高效液相色谱测定黄瓜瓜条中赤霉素和脱落酸含量

本试验以秋露地栽培鲁黄瓜9号为试材,研究如何提取、纯化和利用高效液相色谱(HPLC)分析测定商品成熟期瓜条中赤霉素(GA3)和脱落酸(ABA)的含量。试材用液氮研磨以100%冷乙腈浸提,浸提液抽滤,氯仿去除色素,PVP去除酚类杂质,乙酸乙酯提取激素,最后过PT-C18预处理柱。以甲醇—水(含5%冰乙酸)为流动相,在μ-BandpakC18柱上进行分离,紫外检测器在252nm波长下检测、鉴定,并测得回收率分别为GA3:80 12%;ABA:81 33%。     

不同处理对观赏南瓜种子发芽质量的影响

采用温度、赤霉素 (GA3)和双氧水 (H2 O2 )处理观赏南瓜种子的发芽试验结果表明 :观赏南瓜种子在35℃条件下发芽势最强 ,发芽指数最高 ;GA3和 H2 O2 溶液浸种处理均能够提高观赏南瓜种子的发芽势 ,其中以2 0 0 m g/ L 的 GA3溶液浸种处理的发芽势和发芽指数最高 ;以 10 m g/ L 的 H2 O2 溶液浸种处理的发芽势和发芽指数最高 ,温度和 GA3、H2 O2 浸种的各处理对发芽率都没有明显的影响。     

Study on Variation of Endogenous Hormonesat the Germinating Stage of Tea Spring Shoot

An HPLC method was used to analyze the contents and variation of IAA, GA3, ABA and ZT at five stages around the tea shoot germinating in spring. The contents of GA3 and ABA had a top value during the winter and decreased with the growth of tea shoots, while the contents of IAA and ZT had a low value during the winter and increased quickly at the beginning of shoot growth, but soon afterwards increased slowly or decreesed a little. The ratio of hormones was closely related to the growth of tea plant. The study indicated that the ratlos of GA3 to ABA and IAA to ABA were at low values during the winter and went up with the shoot germinating. When the activity of roots was weak, the ratio of ZT to IAA had a top value, but went down gradually with lmmriant activity of roots. The ratio d GA3 to ZT had a certain relativity with the shoot germinating, which was at a top value during the winter but went down suddenly at the begin-ning of shoot gerrminating.     

设施杏扣棚升温后枝条内源激素的变化

以6￣7年生的设施杏(金太阳和凯特)为试材,研究了从扣棚升温至开花前枝条内源激素含量的变化。结果表明:ABA和ZR呈“升-降-升”的趋势;GA3变化较为复杂,IAA前期含量低且变化缓慢,后期含量急剧升高;四种内源激素中,ABA含量最高,IAA最少;ZR/ABA在升温后16d开始升高,而(IAA GA3 ZR)/ABA的升高,金太阳比凯特提前5d。     

GA3与ABA对黑穗醋栗二次萌芽总酚含量及代谢酶活性的影响

[目的]了解黑穗醋栗发生二次萌芽过程中总酚含量及其合成代谢关键酶活性的变化规律,为揭示黑穗醋栗发生二次萌芽的内在机理及其人工调控提供科学依据.[方法]以易发生二次萌芽的黑穗醋栗品种亚德和不易发生二次萌芽的黑穗醋栗品种布劳德为试材,使用30.0 mg/L赤霉素(GA3)和50.0 mg/L脱落酸(ABA)进行叶面喷施处理,以喷清水为对照(CK1和CK2),利用Folin-酚比色法和酶联免疫分析试剂盒测定各处理黑穗醋栗品种二次萌芽的总酚含量及关键酶活性.[结果]在黑穗醋栗品种亚德和布劳德发生二次萌芽过程中,总酚含量及苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮异构酶(CHI)和肉桂酸-4-羟化酶(C4H)活性降低,多酚氧化酶(PPO)活性升高;经30.0 mg/L GA3处理后亚德和布劳德二次萌芽的总酚含量明显低于CK1和CK2,PAL和CHI活性明显低于CK1和CK2,PPO活性明显高于CK1和CK2,C4H活性总体上低于CK1和CK2;经50.0 mg/L ABA处理后亚德二次萌芽的总酚含量显著高于GA3处理和CK1(P<0.05,下同),经50.0 mg/L ABA处理亚德各测定日期(除8月17日外)的总酚含量均显著高于GA3处理,且明显高于CK2;50.0 mg/L ABA处理的亚德和布劳德PAL活性明显高于GA3处理及CK1和CK2,PPO活性除8月17日外均显著低于GA3处理,且明显低于CK1和CK2,CHI和C4H活性总体上明显高于GA3处理及CK1和CK2.[结论]叶面喷施50.0 mg/L ABA可提高黑穗醋栗品种亚德和布劳德二次萌芽的代谢关键酶PAL、CHI和C4H活性,降低PPO活性,促进总酚合成并抑制其氧化分解,从而抑制黑穗醋栗品种亚德和布劳德发生二次萌芽.     

