金银花不同花期花蕾质量及指标成分含量比较分析

为了确定金银花的最佳采收期,以封丘大毛花金银花为材料,测量其7个不同花期鲜花蕾和干花蕾的千蕾质量,利用HPLC研究其不同花期花蕾千蕾质量及指标成分含量的变化。结果表明,封丘大毛花7个不同花期的千蕾质量差异明显;不同花期绿原酸含量为0.350％～2.501％,木犀草苷含量为0.036％～0.207％,不同花期指标成分含量差异显著。最佳采收期为二白期到大白期。     

金银花药材等级质量标准的划分

为更好地控制金银花质量,采集河南封丘、山东平邑和河北巨鹿金银花道地产区样品34份,检测绿原酸、木犀草苷、总灰分、酸不溶性灰分、水分等指标,采用SPSS 19.0统计分析软件对上述指标进行相关性分析,并对主要药效成分绿原酸、木犀草苷含量进行系统聚类分析和K-聚类分析。结果表明:金银花药材质量可划分为4个等级,一等金银花色泽为绿色,绿原酸≥2.89%,木犀草苷≥0.078%,总灰分≤5.37%,酸不溶性灰分≤0.390%,水分≤4.72%;二等金银花色泽为黄绿色,绿原酸≥2.53%,木犀草苷≥0.072%,总灰分≤6.86%,酸不溶性灰分≤0.789%,水分≤6.34%;三等金银花色泽为黄色,绿原酸≥1.98%,木犀草苷≥0.068%,总灰分≤7.72%,酸不溶性灰分≤1.464%,水分≤7.90%;四等金银花色泽为浅黄少白,绿原酸≥1.51%,木犀草苷≥0.052%,总灰分≤9.29%,酸不溶性灰分≤3.000%,水分≤9.51%。     

5个药用菊花品种类型主要化学成分的动态累积

研究药用菊花红心13号、NJK-2、优单6号、似贡2号、大花6号等品种类型木犀草苷、绿原酸、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸、挥发油、多糖等成分在花期的动态积累过程,为药用菊花最佳采收期的确定提供依据。采用高效液相色谱法(HPLC)测定杭白菊5个品种类型花序6个开放程度的木犀草苷含量、绿原酸含量、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸含量,采用蒸馏法测定挥发油含量,采用分光光度法测定菊花多糖含量。结果表明,除似贡2号外,其余品种类型绿原酸、木犀草苷、3,5-O-双咖啡酰基奎宁、总黄酮的含量最大值均出现于80%开放,即药用菊花普遍采收时期;而似贡2号绿原酸、木犀草苷、3,5-O-双咖啡酰基奎宁、总黄酮的含量最大值出现于胎菊时期。5个品种类型绿原酸、木犀草苷、3,5-O-双咖啡酰基奎宁、总黄酮的含量最小值都出现在100%开放时;多糖和挥发油的含量则不同品种有较大差异,但总体呈现随着开放程度增加而逐步下降的趋势。     

贡菊不同花期3种活性物质含量及相关基因表达

研究贡菊花蕾期、露白期、初花期和盛花期中木樨草苷、绿原酸和异绿原酸含量及其相关CmFNS1、CmC3H、CmHQT基因相对表达量的变化,为确定贡菊最佳采收时期提供理论依据。结果表明,绿原酸、木樨草苷和异绿原酸的含量都在露白期迅速下降,初花期上升,盛花期逐渐下降,其中在初花期含量最高,分别为0.43%、0.27%和0.33%。利用实时荧光定量PCR检测CmFNS1、CmC3H、CmHQT基因的相对表达量发现,这些基因表达量变化呈现出横向"S"形,并在初花期达到最高值,与木樨草苷、绿原酸、异绿原酸含量的变化趋势相似,进一步表明贡菊在初花期木樨草苷、绿原酸、异绿原酸含量最高。     

不同施肥方式对金银花质量的影响

金银花是大宗常用珍贵中药,绿原酸含量及木犀草素苷含量是金银花产品质量主要指标。在遵循平衡施肥原则前提下,通过不施肥、单施无机肥、单施有机肥、无机肥有机肥配施的四种不同施肥方式,对金银花产品中绿原酸、木犀草素苷含量进行了比较。结果表明:施肥能显著提高金银花产品质量,单施无机肥与单施有机肥差别不显著;只施用有机肥更优于只施用无机肥;有机肥无机肥结合施肥,十分接近于只施用有机肥,可作为大规模商品化生产种植的依据。     

“九丰一号”金银花富硒栽培技术

青海海东市进行的金银花引种试验证明,青海东部农业区富硒地区种植金银花,长势良好,增收增效明显。特别是该地区种植的金银花木犀草苷含量0.16%,绿原酸含量3.9%,高于2010年版《中国药典》规定的绿原酸含量不得少于1.5%、木犀草苷含量不得少于0.05%的标准,硒含量≥0.016mg/kg。本文介绍了以定植、栽培模式选择、施肥、修剪、病虫害防治、采收及干燥为主要内容的青海富硒地区种植富硒金银花的主要栽培管理技术。     

