五种不同来源柔嫩艾美耳球虫耐药性虫株的检测

五种不同来源柔嫩艾美耳球虫耐药性虫株的检测秦建华，赵月兰，田勇，张明勇（张家口农业高等专科学校０７５１３１）国外，近年来对鸡球虫的耐药性进行了大量研究，为合理选择和正确使用抗球虫药以防治球虫病奠定了良好的基础。我国在这方面研究较少，实际用药过程中十分...     

柔嫩艾美耳球虫毒害艾美耳球虫变位艾美耳球虫交叉免疫试验

柔嫩艾美耳球虫毒害艾美耳球虫变位艾美耳球虫交叉免疫试验黄兵，赵其平，何林华，吴薛忠，陈兆国，史天卫（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所，２００２３２）鸡感染球虫后会产生一种抵抗再次感染的免疫反应，这种免疫反应具有种的特异性，即感染某种球虫不能保护抵抗另...     

鸡柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫双重PCR检测方法的建立

为了建立一种能够快速实现对鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)和巨型艾美耳球虫(E.maxima)同时进行检测的双重PCR方法,基于2种艾美耳球虫各自的ITS-1基因筛选2对特异性引物,对制备的阳性DNA样品进行PCR扩增,凝胶电泳检测结果显示,分别在约450bp和150bp处出现目的条带。对PCR反应中的退火温度、MgCl2浓度、DNA模板量等进行优化。结果表明,当退火温度为59℃、MgCl2浓度为2.5mmol/L、DNA模板量为2μL时,双重PCR扩增结果最佳。特异性检测结果显示,所建立的双重PCR对环形泰勒虫、羊巴贝斯虫、隐孢子虫和蓝氏贾第虫的扩增结果均呈阴性,表明建立的方法具有较高的特异性。成功建立了柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫双重PCR检测方法,为临床中鸡球虫病的快速诊断提供了一种可靠的检测方法。     

广东和广西地区鸡艾美耳球虫耐药性调查

采用相对印囊产量(Relative oocyst production,ROP)、病变记分减少率(Reduction of lesion scores,RLS)、最适抗球虫活性(Percent of optimum anticoccidial activity,POAA)和抗球虫指数(Antkoccidialindex,ACI)4种指标对采自广东和广西地区的17株鸡球虫分离株的12种抗球虫药的耐药性进行综合评价。结果显示野外分离株普遍存在多重耐药性,47.1%的虫株对3~7种受试抗球虫药呈现完全耐药;5.9%的虫株对其中9种抗球虫药完全耐药,对其余3种抗球虫药也呈现重度耐药。更为严重的是,100%和76.5%的虫株对6种以上的受试抗球虫药分别呈现中度耐药以上及重度耐药以上。100%和75.0%的受试抗球虫药都有至少半数的虫株(9株)分别呈现对其中度耐药以上和重度耐药以上。12种受试抗球虫药中,磺胺氯吡嗪钠粉有4株虫株呈现对其敏感,只有1株呈现对其完全耐药,是本次试验耐药性调查表现最好的药物;其次是尼卡巴嗪、二硝托胺预混剂和盐酸氣苯胍预混剂这3种药物,各有1株呈现对其敏感,其他药物均没有虫株呈现对其敏感,占受试药物的66.7%。     

鸡柔嫩艾美耳球虫对托曲珠利的耐药性检测

为研究鸡柔嫩艾美耳球虫对不同剂量托曲珠利的耐药性,从张家口地区规模化养鸡场采集未使用过抗寄生虫药物鸡只的粪便并进行球虫卵囊分离和复壮。试验设5个感染用药组（Ⅰ组,25 mg/L剂量;Ⅱ组,50 mg/L剂量;Ⅲ组,75 mg/L剂量;Ⅳ组,100 mg/L剂量;Ⅴ组,125 mg/L剂量）和2个对照组（Ⅵ组,感染不用药组;Ⅶ组,不感染不用药组）,Ⅰ～Ⅴ组采用托曲珠利饮水给药方式,Ⅵ组和Ⅶ组的鸡正常饲喂日粮,Ⅰ～Ⅵ组进行球虫感染,检测耐药虫株。结果显示,25 mg/L剂量组和50 mg/L剂量组的托曲珠利产生耐药,75 mg/L剂量组、100 mg/L剂量组和125 mg/L剂量组的托曲珠利不耐药。结果表明,张家口地区鸡柔嫩艾美耳球虫耐托曲珠利的浓度为50 mg/L,为张家口地区鸡球虫病的防治提供了参考。     

鸡艾美耳球虫抗药性研究进展

当前,在抗球虫药已作为添加剂加入到饲料中的集约化养鸡场,由于球虫对许多药物的敏感性下降而导致了球虫病经常发生。为了从根本上解决这一生产问题,目前关于球虫抗药性的研究,也从报道抗药性虫株的出现、调查现场虫株的药物敏感性等方面渐渐转向了抗药机理的探讨,下面就有关艾美耳球虫抗药性方面的研究状况作一概述。1　抗药性的检测手段1.1　鸡体测定法　检测现场鸡球虫抗药性的最常用方法是鸡体测定法,它是指“将供试药物按一定比例与饲料均匀混合后饲喂幼雏,经一定时间后接种球虫,最后通过某些指标和标准判定球虫抗药性[6]”。这种方法…     

鸡艾美耳球虫分子生物学研究进展

鸡艾美耳球虫分子生物学研究进展杨林，陈利，王芳（云南省农业生物技术重点实验室）家禽球虫病是由艾美耳球虫引起的一种严重危害家禽生长发育的疾病。家鸡艾美耳球虫现知共有９种，其中柔嫩艾美耳球虫（Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌｌａ）和毒害艾美耳球虫（Ｅ．ｎｅｃａｔ...     

