产enterocin E5细菌素粪肠球菌发酵条件的优化

采用琼脂扩散法测定粪肠球菌发酵上清液对大肠埃希菌K88的抑菌活性,从而确定产enterocin E5细菌素粪肠球菌的发酵条件。结果表明,粪肠球菌E5产细菌素的发酵培养基为MRS培养基,最适温度为37℃,最适起始pH值6.5,最佳接种量2%,种龄14 h,发酵时间16 h,最佳培养基组分氮源为1%胰蛋白胨、0.5%酵母浸粉,最佳碳源为1%葡萄糖、0.5%蔗糖,0.1%Tween-80有利于enterocin E5的产生。这是分离自北京优良商品猪黑六产enterocin E5粪肠球菌的首次报道。     

猪源粪肠球菌的BIOLOG系统鉴定及其生物学特性

利用BIOLOG自动微生物分析系统和传统鉴定方法对1株猪源粪肠球菌进行了鉴定，并对其生物学特性进行了系统研究。结果显示，2种鉴定方法的结果一致，与传统的鉴定方法相比，BIOLOG自动微生物分析系统更快捷、方便、高效，可快速为临床诊断和用药提供依据。生物学试验表明，本株粪肠球菌在液体和固体培养基内均可有效抑制大肠杆菌生长，从而维持肠道平衡；另外，该菌株可使培养液的pH值降低至3．69。上述结果为该菌株的进一步开发利用提供了理论支持。     

致羔羊脑炎肠球菌与羔羊正常菌群肠球菌生物学特性的比较

对致羔羊脑炎肠球菌和羔羊正常菌群肠球菌进行培养特性、生化特性、溶血特性、药物敏感性以及拥有毒力因子基因种类与分布进行比较,结果表明2种不同来源羔羊肠球菌的培养特性和生化特性基本一致.致病菌均对链霉素、庆大霉素、红霉素等抗生素耐药,1株正常菌对四环素、红霉素及链霉素耐药.11株致病性肠球菌中有5株菌同时检测到esp、cyIA、asa1、ace、efa、EF0591和EF3314等7种毒力因子基因,2株菌没有检测到其中任何毒力因子基因.30株正常菌有3株菌存在gelE和EF3314,l株菌同时存在gelE、EF3314和asa1 3种毒力因子基因.正常菌群株3种毒力因子基因片段序列与GenBank中登录的相应序列同源性在95%以上,与致病株相应序列同源性在96%以上.致病菌能导致小鼠死亡,而正常菌群肠球菌则不能引起小鼠的死亡.     

绵羊肠球菌部分生物学特性的比较分析研究

肠球菌是人类和动物肠道正常菌群的一部分,以往认为肠球菌是对人类无害的共栖菌,但近年来研究已证实了肠球菌的致病力。在需氧革兰氏阳性球菌中,它是仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌〔1〕,肠球菌亦可引起院外感染。所致的疾病包括泌尿道感染、肺部感染、术后感染、心内膜炎、胆囊炎、腹膜炎、败血症、脑炎等,已成为院内感染的第二位主要原因〔2,3〕。由于其固有耐药性,所致感染治疗困难,肠球菌成为当今国外医学界研究的热点。本次实验,对绵羊不同来源的肠球菌(致病菌与健康动物分离菌)进行部分生物学特性的研究,比较致病菌与正常菌群在…     

某养殖场鸡源粪肠球菌分离鉴定及耐药性研究

本文从辽宁某鸡场100份肉鸡盲肠拭子中分离获得粪肠球菌24株,通过ATB细菌鉴定仪进行鉴定确认为粪肠球菌,并对这24株粪肠球菌进行了14种抗生素的药敏试验。结果显示,粪肠球菌对青霉素、万古霉素、氨苄西林和替拉考宁敏感;对红霉素、氯霉素、环丙沙星、四环素、左氧氟沙星和奎奴普汀/达福普汀耐药,耐药率均达到100.0%,养殖场抗菌药物耐药严重。     