不同温度和赤霉素浓度对百脉根种子萌发及植株萌蘖生长的影响

[目的]研究不同温度和赤霉素(GA3)浓度对百脉根种子萌发及其植株萌蘖生长的影响,为百脉根丰产栽培和综合利用提供理论依据.[方法]分别在10、15、20和25℃下开展百脉根种子萌发试验,并在20℃恒温条件下开展100.0、200.0、300.0、400.0和500.0 mg/L GA3溶液浸种萌发试验,对比分析百脉根种子的发芽率、发芽势、发芽指数及其植株萌蘖和根系生长情况.[结果]10℃处理的百脉根种子发芽率(64.44%)最高,20℃处理的发芽势(40.00%)和发芽指数(7.17)最高;25℃处理的发芽率最低(42.22%),与10℃处理差异显著(P<0.05,下同);10℃处理下发芽势(10.00%)和发芽指数(0.50)最低,与15、20和25℃处理的差异显著.在20℃恒温条件下,100.0 mg/L GA3处理的百脉根种子发芽率(52.22%)、发芽势(45.56%)和发芽指数(7.41)均显著高于300.0、400.0和500.0 mg/L GA3处理.以秋季的平均净萌蘖株数最多,为4.73株,其他季度平均净萌蘖株数分别为2.23株(春季)、3.40株(夏季)和2.53株(冬季).[结论]百脉根种子以100.0 mg/L GA3浸种24 h后在20℃恒温条件下的萌发效果最佳,秋季萌蘖生长株数最多,可在百脉根生产中推广应用.     

HPLC法测定不同储藏条件及时期雪莲果块根中绿原酸含量

采用超声波提取、高效液相色谱法测定两种储藏条件下随储藏时间延长雪莲果块根中绿原酸含量的动态变化,并对块根中绿原酸提取方法进行优化,同时考察HPLC方法的精密度和准确度。结果表明,提取溶剂采用φ=50%甲醇、溶剂量50倍、提取时间40min为最佳条件。方法精密度和准确度表明,用乙腈(φ=0.1%)磷酸水溶液V(乙腈)∶V(磷酸)=15∶85洗脱、流速1.0mL·min-1、柱温30℃、检测波长327nm的色谱条件可靠。用此方法测定绿原酸含量结果表明,两种储藏条件下随储藏时间延长,绿原酸含量均呈先缓慢下降后加剧减少的变化趋势。建议以绿原酸为利用目标的应选用短期储存,即以低温储藏85d以内为佳。     

没食子儿茶素没食子酸酯制备新工艺的研究

为得到富含没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)茶多酚,以分离EGCG单体,在传统的有机溶剂提取茶多酚的基础上,采用等体积的柠檬酸水溶液酸洗,使所获茶多酚产品中EGCG的含量由40%～50%上升到80%左右.再以该茶多酚为原料,应用HSCCC分离纯化儿茶素单体,所得EGCG产品的纯度达到98%以上.笔者还分别以常规有机溶剂提取方法和新方法所得茶多酚为原料,进行HSCCC分离,结果表明,在相同进样量的情况下,以新方法提取所得的茶多酚为原料在同等条件下进行HSCCC分离, EGCG的得率提高了169%.     

