苦丁茶紫外图谱共有峰率和变异峰率双指标序列分析法

用3种溶剂氯仿、无水乙醇及水,系统提取苦丁茶等不同极性区间成分,测定其紫外图谱,研究样品的异同,采用图谱共有峰率和变异峰率双指标序列分析法分析苦丁茶紫外图谱。结果表明:该方法可以准确地区分不同产地和不同级别的苦丁茶。利用共有峰率和变异峰率双指标序列分析法可以对2个或多个样品进行方便可靠的鉴别,是一种符合中药自身特点的光谱指纹图谱分析方法。     

西番莲叶红外指纹图谱研究

[目的]研究西番莲（Passiflora dulis）叶红外指纹图谱。[方法]运用双指标序列分析法。以共有峰和变异峰率为指标,计算样品相对于该标准品的共有峰率和变异峰率,并按照共有峰率和变异峰率的大小建立不同的序列。[结果]海口、儋州、万宁、屯昌的西番莲样品红外图谱比较吻合,但也存在一定的差异。[结论]该研究为快速地把相似的西番莲样品归为一类提供了科学依据。     

臭灵丹红外指纹图谱共有峰率和变异峰率双指标序列分析法

【目的】对2个以上中草药样品进行定性评价,以阐明不同产区间的相似程度,为中药材真伪鉴定和品质评价奠定基础。【方法】利用共有峰率和变异峰率2个指标,以不同臭灵丹样品的红外指纹图谱为标准,计算出所测样品相对于标准品的共有峰率和变异峰率。按照共有峰率的大小,建立了不同的共有峰率和变异峰率双指标序列方法。【结果】文中指纹图谱显示,臭灵丹不同产区样品间最大共有峰率为93.33%,最小共有峰率为38.89%,变异峰率最大为114.29%,最小为0.00%。【结论】红外指纹图谱中的共有峰率和变异峰率在一定程度上能反映出不同产区臭灵丹的相近情况,为臭灵丹的进一步研究提供了理论依据。     

天然麝香ATR-FTIR红外指纹图谱的比较

利用衰减全反射红外光谱技术(ATR-FTIR),获得源自林麝、原麝、马麝3个物种的22份天然麝香样本的红外指纹图谱,对图谱的基本特征进行分析;采用双指标序列分析法对全部样本间的相似程度分析,确定天然麝香的特征峰。结果表明:天然麝香的化学成分构成,受产地、个体、采集时间及麝的种类等因素的影响;天然麝香样本种内,共有峰率在48.4%~100.0%之间,变异峰率在3.7%~68.8%之间;天然麝香样本种间,共有峰率在42.4%~100.0%之间,变异峰率在3.8%~85.7%之间;天然麝香整体红外指纹图谱,共有峰率在42.4%~100.0%之间,变异峰率在3.7%~85.7%之间;22份天然麝香样本,在3 275.58~3 260.86 cm-1等15个波数区间存在特征峰,代表麝香中的主要化学成分,如大环酮类物质、多肽及蛋白质类物质、吡啶类物质和甾体类物质等。     

白花蛇舌草紫外指纹图谱共有峰率和变异峰率双指标序列分析法

【目的】建立云南不同产区白花蛇舌草的紫外指纹图谱,阐明不同产区间白花蛇舌草的相似程度和差异,为白花蛇舌草的真伪鉴定和品质鉴定评价奠定基础。【方法】采用紫外分光光度法测定云南23个不同产区白花蛇舌草紫外图谱,考察白花蛇舌草乙酸乙酯、甲醇、水三种极性溶剂的提取物各波段的稳定性及重现性,对紫外图谱进行平均值、平滑和二次微分处理,计算白花蛇舌草不同提取物的共有峰率和变异峰率。【结果】建立的白花蛇舌草指纹图谱:最佳称样量为0.5000 g,乙酸乙酯、甲醇和水3种溶剂最佳提取时间分别为30、40、30 min,3种溶剂提取液在48 h内稳定。白花蛇舌草紫外指纹图谱显示,不同产区样品间最大共有峰率为92.3%,最小共有峰率为22.2%。【结论】利用紫外光谱结合共有峰率和变异峰率双指标序列分析法能阐明不同产区间白花蛇舌草的的相似程度,为白花蛇舌草药材真伪鉴定和品质评价奠定基础。     