浙江产金银花的调查与评估

对原产乐清、永嘉以及文成引种的"金银花"进行原植物鉴定,并利用HPLC法对样品绿原酸和木犀草苷含量进行检测。结果表明,原产乐清的"金银花"为灰毡毛忍冬(Lonicera macreanthoides Hand.-Mazz.),产于永嘉的为红腺忍冬(L.hypoglauca Miq.),文成引种的为忍冬(L.japonica Thunb.)。忍冬样品花与花蕾绿原酸和木犀草苷含量均符合2005版《中国药典》金银花项下规定,其中文成引种栽培金银花花中绿原酸和木犀草苷含量分别达到3.42%和0.21%。产于乐清、永嘉的灰毡毛忍冬、红腺忍冬样品中绿原酸含量也符合2005版《中国药典》山银花项下规定。资源调查结果表明:原产乐清、永嘉的"金银花"实属山银花,文成引种的为正品金银花。     

“华金6号”金银花新品种药材适宜采收期研究

【目的】探讨确定"华金6号"金银花新品种药材适宜采收期。【方法】采集三青期、二白期及大白期后不同时间内的花蕾,用游标卡尺和电子天平测定花蕾的长度、最粗处直径、干重等指标;HPLC法测定绿原酸及木犀草苷含量。【结果】在三青期至大白期,花蕾外观性状变化明显且呈上升趋势,花蕾长度、直径及干重分别由0.17cm、2.05cm、0.19g上升至0.24cm、2.80cm、0.25g,大白期后第2天至第11天,三者均趋于稳定;在三青期至大白期,绿原酸含量由33.59mg/g下降至24.32mg/g,木犀草苷含量由0.55mg/g上升至0.95mg/g,大白期后第2天至第11天,绿原酸含量呈缓慢下降趋势,最低至17.73mg/g,但木犀草苷含量持续上升,最高至1.93mg/g。【结论】"华金6号"金银花在整个大白期内,花蕾干重,绿原酸、木犀草苷含量均相对稳定,考虑到花蕾发育的一致性及药材外观性状,本研究认为"华金6号"金银花在整个大白期内均可采摘。     

不同品系金银花质量评价

[目的]评价不同品系金银花药材质量。[方法]采用HPLC和紫外分光光度法测定相同产地5个不同品系金银花药材成分绿原酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸C、木犀草素和总黄酮的含量,采用方差分析、相关性及主成分分析方法对5个品系金银花成分间的差异及相关性进行评价。[结果]相关性分析中,绿原酸与木犀草苷,异绿原酸A与异绿原酸C,异绿原酸A和异绿原酸C与总黄酮均呈现显著正相关,相关系数分别为0.648、0.833、0.690和0.636;异绿原酸A和异绿原酸C与木犀草素,芦丁和木犀草素与总黄酮均呈显著负相关,其相关系数分别为-0.081、-0.688、-0.476和-0.595。主成分分析综合评价中豫金2号(YJE)金银花评分较高,其次为豫封3号(YFS)金银花,评分中排序最低的为由山东引种的北花1号(BHYH)金银花。[结论]通过对5个品系金银花药材内在成分进行评价,为金银花药材质量的评价、指导金银花规范化种植及新品系的选育提供理论依据。     

金银花和山银花有效成分测定及比较分析

为了比较金银花与山银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量差异.采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),分别以流动相乙腈-0.5%磷酸(10∶90)和检测波长327nm,流动相乙腈-0.5%醋酸梯度洗脱和检测波长348nm测定绿原酸、木犀草苷,以蒸发光散射检测器和流动相乙腈-0.4%醋酸梯度洗脱检测灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙.结果发现:绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的线性范围分别为15.28~76.4、10.8~43.2、49~196和54.6~218.4μg/mL.山银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙含量分别为0.0513%、6.953%、1.132%、5.59%;金银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙含量分别为2.82%、0.1847%、0.056%.本结果可为有效鉴别金银花和山银花提供依据,同时HPLC方法为全面控制金银花和山银花药材的质量提供了可靠的方法.     

有机无机氮肥对金银花质量的影响

为研究有机氮肥与无机氮肥的施用对金银花质量因子的影响。以盆栽7年生金银花为试验材料,采用紫外分光光度计法测定金银花中总绿原酸和黄酮含量。结果表明:在磷钾肥充足供应下,单施有机氮肥虽对金银花千蕾质量起正效应,但对花和叶内绿原酸和黄酮的含量起负效应,而单施无机氮肥效果正好相反,只有有机氮肥和无机氮肥混合施用才不会降低金银花的质量,因此,在金银花种植中应将有机氮肥和无机氮肥结合施用。     

离子液体微波辅助萃取金银花中绿原酸的研究

以离子液体[Bmim]BF4和水的混合溶剂为萃取溶剂,采用微波辅助技术萃取金银花中的绿原酸,并对微波辅助条件进行了优化。结果表明,萃取溶剂[Bmim]BF4/V水为4／11;萃取时间9min;微波功率600W条件下微波辅助萃取绿原酸,绿原酸的萃取得率为1．475％。与传统的溶剂萃取方法进行比较,离子液体萃取法快速、高效。     

