山东省侵染四瓜的西瓜花叶病毒（WMV—2）和黄瓜花叶病毒（CM…

从采自平度、临沂两地的西瓜病叶中得到两个病毒分离物Ｗ－ＰＤ和Ｗ－ＬＹ。Ｗ－ＰＤ可侵染３料８种植物，可由桃蚜以非持久性方式传播。钝化温度６５℃，稀释限点１０＾－４－１０＾－５，体外存活期２０－２５ｄ。提纯病毒呈典型的核蛋白吸收，最大吸收峰为２６０ｎｍ，最小吸收峰２４６ｎｍ。Ａ２６０／Ａ２８０＝１．２４。病毒外壳蛋白分子量为３３．３４ＫＤ。Ｗ－ＰＤ的粒子线状，长度为６００－７５０ｎｍ。在病组织超薄切片     

侵染西瓜的黄瓜花叶病毒的生物学鉴定

用生物学、血清学及电镜技术鉴定了西瓜花叶病毒分离物 (XZ -1)的基本属性。研究结果表明 ,该分离物可侵染 6科 17种植物。其中 ,在葫芦科、茄科、菊科、苋科几种植物上表现为花叶 ;在苋色藜、蚕豆上表现为枯斑。桃蚜 (MyzusPersicae)可传毒 ,病毒汁液极易摩擦接种。该分离物汁液的致死温度为 5 5～ 60℃ ,稀释限点为 10 - 3～ 10 - 4,体外存活期约为 2～ 3d。分离物形态为典型球状 ,其提纯物紫外光吸收的最高峰在 2 60nm ,最低峰在 2 40nm。A2 80 /A2 6 0 =0 .69。该病毒核酸含量约为 11.3 %。ELISA测定该分离物与黄瓜花叶病毒的抗血清学反应为阳性 ,初步鉴定该分离物隶属于黄瓜花叶病毒 (CMV)     

侵染大丽花的黄瓜花叶病毒分离物的鉴定

根据病毒生物学特性、粒体形态和血清学性质，初步鉴定在厦门地区种植的大丽花上表现花叶症状的病株上分离的1个病毒分离物属于黄瓜花叶病毒。在供试的11科39种(或品种)植物中，该分离物通过摩擦接种能侵染其中的9科35种(或品种)；失活温度为50-55℃，稀释终点为10^-3～10^-4，体外存活期为24-28h；病毒粒体球状，直径约28-30nm。经间接ELISA测定，该分离物与烟草花叶病毒、南瓜花叶病毒、烟草环斑病毒、番茄不孕病毒、西番莲木质病毒的抗血清均无反应。与黄瓜花叶病毒抗血清具有强阳性反应，鉴定该病毒是黄瓜花叶病毒。     

侵染蚕豆的黄瓜花叶病毒的分离和鉴定

根据鉴别寄主反应、寄主范围测定、介体传播特性、粒体形态以及血清学诸项试验,将蚕豆病毒分离物B_5鉴定为黄瓜花叶病毒(Cucumber Mosaic virus,CMV)。B_5液接种能侵染7科20余种植物。在蚕豆的接种叶上形成红褐色坏死斑,有或无系统侵染;局部侵染苋色藜和昆诺藜;系统侵染心叶烟和番茄分别引起花叶和蕨叶症。B_5可经桃蚜、棉蚜和甘篮蚜的非持久方式传播。B_3在电镜下粒体形态为球状,直径28～30nm。B_5病株的粗制液在免疫双扩散试验中能和黄瓜花叶病毒的抗血清起反应,且在免疫电镜试验中,黄瓜花叶病毒抗血清处理的铜网能捕获大量B_5粒体。     