屎肠球菌的生物学特性及其对仔猪免疫功能的影响

屎肠球菌是动物肠道正常菌群中的菌类,对维持动物肠道菌群生态平衡起到重要作用。文章综述了屎肠球菌的生物学特性及其对仔猪免疫功能的影响。     

2017-2021年上海市动物源粪肠球菌、屎肠球菌耐药性情况变迁分析

为了解上海地区动物源粪肠球菌、屎肠球菌对常见抗菌药物的耐药及其最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)变迁情况,采用微量肉汤稀释法对近五年采集的粪肠球菌、屎肠球菌进行10种常见抗菌药物敏感性测试。结果表明,458株粪肠球菌及283株屎肠球菌对头孢西丁、头孢噻呋及氧氟沙星耐药率较高(均高于60%),对青霉素、阿莫西林/克拉维酸及万古霉素的耐药率较低(均低于11%),粪肠球菌耐药率整体高于屎肠球菌,两者对氧氟沙星、头孢噻呋、氟苯尼考、庆大霉素、利奈唑胺、恩诺沙星的耐药率存在较大差异(耐药率差异为15%～44%)。五年间,粪肠球菌对阿莫西林/克拉维酸、氧氟沙星的MIC₅₀及MIC₉₀均呈下降趋势;屎肠球菌对阿莫西林/克拉维酸、头孢西丁及氟苯尼考的MIC₅₀及MIC₉₀均呈下降趋势。研究表明,近年来上海地区动物源粪肠球菌、屎肠球菌的耐药情况有好转趋势,仍需继续加强肠球菌耐药性监测。     

粪肠球菌生长曲线的测定

用分光光度仪和活菌计数两种不同的方法对粪肠球菌生长曲线进行测定,结果表明,在细菌对数生长期以前,两种方法所得结果基本一致,但在衰亡期,两种方法具有差异,活菌记数法更能如实反映细菌的生长情况.     

乌鲁木齐市宠物源粪肠球菌和屎肠球菌耐药性及耐药基因检测

为了解乌鲁木齐市宠物源粪肠球菌和屎肠球菌对临床常用抗菌药物的耐药性及其耐药基因携带情况,在乌鲁木齐市多家宠物医院、警犬基地、犬养殖基地采集宠物(犬和猫)直肠粪样449份进行粪肠球菌和屎肠球菌的分离鉴定,通过琼脂稀释法测定10种抗菌药物的最小抑菌浓度,利用PCR方法检测11种耐药基因.结果分离鉴定出宠物源粪肠球菌和屎肠球...     

一株母猪产道益生性粪肠球菌的分离鉴定

产道作为母猪生殖系统的重要器官组织,与繁殖性能密切相关.本试验无菌采集江西省某养殖场窝产14头母猪产道中段阴道分泌物进行传统细菌分离培养,初步筛选出4株细菌,挑选其中一株通过生化反应和16S rDNA序列分析方法进行鉴定,同时进行抗生素抵抗能力试验和牛津杯法体外抑制试验.生化鉴定结果表明该菌可降解果糖、乳糖、半乳糖等,...     

屎肠球菌素E9的产生和特性研究

用琼脂扩散法分别检测了不同培养时间的屎肠球菌E9无细胞上清液和连接在菌体上的Enterocin E9活性,同时分析了Enterocin E9的生物学特性。结果显示：含Enterocin E9的上清液和菌体都具有抑菌活性,活性大小存在浓度依赖性。在一定时间范围内,其上清液和菌体的活性都随着培养时间的增加而逐渐升高。取上清液进行稳定性分析,结果发现Enterocin E9有很好耐热和耐酸碱性,经121℃处理20 min后其活性仍大部分保留,在pH2~12的范围内37℃下处理4 h仍保持较高活性;不同浓度的吐温-80对其活性无明显影响;室温放置7周后,活性无明显变化。上述实验说明屎肠球菌E9产生的细菌素不仅分泌到上清液中,同时还有较大部分与菌体结合。Enterocin E9稳定性良好,储藏条件简单,具有在畜牧业中应用的潜能。     