盐胁迫下金银花叶片绿原酸含量的变化

[目的]为绿原酸的存在找一个最适的盐环境,在提高金银花绿原酸的含量和合理利用盐碱地方面提供一定的科学依据。[方法]分别对藤本金银花（金花1号）一年生苗在4个不同浓度（0、100、200、400 mmol/L）的NaCl胁迫下的叶片绿原酸含量变化进行了测定和分析。[结果]试验结果表明,金银花叶片内绿原酸的含量随盐浓度变化,短期内呈现低盐下降,高盐上升的趋势,但没有达到统计学上的显著水平。[结论]短期的盐处理不会对金银花叶片的绿原酸含量造成显著影响,但金银花植株仍表现出对盐环境的应激性。     

金银花中主要内含物最佳浸提条件研究

[目的]为了确定金银花的最适浸提条件,为加工金银花饮料提供参考。[方法]通过花水比、温度、时间三因素二水平正交试验,测定水浸出物、氨基酸、黄酮和绿原酸含量并分析其变化情况。[结果]金银花中水浸出物的最适浸提条件为:花水比1∶40,温度80℃,时间20 min,水浸出物含量为45.96%;金银花中绿原酸的最适浸提条件为:花水比1∶40,温度80℃,时间15 min,绿原酸含量为4.09%;金银花中氨基酸的最适浸提条件为:花水比1∶30,温度70℃,时间10 min,氨基酸含量为2.02%;金银花中黄酮的最适浸提条件为:花水比1∶40,温度80℃,时间15 min,黄酮含量为0.826 2%。[结论]金银花的最适浸提条件是花水比1∶30~1∶40,温度70~80℃,时间10~15min。     

不同采收时间·花期及干燥方法对秀山金银花中绿原酸含量的影响

[目的]测定不同采收时间、花期和干燥方法制备的秀山金银花中的绿原酸含量。[方法]按2005年版《中国药典》规定的HPLC法测定样品中绿原酸。[结果]绿原酸的标准曲线为Y=3.6E＋7X-1.5E＋5,r=0.999 7。[结论]金银花的采摘时间、花期、干燥方法均是影响金银花药材绿原酸含量的重要因素,建议在7：00前采摘二白期金银花,采用杀青烘干。     

利用大孔树脂提取绿原酸的研究

研究利用大孔树脂从金银花中有效提取、分离纯化绿原酸的方法,从而得到纯度高的绿原酸粗品。利用紫外分光光度计,对绿原酸标准品进行定性、定量的测定,即λ=329．5nm,R=0．99925;限性范围：0．002mg/ml〈C〈0．010mg／ml。选用4种不同型号的大孔树脂．通过静态吸附试验找出最适合吸附金银花中的绿原酸的大孔树脂,即HZ-818;利用HZ-818型树脂进行纯品动态吸附,得出吸附饱和时间为28min;利用含量为40％的乙醇洗脱液进行洗脱,所用洗脱液体积为1．7BV,回收率为62．9％。     

金银花茎、叶和花中化学成分的比较研究

为了比较金银花茎、叶和花中的化学成分含量,采用了硫酸-蒽酮法、苯酚－硫酸法、2,6-二氯酚靛酚滴定法、考马斯亮蓝法、茚三酮呈色法和紫外分光光度法,分别测定了金银花茎、叶和花中的黄酮类物质、维生素C、绿原酸、可溶性蛋白质、游离氨基酸、可溶性糖和多糖的含量。结果表明：黄酮类化合物和维生素C含量均为叶＞花＞茎;而绿原酸、可溶性蛋白质和游离氨基酸含量均为：花＞叶＞茎,虽然花中含量最高,但叶和茎中也有一定的含量;可溶性糖：茎＞花＞叶;多糖含量：茎＞叶＞花。这为金银花的综合利用提供了一定的理论依据。     

金银花超微细粉与普通粉的比较研究

[目的]考察微粉化技术对中药材金银花的显微特征以及溶出度的影响。[方法]显微镜下观察金银花普通细粉与超微细粉的显微特征区别,并以绿原酸含量为指标,采用紫外分光光度法测定金银花超微细粉与普通细粉的溶出度。[结果]2种金银花粉末显微镜下观察有明显差异;绿原酸含量超微细粉(10μm)普通细粉(80目筛)。[结论]微粉化技术对金银花粉末显微特征和溶出度影响明显。     

多倍体金银花绿原酸的提取工艺优化

用5种不同型号树脂对多倍体金银花绿原酸静态吸附和解吸的性能进行试验,筛选出一种对绿原酸吸附和解吸均有较好效果的树脂,即DPH-417型大孔吸附树脂。在选择了DPH-417型树脂后,通过分析乙醇浓度对绿原酸解吸率的影响,得出60%的乙醇为最佳洗脱剂。动态吸附和解吸试验表明,DPH-417型树脂对绿原酸的动态饱和吸附量为70.21 mg/g,动态解吸率为91.2%;对洗脱液进行收集浓缩、冷冻干燥得多倍体金银花绿原酸粗品,绿原酸含量为56.2%。