广西柚子皮红外指纹图谱的研究

[目的]建立广西柚子皮的红外指纹图谱。[方法]采用傅里叶变换红外光谱法(FT-IR)测定来自不同产地的广西柚子皮,并应用红外Omic软件对试验数据进行处理。[结果]试验建立了广西柚子皮红外特征指纹图谱共有模式,标定了6个共有峰。[结论]该方法专属性强、快速、稳定,可用于广西柚子皮的质量评价。     

南方红豆杉人工林药材活性成分指纹图谱鉴别研究

利用高效液相色谱(HPLC)指纹图谱技术,建立HPLC指纹图谱的色谱条件,研究了重庆地区11批6年生栽培南方红豆杉枝叶色谱指纹图谱的共有特征规律。结果表明:SHIMADZU C18色谱柱(250mm×4.6μm,ID5μm),乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,波长227nm,流速0.8mL/min为HPLC指纹图谱的最佳色谱条件;在此色谱条件下,栽培南方红豆杉色谱指纹图谱中共有17个共有色谱峰,其中峰9可作为参照峰;共有峰相对保留时间和相对峰面积的平均RSD均小于2.0%;非共有峰面积在4.1%～8.3%之间,符合色谱指纹图谱研究规定小于10%的检测要求;全图谱共有峰的相似度均≥93%。表明所建立指纹鉴别方法具有稳定性高、精度准、重现性好,选定的HPLC指纹图谱可以对栽培南方红豆杉药材组分的一致性作出可靠的判断。     

马蓝红外指纹图谱的鉴别

利用傅里叶变换红外光谱法(FTIR)对不同部位、不同产地的马蓝药材进行红外指纹图谱鉴别研究,找出根、茎、叶的指纹特征及其差异.结果表明:根、茎在1260 cm-1处存在共吸收峰,而叶在此处不存在吸收峰(或者不明显);经一阶、二阶导数光谱,傅里叶去卷积分析后发现有更多的差异峰.不同产地马蓝茎、叶的指纹图谱很相似,但茎与叶平均图谱的相似度有较大差异,10批产地马蓝茎的红外光图谱与茎平均图谱的相似度为94.29-98.72,与叶平均图谱的相似度为85.74-90.90;10批产地马蓝叶的红外光图谱与叶平均图谱的相似度为93.30-97.46,与茎平均图谱的相似度为82.16-89.03.FTIR法具有方便、快速、高效、无污染、前处理简单的优点,可用于马蓝药材的鉴别和质量控制.     

高山红景天GH3基因克隆及序列分析

参照已知植物GH3的氨基酸序列,通过比较找出相对保守的氨基酸序列设计简并引物,通过RT-PCR和RACE法得到高山红景天GH3的3'端,其长度838bp,编码200个氨基酸的602 bp位于GH3的开放阅读框内和一段长36bp的3'非编码区(3'UTR).序列比较结果表明,GH3推导的氨基酸序列与已公布的几种植物GH3氨基酸序列有较高的序列同源性.     