烟草与TMV不同互作体系中的活性氧及抗氧化酶系活性比较

3种不同抗性烟草与TMV互作体系中的活性氧(AO)、脂质过氧化、抗氧化酶系活性的测定结果表明:在Xanthi-NN/TMV的非亲和性互作体系中,超氧阴离子(O2-)的释放量除与Xanthi-nn/TMV和K346/TMV的亲和性互作体系一样在互作后的6 h形成一个峰值外,在互作后的24 h又出现了第二个特异性峰值,在互作的中、后期,Xanthi-NN的叶片内O2(-)/(*)含量显著高于后者两个品种;在互作的早期,H2O2的产生速率尽管明显比O2(-)/(*)的低,但也是以较快的速度上升,Xanthi-NN的非亲和性互作体系中H2O2含量明显高于其它两个互作体系;互作早期的非亲和性体系中SOD、POD活性均低于亲和性体系,但随着互作的进行,对比关系发生逆转;CAT活性变化趋势刚好与SOD、POD的相反;互作前期的Xanthi-NN叶片内LOX活性值和上升速率都低于另外两个品种,但中、后期的情形正好相反;非亲和性互作中的MDA含量一直低于亲和性互作.3种互作体系的非接种叶内AO和有关抗氧化酶系活性的变化远不如各自接种叶显著,且互作前期的活性水平也明显低于接种叶,上、下部叶片的变化趋势基本一致,这也部分解释了抗病信号转导的时空动态;近等基因系Xanthi-NN和Xanthi-nn中的AO和有关抗氧化酶系活性变化差异较大,而后者更接近于感病品种K346,说明控制抗病性的内在本质是"N"基因.     

糙米的营养成分及其在发芽过程中的变化

研究了糙米中淀粉、还原糖、水溶性蛋白质和游离氨基酸等营养成分含量及其用Ca^2 、GA3和去离子水处理后发芽过程中的变化。结果表明，糙米中除淀粉和还原糖含量低于白米外，水溶性蛋白质、游离氨基酸、粗脂肪、粗纤维和灰分等均高于白米；发芽糙米中淀粉含量下降了43．1％～53．7％，还原糖上升40．4～61．9倍，水溶性蛋白质和游离氨基酸含量分别上升5．7％～17．7％和92．1％～151．2％。上述变化幅度以GA3处理的发芽糙米为最大，其次是Ca^2 处理，而去离子水处理的变化最小。     

Monoclonal antibody-based serological detection of potato virus M in potato plants and tubers

Potato virus M(PVM) is one of the common and economically important potato viruses in potato-growing regions worldwide. To investigate and control this viral disease, efficient and specific detection techniques are needed. In this study, PVM virions were purified from infected potato plants and used as the immunogen to produce hybridomas secreting PVM-specific monoclonal antibodies(MAbs). Four highly specific and sensitive murine MAbs, i.e., 1 E1, 2 A5, 8 A1 and 17 G8 were prepared through a conventional hybridoma technology. Using these four MAbs, we have developed an antigen-coated plate(ACP)-ELISA, a dot-ELISA and a Tissue print-ELISA for detecting PVM infection in potato plants and tubers. PVM could be detected in infected potato plant tissue crude extracts diluted at 1:10 240(w/v, g mL~(–1)) by the dot-ELISA or at 1:163 840(w/v, g mL~(–1)) by the ACP-ELISA. The Tissue print-ELISA is the quickest and easiest assay among the three established serological assays and is more suitable for onsite large-scale sample detection. Detection results of the field-collected samples showed that PVM is currently widespread in the Yunnan and the Heilongjiang provinces in China. The field sample test results of the developed serological assays were supported by the results from RT-PCR and DNA sequencing. We consider that the newly established ACP-ELISA, dot-ELISA and Tissue print-ELISA can benefit PVM detection in potato plant and tuber samples and field epidemiological studies of PVM. These assays can also facilitate the production of virus-free seed potatoes and breeding for PVM-resistant potato cultivars, leading to the successful prevention of this potato viral disease.     

冬种免耕马铃薯栽培小气候变化及最佳播种期气象依据探讨试验

为探讨冬种马铃薯最佳播种期,进行冬种免耕马铃薯栽培小气候变化及最佳播种期试验,结果表明：冬季马铃薯栽培,在允许的时间范围内,以11月10日前后播种最佳,稻草覆盖栽培以其卓越的保温保湿以及平衡气温的功能产量表现最为突出。     

腐烂茎线虫侵染马铃薯块茎与甘薯块茎危害症状比较

利用室内打孔法接种腐烂茎线虫至马铃薯与甘薯块茎上观察比较发病症状及线虫定植情况。研究显示:马铃薯受线虫危害后,周皮变褐变黑,皱裂,切开病组织内部症状腐烂变色,同时由于马铃薯内部含水量大,有部分坏死组织发软,病变组织部位的表皮容易脱落;而甘薯受线虫危害后薯块失水重量减轻,组织内部变褐呈褐白相间干腐状,周皮部位呈现一圈坏死组织,与马铃薯周皮不尽相同;镜检马铃薯坏死组织线虫发生量不大,原因可能与坏死组织营养严重流失,生存环境恶化,不利于线虫生存有关;镜检马铃薯表皮层组织显示,有大量成虫和卵聚集在表皮层下的薄皮细胞里以及皮孔处,这对解释腐烂茎线虫对环境的适生性有一定意义;而在甘薯中线虫主要集中发生在髓部的干腐部位,发生量较大。     

桔梗种子内源发芽抑制物质研究

研究桔梗(Platycodon grandiflorum)种子不同浸泡时间、不同浓度的浸出液对白菜(Brassica pekinensis)、莴苣(Lactuca sativa)、小麦(Triticum aestivum)种子萌发和幼苗生长的影响.结果表明,桔梗种子中存在着活性较高的内源抑制种子发芽物质,其浸出率在24 h左右达到最大值,抑制作用随着浓度增加而逐渐增强.     

