外源褪黑激素对罕山白绒山羊皮肤绒毛周期性变化规律的影响

试验旨在分析外源褪黑激素(Melatonin,MT)对绒山羊绒毛生长特性与皮肤毛囊组织周期性变化规律的影响。选择10只体重和产绒量相当的罕山白绒山羊周岁母羊为试验动物,分为两组,每隔1个月按照2 mg·kg~(-1) BW的剂量在埋植组绒山羊耳后皮下埋植MT。连续采集13个月(从2014年12月到2015年12月)的肩胛部皮肤和绒毛样品,每月测定其绒毛长度,并制作皮肤毛囊组织切片。结果表明,埋植MT使绒山羊体表常年有绒毛覆盖,春季和秋季出现脱绒现象,之后快速长出新绒毛,绒毛脱落时次级毛囊活性降低。表皮的角质层厚度在毛囊生长前期随着绒毛的生长逐渐变薄,而在毛囊生长后期逐渐变厚,毛囊进入休止期时其厚度达最高点;与表皮其它三层的变化趋势正好相反。研究结果提示,12月开始持续埋植MT将缩短绒毛生长周期,其表皮及次级毛囊活性也会随之出现周期性变化。     

褪黑激素影响绒山羊毛囊生长发育相关基因表达的研究进展

褪黑激素是动物体内广泛存在的一种小分子吲哚类激素,是基于光周期、季节性及生殖节律的一种神经内分泌激素,它对绒山羊的皮肤毛囊发育和绒毛生长等生理过程具有重要的调控作用.文章综述了褪黑激素对绒山羊毛囊生长发育相关基因表达的影响,揭示了褪黑激素对绒山羊毛囊生长发育的调控作用及其可能的机制,为提高绒山羊绒毛产量和质量提出可靠高...     

内蒙古成年绒山羊皮肤基因表达的研究

构建了成年绒山羊次级毛囊兴盛期皮肤组织cDNA文库。在GenBank数据库注册非冗余ESTs 392条。序列号为CD051766～CD052157。共有319个已知功能基因。未分类的基因108个；基因和蛋白质表达类70个；代谢类43个；细胞结构类45个；细胞信号和传导类30个；细胞和机体防御的基因15个；参与细胞分裂的基因8个。发现了一些可能和绒毛生长有关的基因：TGFβbinding protein，EDRK enriched factor，growth factor receptor，G protein associated receptor，dermal papilla derived protein 2，homeobox gene otx2，kallikrein7，jagged-1，thrombos pondin-1 and p53 inducible protein。     

内蒙古白绒山羊皮肤毛囊发生发育规律的研究

本文研究了内蒙古白绒山羊从胎儿期到生后期皮肤毛囊的发生发育规律。在胎儿期，从４５日龄开始，每隔１５ｄ，用剖腹产手术的方法取胎儿３～５只，分别在头顶、颈上　甲、背、荐、颈侧、肩、体侧、股和腹等１０个部位采取约１×１ｃｍ的皮肤样本；生后期分初生、１～９个月、１岁、１岁半、２岁和３岁等１４个阶段，每阶段在活羊体侧部采取约１×１ｃｍ的皮肤样本。用石蜡切片法制做皮肤切片。经显微观测，得到如下结果：初级毛囊在胎儿期４５日龄前发生，次级毛囊在７５日龄前发生，皮脂腺和汗腺在７５日龄时出现，竖毛肌在９０日龄出现，粗毛１０５日龄时在全身各部位长出，绒毛在１２０日龄时长出。表皮在６０～７５日龄时形成完整结构，真皮层在７５～９０日龄时分化出乳头层和网状层。初级毛囊的发育在胎儿期１３５日龄时已完成，而次级毛囊发育直至出生后６月龄。毛囊群结构主要为三毛型，少数其它毛型。初次级毛囊比例为１：７～１３。     

内蒙古阿尔巴斯绒山羊皮肤切片染色观察

用改良的Sacpic染色法对不同时期绒山羊皮肤组织切片进行染色，观察了初级毛囊在不同生长阶段的变化．比较了不同季节次级毛囊组织结构的差异，以及羔羊与成年羊毛囊群结构的区别。观察到毛囊在不同的生长阶段具有不同组织结构特征，其组织切片被染的颜色和形态均有着显著的区别。     

