宁夏回族自治区马铃薯镰刀菌根腐病病原菌的分离鉴定与致病性测定

为明确宁夏回族自治区马铃薯镰刀菌根腐病的病原菌种类,2015—2018年从宁夏回族自治区固原市、吴忠市、中卫市和石嘴山市4个市12个区县采集马铃薯病样,采用组织分离法对病样进行分离纯化,利用形态学鉴定方法和基于rDNA-ITS与EF-1α序列分析的分子鉴定方法对分离物进行鉴定,并按照柯赫氏法则对其致病性进行测定。结果显示,经组织分离法共获得真菌菌株347株,其中230株镰刀菌属真菌菌株引起马铃薯镰刀菌根腐病,这些镰刀菌分属于5个种,分别为尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum、茄病镰刀菌F. solani、锐顶镰刀菌F. acuminatum、木贼镰刀菌F. equiseti、接骨木镰刀菌F. sambucinum,这5种镰刀菌分别为67、29、50、39和45株,分离频率分别为29.13%、12.61%、21.73%、16.95%和19.56%;这5种镰刀菌的致病性有差异,其中接骨木镰刀菌和茄病镰刀菌的发病率分别为91.81%和99.99%,病情指数分别为69.56和82.23,均高于其它3种镰刀菌,是引起宁夏回族自治区马铃薯镰刀菌根腐病的优势病原菌。     

辣椒种生镰刀菌及其病理学意义的研究

 采用吸水纸检验法,对北京地区22份辣椒(Capsicum annuum)种子样品的分析结果是:木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)、串珠镰刀菌(F. moniliforme)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)、半裸镰刀菌(F. semitectum)和茄病镰刀菌(F. solani)是5种常见的辣椒种生镰刀菌,其平均带菌率分别为1.0%,2.6%,0.1%,0.8%和0.2%。经发芽试验观察,在自然带菌的情况下,木贼镰刀菌,串珠镰刀菌、尖孢镰刀菌、半裸镰刀菌和茄病镰刀菌能分别使种子发芽率降低98.6%,39.8%、62.1%、2.7%和52.1%。经土壤接种法进行致病性测定,除半裸镰刀菌对植株无明显致病性反应外,其它4种镰刀菌均能不同程度地引起植株枯萎和其它病理症状。     

辣椒种生镰刀菌及其病理学意义的研究

采用吸水纸检验法,对北京地区22份辣椒(Capsicum annuum)种子样品的分析结果是:木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)、串珠镰刀菌(F. moniliforme)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)、半裸镰刀菌(F. semitectum)和茄病镰刀菌(F. solani)是5种常见的辣椒种生镰刀菌,其平均带菌率分别为1.0%,2.6%,0.1%,0.8%和0.2%。经发芽试验观察,在自然带菌的情况下,木贼镰刀菌,串珠镰刀菌、尖孢镰刀菌、半裸镰刀菌和茄病镰刀菌能分别使种子发芽率降低98.6%,39.8%、62.1%、2.7%和52.1%。经土壤接种法进行致病性测定,除半裸镰刀菌对植株无明显致病性反应外,其它4种镰刀菌均能不同程度地引起植株枯萎和其它病理症状。     

山东省大豆根腐病病原菌及其生物学研究

 1988-1989年采集山东大豆根腐病标样553个,经分离接种证明,致病菌有茄病镰刀菌[Fusarium solani(Mart.)Sacc.]、尖孢镰刀菌(F.oxysporum Schl.)和木贼镰刀菌[F.equiseti(Corda)Sacc.]三种,以茄病镰刀菌的分离频率最高,致病力最强,为主要致病菌。并对其培养特性、形态特征、寄主范围和光照、温度及pH对生长的影响进行了研究,根据这些研究结果,将大豆根腐病主要致病菌定名为茄病镰刀菌大豆专化型[Fusarium solani(Mart.)Sacc.f.sp.glycines Li et Luo],本专化型过去没有报告。     

浙江省铁皮石斛根腐病病原真菌的鉴定

为明确铁皮石斛根腐病病原真菌,于其主产地浙江省金华市武义县收集铁皮石斛根腐病病株,采用平板分离方法对病原真菌进行分离,使用镰刀菌种特异性引物并结合ITS和TEF序列分析及形态学鉴定确定该镰刀菌的分类地位。结果表明,共分离纯获得真菌117株,其中有105株镰刀菌;经分子生物学分析及形态学鉴定结果显示,分离出的镰刀菌为层出镰刀菌Fusarium prolife‐mum、茄病镰刀菌F. solani、尖孢镰刀菌F. oxysporum和厚垣镰刀菌F. chlamydosporum四个种,其中层出镰刀菌在数量上具有优势地位,占总镰刀菌数的44.8%;茄病镰刀菌、尖孢镰刀菌、厚垣镰刀菌分别占总镰刀菌数的21.0%、15.2%和19.0%。在致病性测定中发现层出镰刀菌和茄病镰刀菌并不具备致病性,尖孢镰刀菌的致病性明显弱于厚垣镰刀菌,表明厚垣镰刀菌为浙江省金华市武义县铁皮石斛根腐病的主要致病菌。     

