Plant mycoplasmas: a cultivable spiroplasma causes corn stunt disease

A spiroplasma can be isolated and grown continuously in cell-free medium from stunted corn or from Drosophila injected with sap expressed from diseased corn. The organism is serologically related to, but not identical with, Spiroplasma citri, the causative agent of citrus stubborn disease. Leafhopers injected with cultured organisms induced typical symptoms of the corn stunt disease when placed on previously healthy corn plants.     

Plant-Pathogenic Mycoplasma-Like Organism: Maintenance in vitro and Transmission to Zea mays L

Mycoplasma-like bodies, isolated from corn plants that were infected with Rio Grande strain of corn stunt, were maintained in an artificial cell-free medium. The agent apparently multiplied. Leafhopper vectors that were injected with the pure cultures transmitted the agent to healthy corn plants and induced the corn stunt disease.     

Helical filaments produced by a Mycoplasma-like organism associated with corn stunt disease

Mycoplasma-like bodies with helical filaments were seen by phase contrast microscopy in juice expressed from tissues of plants infected with corn stunt agent. Each filament is bounded by a "unit membrane" and no cell wall, sheath, envelope, or second membrane has yet been discerned by electron microscopy. The association of these filaments with development of disease, their occurrence in phloem cells as seen by both freeze-etching and thin-section electron microscopy, the diagnosis of infection based on their presence in plants without symptoms, and their absence in noninfected corn are consistent with the hypothesis that these unusual filaments are formed by the mycoplasma-like organism presumed to be the corn stunt agent.     

玉米内生真菌的分离与鉴定

对不同品种的玉米种子及不同地区、不同部位的玉米内生真菌进行分离和鉴定。结果显示,8个不同品种的玉米种子,内生真菌检出率为25%,不同玉米品种的种子内所含的内生真菌种类和数目都不同,最高的检出率为40%,最低的检出率为10%。从玉米种子中分离得到的92个菌株,经形态学鉴定,分别属于14个属,出现频率最高的是木霉属,为34.78%。从不同地区的玉米组织中一共分离得到内生真菌168株,其中10株未产孢的没有鉴定,其他菌株经形态学鉴定分别属于26个属,以青霉属、曲霉属、头孢霉属为主,占内生真菌分离物总数的41.07%。对形态学鉴定为白僵菌属的10个菌株进行分子鉴定,均确定为球孢白僵菌(Beauveria bassiana)。此外,球孢白僵菌作为玉米的内生真菌,在国内还是首次分离得到。     

13种植物丝核菌对水稻、甜玉米、黄瓜和甘蓝的交互致病性

从13种植物上分离得到58个丝核菌(Rhizoctonia spp.)菌株,在确定其种类和融合群的情况下,将所有供试菌株分别接种于水稻(Oryza sativa L)、甜玉米(Zea mays var.saccharata)、黄瓜(Cucumis sativus)及甘蓝(Brassica capitata)上,测定其致病性.结果表明:从玉米(Zea mays)和甜玉米上分离得到的菌株(大部分归属于AG-1)的致病力最强;其次为其它植物上分离的菌株(归属于AG-4),其致病力属于中等;从其它植物上分离得到的、归属于其它融合群及非立枯丝核菌的菌株的致病力最弱.     

培养基营养成分对蛹虫草生长的影响

为了深入了解培养基有效成分对蛹虫草生长的影响,配制2种液体培养基和5种大米、玉米配比的栽培料,通过菌种培养和栽培比较表明,添加奶粉的培养液培养的液体菌种有利于蛹虫草的生长,不同大米和玉米配比的栽培料对蛹虫草的生长没有显著差异。     

中菲水稻病毒病的比较研究Ⅴ．水稻种质对病毒及其介体的抗性

采用网箱集团接种结合玻管定苗定虫接种技术，测定比较了中菲栽培稻的８１个品种和野生稻的３个种，对两国水稻东格鲁病和水稻草状矮化病的病原病毒及其介体的抗性，筛选出了能同时抗水稻东格鲁球状病毒（ＲＴＳＶ）、水稻东格鲁杆状病毒（ＲＴＢＶ）和水稻草状矮化状病毒（ＲＧＳＶ）的３个株系以上的多抗性抗源─中山红无名种、Ｏｒｙｚａｎｉｖａｒａ和Ｏ．ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ，高抗这些病毒两个株系以上的多抗性品种─汕优桂３３、金早６号、ＨＢ４３７、Ｐａｎｋｈａｒｉ２０３、ＩＲ２８、ＩＲ５８和赤块矮选．高抗ＲＴＳＶ、ＲＴＢＶ介体黑尾叶蝉的品种─ＩＲ２８、ＧａｍＰａｉ３０１２－１５和Ｐａｎｋｈａｒｉ２０３，高抗ＲＧＳＶ介体褐飞虱的品种─ＩＲ２８和ＩＲ６４．     

