不同培养体系及肝素剂量对Boer山羊精子体外获能的研究

用S ,D ,B 3种培养体系对Boer山羊精子进行体外获能 ,肝素添加剂量设 5个水平 .获能处理前先进行活精子分离 ,然后按试验之需 ,用含有肝素的培养液获能处理 ,获能后用溶血磷脂酰胆碱 (LC)诱导顶体反应 (AR) ,TG染色法测得有顶体反应的活精子作为评价精子获能的指标 .试验结果表明 ,(1)S培养液效果最好 ,4h的顶体反应率达 6 0 .88% ,与D ,B培养液的获能效果相比 ,差异极显著 (P <0 0 1) .(2 )肝素的添加剂量以 15mg·L-1和 2 0mg·L-1的效果最好 ,与其它处理组的效果相比差异显著 (P <0 0 5 ) ,但这 2个水平间的效果差异不显著 (P >0 0 5 ) .     

精子体外获能影响因素探析

阐述了精子体外获能的提出、生理意义及影响因素。     

奶山羊精子体外获能与体外受精

供体用FSH+LH超排,卵母细胞从注LH后约30h回收。将获能精子与10枚卵母细胞在受精液(mDM+输卵管上皮细胞)和培养液(mDM+30％供体羊血清)中连续培养(38℃)24h后,有6枚卵受精,抛出第二极体。将6枚受精卵移植到3只受体中,有1只妊娠,产出1只试管母山羊。初步表明,本试验的奶山羊精子体外获能与体外受精程序是简便而有效的。     

猪精子体外获能及异种穿卵的超微结构研究

 研究结果表明，猪精子头部长7.6微米，宽4.1微米。主要由核、顶体及顶体后区组成。顶体的内、外膜结构不同于质膜。颈部由中心粒和9条纵行分节的节柱组成。尾部全长49.4微米，其中，中段长11.4微米，线粒体较发达，约为52-55旋；主段中央是“9+2”的微管结构，其外方被9条致密纤维和纤维鞘包裹。体外获能前的猪精子群集成簇，运动缓慢。获能后运动方式发生变化，呈超激活运动特征。获能后的猪精子主要是以顶体外膜囊泡化的形式发生顶体反应。质膜是否参与囊泡化尚待进一步观察。顶体反应完成后，仅有顶体内膜包在精子核膜的外面。顶体内膜可与去透明带的金黄地鼠卵的细胞膜相融合，穿入卵内的精子核能在卵内去浓缩并发育成雄原核。本研究共分4批，对120枚金黄地鼠卵进行了观察，平均穿透率为84.8±10.2%。     

牛精子体外获能前后元素变化的研究

 本文应用x射线能谱技术，对获能前后精子质膜表面（头部、中段）和内部（顶体内、中段线粒体内）的元素进行了分析测试。结果表明，牛精子用肝素+咖啡因体外获能后，头部、中段质膜表面的Na、Al、S、K含量升高，Cl、Ca含量降低；顶体内Na、Mg、Si、P和Fe含量降低，而Ca、K、Cl和S含量升高；精子中段线粒体内Na、P、Si、Cl和Ca升高，而Mg、S、K和Fe却降低。获能过程中精子顶体内Na/Ca、Na/K、Cl/Ca、Cl/K和Na/Cl的浓度比分别为42.13、12.43、15.36、45.31和2.74；而摩尔比又分别为73.42、21.13、17.37、4.99和4.23。本文并对可能的获能机理进行了讨论。     

奶山羊精子体外获能异体受精试验

关于哺乳动物体外受精的研究,已经历了120多年,直到80年代才获得了第一例“试管家畜”。近年来,尽管“试管婴儿”平均每天有4例问世,但到1990年4月10日为止,全世界获得的“试管家畜”仅有130例,其中“试管牛”54头,“试管猪”52只,“试管绵羊”23只,“试管山羊”只有1只。 为了克服山羊体外受精的难点,Rao等将山羊输卵管卵母细胞输入事先经子宫输入新鲜羊精的假孕兔输卵管,培养24～36h,有37.0％完成了异体受精。将这些受精卵移植给9只受体羊后,有1只正常分娩,获得了首例异体受精山羊羔。我们将超排羊输卵管卵母细胞移入事先经阴道输入新鲜羊精的假孕兔输卵管,获得了44.8％的异体受精率。但迄今尚未证实,山羊体外获能的精子与超排卵母细胞在假孕兔输卵管内能否完成受精过程和产出正常后代。本试验旨在研究山羊体外获能的精子与超排的输卵管卵异体受精及受精卵移植后产羔的可能性。     