热胁迫恢复阶段辣椒种子发芽能力与幼苗期耐热性的相关性

【目的】了解热胁迫恢复阶段辣椒种子的发芽能力及其与幼苗期耐热性的相关关系,为辣椒种质资源耐热性的快速准确鉴定提供依据。【方法】14个不同辣椒品系(R1~R11、CM334、B35和B6)的种子在40℃热胁迫条件下发芽处理14d后,将未发芽种子移至25℃进行恢复处理,分别计算热胁迫处理阶段和恢复阶段的相对发芽率、相对发芽势和相对发芽指数,并分析其与幼苗期耐热指数的相关性。【结果】热胁迫处理阶段,参试辣椒品系R2、R3、R8、CM334、B6和B35的种子没有发芽,而R9和R10种子的综合发芽能力(2.472 4和2.0835)显著高于其他品系;热胁迫恢复阶段,R2、R6和B35的种子表现出较强的发芽能力(综合发芽能力分别为2.290 1,1.874 4和1.575 2),而R9、R10、B6、R8和R11种子的发芽能力(综合发芽能力分别为0.487 9,0.271 0,0.1914,0.1839和0.0235)相对较差。辣椒热胁迫处理阶段与恢复阶段的种子发芽能力之间无相关关系,并且前者与幼苗期耐热性之间也无相关关系,而后者则与幼苗期耐热性存在显著正相关。建立了根据辣椒热胁迫恢复阶段种子发芽能力预测幼苗期耐热性的最优回归方程,并将14个辣椒品系聚类为耐热、耐热性中等和热敏3个类群,其中耐热类群包括R9、R2、R10和R6等4个品系,耐热性中等类群包括R1、B35、R7、R5、R3、R4和CM334等7个品系,热敏类群包括R8、R11和B6等3个品系。【结论】热胁迫恢复阶段的种子发芽能力可作为辣椒发芽期耐热性鉴定的指标之一,并可用来预测幼苗期的耐热性。     

转PPase基因对马铃薯块茎休眠特性的影响

利用农杆菌介导法将组成型表达启动子CaMV 35S驱动的正义和反义无机焦磷酸酶(PPase)基因导入到马铃薯栽培品种‘费乌瑞它’的试管薯中,通过PCR检测证明PPase基因已转入马铃薯基因组中.对转基因株系及对照植株块茎的休眠特性的测定表明,分别在4℃低温和25℃室温贮藏条件下的转反义基因马铃薯株系块茎的休眠期较对照株系均延长了2~3周;转正义基因马铃薯株系块茎的休眠期较对照株系均提前了2~3周;且在4℃低温贮藏条件下的转基因马铃薯株系及对照块茎的休眠期比25℃条件贮藏的长2~3周,为进一步利用PPase基因改良马铃薯块茎休眠特性提供科学依据.     

小佛肚竹出笋及竹笋-幼竹高生长规律

小佛肚竹Bambusa ventricosa多用于盆景制作和园林绿化。研究结果表明:小佛肚竹出笋能力强,无大小年之分,笋期7~10月,达116 d,8月上旬至9月上旬的盛期出笋数占总出笋数的70%以上,而末期历时占笋期的44.8%;竹笋-幼竹高生长时序变化呈“慢—快—慢”的节律,以历时20 d,平均生长量2.60 cm.d-1的高生长盛期最快,阶段高生长量占新竹高度的65.4%;各出笋期的竹笋-幼竹高生长期无显著差异,平均高生长期为62 d,明显少于其他中大型丛生竹种。图1表2参11     

不同浓度葡萄糖打破马铃薯块茎休眠的效果

通过浸泡和打孔注入处理,研究0.5%、1.0%、1.5%、2.5%等4个不同浓度葡萄糖溶液打破大西洋马铃薯块茎休眠的效果.结果表明:不同浓度葡萄糖和2种处理方法均能打破马铃薯块茎休眠,其中以1.5%葡萄糖为破休眠最佳浓度,浸泡法比打孔注入法能提前打破休眠.