哺乳动物上皮细胞抗菌肽分离纯化技术研究进展

抗菌肽是在动植物体内发现的氨基酸数目少于100个的一类多肽,是哺乳动物防御体系的一个重要组成部分,具有分子质量小、对热稳定、水溶性好、广谱抗菌和作用机制独特等特点。文章主要综述了几种哺乳动物上皮细胞抗菌肽的分离纯化技术研究概况。     

多黏类芽孢杆菌抗菌肽的分离纯化及特性研究

试验旨在分离纯化多黏类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）BLCC1-0402代谢产物中的抗菌肽,为抗菌肽制备及其制品检测提供参考。采用离心、不同分子质量卷式膜超滤浓缩、Superdex peptide 10/300GL凝胶过滤层析对多黏类芽孢杆菌发酵上清液进行逐级分离纯化,对不同时段的收集液做抑菌试验,以大肠杆菌O78标准菌株为指示菌,采用打孔法进行抑菌活性检测,比较评价分步层析效果,以Tricine-SDS-PAGE进行分子质量检测。结果显示,通过5和3 ku卷式膜超滤获得的3~5 ku组分蛋白质样品抗菌活性较强;对于3~5 ku组分经凝胶过滤层析分离纯化,纯化后的抗菌肽A3抑菌活性最强,经Tricine-SDS-PAGE小分子多肽电泳检测,已达到电泳纯,分子质量为4 ku;抑菌活性检测结果显示,该抗菌肽A3对大肠杆菌O78标准菌株具有较强的抑菌作用。同时,抗菌肽A3表现出较好的耐热性,90~100 ℃处理15 min,抑菌活性可保持在96%左右;具有较好的酸碱稳定性,在pH 2.0~9.0下,抑菌活性保持在90%以上;经胃蛋白酶作用后抗菌肽A3抑菌活性降低20%,胰蛋白酶作用后抗菌肽A3抑菌活性降低18%,蛋白酶K对抗菌肽A3的抑菌活性几乎无影响。本研究结果表明,分离得到的抗菌肽A3是一种对大肠杆菌O78具有抑菌活性的新型抗菌肽,具有一定的开发潜力,可为下一步抗菌肽的结构分析、理化特性分析等深入研究提供一定参考依据。     

抗菌肽在犬病防治中的应用及展望

近年来,由于抗生素的广泛应用,耐药菌株和多重耐药菌株不断增加,已经成为临床医学中急需解决的重大难题。传统药物的严重匮乏,使开发新型抗菌药物迫在眉睫。抗菌肽具有天然抗菌作用,在动物先天免疫系统中起重要的作用。哺乳动物抗菌肽多在上皮细胞和白细胞表达,对细菌、真菌     

抗菌肽的研究现状及其在肉鸭生产中的应用

由于抗生素在畜禽生产中的大量使用，药物在畜禽体内严重残留及其耐药微生物的产生使动物性食品的安全性问题日益突出，这严重威胁着人民身体健康和整个养殖业的可持续发展，也给我国畜产品出口贸易带来了巨大的损失。抗菌肽又称抗微生物肽（antimicrobial peptide）或肽抗生素（peptide antibiotics），在动植物体内分布广泛，是天然免疫防御系统的一部分。抗菌肽不仅有广谱抗细菌能力，而且对真菌、病毒及癌细胞也有作用，具有广谱抗菌活性且快速杀菌，不受传统抗生素耐药突变株影响，不易产生耐药菌株，与传统抗生素协同作用，     

抗菌肽的研究现状及其在家禽生产中的应用前景

抗菌肽,又称抗微生物肽或肽抗生素,广泛分布于动植物体内,是天然免疫防御系统的一部分。抗菌肽不仅有广谱抗细菌能力,而且对真菌、病毒及癌细胞也有一定作用。由于其广谱抗菌活性且不受传统抗生素耐药突变株影响,不易产生耐药菌株,与传统抗生素协同作用,能中和内毒素和在动物体     

抗菌肽在动物生产中的研究现状、应用及展望

抗菌肽是具有免疫活性的小分子肽,自20世纪70年代Boma发现抗菌肽以来,已陆续分离纯化得到2,000多种抗菌肽产品。抗菌肽根据来源分为植物源抗菌肽、哺乳动物抗菌肽、昆虫抗菌肽和鱼类抗菌肽。由于天然抗菌肽的资源十分有限,分离提取自然抗菌肽的成本较高,抗菌肽的大规模应用必须依赖于人工合成技术,其中化学合成和基因工程方法最为     