皮下埋植褪黑激素对陇东绒山羊皮肤毛囊生长发育的影响

休绒期及绒生长期对陇东绒山羊母羊皮下埋植褪黑激素（MT）颗粒埋植剂,分别在缓释期内的每月中旬切取皮肤样品,实验室制作切片、观测研究。结果表明：毛囊直径、毛囊深度、毛囊密度、S/P与对照组差异均不显著（P〉0.05）;毛囊活率试验组高于对照组（P〈0.05）,高水平MT组略高于低水平组（P〉0.05）。外源MT可提高绒山羊产绒量是因为提前并持续激活次级毛囊生长发育,延长了绒生长期,增加了羊绒长度与数量。     

内蒙古绒山羊与辽宁绒山羊皮肤毛囊周期性变化的比较研究

对内蒙古阿尔巴斯白绒山羊和辽宁绒山羊皮肤及毛囊的组织学周期性变化作了比较研究，结果表明：表皮生发层细胞从3月份开始活动并向下延伸，此时毛囊也开始重建，绒山羊毛囊8-9月份进入兴盛期，12月份进入退行期，2-3月份为休止期。它们进入兴盛期和持续的时间不同，初级毛囊除毛球宽外，其它各性状阿尔巴斯白绒山羊均大于辽宁绒山羊，而次级毛囊各性状辽宁绒山羊都大于阿尔巴斯白绒山羊，在大多数月份二者差异显著。毛囊深、密度、S／P、毛球宽和生长期是影响产绒量的因素。     

外源褪黑激素对罕山白绒山羊绒毛生长相关基因表达差异的影响

试验旨在筛选罕山白绒山羊皮肤毛囊生长脱落相关的关键基因,并揭示外源褪黑激素（Melatonin,MT）对罕山白绒山羊绒毛生长相关基因表达差异的影响。选择10只体重平均为33.3 kg、年龄为20月龄的罕山白绒山为实验动物,分为2组,从2014年12月开始每隔1个月按照2 mg/（kg·BW）的剂量在埋植组绒山羊耳后皮下埋植MT,于2015年9月采集2组罕山白绒山羊皮肤组织进行RNA-Seq测序,对差异表达基因进行筛选、功能注释和富集分析。共筛选获得了475个在埋植组与对照组中差异表达的基因,其中,上调表达基因392个,下调表达基因83个。KEGG富集性分析表明,差异表达基因主要参与白细胞经内皮迁移、趋化因子信号通路、fcγ-R介导的吞噬作用、吞噬体、造血细胞谱系、补体级联和混凝级联、细胞因子—细胞因子受体相互作用、NF-kappa B信号通路、PI3K-Akt信号通路等。PI3K-Akt信号通路可能在褪黑激素调控皮肤毛囊发育中发挥重要作用。研究结果为进一步研究MT影响皮肤毛囊生长的分子机理提供依据。     

BMP2、HSP27基因在不同地域绒山羊皮肤组织中的表达分布研究

为探究不同地域环境与绒山羊次级毛囊发育相关因子表达分布的相关性,本实验选取原产地内蒙古绒山羊和辽宁绒山羊(2岁)以及引进到甘肃环县2年的内蒙古绒山羊和辽宁绒山羊(2岁)各8只,分别采用透射电镜技术确定毛囊的超微结构特点;利用qPCR技术检测BMP2、HSP27基因在绒山羊皮肤组织中的表达差异;通过免疫组化技术测定同种绒山羊在不同地域环境下BMP2、HSP27蛋白在毛囊中的定位表达。结果显示:8月份绒山羊毛囊结构完整,处于毛囊生长期;BMP2、HSP27基因mRNA在原产地与引入地绒山羊皮肤组织中均有表达,两地绒山羊皮肤组织中BMP2基因表达几乎无差异(P>0.05),但HSP27基因mRNA在引入地与原产地表达量相比差异显著;免疫组化发现BMP2、HSP27蛋白主要弱表达于表皮层、毛囊的内根鞘,而HSP27蛋白不仅在表皮层、次级毛囊的内根鞘表达,其在毛囊外根鞘、毛乳头也呈强阳性表达。本研究表明BMP2、HSP27基因在不同地域绒山羊皮肤组织中表达分布存在差异。     