彝药毒清药和香樟根的红外指纹图谱分析

[目的]建立鉴别毒清药和香樟根药材的红外指纹图谱。[方法]采用傅立叶变换红外光谱法对毒清药和香樟根进行红外指纹图谱分析。[结果]毒清药和香樟根药材具有各自不同的红外特征指纹图谱。[结论]试验所得毒清药和香樟根药材的红外特征指纹图谱可作为这2种药材的鉴别依据。     

高山红景天(Rhodiola sachalinensis)试管苗缓慢生长法保存及试管苗DNA含量分析

为建立高山红景天试管苗的缓慢生长法保存体系,在低温、弱光及不同浓度甘露醇条件下对两种来源的试管苗进行缓慢生长法保存,并对其恢复生长植株的DNA含量进行分析.结果表明:低温(6±1)℃和弱光600 lx(8 h·d-1)条件下,试管苗在添加有甘露醇10 g·L-1的1/2MS+蔗糖20 g·L-1+琼脂7 g·L-1培养基中可保存18个月,平均存活率在85%以上,且恢复生长后试管苗长势良好.上述方法保存后恢复生长的植株经流式细胞仪检测表明核DNA含量没有发生改变.该结果为高山红景天种质资源缓慢生长法保存的有效性和可行性提供了理论依据.     

高山红景天生殖生态学——有性生殖与无性生殖的调查

通过原产地调查、栽培试验、分根扦插及种子萌发实验等，研究了高山红景天的繁殖及扩散方式。结果表明：高山红景天有两条生殖途径，一条是有性生殖，另一条是无性生殖。在原产地生境条件恶劣的情况下，有性生殖能力弱，主要靠无性生殖来产生大量后代，保存物种；而在太平沟人工移栽条件下，两种生殖方式都能正常进行。     

高山红景天不同器官氨基酸含量的分析

[目的]为更好地利用高山红景天提供科学依据。[方法]测定了高山红景天不同器官的氨基酸含量。[结果]高山红景天地上部分和地下部分的氨基酸含量和组成不同,地上部分的氨基酸含量高于地下部分,人体必需氨基酸的含量以叶片中最多,为55.75～87.21mg/g;其次是茎,为36.13～37.39mg/g;根中最少,仅13.17～14.30mg/g。半必需氨基酸以根中最多,叶次之,茎中最少。不同器官的氨基酸含量因发育时期而变化,茎、叶中的氨基酸含量从营养生长期到果熟期呈由高变低的趋势,根中的氨基酸含量变化不大。[结论]高山红景天不同器官中的氨基酸含量与组成不同。     

高山红景天UGT72B14-2基因克隆及其原核表达

[目的]旨在构建UGT72B14-2的原核表达体系,为进一步研究其功能与应用奠定基础.[方法]利用RT-PCR技术从高山红景天茎叶中分离获取UGT72B14-2基因,在大肠杆菌中表达后,经Ni2+亲和柱纯化、PD-10柱脱盐处理,利用SDS-PAGE检测目标蛋白.[结果]测序结果表明UGT72B14-2基因长度为1 422 bp,预测其编码473个氨基酸,蛋白质相对分子量(Mr)为51.49 kDa,等电点(pI)为6.30;SDS-PAGE检测结果表明当初始菌液OD600约0.6时,诱导4h后目标蛋白即可大量表达,纯化、脱盐和浓缩处理后可获得较高纯度的重组蛋白.[结论]UGT72B14-2属于UDP-葡萄糖基转移酶家族的一员,能够在大肠杆菌中表达.     

高山红景天愈伤组织的玻璃化法保存及植株再生

采用玻璃化法对高山红景天的愈伤组织进行了超低温保存研究.高山红景天愈伤组织在8%蔗糖中暗培养5 d后,先用25℃的60%玻璃化保护剂PVS2预处理20 min,转至100% PVS2于-20℃乙醇浴中处理2 h后,投入液氮进行保存,48 h后使用40℃水浴快速化冻.冻存后的愈伤组织用液体培养基MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+40%蔗糖洗涤3次,再转入MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.5 mg/L固体培养基中在22℃条件下进行暗培养,2周后转入光照培养（光照强度800 lx）. 6周后观察到高山红景天愈伤组织呈鲜绿色,长势较为旺盛,存活率可达到78.24%.冻存后的愈伤组织可诱导成苗.      