南京及周边地区螺原体菌株的系统发育及遗传多样性分析

利用系统发育分析和RAPD技术对我国南京及周边地区的20株昆虫和植物花螺原体的分类地位和遗传多样性进行分析。结果表明:大多数菌株与Spiroplasma melliferum聚类,位于以16S rDNA序列构建的螺原体系统发育树的Citri-Chry-sopicola-Mirum类群;菌株ZHUF0901和MF0905位于Apis群内,但二者又分为2个不同的分支。利用筛选的34条RAPD引物共检测出664个位点,其中多态性位点数644个,多态性比率为96.99%。UPGMA聚类分析表明,在相似性系数达到0.6时,与Spiroplasma melliferum聚类的18株菌可根据螺原体宿主的不同分为明显的3个类群,菌株ZHUF0901与MF0905各为一类。同一时期不同宿主(植物花、蜜蜂以及其他昆虫)中的蜜蜂螺原体Spiroplasma melliferum亲缘关系很近,说明自然界中螺原体可通过水平传播方式进行传播。     

缙云山土壤拮抗放线菌的分离、筛选与发酵条件优化

以烟草赤星病菌为指示菌,从缙云山土壤中分离和筛选出6株拮抗放线菌,其中JY-22对指示菌拮抗效果最好。对JY-22的抑菌谱测定结果表明:JY-22对棉花枯萎病菌、烟草赤星病菌、小麦纹枯病菌、柑橘疮痂病菌、茶云纹叶枯病菌和柑橘青霉病菌都具有较强的拮抗作用,抑菌率达41.9%~75.7%。通过单因子和正交试验对拮抗放线菌JY-22进行发酵条件的研究,结果表明,其最佳培养基组成和培养条件为:1 000 mL培养基中含葡萄糖2.0%、玉米粉1.5%、黄豆粉3.0%、氯化钠0.25%、碳酸钙0.2%,初始pH值为自然,250 mL三角瓶装液量为50 mL,发酵周期为72 h。     

安徽省草莓黄萎病病原的鉴定及主栽草莓品种的抗性评价

在安徽省主要草莓种植区随机采集的18个草莓黄萎病株进行病原菌的分离与鉴定,结果共分离出15个菌株,病原菌的形态特征基本一致。根据病原菌的形态学分析,初步确定分离到的菌株均为镰刀菌(Fusarium);选取真菌通用引物ITS1/ITS4对菌株基因组DNA进行PCR扩增并将扩增出的条带进行克隆、测序和序列比对,同时根据分子鉴定与形态学鉴定结果最终确定该病原菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum);根据序列比对的结果显示该病原菌可能来源于橡胶、木薯、棉花等木本植物。研制出可用于该病原菌的孢子悬浮液大量制备的优化液体培养基配方,解决了该病原菌由于菌丝生长过旺而产孢量很少的难题,同时申请了发明专利。通过人工伤根接种的方法将该病原菌的孢子悬浮液回接到健康草莓幼苗上,2周后植株表现出明显发病的症状。从发病植株中重新分离获得出该病原物。基于形态学、分子生物学鉴定及人工接种鉴定的结果,最终确定安徽省草莓黄萎病的病原菌主要为尖孢镰刀菌。对我国主栽的几个草莓品种进行黄萎病病圃鉴定,结果显示:枥木少女和红颜发病最重,其中红颜病株率最高,为17.79%;章姬、丰香和佐贺清香次之,而欧系和宁玉2个品种的黄萎病抗性较强。     

乙烯利对玉米生长和产量的影响

在玉米第 10至 12片叶展开时使用 10 %乙烯利可溶性粉剂 6 0 0mg/L ,70 0mg/L和 80 0mg/L喷雾 ,可使玉米植株明显矮化 ;药后 15d ,用药玉米比对照矮 36～ 41cm ;玉米抽雄后用药玉米比对照矮 6 0～ 78cm。当使用浓度上升到 10 0 0mg/L时 ,玉米产生明显药害。施用乙烯利后对基粗的影响不大 ,仅在施用后的初期对玉米基粗有一定增大作用。施用不同浓度的乙烯利后对玉米有一定增产作用 ,但增产幅度不如 0 0 4%云大 - 12 0水剂 0 0 2mg/L。由于乙烯利能明显使玉米植株矮化 ,在多风暴的地区使用还是有很大意义     

玉米细菌性条斑病病原细菌的鉴定

2003～2004年在江苏南京江浦县南京农业大学实验农场玉米上发现1种细菌性病害,从病叶上分离得到了17个菌株,接种玉米叶片发病症状与自然发病症状一致,并从回接病株上重新分离得到相同细菌,各菌株间致病力无明显的差异.根据致病性、菌体形态、培养性状、生理生化反应和16S rDNA序列分析等特性将该批病原菌鉴定为燕麦噬酸菌燕麦亚种(Acidovorax avenae subsp.avenae).本文首次在国内报道该病害.     