内蒙古阿尔巴斯白绒山羊皮肤毛囊结构研究

对内蒙古阿尔巴斯白绒山羊皮肤、毛囊进行观察,结果显示,阿尔巴斯白绒山羊皮肤毛囊结构与其他绒山羊基本一致,由表皮层、真皮毛囊层和真皮网状层组成.表皮极薄,主要由角质层和生发层构成.真皮毛囊层以疏松的结缔组织为主,内有毛囊和皮脂腺等结构.毛囊群由1～4个初级毛囊和若干个次级毛囊组成.初级毛囊发生较早,附属结构齐全;次级毛囊发生较晚,无汗腺.内蒙古阿尔巴斯白绒山羊的皮肤毛囊结构有其品种特征,具有较高的密度和S/P(次级毛囊/初级毛囊)值,所以研究其皮肤毛囊结构对于提高内蒙古阿尔巴斯白绒山羊羊毛品质和产绒量具有重要的意义.     

内蒙古绒山羊皮肤蛋白质双向电泳条件优化及图谱建立

试验旨在建立内蒙古绒山羊皮肤蛋白质双向电泳图谱。采用液氮研磨法提取蛋白质,通过双向电泳技术对蛋白质进行分离,分别对不同的蛋白质沉淀方法、上样量和SDS-PAGE凝胶浓度进行比较。结果显示,使用2-D Clean-up试剂盒处理、上样量为20 μg、采用10%的SDS-PAGE凝胶浓度时可获得重复性好和分辨率高的双向电泳图谱,便于后续的内蒙古绒山羊皮肤差异蛋白质组学分析。     

Effect of Different Concentrations of Melatonin on Proliferative Activity of Hair Follicle Stem Cells in Inner Mongolia Cashmere Goat

This study aimed to investigate the effect of different concentrations of melatonin on proliferative activity of hair follicle stem cells in Inner Mongolia cashmere goat.The five levels melatonin including 0,100,300,500 and 700 pg/mL were designed to stimulate the hair follicle stem cells in Inner Mongolia cashmere goat,the MTT method was used to detect cell proliferation activity for 5 days.The result showed that 2 days later,the groups stimulated by melatonin did not cobble-stone arrangement and began to appear spindle cell and cell growth was not uniform compared with the control group (0 pg/mL),the groups showed obvious effect on cell proliferation relatively.4 days later,the cell proliferation of groups stimulated by 500 pg/mL melatonin were significantly greater than that of 0,100 pg/mL (P<0.01;P<0.05),but there was no significant difference with 700 pg/mL melatonin stimulation group (P>0.05).The optimal melatonin concentration of hair follicle stem cell proliferation was 500 pg/mL in Inner Mongolia cashmere goat.     

不同浓度褪黑素刺激对内蒙古绒山羊毛囊干细胞增殖活性的影响

试验旨在探究不同浓度褪黑素刺激对内蒙古绒山毛囊干细胞增殖活性的影响.采用0 (对照组)、100、300、500、700 pg/mL 5个浓度梯度分别对内蒙古绒山羊毛囊干细胞连续刺激5 d,MTT法分别检测各组细胞活性.结果表明,不同浓度褪黑素刺激2 d后,相较于对照组 (0 pg/mL),褪黑素刺激组未见成团细胞出现,开始出现长梭形细胞且细胞生长不再均一,各刺激组均表现出较高的增殖活性;刺激4 d后,500 pg/mL褪黑素刺激组毛囊干细胞增殖活性显著高于0、100 pg/mL (P<0.01;P<0.05),但与700 pg/mL褪黑素刺激组差异不显著 (P>0.05).因此,500 pg/mL是内蒙古绒山羊毛囊干细胞增殖的最适浓度.     

胰岛素样生长因子结合蛋白3和胰岛素样生长因子结合蛋白5基因在内蒙古白绒山羊皮肤中的表达研究

本研究旨在探明胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor-binding protein,IGFBP)在内蒙古白绒山羊绒毛发育的不同生长阶段皮肤组织中的表达变化情况。试验采用实时荧光定量PCR技术,对内蒙古白绒山羊绒毛生长发育的各个时期皮肤中IGFBP-1~IGFBP-6基因的表达进行了测定,并通过埋植褪黑素组改变绒毛生长周期的研究,来鉴定IGFBP-1~IGFBP-6基因中高表达的结合蛋白的作用。结果表明,IGFBP-3和IGFBP-5在绒山羊绒毛生长发育的各个时期的皮肤组织中均有表达,但是IGFBP-5的表达相对于IGFBP-3的表达具有很强的规律性。结果提示,在内蒙古白绒山羊的绒毛发育过程中,IGFBP-5可能是一个主要的调控因子。     