枸杞根腐病的发生及防治研究

宁夏枸杞根腐病普遍发生。作者对其病原进行了分离鉴定,有4种病原菌:尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum Schlecht)、腐皮镰刀菌[F.solani(Mart,)Sacc]、同色镰刀菌(F.concolor Reinking)和串珠镰刀菌(F.moniliforme Sheldon)。其中尖孢镰刀菌致病力最强。对上述病原的生长温度、pH值作了室内测定。此病病原菌能随病株、病残体和病果种子越冬。枸杞不同品种对此病抗性有明显差异。田间积水和根部损伤利于发病。45％代森铵药液灌根对此病有良好的防治效果;培土垄作和中耕时不伤根的防治效果达74.4％。     

云南灯盏花根腐病的2种新病原鉴定及防治药剂的室内筛选

引起云南省灯盏花根腐病的病原为茄病镰刀菌(Fusarium solani)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)和半裸镰刀菌(F.semitectum)3种真菌,茄病镰刀菌和尖孢镰刀菌为灯盏花根腐病的2种新病原,其中茄病镰刀菌为主要致病菌,其分离率为42.86%,茄病镰刀菌有伤接种发病率为70%,无伤接种发病率为56.7%。采用室内生长速率法测定了50%多菌灵可湿性粉剂、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂、64%恶霜·锰锌可湿性粉剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂、10亿活芽胞/g 枯草芽胞杆菌·荧光假单胞杆菌可湿性粉剂5种供试杀菌剂对灯盏花根腐病主要病原茄病镰刀菌的毒力。结果表明：5种供试药剂对茄病镰刀菌都有抑制作用。对茄病镰刀菌的有效中浓度（EC50）分别为0.000 4、0.050 7、0.053 5、0.081 3和8.624 0 mg/mL,其中50%多菌灵可湿性粉剂有效中浓度最低,相对抑制效果最好。5种药剂的毒力相关系数均在0.89以上,表明药剂质量浓度与抑制作用呈较高相关性。     

河北和内蒙古马铃薯干腐病菌种类鉴定

为明确河北和内蒙古马铃薯干腐病菌种类和优势种群,从两省采集300块具干腐病症状的样品,通过分离培养、形态鉴定、TEF-1α序列分析及致病性测定等,对马铃薯干腐病菌种类进行了系统研究.结果表明,两省马铃薯干腐病共存在4种病原菌,即接骨木镰刀菌Fusarium sambucinum、锐顶镰刀菌F.acuminatum、尖孢镰刀菌F.oxysporum和芬芳镰刀菌F.redolens,分别为149、80、3、3株.其中,河北省的优势种群为接骨木镰刀菌和锐顶镰刀菌,其发生频率分别为50％和48.68％;内蒙古的优势种群为接骨木镰刀菌,发生频率为87.95％.     

北京地区西洋参根腐病病原鉴定及其致病性

根腐病是北京地区栽培西洋参的主要病害之一,为了明确引起该类病害的病原菌,对北京怀柔区罹病西洋参参根进行了病原菌的分离及鉴定。结合形态学以及rDNA ITS区、转录延伸因子TEF 1α区的分子序列特征,对分离菌株的鉴定结果显示,分离频率较高的11个菌株分属于茄镰孢（Fusarium solani）、尖镰孢（F.oxysporum）、三线镰孢（F. tricinctum）、多育镰孢（F. proliferatum）、毁灭柱孢（Cylindrocarpon destructans）。通过柯赫氏法则验证,F. solani和F. oxysporum是引起北京地区栽培西洋参根腐病的主要病原菌;致病性测定结果发现F. solani不同菌株的致病性及致病力表现出明显差异。     

百合枯萎病发生规律及防治研究

百合枯萎病是甘肃省百合产区近年来新发生的一种重要病害。研究证明,百合枯萎病系由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum Schlecht.)、串珠镰刀菌(F.moniliform Sheldon)和茄病镰刀菌[F.solani(Mart.)Sacc.]侵染所致。病菌以菌丝体在种球内,或以菌丝体、厚垣袍子及菌核随病残体在土壤中越冬,成为翌年的主要初侵染源。病害的发生与连作、线虫、栽培技术及气候因素等密切相关。多菌灵对此病有显著防治效果。     

荸荠枯萎病——浙江省一种荸荠新病害

 1984—1986年间从浙江省11个县市采集荸荠枯萎标本共计240个,经分离、纯化,鉴定为以下4个镰刀菌种:Fusarium oxysporum,F.acuminatum,F.semitectum,F.moniliforme var.intermedium.     

