适外植体为甘薯品种徐薯22的叶片。     

石刁柏体细胞胚的培养与植株再生研究

石刁柏的体植体在附加激素的ＭＳ固体培养基上诱导愈伤组织，在愈伤组织的分类选择中获得的胚性愈伤组织，转移到含２，４－Ｄ １￣１．５ｍｇ／Ｌ的液体培养基中悬浮培养繁殖。在继代培养中，将颗粒大于１ｍｍ的愈伤组织，转移到无激素的ＭＳ培养基中诱导体细胞胚发生，提高培养基中琼脂的浓度，可减轻体细胞胚的玻璃化。     

枣幼胚体细胞胚的发生及植株再生

以小梨枣胚龄30~40d的幼胚为外植体,研究不同质量浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)、噻苯隆(TDZ)、吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)、脱落酸(ABA)及其组合对幼胚胚乳看护培养效果、体细胞胚发生、成熟及萌发的影响。结果表明,适宜小梨枣幼胚(30~40d)胚乳看护培养的培养基为MS+IBA0.2mg·L~(-1)+BA0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1),成胚率达62.07%;诱导胚性愈伤组织较适宜的培养基为MS+TDZ 0.6mg·L~(-1)+IBA1.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),诱导率为53.32%;在MS+6-BA 0.3mg·L~(-1)+NAA0.02mg·L~(-1)组合下有利于体细胞胚的发生,发生率可达71.43%;ABA可促进体胚的正常发育,质量浓度为0.5mg·L~(-1)时,体细胞胚结构完整,体胚成熟率为21.83%;将成熟的体胚转接到含有IBA 0.03mg·L~(-1)+GA30.03mg·L~(-1)的培养基中,体细胞胚萌发形成完整植株。     

甘薯不同外植体体细胞胚的发生及植株再生(英文)

[目的]分别以甘薯品种徐薯22的叶片与茎尖作为外植体,研究利用不同外植体通过体细胞胚胎再生途径得到再生植株的方法。[方法]将徐薯22的叶片和茎尖分别置于MSB和MSD培养基中诱导胚性愈伤,再将胚性愈伤置于MS培养基培养,观察体细胞胚的发生情况,最后对不同外植体得到的植株再生频率进行比较。[结果]用叶片作为外植体得到的胚性愈伤平均诱导频率为95.69%,而茎尖的则为30.56%;不同外植体在体细胞胚发生途径中的形态特征有一定差异;用叶片作为外植体的植株再生频率为60.61%,用茎尖的则为22.00%,且采用不同外植体诱导得到的再生植株无形态变化。[结论]在该试验中,体细胞胚的发生及植株再生的最适外植体为甘薯品种徐薯22的叶片。     

甜瓜品种‘GT-1’基于体细胞胚发生的植株再生体系研究

以甜瓜(Cucumis meloL.)品种‘GT-1’5 d苗龄的子叶为外植体,建立了基于体细胞胚发生的植株再生体系.结果表明:在MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L的培养基上,胚状体发生的频率可达81.7%.以葡萄糖为碳源,子叶块以间接方式发生胚状体;以乳糖为碳源,子叶块则以直接方式发生胚状体.剥离成熟体细胞胚置于MS培养基上可萌发生长出完整植株.     

无籽西瓜子叶体细胞胚发生及植株再生研究

‘黑蜜2号’无籽西瓜的种胚经3 d暗培养后,在(16L∶8D)h.d-1的光周期下培养获得无菌苗,以其子叶为外植体进行体细胞胚发生及植株再生的研究.结果表明:从无籽西瓜子叶诱导胚性愈伤组织和体细胞的最适培养基为MS 6-BA 3.0 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1,诱导的适宜条件为暗培养7 d,再在(16L∶8D)h.d-1的光周期下培养7 d;诱导丛生芽生根的最适培养基分别为1/2 MS IBA 0.3 mg.L-1和1/2 MS NAA 0.3 mg.L-1.     

花生胚小叶体细胞植株再生系统的建立

[目的]研究花生胚小叶体细胞植株再生体系,为利用胚小叶进行外源基因遗传转化提供试验依据。[方法]以花生品种四粒红和改良海花的胚小叶为外植体,2种外植体取材方式(预培养和直接取材)为培养背景,探讨了不同取材方式下各个培养要素(基因型、培养基等)与脱分化、再分化的关系,初步建立了花生胚小叶体细胞植株再生体系。[结果]在预培养取材条件下,预培养6d的四粒红外植体在2号培养基(MS+3mg/L6-BA+1mg/LNAA)上分化得最好,每愈伤组织再生芽2.34个,预培养5d的改良海花外植体在1号培养基(MS+5mg/L6-BA+3mg/LNAA)上分化最佳,每愈伤组织再生芽2.08个。直接取材条件下,改良海花在1号培养基上每愈伤组织出芽数为6个,而四粒红为3个。直接取材在诱导愈伤组织及器官分化方面都好于预培养取材。[结论]直接取材条件下,不同培养基对诱导愈伤组织及芽分化的作用差异较大,而基因型在诱导愈伤组织上的作用有显著差异,在出芽率上的作用差异并不显著。     