山东省侵染西瓜的西瓜花叶病毒（WMV－2）和黄瓜花叶病毒（CMV）的研究

从采自平度、临沂两地的西瓜病叶中得到两个病毒分离物Ｗ—ＰＤ和Ｗ—ＬＹ。Ｗ—ＰＤ可侵染３科８种植物，可由桃蚜以非持久性方式传播。钝化温度６５℃，稀释限点１０￣（－４）～１０￣（－５），体外存活期２０～２５ｄ。提纯病毒呈典型的核蛋白吸收，最大吸收峰为２６０ｎｍ，最小吸收峰为２４６ｎｍ。Ａ２６０／Ａ２８０＝１．２４。病毒外壳蛋白分子量为３３．３４ＫＤ。Ｗ—ＰＤ的粒子线状，长度为６００～７５０ｎｍ。在病组织超薄切片中可以看到风轮状和环状内含体。Ｗ—ＰＤ与ＷＭＶ—２的抗血清有明显的沉淀反应。以上结果表明，Ｗ—ＰＤ为ＷＭＶ—２的一个分离物。Ｗ—ＬＹ可侵染５科１３种植物。钝化温度７０℃，稀释限点１０￣（－３）～１０￣（－４），体外存活期３～５ｄ，可由桃蚜以非持久方式传播，与ＣＭＶ的抗血清有明显的沉淀反应。Ｗ—ＬＹ应为ＣＭＶ的一个分离物。ＷＭＶ—２是我省西瓜病毒病的主要毒原，其分出率为７５％，ＣＭＶ的分出率为１６．３５％。     

侵染丝瓜的黄瓜花叶病毒研究

１９９３年６月从温州市郊区丝瓜病株上获得一病毒分离物Ｌ－９３，人工摩擦接种５科２２种植物，Ｌ－９３能侵染５科１８种植物。Ｌ－９３在多种葫芦科植物上具有很强的侵染力。提纯病毒粒体为球形，直径约２８ｎｍ。在琼脂双扩散试验中，Ｌ－９３与ＣＭＶ抗血清具有密切的血清学关系。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其衣壳蛋白亚基分子质量为２９０００ｕ，分析植物组织中ｄｓＲＮＡ，发现有４条ｄｓＲＮＡ条带，长度分别为含３．３，３．０，２．２和０．９×１０３ｂ。根据以上结果，Ｌ－９３被鉴定为黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）。种子传毒试验表明，ＣＭＶ不能通过丝瓜种子传毒。在交互保护试验中，弱毒株系ＣＭＶＰｌ对Ｌ－９３侵染具有很好的保护效果，保护率达８９％，保护接种植株中，Ｌ－９３浓度明显低于未保护植株。     

侵染美国甜瓜和番茄的黄瓜花叶病毒毒原鉴定

甜瓜1396母本、甜瓜1396父本、甜瓜1472母本、甜瓜1472父本采自户县原种场(西安市种子公司制种地),番茄17106、番茄155×156、番茄4878,采自临潼(咸阳益民种苗公司制种地),上述种子均来源美国, 所采标样主要症状为花叶和畸形。     

侵染烟草的黄瓜花叶病毒株系分化研究

根据已报道的黄瓜花叶病毒(CMV)外壳蛋白(CP)基因序列合成1对引物,对侵染烟草的黄瓜花叶病毒贵州分离物的病毒外壳蛋白基因进行基因扩增和序列分析。结果表明:40个CMV贵州分离物和CMV株系亚组ⅠB系列CP基因核苷酸相似性为95.1%~100.0%,与CMV株系亚组ⅠA系列CP基因核苷酸相似性为92.3%~98.2%,亚组ⅡCP基因核苷酸相似性为78.2%~80.5%。表明贵州CMV分离物与CMV株系亚组ⅠB系列同源性关系更密切,因而它们都属于CMV株系亚组ⅠB系列。     

侵染西洋芹菜的黄瓜花叶病毒及品种抗病性测定

1987～1989年,从田间采集病害样本55个,根据鉴别寄主和血清学反应的结果,黄瓜花叶病毒(CMV)占样本总数的66.45％,是危害西洋芹菜的主要毒源。代表分离物Ce-20的各种性状与典型的黄瓜花叶病毒相似。苗期抗病性测定表明,在7个西洋芹菜品种、意大利冬芹和南京本地芹菜中,未发现对黄瓜花叶病毒的免疫和高抗品种,其中西洋芹84-3和84-6两个品种比较耐病,意大利冬芹较为抗病。     

侵染辣椒的黄瓜花叶病毒分离物的亚组鉴定及株系分析

根据已报道的黄瓜花叶病毒(CMV)外壳蛋白(CP)基因序列合成 1 对引物,对侵染辣椒的黄瓜花叶病毒湖北分离物的病毒外壳蛋白基因进行基因扩增和序列分析.结果表明:湖北省内不同辣椒主产区采集到的样品CP基因之间的核苷酸同源率高达98.2%～99.2%,与CMV亚组Ⅰ和亚组Ⅱ各株系之间的核苷酸同源率分别为92.1%～96.5%和72.1%～78.1%,并且和亚组Ⅰ中的ⅠB系列株系同源率更高.由此确认这4个CMV分离物属于亚组Ⅰ中的ⅠB成员.     