Enterococcus faecalis of human and poultry origin share virulence genes supporting the zoonotic potential of E. faecalis

Enterococcus faecalis is a major cause of nosocomial infections in humans and has been linked to severe extra‐intestinal infections in poultry. A zoonotic potential has been suggested and the aim of the present study was to investigate similarities in virulence gene profiles of E. faecalis originating from infections in humans and poultry respectively. A total of 106 isolates of E. faecalis [26 human clinical isolates, 60 poultry clinical isolates (including two small‐colony variants (SCVs) and 20 poultry cloacal isolates] were investigated for presence of seven virulence‐associated genes: ace, asa1, cylA, efaA, EF0591, esp and gelE. For each gene, the PCR‐amplification product was sequenced from one isolate in each group to explore intragenic variations between genes of human and poultry origin. Haemolytic and protease activities were assessed and isolates were assigned a sequence type (ST). Three of the seven genes investigated (ace, efaA and gelE) were present in all isolates. The asa1 was detected in 63/80 and 13/26 isolates of poultry and human origin respectively. For cylA, the numbers were 46/80 and 14/26 respectively. Among poultry isolates, esp and EF0591 were the least frequently observed genes (1/80 and 20/80 respectively); the prevalences among human isolates were 1/26 and 18/26 respectively. A high degree of similarity between genes in human and poultry isolates were confirmed by sequencing of amplification products. None of the cylA‐positive isolates demonstrated haemolytic activity, while the phenotypic expression of gelatinase varied. The ST16 was the only ST shared by human and poultry isolates. The SCV isolates did not show a unique virulence profile or phylogeny. In conclusion, regardless of the distinct phylogenetic background of most E. faecalis isolates of human and poultry origin, we found major similarities in virulence gene profile and gene sequences in isolates from the two sources, supporting the zoonotic risk associated with this organism.     

微量环丙沙星对人源大肠杆菌和粪肠球菌体外敏感性的影响

建立人离体肠道模拟模型，研究微量环丙沙星对人源肠道大肠杆菌和粪肠球菌敏感性的影响，进而用聚合酶链反应法扩增耐药菌的gyrA基因的耐药决定区，并分析其耐药机制。结果显示，大肠杆菌连续培养后存活菌株对微量环丙沙星耐药，此耐药菌对其他抗菌药敏感；粪肠球菌绎连续培养，对环丙沙星和其他抗菌药物仍敏感；耐药大肠杆菌的gyrA基因发生突变，248位碱基由C变为T，259位由G变为T，相应地，该基因编码的蛋白质在83位的丝氨酸和87位的天冬氨酸分别改变为亮氨酸和酪氨酸。研究表明，微量环丙沙星对人肠道菌群具有不同的选择作用，能诱导大肠杆菌产生耐药性。这为动物源食品中环丙沙星残留的安全性评价提供了试验依据。     

粪肠球菌动物致病的研究进展

粪肠球菌又称粪链球菌,能在不同环境中生长存活,对外界环境抵抗力较强,部分属于动物肠道中的正常茵群,还有部分在长期的进化中出现了毒力基因。近年来,粪肠球菌感染人和动物的报道日益增加,逐渐得到人们的广泛关注。论文综述了猪、牛、羊、禽和犬粪肠球菌的主要致病性、毒力基因及耐药性,为防制动物粪肠球菌感染提供参考。     