新疆陆地棉体细胞胚状体的发生和植株再生

以新疆陆地棉品种下胚轴为外植体，在含有４种激素（２，４－Ｄ、ＫＴ、ＮＡＡ、ＩＡＡ）不同组合的培养基上进行愈伤组织诱导，通过对体细胞胚胎发生的悬浮培养条件与植株再生各因子的比较研究，获得了陆地棉新陆中２号、新陆早１号两个优良栽培品种的体细胞胚胎的发生，体细胞胚经固体或液体培养，均可萌发，萌发的胚在成株培养基上形成了具有根、芽的完整再生植株。     

ABA对甘薯体细胞胚分化及再生的影响

以徐薯28、徐薯29、徐55-2、徐20-1等4个甘薯新品种(系)茎尖分生组织诱导的胚性愈伤组织为试验材料,研究脱落酸(ABA)在甘薯体细胞胚诱导和植株再生中的作用.结果表明,ABA对体细胞胚发生的调节作用与甘薯基因型和作用时间有关.胚性愈伤组织在体胚诱导培养基( MS+ 1.0 mg/mL ABA)上,10 d即可产生大量体细胞胚,其中徐薯29体胚诱导率最高,达90％以上,徐薯28次之,徐20-1最低;ABA作用时间延长至30 d时,所有品种(系)体细胞胚均褐变死亡,但将ABA处理10 d后得到的体胚进一步转移至MS基本培养基上,体胚可再生出完整植株,但再生率和植株长势明显不如未经ABA处理组.在MS固体基本培养基上,各品种(系)胚性愈伤组织形成体细胞胚时间延长,但延长培养时间至20d时,最终可获得与ABA诱导基本相同的结果,说明用ABA诱导胚性愈伤可以缩短形成体细胞胚所需时间,促进体胚的成熟.     

碳源对山核桃体细胞胚发生和植株再生的影响

以山核桃Carya cathayensis花后10～12周的幼胚为外植体,建立体胚发生及再生体系,同时分别对山核桃胚性愈合组织和体细胞胚诱导的碳源种类和质量浓度进行了比较分析。结果表明：接种在含葡萄糖培养基中的山核桃胚性愈合组织诱导率显著高于蔗糖、海藻糖和麦芽糖,诱导率达33.3%;在培养基中添加20 g.L-1葡萄糖,胚性愈合组织诱导率最高,达50.0%,显著高于其他处理。蔗糖为山核桃体细胞胚诱导的最佳碳源种类,体细胞胚诱导率显著高于葡萄糖、海藻糖和麦芽糖,诱导率达23.3%;在培养基中添加45 g.L-1蔗糖,体细胞胚诱导率最高,达30.1%,显著高于其他处理。体胚在WPM培养基（木本植物用培养基）附加5 g.L-1蔗糖的培养基上萌发率达20%,显著高于附加0,10,15,20,25,30 g.L-1蔗糖的体胚萌发率。     

木薯品种新选048体细胞胚发生及植株再生初步研究

[目的]初步探讨木薯品种新选048体细胞胚发生及植株再生的影响因素,为木薯遗传转化和品种改良奠定基础.[方法]以不同外植体(未完全张开叶、侧芽茎尖、幼嫩叶柄及完全张开叶的顶部、基部、叶缘、中部和全叶)为材料,对木薯体细胞胚发生和愈伤组织生长进行观察,并探讨6-BA(0.01、0.05、0.10、0.50、1.00 mg/L)对体细胞胚植株再生的影响.[结果]不同木薯外植体均能诱导愈伤组织,愈伤组织诱导率为48.30%~100.00%,但产生的愈伤组织生长状况表现不同.在MS+12.0 mg/L毒莠定(picloram)+20.0 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂培养基中,侧芽茎尖诱导获得的初生体细胞胚诱导率最高,达22.22%,平均产胚量为5.85个;而叶柄、未完全张开叶片或全张开叶片不同部位均不利于诱导体细胞胚,其诱导率极低,为0~5.00%.随着MS培养基中6-BA用量的增加,体细胞胚的成熟率不断增加(81.3%~100.0%),而在MS+0.01 mg/L 6-BA+0.02 mg/L NAA培养基中的植株再生率呈先升高后下降的变化趋势;当6-BA用量为0.10 mg/L时,植株再生率最高,为21.8%,且子叶生长正常.在1/3MS+0.02 mg/L NAA生根培养基中,再生植株均能诱导生根;在沙与表土混合基质中生根植株均能正常生长.[结论]新选048可以通过体细胞胚发生途径获得再生植株,但其发生率和再生率较低.     