Plant Mycoplasmas: Serological Relation between Agents Associated with Citrus Stubborn and Corn Stunt Diseases

Growth-inhibition and precipitin tests established that antigens of the helical mycoplasma-like organism (Spiroplasma citri) associated with citrus stubborn disease are serologically related to antigens in corn infected with stunt disease but not in healthy corn.     

红树植物根内生放线菌的分离鉴定及其生理活性的评价

采集海南文昌清澜港头苑村红树林保护区的18种红树植物和3种半红树植物的根部样品,用1／10ATCC172培养基共分离到138株内生放线菌。经初步鉴定,分离到的138株内生放线菌分别属于继生菌属、小单胞菌属和链霉菌属3个属。对分离到的内生放线菌进行体外细胞毒活性和抗菌活性检测,结果表明,对肝癌SMMC-7721细胞有细胞毒活性的菌株有40株,抗MRSA活性的菌株有27株,所有测试菌株均未检测到抗白色念珠菌活性。对88株菌进行耐盐性检测,77株菌表现出耐盐或嗜盐特征,其中2株最高耐盐质量浓度ρ（NaCl）=150g·L-1,54株菌可在含有P（NaCl）=33g·L-1的培养基上生长良好。     

玉米浸泡液中噬淀粉乳杆菌的分离与鉴定

从玉米浸泡液中分离出３株细菌，这些细菌为兼性厌氧，革兰氏阳性，无运动性，不形成芽胞的杆菌，呈单在或短链状排列．无过氧化氢酶．４５℃生长，１５℃不生长，发酵纤维二糖、水杨苷，不发酵阿拉伯糖、棉子糖、鼠李糖，水解淀粉．这些细菌与Ｌ．Ｋ．Ｎａｋａｍｕｒａ（１９８１）所报道的噬淀粉乳杆菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ）的性状完全一致，证明由玉米制淀粉的过程中有噬淀粉乳杆菌参与．     

比较鼠抗腹水和兔抗血清对三种植物螺原体(Spiroplasma)的血清学关系

用小白鼠抗腹水和常规的兔抗血清对柑桔僵化病(Sc)、玉米矮缩病(CS-747)和花表面分离的(23-6)三种植物螺原体(Spiroplasma)进行生长抑制和菌体变形测定的比较。在二种方法测定中,小白鼠抗腹水都与免抗血清的结果趋势一致,而且小白鼠抗腹水比兔抗血清具有更强的免疫专一性和敏感性。三种植物螺原体在生长抑制和菌体变形的相互测定中都有明显差别,然而Sc和CS-747之间有一定的交叉反应。测定结果与前人提出的以免抗血清Sc和CS-747分别属于血清Ⅰ组中的I-1和I-3亚组,而23-6螺原体与血清Ⅲ组的结果相同。小白鼠抗腹水的制备还具有抗原用量少、抗体产量和效价高以及饲养管理方便等优点。     

河北省小麦及玉米纹枯病菌生物学特性初步研究

对2005年采自河北省10个县（市）的130株小麦丝核菌及采自6个县（市）的21株玉米丝核菌进行了生物学测定，结果表明不同的培养基成分对病菌的生长有明显的影响，菌株在各种培养基上的生长速度为：PDA培养基〉玉米粉培养基〉水琼脂培养基。在pH值为4～9时丝核菌均能良好生长，pH值为6时生长速度最快；通过番红0．KOH染色观察发现1330株小麦分离菌株中有双核丝核菌122株，占93．85％，多核丝核菌8株。占6．15％；21株玉米分离菌株中双核丝核菌2株，占9．52％，多核丝核菌19株，占90．48％；选取典型的丝核菌菌株进行了盆栽小麦、玉米相互接种的致病性测定，结果表明，不同类型的菌株间致病力强弱存在明显差异，且丝核菌对原寄主的致病力强。     

河南省玉米弯孢叶斑病菌遗传多样性的RAPD分析

为了解玉米弯孢叶斑病新月弯孢菌的遗传变异情况,利用8个随机引物对来自河南省不同地区的22个新月弯孢菌株进行RAPD分析.结果显示：①22个受试分离株共产生89条谱带,其中70条为多态性带,约占谱带总数的79%;②利用UPGMA法对DNA扩增图谱进行聚类分析,以遗传距离0.65为阈值,将22个受试菌株分为5种遗传类型.上述结果表明,河南省玉米弯孢叶斑病新月弯孢菌群体内具有丰富的遗传多态性,即存在明显的种内遗传分化现象.     

玉米植株生长叶片组织的离体培养研究

以玉米植株生长叶片组织作为外植体,无菌条件下接种于MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培养基,培养8d,叶片细胞逐渐增殖培养生成芽苗;将芽苗接种于MS+0.5mg/L6-BA+0.8mg/LNAA培养基,培养7d,芽苗周围诱导出玉米幼苗;将玉米幼苗转接入含0.8mg/LNAA的MS培养基中,培养8d,幼苗诱导生根,形成完整的玉米组织培养植株。