奶牛子宫内膜组织抗菌肽分离纯化及其抗菌活性研究

目的：研发奶牛抗菌肽生物制剂,防治奶牛子宫内膜疾病。方法：采用酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖弥散法检测子宫内膜组织酸溶性提取物抗菌活性;应用琼脂糖电泳及水平电泳洗脱分离出相应的抗菌条带,HPLC进一步分离纯化,琼脂糖弥散法检测纯化物的抗菌活性,Tricine-SDS-PAGE电泳检测其分子量。结果：粗提物中有两种主要的抗菌成分,其对金黄色葡萄球菌26003、大肠杆菌BL-21、牛致病性大肠杆菌4605、绿脓杆菌10104具有抗菌活性。上层条带的主要色谱峰出现在43、45 min,其中45 min收集的样品有较强的抗菌活性,其相对分子质量约为14 k Da。下层条带主要色谱峰出现在5、35、43、45、46、47、50 min,其中35、43、45 min收集的样品有抗菌活性,其相对分子质量分别约为14-16、6和12 k Da。各个组分对大肠杆菌BL-21和金黄色葡萄球菌26003均具有抑菌活性。结论：从奶牛子宫内膜组织分离出了5个抗菌成分,从相对分子质量、抗菌活性等方面初步认定为抗菌多肽。     

Spinigerin α抗菌肽的分离纯化及其活性研究

Spinigerinα抗菌肽是一种源于白蚁的线性抗菌肽,包括25个氨基酸,不含半胱氨酸,呈α-螺旋结构。本研究采用凝胶加热-层析法,对Spinigerinα抗菌肽样液通过水浴加热至100℃保持20³0 min,除去不耐热的部分蛋白,经葡聚糖凝胶SephadexG-25脱盐层析分离得到Spinigerinα抗菌肽提纯物。根据SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱绘制分子质量标准曲线,计算Spinigerinα抗菌肽的分子质量。试验结果表明:SDS-PAGE电泳表现为单一条带,其分子质量为2.74 ku;Spinigerinα抗菌肽对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,最小抑菌浓度分别为0.5 mg/mL、0.3 mg/mL、0.2 mg/mL。     

抗菌肽的研究概况

抗菌肽(Antimicrobial Peptides)是具有抗菌活性短肽的总称,是生物体内存在的一种具有抗菌活性的小分子蛋白,是生物体免疫防御系统产生的一类对抗外源性病原体致病作用的防御性多肽活性物质,是生物体先天免疫的重要组成部分.抗菌肽已成为免疫学和分子生物学研究的热点,目前已发现抗菌肽或类似抗菌肽的小分子肽类广泛存在于生物界,包括细菌、动植物和人类.这种内源性的抗菌肽经诱导合成,在机体抵抗病原的入侵力面起着重要作用,被认为是缺乏特异性免疫功能生物的重要防御成分.至今已有880多种抗菌肽被鉴定或核酸序列被预告,包括多种无脊椎动物、植物和哺乳动物的许多组织和细胞,某一细胞因子和化学激活剂,选择性神经肽和肽激素,较大蛋白的碎片产生的抗菌肽[1].     

抗菌肽研究及其在家禽生产中的应用进展

抗菌肽是一类由生物细胞特定基因编码、经特定外界条件诱导产生的蛋白质与多肽的总称,是生物先天免疫系统的重要组成部分,其来源极其广泛,具有广谱的抗微生物活性以及其它重要的生物学功能,被用作饲料添加剂广泛应用于家禽生产。本文对抗菌肽的分类、特点、作用机理等方面进行了综述,分析了抗菌肽应用过程中存在的问题,并展望了其应用前景。     

抗菌肽研究现状及其在畜牧业中的应用前景

抗菌肽是生物防御系统产生的一类对抗外源性病原体的肽类物质,对细菌、部分真菌、病毒、原虫、肿瘤细胞都具有杀伤作用,具有广阔的应用前景。作者分析综述了抗菌肽的分类情况、作用机理、抗菌肽基因工程、面临的问题,以及抗菌肽在畜牧业中的应用前景。     

抗菌肽在畜禽养殖上的应用研究

<正>抗生素的发现曾是人类医学史上的一个里程碑。然而,随着抗生素的广泛使用,耐药菌株和多重耐药菌株不断增加,使得病原菌的抗药性大大提高,抗感染治疗已经陷入耐药危机之中,传统抗生素的使用正面临着严峻的挑战。研究和应用无毒、无公害、无耐药的新型抗菌制剂替代抗生素已成发展趋势。抗菌肽以其独特的抗菌方式和广谱抗性等优点,已被广泛应用于药物开发、临床治疗、食品防腐、药物饲料添加剂或兽药、化妆品等领域,并显示出良好的应用效果与发展前景。     

禽源大肠杆菌和沙门氏菌耐药性研究

试验主要对山东、河南及安徽共五个养禽场分离的大肠杆菌和沙门氏菌进行耐药性研究,研究结果表明:所有分离菌株对大多数药的耐药率都非常高,并且多重耐药情况严重,大肠杆菌和沙门氏菌对磺胺类药     