陇东绒山羊皮肤毛囊发生发育规律研究

对陇东绒山羊进行皮肤切片制作,实验室显微观测毛囊发生发育情况。结果表明：陇东绒山羊羔羊初生时初级毛囊已发育完全;6月龄时次级毛囊发育成熟。皮肤毛囊深度、宽度、密度、活性及s/p值随季节,以年为周期呈规律性变化。s/p值母羔6月龄时（11.2±1.9）、母羊周岁及2岁期9月份（11.5±1.0、11.5±2.1）、公羔6月龄时（11.2±1.2）最大,s/p值与绒毛的生长发育相关,具有品种特性,可以作为间接选择指标进行早期选择。     

内蒙古绒山羊Homeoboxc9基因在皮肤毛囊中的表达

试验通过原位杂交检测Homeoboxc9（Hoxc9）基因在皮肤毛囊中的表达情况,结果显示Hoxc9在胚胎期75 d的上皮细胞中表达,伴随着毛囊的生长发育,Hoxc9基因分别在初级毛囊的毛母质、毛乳头、内根鞘、外根鞘和毛干几个部位表达;在次级毛囊的内根鞘和绒干表达。在这个过程中毛囊角质化细胞大量增殖,表明在毛囊发育中Hoxc9基因对于角质化细胞的增殖可能起一定作用。     

控制光照对内蒙古白绒山羊母羊营养物质消化率的影响研究

试验对比研究了舍饲和放牧条件下控制光照对内蒙古白绒山羊营养利用规律的影响,以期为光控增绒条件下绒山羊日粮的高效配制提供科学依据。试验在舍饲和放牧条件下分别开展研究,两种条件下各选择12只2.5周岁内蒙古白绒山羊母羊,随机分为光控组和对照组,其中光控组通过采用光控增绒棚将光照时间限定为7h,对照组采用自然光照,对比研究光照控制对绒山羊干物质采食量以及干物质、粗蛋白和中性洗涤纤维等营养物质表观消化率的影响。结果表明,在舍饲条件下:(1)整个试验期光控组的干物质采食量均稍高于对照组,特别是在光控增绒中期光控组干物质采食量高于对照组(P0.05)。(2)在试验初期,营养物质表观消化率稍高于对照组(P0.05)。而在光控增绒中期,营养物质表观消化率稍低于对照组(P0.05)。在光控增绒末期,粗蛋白表观消化率高于对照组(P0.05);在放牧条件下:(1)整个试验期光控组的干物质采食量均稍高于对照组,在光控增绒中期光控组干物质采食量高于对照组(P0.05)。(2)在光控增绒中期和末期,光控组营养物质表观消化率均高于对照组(P0.05)。     

内蒙古绒山羊105 d胎儿皮肤的基因表达

选择105d绒山羊胎儿体侧部皮肤组织构建cDNA文库，随机挑取克隆进行表达序列标签（ESTs）测序，共测序1152个质粒，合格的大于100bp的高质量ESTs846个，平均长度为443．2bp。对525个绒山羊胎儿皮肤组织已知功能基因的ESTs进行分类，可分为细胞分裂类18个，细胞信号类65个；细胞结构蛋白基因73个；细胞防御类21个；基因／蛋白表达126个；代谢类的69个；未分类的153个。发现了Wnt-4、Bmpr-Ib、ASIP gene、Ectodysplasin等重要的与毛囊分化相关的基因。     

内蒙古白绒山羊附睾精子冷冻效果的研究

本试验把不同温度下的样品分成3个处理组,通过检测精子与繁殖力有关的重要指标研究3个处理组的冷冻效果,结果显示, 在3个不同的环境下收集附睾,室温下(19 ℃)收集附睾精子(处理1组)的冷冻效果最好,解冻后活率为(55.0±3.4)%;4 ℃下收集的精子(处理2组)冷冻解冻后的活率为(35.0±2.5)%;37 ℃下收集的精子(处理3组)的冷冻效果较差,解冻后活率为(23.0±2.5)%。通过对处理组中冷冻和解冻后两个阶段的精子指标的测定,研究了精子活率与其他指标的关系,得出白绒山羊附睾精子能够成功的保存。