麻黄根腐病病原物的分离及鉴定

 2001年从宁夏麻黄基地采集麻黄根腐病病株样品10份,按照柯赫氏法则对其进行了病原物的分离、纯化、致病性测定及菌株鉴定。结果表明,发病部位分离物中主要优势菌群为镰孢属(Fusarium spp.)。分离物经致病性测定和复合接种试验发现,微胶镰孢Fusarium subglutinans致病性最强,接种后发病株率达60%以上,尖孢镰孢F. oxysporum、半裸镰孢F. semitectum、茄镰孢蓝色变种F. solani var. coeruleum和茄镰孢F. solani致病性弱,接种发病率为10%~20%,它们和微胶镰孢混合接种后的发病率均高于单独接种的发病率,其中微胶镰孢与含尖孢镰孢或半裸镰孢的组合接种发病率高于不含这2种镰孢的组合。病株上获得的其它分离物均无致病性。证实麻黄根腐病是以微胶镰孢为主要病原,并由尖孢镰孢、半裸镰孢和其它几种镰孢复合侵染导致的一种病害。     

Fusarium spp. as a cause of crown and root rot of asparagus in Greece

Specimens of diseased asparagus (108) were selected from 17 fields in northern Greece. The asparagus crowns showed limited or widespread brown discoloration or extensive internal rot with fibrous tissues. A red-brown discoloration was also observed on the roots and, in a serious infection, most of the roots were totally destroyed and only their epidermis and ribbon-like central axis remained. 68 strains of Fusarium proliferatum , 25 of F. oxysporum , 19 of F. solani , and 1 strain of Rhizoctonia solani were isolated from crowns and roots. Single-spore isolates were subcultured from 50 strains of F. proliferatum , 21 of F. oxysporum and 7 of F. solani. These isolates were evaluated for pathogenicity by inoculating cultivar UC157F₁ of asparagus in an in vitro agar test-tube assay for 21 days at 29–32°C, with a light period of 16 h. Isolates of F. proliferatum and F. oxysporum were found to be the most pathogenic. The pathogenic F. oxysporum isolates were characterized as f.sp. asparagi.     

Diversity of pathogenic Fusarium populations associated with asparagus roots in decline soils in Spain and the UK

Asparagus decline is a disease associated with several species of Fusarium . In order to assess the relative significance of causative species, single-stranded conformational polymorphism (SSCP) analysis of the ITS2 (internal transcribed sequence) region of the ribosomal DNA was used to rapidly and objectively identify the fusarial populations associated with the roots of two intensively sampled asparagus crops, one in the UK and the other in Spain. Over 360 fusarial isolates were obtained from fields showing symptoms of asparagus decline, and most were easily differentiated by SSCP into four principal species, F. oxysporum f. sp. asparagi , F. proliferatum , F. redolens and F. solani . Fusarium oxysporum f. sp. asparagi (Foa) was most frequently isolated from the UK site (69%), whilst Foa and F. proliferatum were found in similar proportions overall (40 and 39%, respectively) from the Spanish site, although individual fields showed considerable intraregional variation. Other minor populations, such as F. culmorum , were also found. Most isolates were highly pathogenic to asparagus in vitro , although F. solani isolates comprised both pathogenic and nonpathogenic populations. Two populations of Foa were distinguished by a single ITS2 base transition, and the dominance of these two populations differed between Europe and the USA. Fusarium proliferatum was more abundant in Spain than in the UK. Phylogenetic analysis using EF1α sequences indicated that isolates of F. oxysporum pathogenic to asparagus are spread across a number of clades within the species complex, supporting the hypothesis that pathogenicity to asparagus in this species is a relatively unspecialized trait.     

百合鳞茎斑点病病原菌鉴定

 1991年在浙江湖州市和杭州市采集得百合(Lilium brownii F. E. Brown var. viridulum Baker)鳞茎有褐色斑点的标本104份,分离出纯菌株108个。鉴定为2个镰刀菌种:Fusarium solani(Mart.)Sacc. 和F. oxysporum Schlecht. F. solani出现频率84.3%,占优势.田间调查和接种试验证明F.solani是百合鳞茎褐色斑点病主要致病菌。在20种植物上接种试验结果表明:F.solani对百合有专化性,因此鉴定其病原菌为茄病镰孢一个新专化型:Fusarium solajni f. sp.lilii Wang.     