5 L发酵罐中粪肠球菌发酵工艺参数优化

本试验旨在通过单因素试验及Box-Behnken响应面试验设计法优化饲用粪肠球菌EXW 27发酵工艺,探索搅拌速度、中和剂、pH、接种量、初始糖含量、通气方式以及补料工艺等对菌体在发酵罐内生长的影响。优化菌体小试发酵工艺为:将种子液以3%(V/V)接种于装液量为70%的5 L小罐,发酵温度37℃,搅拌转速165 r/min,通空气保压0.02 Mpa,自动流加12.5%的氨水控制pH在5.5,当pH高于5.5流加葡萄糖补料发酵18 h左右结束,在此最佳条件下所得发酵液的活菌浓度约为3.799×10^10 cfu/mL,比优化前提高了近3倍,为以后工业化生产提供参考。     

粪肠球菌生长曲线的测定及其对小鼠脑组织的影响

为测定致羔羊脑炎粪肠球菌（Enterococcus faecalis）的生长曲线,寻求一种快速而准确的方法测定不同生长时期粪肠球菌数量,并客观评价其毒性强弱及其对小鼠脑组织的影响,试验采用平板菌落计数法和OD-Monitor振荡比浊法（D_λ值法）测定粪肠球菌的生长曲线,探究该菌在合适时间段内的吸光值（D_{600 nm}）与平板菌落计数法测定的活菌数（CFU）的关系。用粪肠球菌感染小鼠,观察记录小鼠的死亡情况,最后采用Karber法计算粪肠球菌感染小鼠的半数致死量（LD₅₀）。用LD₅₀的剂量感染小鼠,及时采集死亡小鼠脑组织,未死亡的小鼠72 h后全部剖杀取脑组织,一部分做涂片染色,制作病理切片,观察病理变化;一部分进行培养,用于PCR方法进行细菌的回收鉴定。结果显示,用两种方法测定此株粪肠球菌的生长曲线基本一致,在2~8 h生长迅速,为对数生长期,8~14 h生长缓慢,为稳定期,14 h之后死亡数增加,进入衰亡期;对12 h粪肠球菌D_{600 nm}与CFU的关系进行探讨,成功建立回归方程：y=20.769x-1.3422,R²=0.997;其感染小鼠的LD₅₀为7.77×10¹¹个活菌。以此剂量感染小鼠,脑组织涂片染色和培养染色,均能看到革兰氏阳性球菌;PCR结果显示,均出现了大小为112 bp的条带。对脑组织进行病理学观察发现该菌可导致脑组织充血、出血、形成微血栓,脑膜充血。通过生长曲线和其D_{600 nm}与CFU关系的建立,可实时监测粪肠球菌数量,为后期更深入研究粪肠球菌穿越血脑屏障的机制奠定重要的理论基础。     

屎肠球菌及其微生态制剂的研究进展

屎肠球菌作为一种潜在的新型饲用抗生素替代品,具有耐热、耐胃酸、耐胆盐、粘附力强、抑菌性和抗生素耐受性等优良的生物学特性,还能提高饲料的转化效率,增强动物机体的免疫力,降低腹泻率及死亡率,从而改善动物产品品质,屎肠球菌微生态制剂在畜禽养殖业中应用已十分广泛。其中微囊化屎肠球菌活菌制剂更是近几年的研究热点,其抗逆性强、稳定性高,可以作为饲用高活性微生态制剂应用于实际生产。本文主要阐述屎肠球菌的生物学特性及其在饲用微生态制剂中的研究进展。     

一例肉鸡大肠杆菌和粪肠球菌混合感染的诊治

本试验对某发病肉鸡场的病死鸡进行了病原学诊断。通过病原分离、生化试验、动物试验、血清型鉴定、PCR扩增等方法对分离细菌进行了鉴定,最终确定为大肠杆菌和粪肠球菌的混合感染。在此基础上进行了药敏试验,筛选出了大肠杆菌的高敏药物阿米卡星和庆大霉素,而粪肠球菌只对某些氟喹诺酮类药物中度敏感,其余均显示为耐药。将阿米卡星、庆大霉素和恩诺沙星用于发病鸡群的治疗,很快控制了疫情,及时减少了经济损失。