抗菌肽的作用机理及在家禽生产中的应用前景

抗菌肽又称抗微生物肽或肽抗生素,广泛分布于动植物体内,不仅有广谱抗细菌能力,而且对真菌、病毒及癌细胞也有一定作用。由于其广谱抗菌活性且不受传统抗生素耐药突变株影响,不易产生耐药菌株,与传统抗生素协同作用,能中和内毒素和在动物体内起有效作用等特性,在发展绿色、安全、环保畜牧业中,将会发挥更加重要的作用。     

中国林蛙皮肤抗菌肽的分离纯化及部分特性研究

从长白山林蛙养殖场购买林蛙 ,用冷水清洗林蛙 ,断头后迅速剥离皮肤 ,清洗血液后剪碎 ,经 80 %的甲醇抽提 3次 ;再经组织捣碎机捣碎 ,用 80 %的甲醇抽提 2次 ;再经葡聚糖凝胶过滤。实验结果表明 ,林蛙皮肤中小分子活性多肽经葡聚糖凝胶过滤得到纯度较高的抗菌活性肽 ;林蛙皮肤中小分子活性多肽对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌都具有一定的抗菌作用 ;经醋酸纤维薄膜电泳 ,表明其具有较强的阳离子特征 ;SDS - -PAGE电泳分析表明为单一区带 ,林蛙皮肤中小分子抗菌活性多肽的相对分子量为 6 .2 8ku。     

液相色谱技术在饲料中抗菌肽分离纯化和含量测定的应用研究

文章旨在分析纯化饲料添加剂中的抗菌肽,为抗菌肽的含量测定及样品检测提供了参考依据。本研究采用过滤膜超滤浓缩,采用固相萃取柱进行洗脱和分离,用过滤膜进行过滤,用高效液相色谱仪进行分离纯化,优化色谱条件,并对不同类型的饲料中抗菌肽的含量进行测定,流动相为甲醇,实验将流速设置为0.75 mL/min,甲醇的体积比为10%,柱温度为31℃,检测波长为526 nm,进样量为10 ul,而后用高效液相色谱仪测定饲料中抗菌肽含量。结果显示：该方法分离纯化获得的抗菌肽蛋白活性较强。该方法检测饲料中抗菌肽的保留时间为7.25 min,呈现单峰,峰值较好,在误差范围呈现线性关系,方法操作简单、快速、安全环保、灵敏度高,应用范围广泛。液体动物饲料添加剂的抗菌肽测定值为2.45 mg/kg,水产动物饲料和家禽饲动物料的抗菌肽测定值分别为3.14 mg/kg和2.56 mg/kg。因此,本实验建立了高效液相测定法有利于饲料中抗菌肽的纯化和饲料中抗菌肽的测定。[关键词]抗菌肽|高效液相色谱|分离纯化|含量测定     

国外兽用抗菌药物减量化经济学研究现状

兽用抗菌药物使用不当会对养殖户、消费者和畜禽养殖行业产生不良影响。研究国外兽用抗菌药物减量化进展,有利于加快我国兽用抗菌药物减量化进程,同时对兽用抗菌药物使用标准的制定、社会公众身体健康有着重要意义。国外研究者主要从以下几个方面对兽用抗菌药物减量化进行探讨,即兽用抗菌药物使用量的测度依据、影响兽用抗菌药物减量化的因素、兽用抗菌药物减量化对动物生产力的影响、对消费市场的影响及养殖场的使用意愿情况。针对以上研究进展,得出兽用抗菌药物减量化研究内容涵盖多学科、兽用抗菌药物替代措施研究任务艰巨和国内兽用抗菌药物减量化研究有较大提升空间。     

动物抗菌肽新型饲料添加剂的研究与开发

<正>什么是抗菌肽?抗菌肽是一类很难导致微生物耐药性的新型抗感染药物多肽,目前世界上已知的抗菌肽共有1200多种。抗菌肽在医药、食品和农业都有广泛应用。抗菌肽用于饲料添加剂既可以增强动物抵抗力,促进动物生长,同时还减少药物残留,是一种绿色饲料添加剂。     

料饲中允许使用的抗菌肽类添加剂

根据《饲料添加剂品种目录（2010）》,允许使用的肽类添加剂有12种,包括淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶等酶制剂,它们对特定的底物起作用,提高底物的利用率,为畜禽提供更多的能量和营养。另外,在《监测期内的新饲料和新饲料添加剂品种目录》中允许使用的肽类添加剂只有溶菌酶一种,在《饲料药物添加剂使用规范》中允许使用的肽类添加剂有三种,即杆菌肽锌、那西肽,以及亚甲基水杨酸杆菌肽。     

如何使用抗菌药物

随着抗菌药的广泛使用,使许多疾病得已控制和治愈,但也给临床用药带来了许多问题,如过敏反应、耐药菌株的大量出现等,为了提高疗效,减少不良反应,应合理使用抗菌药。