野生蒲公英联合高山红景天对糖尿病模型小鼠的降血糖作用研究

[目的]探讨长白山野生蒲公英（Taraxacum mongolicum）联合高山红景天（Rhodiola sachalinensis）对糖尿病小鼠的降血糖影响。[方法]选取30只昆明种小鼠,其中24只造成糖尿病模型,分为5组,分别为正常对照组、四氧嘧啶模型组、高山红景天组、长白山野生蒲公英组和联合剂量组。采用自制的水煎液进行灌胃给药,1次/d,连续5 d,测定糖尿病模型小鼠的血糖值。[结果]给药5 d后,各试验组小鼠血糖浓度均明显降低,与四氧嘧啶模型组相比存在极显著差异（P〈0.01）。[结论]高山红景天、长白山野生蒲公英、高山红景天与蒲公英联合对糖尿病小鼠都有明显的降血糖作用。     

氮源和碳源对高山红景天愈伤组织生长和再分化的影响

以高山红景天种子诱导的愈伤组织为材料,改变MS培养基中氮源和碳源的种类和比例,研究愈伤组织的生长和分化情况,结果表明：MS培养基中硝酸铵含量低而硝酸钾含量相对高时,愈伤组织生长量比对照高,硝酸铵含量高而硝酸钾含量低时,愈伤组织生长量比对照低,蔗糖浓度50 g/L时愈伤组织生长速度最快;MS培养基中减少硝酸铵含量而增加硝酸钾含量或保持对照含量时,愈伤组织分化率提高幅度大,减少硝酸钾含量而增加硝酸铵含量或保持对照含量时,愈伤组织分化率提高幅度小,在蔗糖浓度为10、30、50和70 g/L时,浓度越低愈伤组织分化率越高.     

高山红景天叶片愈伤组织诱导与植株再生

以高山红景天叶片作为外植体,研究了影响愈伤组织诱导、芽增殖、生根的主要因素。结果表明:高山红景天叶片切块诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 6-BA 2mg/L NAA0.5mg/L,诱导率达88.33%;高山红景天叶片切块经诱导可产生3种色泽的愈伤组织,其中只有绿色愈伤组织诱芽容易,绿色愈伤组织在附加1mg/L6-BA 0.1mg/LNAA的MS培养基中有利于芽的分化和增殖,培养7周左右,平均每个外植体分化形成的再生小植株数达到21.33个;增殖苗转入1/2MS培养基中生根率高达100%。     

采收前短期红膜遮阴处理对高山红景天根的生长及红景天苷产量的影响

[目的]为提高栽培高山红景天的经济价值,研究了采收前短期红膜遮阴处理对高山红景天根生物量、红景天苷含量及产量的影响。[方法]对高山红景天分别进行了10、20、30和40 d的红膜遮阴处理,测定了雌株和雄株高山红景天根中红景天苷的含量和产量。[结果]红膜遮阴处理显著提高了高山红景天根中红景天苷的含量和产量,并且无论是雌株还是雄株,高山红景天根中红景天苷的产量均表现为在红膜遮阴处理20 d时最高,增幅分别达到21.21%和32.91%。[结论]从生产实际出发,在收获前20 d对高山红景天进行遮红膜处理,有利于提高红景天苷的产量。     

氮源和碳源对高山红景天愈伤组织诱导的影响

以高山红景天种子和叶片为外植体,以MS为基本培养基,研究不同氮源含量比例及不同碳源浓度对高山红景天愈伤组织诱导的影响。结果表明,适当调节不同氮源比例可以提高愈伤组织诱导率,而且与适宜浓度的植物生长调节剂配合使用效果更明显;叶片为外植体时,高山红景天雌株和雄株叶片均在硝酸铵和硝酸钾含量为500／3050（mg／L）的培养基上愈伤组织诱导效果最好。糖的种类和浓度也影响诱导率,蔗糖的效果最好,其浓度因材料不同而有所不同,种子和雌株叶片在浓度为3％时诱导率最好,雄株叶片在3％～7％时都能取得好的效果。