辽宁省辣椒土传病害镰刀菌鉴定及rDNA-ITS序列分析

［目的］ 对分离的辣椒镰刀菌形态、基因序列进行研究,以确定病原菌的种类及这些菌的同源性,为进一步开展该病害诊断和防治研究奠定基础。［方法］ 对采自辽宁省各地辣椒土传病害的16株病菌进行形态观察及rDNA-ITS序列分析。［结果］ 引起辽宁省辣椒土传病害的主要镰刀菌有尖镰孢、茄镰孢、锐顶镰孢和串珠镰孢等4种,根据菌株分生孢子形态和rDNA ITS序列同源性,将ZW13、LY3、PJLJ、HC5、CY2、CY5、TLLJ、LY5、LY1菌株聚类为尖镰孢;FSLJ2和FSLJ3菌株聚类为茄镰孢;ZW和ZW18菌株聚类为锐顶镰孢;KPLJ、LZLJ、FSLJ1菌株聚类为串珠镰孢。［结论］ 从分子系统树和菌株间的遗传距离看出镰刀菌同种同源性都很高,不同种之间同源性相对较低,种间遗传差异较大。     

载银无机抗菌制剂对大豆根腐病的防治效果

 测定了广泛用于工业和日用品的载银无机抗菌制剂Zeomic和AM₁对大豆根腐病重要病原菌Fusarium oxysporum、Fusarium solani和Rhizoctonia solani孢子萌发和菌落扩展的抑制作用。结果表明,Zeomic在浓度为500 mg/L时可以完全抑制F. oxysporum和F. solani的孢子萌发,但对F. oxysporum、F. solani和R. solani菌落扩展的抑制作用较弱,分别为7.4%、0.0%和3.7%。AM₁对病菌孢子萌发的抑制作用随浓度的升高而增强,在浓度为250 mg/L时对F. solani孢子萌发的抑制率为18.8%,到1 000 mg/L时可完全抑制。但AM₁在浓度为1 000 mg/L时对F. oxysporum的孢子萌发抑制率只有29.7%,表明不同菌类对AM₁的敏感性不同。同一浓度下的AM₁对F. oxysporum菌落扩展的抑制率大于对F. solani和R. solani菌落扩展的抑制作用,在500 mg/L时对病菌的抑制率分别为51.4%、14.6%和11.0%。温室内对大豆生长的调查结果表明,用种子重量0.05%和0.10%的AM₁拌种对出苗和生长有促进作用,Zeomic用量在0.05%时不影响出苗、株高和根系干物质积累,但当用量增加至0.10%时,则表现对出苗和干物质累积的抑制作用。田间试验结果表明,500m g/L的AM₁拌种对大豆根腐病防效为32.6%,与化学农药35%多克福包衣处理无显著差异,但比后者增产10.1%。由此说明,载银无机抗菌制剂具有用于农作物病害防治的潜力。     

安徽省玉米穗腐病主要致病镰孢菌的分离与鉴定

为明确安徽省玉米穗腐病主要致病镰孢菌的种类,采用单孢分离、形态学鉴定和分子生物学鉴定的方法,对2017年采集自安徽省6个玉米主产区——合肥市、蚌埠市、淮北市、阜阳市、亳州市和宿州市的玉米穗腐病病样进行了分离鉴定。在获得的455株镰孢菌中,拟轮枝镰孢菌、禾谷镰孢复合种、层出镰孢菌、尖孢镰孢菌和黄色镰孢菌的分离频率分别为59.13%、21.28%、13.68%、5.12%和0.79%。其中拟轮枝镰孢菌在各地的分布最广,属于安徽省的优势致病镰孢菌。     

大豆根腐病原镰孢菌种群多样性DGGE分析及其致病性研究

 应用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术以及主成分分析方法,结合植物病原菌传统分离、鉴定及致病力测定,检测位于黑龙江省海伦市大豆连作定位试验区根腐病原镰孢菌的种群构成及其致病力。采用真菌传统分离和鉴定方法共确定镰孢菌6个种,包括燕麦镰孢Fusarium avenaceum、木贼镰孢F. equiseti、禾谷镰孢F. graminearum、腐皮镰孢F. solani、尖镰孢F. oxysporum和拟轮枝镰孢F. verticillioides。其中,尖镰孢菌的分离频率最高,为56.7%。结合DGGE条带克隆测序及系统发育分析鉴定出8种镰孢菌,较传统方法增加了黄色镰孢F. culmorum和一个尖镰孢近似种。同时,DGGE图谱中尖镰孢所占百分比下降为37.4%。采用主成分分析方法将大豆生育指标相关的多种变量进行降维分析,得到第一主成分贡献值为91.2%。按照贡献值的正负结果,将30株镰孢菌分为致病和非致病类群。第二主成分贡献值为5.8%,根据其正负值可以矫正被错误估计的致病能力。综合所有研究结果,该定位试验区大豆根腐病主要病原镰孢菌为尖镰孢、禾谷镰孢和燕麦镰孢,且以尖镰孢菌为优势病原菌。