家兔精子体外获能与体外受精试验

本试验目的在于建立一种简便而有效的系统,能使家兔射出的精子完成体外获能,并获得体外受精、早期卵裂和正常产仔。精子体外获能采用三种方法:A.HIS(15min)+DM(1～2h);B.HIS(15min)+DM(11～12h);C.m-HIS(15min)+m-DM(2～4h)。经上述方法处理的精子与512枚输卵管卵母细胞进行体外受精和体外培养的结果表明,A组的受精和早期卵裂发育延迟;B组的受精卵大都停留在原核期;C组的受精和早期卵裂发育正常。将C组60枚2-4细胞移植至9只受体兔,5只妊娠,其中2只产4只试管仔兔,另外3只获得12个胎儿。     

肝素和羊血清对绵羊附睾精子体外获能的影响

通过对体外受精试验检验了肝素和羊血清有绵羊附睾精子体外获能中的作用。结果表明,在获能液ＳＯＦＭ＋０．６％牛血清白蛋白（ＢＳＡ）中加入５、１５、２５、５０ＩＵ／ｍｌ肝素不能有效诱导精子获能,所得卵裂率（１６．１％,１１．２％,１４．５％,１５．８％）与不加肝素的对照组（１０．０％）相比,差异不显著;获能液ＳＯＦＭ＋２０％羊血清（ＳＳ）对精子获能效果优于ＳＯＦＭ＋０．６％ＢＳＡ＋肝素,二者卵裂率差异显     

肝素和羊血清对绵羊附睾精子体外获能的影响

通过体外受精试验检验了肝素和羊血清在绵羊附睾精子体外获能中的作用。结果表明,在获能液ＳＯＦＭ＋０．６％牛血清白蛋白（ＢＳＡ）中加入５、１５、２５、５０ＩＵ／ｍｌ肝素不能有效诱导精子获能,所得卵裂率（１６．１％,１１．２％,１４．５％,１５．８％）与不加肝素的对照组（１０．０％）相比,差异不显著;获能液ＳＯＦＭ＋２０％羊血清（ＳＳ）对精子获能效果优于ＳＯＦＭ＋０．６％ＢＳＡ＋肝素,二者卵裂率差异显著（５０％ＶＳ１４．７％Ｐ＜０．０５）;获能液ＳＯＦＭ＋２０％ＳＳ中再加入５、１５、２５ＩＵ／ｍｌ肝素可明显增强获能效果,所得卵裂率（８１．４％,８０．４％,８１．３％）与不加肝素的对照组（４６％）相比,差异显著（Ｐ＜０．０５）。     

波尔山羊对徐淮山羊改良效果研究

通过对饲养一年的同批次的波杂一代山羊(F1)和本地山羊(徐淮山羊)共36只的生长发育性能进行测定比较,研究了波尔山羊对徐淮山羊的改良效果。波尔-徐淮山羊的杂交一代山羊除管围与本地山羊的差异不大外,体重从初生起就与本地羊保持着显著差异,同时在体长、体高以及胸围等方面也得到了显著的改善。结论表明,用波尔种羊对盐城地区的本地徐淮山羊进行杂交改良,可明显提升山羊的生产性能。     

不同获能液对猪精子获能效果的初步观察

为了探讨不同获能液对猪精子获能效果的影响,以新鲜猪精液为材料,进行mTBM＋咖啡因、mTBM＋咖啡因＋BSA,mTBM＋肝素三种获能液获能效果的比较。利用金霉素荧光染色法对其获能效果进行检验。结果表明,mTBM＋肝素组诱发B型（获能）精子率极显著高于mTBM＋咖啡因组（P〈0.01）,显著高于mTBM＋咖啡因＋BSA组（P〈0.05）;三种获能液诱发的AR型（顶体反应）精子率差异不显著（P〉0.05）。说明,添加肝素更有助于提高猪精子获能效果。     

