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实时荧光定量PCR技术在植物检疫中应用的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
实时荧光定量PCR技术是在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光探针,利用荧光信号积累实时监测整个PCR反应进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析,具有操作简便、快速高效、高通量、高敏感性等特点。近年来,实时荧光定量PCR技术在植物检疫研究上不断深入,大大提高了植物疫情的检测效率和监测防治水平。综合论述了实时荧光定量PCR技术在由真菌、细菌、病毒和线虫引发的植物疫情的检测与应用。 相似文献
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越来越多的基因组测序给特异性引物和探针的设计带来了极大的支持。最近有研究表明,基于定量聚合酶链式反应(qPCR)方法的技术成功应用于发酵过程中的微生物计数以及乳制品中益生菌数量的计算。基于qPCR方法的技术进步包括实时荧光定量PCR技术,不仅可以计数活菌数量,还可以在单一反应体系中检测多个微生物菌群数量,且能构建高通量PCR流程。实时荧光定量PCR技术在食品工业中的应用已证明其可靠性,尽管如此,该技术在乳品工业中的广泛使用还需要更多的技术支持和标准化方法。综述了实时荧光定量PCR技术及其在乳品微生物学中的最新研究与应用进展。 相似文献
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通过对PCR法、Southern Blot法、IPCR法与实时荧光定量法4种转基因外源基因检测方法的比较认为:PCR扩增虽十分灵敏,但有时会出现假阳性扩增,因而对外源基因是否整合还需进行验证.Southren方法准确性高,特异性强,但存在费时、费力的缺点.同时实际操作中就需要较大量的植物材料来提取DNA,而转基因植物的愈伤组织在无菌条件下经过筛选、重新分化后,一般都比较细弱,不宜大量取样.IPCR法虽可以转座突变分离基因,但当转座子作为外源基因通过农杆菌介导等方法导入植物时,由于T DNA整合到染色体中引起插入突变并分离基因造成误差.实时定量PCR技术的特异性和高信噪比为转基因拷贝数定量提供了方便,实时定量PCR法,花费试剂少、节省劳力和时间,需要DNA样品量少、并不进行放射检测.同时对实时荧光定量PCR法计算进行了详细介绍. 相似文献
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荧光定量PCR技术是进行生防菌和病原菌动态变化监测的有效手段,文章从定量PCR技术原理及其在植物病害生物防治中的应用两个方面进行了阐述. 相似文献
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荧光定量PCR技术是进行生防菌和病原菌动态变化监测的有效手段,文章从定量PCR技术原理及其在植物病害生物防治中的应用两个方面进行了阐述。 相似文献
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PCR技术在植物病害检测中的应用* 总被引:4,自引:0,他引:4
PCR技术是20世纪末出现的新兴生物技术。当前,该技术广泛地应用于分子生物学、医学、农学等学科。简要介绍了在植物病害检测中,病原特异的PCR引物的设计、模板的制备、PCR反应体系对检测灵敏度和特异性的影响等几个方面,并综述PCR技术在植物病害检测中的应用。 相似文献
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采用形态学观察与PCR技术相结合的方法,针对口岸截获的可疑菜豆象和四纹豆象幼虫和成虫进行快速鉴定。采用异硫氰酸胍方法提取昆虫基因组DNA,并根据特异性引物,采用PCR技术从截获的可疑菜豆象幼虫和成虫中均扩增得到192 bp的特异性条带,从截获的可疑四纹豆象幼虫和成虫中均扩增得到181 bp的特异性条带,经测序比对,扩增产物序列与菜豆象和四纹豆象Cyt b目的基因序列完全相同。由此证实可疑样本即为菜豆象和四纹豆象的幼虫和成虫。该方法缩短了鉴定周期,6 h内即可快速准确鉴定未成熟的虫态,为口岸检验检疫及快速通关提供依据。 相似文献
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采用 RAPD 方法对水牛梭形住内孢子虫、待定种及黄牛枯氏住内孢子虫缓殖子基因组 DNA 进行了分析,待定种 PCR 产物的电泳带型与枯氏住肉孢子虫的差异较梭形住内孢子虫大,这与二者表型性状一致的研究结果不吻合.对3种包囊种特异性的 PCR 指纹进行了筛选,回收和纯化了3种包囊种特异性的 DNA 片段,待定种0.7kb 片段经α-~(32)PdATP 标记后用作探针,只与同源 DNA 杂交,不与其它包囊、宿主细胞和艾美耳球虫杂交,用 pGEM-T Easy Vector 对该片段克隆成功,并测出其全长序列,为进一步设计特异引物建立标准 PCR 诊断方法和用作核酸探针奠定了基础。 相似文献
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应用PCR方法通过毛发进行哺乳动物性别鉴定 总被引:13,自引:2,他引:13
以哺乳动物的新鲜毛发和在冷冻条件下保存4个月的毛发作为材料。从毛囊中提取DNA,应用PCR方法扩增SRY基因片段,ZFX/ZFY基因片段,探讨哺乳动物性别鉴定的最优化PCR方案。结果表明,毛发DNA和血液DNA均可获得相同的扩增结果。证实了毛发作为PCR扩增材料是可靠的。对不同材料量、不同模板量、不同提取方法进行比较,优化实验方案,达到1根毛发用Chelex-100提取得到的DNA即可以成功地进行 相似文献
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实时荧光定量PCR技术作为一项新兴技术,越来越受到人们的重视.它以快速、准确定量、便捷等优点广泛应用于科学研究各个领域,近年来,实时荧光定量PCR技术在植物病害研究上不断深入,大大提高了植物病害的检测效率和监测防治水平.结合了最近几年来应用于检测和鉴定植物病原病害的实时荧光定量PCR过程中引物与探针的设计、反应过程、结果评价情况,综合论述了实时荧光定量PCR技术在由真菌、细菌、病毒、线虫引发的植物病害的检测与应用. 相似文献