美人蕉黄瓜花叶病毒和菜豆黄花叶病毒研究

本文是对美人蕉上表现花叶，褪绿条纹和坏死线等症状的两个分离物进行的系统研究，分离物Ｃｌ系统侵染心叶烟，普通烟，蔓陀罗产生明显花叶症，在蚕豆，昆诺上产生局部枯斑，其ＴＩＰ为６０～６５℃，ＤＥＰ为１０＾－３～１０＾－４，ＬＩＶ为５～５ｄ，提纯病毒Ａ２６０／Ａ２８０＝１．１９，病毒粒子球形，直径３０ｎｍ，它与黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）抗血清呈阳性反应，为此，确证Ｃｌ病毒粒子球形，直径３０ｎｍ。它与黄瓜花叶病     

黄瓜花叶病毒（CMV）土壤非介体传播研究

对黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）土壤非介体传播的试验结果表明，土壤非介体传播是ＣＭＶ传播的新途径，不同作物间的传播效率有差异，一般ＣＭＶ传入根部后多数地上部不表现症状，但根系生长明显受到影响。文章还分析了ＣＭＶ能够以土壤非介体方式传播的原因。     

侵染观赏百合的黄瓜花叶病毒血清学检测方法研究

采用摩擦接种和PEG沉淀法对侵染观赏百合的黄瓜花叶病毒(CMV)进行了提纯,提纯病毒具有典型的核蛋白吸收峰曲线,D260 nm/D280 nm=1.236;利用提纯的CMV免疫大白兔制备抗血清,经微量沉淀法测定,其效价为1∶1024;用硫酸铵沉淀法提纯IgG,制备了辣根过氧化物酶标抗体,利用自制抗血清对DAS-ELISA、间接-ELISA和DIBA-ELISA检测侵染观赏百合的CMV灵敏度和检测范围进行了比较试验,结果表明DAS-ELISA检测的灵敏度较高,是间接-ELISA和DIBA-ELISA灵敏度的4倍;间接-ELISA和DIBA-ELISA的检测范围比DSA-ELISA宽.对21个观赏百合样品的CMV检测结果表明,DIBA-ELISA的检出率为66.67%,间接-ELISA的检出率为38.09%,二者的检出率分别比DAS-ELISA的检出率(23.81%)提高了42.86%和14.28%.     

利用DAS-ELISA检测侵染观赏百合黄瓜花叶病毒的研究

从制备的黄瓜花叶病毒———观赏百合分离物(CMV-Li)抗血清中提纯了IgG,并用过碘酸钠法进行辣根过氧化物酶(HRP)标记,建立了检测CMV-Li的DAS-ELISA(double antibody sandwich-enzyme-linked immumnosor-bent assay)系统,利用此检测系统并结合生物学方法,对临洮切花百合田间病样和百合不同部位带毒量进行了检测,结果发现CMV-Li的侵染率为23.81%,叶片的带毒量明显高于花和鳞茎.     

侵染观赏百合的黄瓜花叶病毒提纯和抗血清制备

采用PEG沉淀并结合差速离心技术,获得了精提纯的侵染观赏百合的黄瓜花叶病毒(CMV-Li).提纯病毒具有典型的核蛋白吸收峰曲线.OD260 nm/OD280 nm=1.236.将提纯病毒免疫兔子制备得CMV-Li抗血清.经微量沉淀法和间接ELISA法测定,其效价分别为1∶1024、1∶4096.两种方法相比,间接ELISA具有灵敏度高、特异反应强等优点.     