波尔山羊与麻城黑山羊杂交F1代品质性状研究

[目的]为改良麻城黑山羊提供可靠的依据。[方法]以波尔山羊为父本、麻城黑山羊为母本进行杂交,研究波麻杂种后代的生长发育性能、繁殖性能、肥育性能和屠宰性能。[结果]波麻杂交一代(F1)的体型趋向父本,合群性更好,有利于放牧管理。6月龄、12月龄的波麻F1代的体重、胸围与母本存在极显著差异(P<0.01),体高、体长与母本存在显著差异(P<0.05)。波麻F1代的产活羔率高于麻城黑山羊。3月龄的波麻F1代在90 d的育肥期内,日增重达93.78 g,表现出明显的杂种优势。波麻F1代的产肉性能明显优于麻城黑山羊。[结论]波麻F1代的生长发育性能、繁殖性能、肥育性能和屠宰性能均优于麻城黑山羊,表现出良好的杂交优势和适应性。     

波尔山羊与贵州黑山羊杂交的改良效果

为了探明波尔山羊与贵州黑山羊杂交对其后代生长性能的影响,以及在人工草地和荒山放牧饲养方式下的生长变化,以波尔山羊为父本(♂)与贵州黑山羊为母本(♀)进行杂交(贵州纯种黑山羊为对照),对其初生重、3月龄、6月龄和12月龄羊的体重、体尺等生长性能进行测定和比较。结果表明:1)杂交F1代羔羊的体重较贵州纯种黑山羊后代的平均体重增加53.89%,3月龄、6月龄和12月龄的体重、体高、体长和胸围均得到明显提高,综合性能得到很好改善。2)通过比较人工草地放牧与荒山放牧饲养方式下的改良效果发现,在人工草地上的杂交优势更为明显。说明,杂交优势是否得到充分发挥与饲养方式密切相关,在饲草较为丰富、活动相对受限的人工草地放牧饲养方式下,波尔山羊与贵州黑山羊的杂交优势更明显。     

波尔山羊个体精子抗冻性研究

为了加速贵州省地方山羊品种改良,2000年9月试验采用常规的精液冷冻解冻方法,通过鲜精活力、畸形率、冻精活力、解冻后4 h存活指数、顶体完整率、谷草转氨酶(GOT)释放量等指标研究了3只波尔山羊精子的抗冻性,结果3只试验公羊精子抗冻性存在明显差异,968号公羊生存指数显著高于2022和098号(P<0.05),098号公羊谷草转氨酶释放量显著低于2022和968号(P<0.05),但其鲜精品质全部达到常规制作冻精的要求,配种试验,65.77 %(146/222)的受胎率也验证了3只公羊适宜制作冻精。     

布尔山羊细管冷冻精液研制初报

首次在国内建立了布尔山羊的细管精液冷冻程序。试验证明,选用３０ｇ／Ｌ的葡萄糖、１３ｇ／Ｌ的柠檬酸钠和１ｇ／Ｌ的乙二胺四乙酸钠（ＥＤＴＡ）作基础稀释液,乙二醇作保护剂,精液冻前经１００ｍＬ／Ｌ卵黄处理,离心除去精清。精液稀释并经冻前处理后装入０．５ｍＬ细管,在４℃下平衡１．５ｈ,再以１１～３０℃／ｍｉｎ的速率降温至－８０℃以下（３～５ｍｉｎ）投入液氮,可获得良好的冷冻效果。用乙二醇作保护剂的冷冻精液,解冻后在１２～１５℃的常温下放置２４ｈ,其活力仍可满足输精的要求。     

液氮内冻存8年的布尔山羊胚胎移植试验

2009年9月,在陕西省布尔羊良种繁育中心,对85枚已冷冻保存8a的布尔山羊胚胎进行解冻、培养,根据复水情况将80枚(45枚优良者,35枚次级)胚胎优次搭配,分别移植于31只关中奶山羊,最终27只妊娠,妊娠率为87.1％(27/31);产羔33只(♂9只,♀24只),其中8只产双羔;羔羊平均出生体质量为3.22kg(♂...     

饲养条件对波尔山羊超数排卵效果的影响

研究饲养条件对波尔山羊超数排卵效果的影响。结果表明,在室内控温(22~24℃)和室外自然条件下(10~20℃),分别对处女母羊和经产母羊进行超数排卵处理,无论是处女母羊还是经产母羊,超排效果差异都极显著(P<0.01)。此外,在日粮中添加青绿多汁饲料对处女母羊和经产母羊的超排效果都有改善作用(P<0.05),其中日粮中添加青绿多汁饲料的处女母羊的超排效果接近未添加青绿多汁饲料的经产母羊。因此,波尔山羊在进行超数排卵时,应选择经产母羊,日粮中应添加青绿多汁饲料,避开低温条件进行。