大豆体细胞胚的成熟处理及植株再生

选用体细胞胚高频发生的黑龙江省主栽大豆品种 (东农 7819)的未成熟子叶 ,在含高浓度的生长素 MSB培养基上诱导体细胞胚的产生。体细胞胚分别置于 M3、M10、MC三种成熟培养基上或单纯置于灭菌过的培养皿进行干化处理。成熟处理为大豆体细胞胚萌发所必需。单纯干化处理不利于体细胞胚存活 ,而在高渗成熟培养基 MC或 M10成熟处理过的体细胞胚在 MSG(1/2 MSB+ GA)萌发培养基上的萌发率明显高于 M3。成熟处理后 ,形态正常体细胞胚的萌发率达90 % ,明显高于形态不正常胚 4 %的萌发率。对成熟处理过的体细胞胚的组织学研究表明 ,形态学上苗端未分化是形态不正常胚不能形成完整植株的原因之一。     

棉花优良新品种泗棉3号高频体细胞胚发生和植株再生的研究

选择我国棉花优良品种泗棉３号进行组织培养，获得了具有高频胚胎发生的愈伤组织、胚状体和小植株。在附加ＺＴ的ＭＳ培养基上，泗棉３号的下胚轴、子叶、根均诱导获得了愈伤组织，但其形成率和形成量不同，其中下胚较易诱导获得愈伤组织，根和子叶较差。ＺＴ对愈伤组织形成和生长影响较大，其在愈伤组织诱导中较适的使用浓度为３．０或５．０ｍｇ／Ｌ。     

龙牙忽木体细胞胚状体发生及植株再生

龙牙忽木叶柄培养诱导性胚性愈伤组织,进一步分化形成体细胞胚状体,并发育成完整植株。初代培养以MS＋BA＋NAA培养顶芽,当芽萌发后取幼嫩叶柄在含有2,4－D的MS培养基上进行愈伤组织诱导,将胚性愈伤组织继代培养,成熟的体细胞胚状体经分化形成完整植株。     

龙牙(木忽)木体细胞胚状体发生及植株再生

龙牙(木忽)木叶柄培养诱导胚性愈伤组织,进一步分化形成体细胞胚状体,并发育成完整植株。初代培养以MS BA NAA培养顶芽,当芽萌发后取幼嫩叶柄在含有2,4-D的MS培养基上进行愈伤组织诱导,将胚性愈伤组织继代培养,成熟的体细胞胚状体经分化形成完整植株。     

东北天南星体细胞胚胎发生及植株再生体系的优化

为建立东北天南星体细胞胚胎发生体系,以东北天南星幼叶为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导、体细胞胚胎发育及植株再生的培养基。结果表明,东北天南星叶片胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导最适宜的培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L,诱导率为98%;体细胞胚胎发育及植株再生最适宜的培养基为MS+6-BA 0.9 mg/L+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.1 mg/L,体细胞胚萌发率为99.5%,萌发的胚20 d后全部发育成完整植株。     

木薯初生体细胞胚发生及植株再生的影响因素

分别采用不同培养基（MS、1/2MS、GD和SH）、外植体（茎尖、幼嫩茎段、嫩叶和老叶）、0～100.00mg/LNAA和不同基因型木薯品种对木薯初生体细胞胚发生及植株再生的影响进行研究。结果表明,与其他3种培养基（1/2MS、GD、SH）相比,在MS培养基上,木薯品种GR911初生体细胞胚及植株再生的发生率最高,分别为36.0%和8.3株/外植体;以幼嫩茎段为外植体时,虽然GR911初生体细胞胚发生率及植株再生频率稍低于茎尖,但诱导效果较好且省时省工。随着MS培养基中NAA浓度的增加,GR911的初生体细胞胚发生率和植株再生频率呈先增加后降低趋势,以添加60.00mg/LNAA的诱导效果最好,可以直接诱导初生体细胞胚发生和芽的形成。此外,供试的9个木薯品种中有8个品种（GR911、SC5、SC6、SC7、SC8、SC9、南植188和SC205）可直接由茎段诱导初生体细胞胚发生和植株再生,但不同基因型木薯品种间的体细胞胚发生率和植株再生频率差异较大,以SC8最高,SC7最低。