17个烟草品种（系）的烟草黄瓜花叶病毒抗性鉴定

烟草花叶病对烟草种植危害极大,推广应用高抗病品种是有效应对烟草花叶病危害的有效途径。为湖南省烟区筛选对烟草黄瓜花叶病抗性较好的烟草品种（系）提供参考,以17个烟草品种（系）为材料,对其进行烟草黄瓜花叶病毒（CMV）的人工接种,并于病毒接种后第14天、第21天、第28天、第38天调查其烟草黄瓜花叶病发病情况,鉴定其对烟草黄瓜花叶病的抗性。结果表明：17个烟草品种（系）在病毒接种后第14天的CMV抗性均表现为抗病。病毒接种后第21天,CZ-67、HC2030、C81-3-5、CZ-66的CMV抗性表现为抗病,YZ2008等12个品种（系）的CMV抗性表现为中抗;病毒接种后第28天,CS08、CS12、YZ10、M87的CMV抗性表现为感病,CZ-67等12个品种（系）的CMV抗性表现为中感;病毒接种后第35天,YZ2008、K326(CK1)、HC2032、CS12、YZ09、Ti245的CMV抗性表现为中感;CZ-67、CS08、云烟87(CK2)、HC2030、SY146-1、YZ10、M87、C81-3-5、CZ-66、G28的CMV抗性表现为感病。CS19对CMV的抗性在病毒接种后...     

黄瓜花叶病毒辣椒分离物侵染性克隆构建

 【目的】鉴定引起辣椒产生褪绿黄化症状的病原物,构建侵染性克隆。【方法】大田辣椒样品通过ELISA检测,结合病毒外壳蛋白SDS-PAGE及病毒RNA分析,初步确定辣椒中病原物为黄瓜花叶病毒（CMV）Phy株系。以辣椒病毒粒子RNA为模板,采用含T7启动子的不同正向引物通过RT-PCR扩增CMV-Phy全长基因组RNA1、RNA2和RNA3。PCR产物经过双酶切后连接到pUC118载体,并分别比较5种（DH5α、HB101、JM109、LE392和NM522）感受态细胞的转化效率。体外转录CMV-Phy的基因组cDNA克隆（pUC-P1、pUC-P2和pUC-P3）成RNA分子（P1P2P3）,分析其转录效率和侵染活性。P1P2P3与CMV的卫星RNA进行假重组,进一步确定CMV-Phy侵染性克隆的成功构建。【结果】引起辣椒产生褪绿黄化症状病原物为CMV,携带卫星RNA;心叶烟接种辣椒病毒粒子后同样产生褪绿黄化症状。HB101感受态细胞最适合CMV-Phy基因组转化。CMV-Phy基因组及其卫星RNA的大小如下：RNA1为3 356 nt、RNA2为3 048 nt和RNA3为2 220 nt,卫星RNA Pz-satRNA为384 nt（序列登陆号分别为：DQ402477,DQ412731 ,DQ412732 EF363688）。CMV-Phy的cDNA克隆体外转录在5′端添加G有利于提高转录效率,但影响其侵染活性;P1P2P3在苋色藜和心叶烟产生的症状与其病毒粒子产生的症状相一致。除了Pz-satRNA,P1P2P3还能作为T1-satRNA、Rs-satRNA和Tsh-satRNA辅助病毒;T1-satRNA可加重CMV-Phy在心叶烟症状反应,而其它3个卫星RNA则对此起减弱作用。【结论】以病毒粒子RNA为模板,采用touch-up PCR扩增参数在1个反应管中同时获得CMV-Phy基因组RNA1、RNA2和RNA3;CMV-Phy RNA1、RNA2和RNA3的5′端添加1个G最有利于侵染性克隆构建。     

黄瓜花叶病毒亚组研究进展

综述了黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）亚组研究的进展,根据寄主反应,血清学关系,病毒外壳蛋白肽链图谱分析,ｄｓＲＮＡ分析,核酸杂交,ＲＴ－ＰＣＲ产物酶解分析及核酸序列分析等方法,可将现有ＣＭＶ株系成分离物区分成２个亚组,尤其是利用单克隆抗体,核酸杂交、ＰＣＲ及核酸序列分析,能准确地将不同亚组的分离物区分开。从已知序列的ＣＭＶ株系分析,不同亚组株系的核苷酸序列同源率各ＲＮＡ组分仅为５８％￣７５％,同亚组株系的