3株柔嫩艾美耳球虫安徽株的同工酶检测

为了检测安徽3株柔嫩艾美耳球虫的耐药情况,采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳,进行了乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖磷酸异构酶(GPI)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)等同工酶酶谱分析,并与敏感株和参考耐药株进行比对。试验结果显示,敏感株与地方株之间的3种同工酶酶谱存在差异,敏感株间无差异,耐药株间有差异,同时各酶的结果也不一致。说明在建立参考株与单一药物耐药株同工酶酶谱的情况下,可以用同工酶检测法对球虫进行耐药性检测。     

安徽3株柔嫩艾美耳球虫对5种抗球虫药的耐药性检测

采用鸡体试验法,以抗球虫指数、最适抗球虫活性百分率、病变记分减少率和相对卵囊产量4项指标综合判定,安徽庐江县、青阳县和肥西县3个地区鸡柔嫩艾美耳球虫对磺胺氯吡嗪钠、马杜拉霉素、氨丙啉、妥曲珠利、地克珠利的耐药性。结果显示,庐江株对氨丙啉和妥曲珠利敏感,对磺胺氯吡嗪钠和地克珠利完全耐药,对马杜拉霉素中度耐药;青阳株对地克珠利和妥曲珠利敏感,对磺胺氯吡嗪钠和马杜拉霉素完全耐药,对氨丙啉中度耐药;肥西株对磺胺氯吡嗪钠敏感,对妥曲珠利中度耐药,对地克珠利、马杜拉霉素和氨丙啉完全耐药。     

一毒害艾美耳球虫田间分离株耐药性分析

用鸡体实验法,以相对卵囊产量(ROP)、病变记分减少率(RLS)、最适抗球虫百分数(POAA)和抗球虫指数(ACI)等4项指标,分析了一株毒害艾美耳球虫对复方磺胺氯吡嗪钠(20％磺胺氯吡嗪钠+4％二甲氧苄啶)、血痢宁(磺胺氯吡嗪钠可溶性粉)、贝尔球康(又称鸡球虫散,含青蒿、仙鹤草、何首乌、白头翁、肉桂等)、百球清(妥曲珠利)、马杜球败(马度米星铵预混剂)等5种抗球虫药的耐药性.结果显示:该株毒害艾美耳球虫对百球清无耐药性,对复方磺胺氯吡嗪钠和血痢宁有轻度耐药性,对贝尔球康无耐药性或轻度耐药性,对马杜球败有完全耐药性.提示该养殖场应停止使用马杜拉霉素,改用妥曲珠利或贝尔球康,但必须进行轮换用药或联合用药,以延长药物的使用寿命.     

球虫分子生物学检测方法研究进展

球虫病是由球虫引起的一种发病率高、致死率低、显著影响动物生长,对畜牧业危害最严重的寄生虫病之一.建立高效的球虫检测方法对防控球虫病具有重要意义.为改善传统诊断方法的局限性,目前基于核酸的新兴诊断技术正在发展.论文综述了国内外球虫分子生物学检测方法的研究进展,分析了各种技术的优点和问题,展望了球虫分子生物学技术的应用前景...     

细胞培养技术在鸡球虫研究中的应用

球虫的细胞培养是球虫在体外合适的细胞体系中进行发育的过程,能让人们在"无控"和"透明"环境下研究抗球虫药物的作用机制和虫体发育机制等.目前,该技术已在球虫学研究中广泛应用,主要集中于细胞培养体系优化、抗球虫制剂的疗效、虫体入侵相关蛋白功能研究以及检测手段的优化等方面.论文从以上几个方面综述细胞培养技术在鸡球虫学研究中的...     

鸡卡氏住白细胞虫的分子分类和分子检测的研究概况

鸡卡氏住白细胞虫是危害养鸡业的一种常见寄生原虫,其感染可引起鸡的贫血、腹泻、全身广泛性出血、产蛋下降、高死亡率.近年来,鸡卡氏住白细胞虫病严重危害鸡的健康,给养鸡业造成了较大的经济损失.此病的诊断主要依靠临床症状、流行病学、病理剖检和血液涂片等做出判断.随着现代分子生物学技术的发展,PCR技术在寄生虫的分类和检测方面已成为一类快速、敏感、高效的新型方法.本文综述了近年来国内外在鸡卡氏住白细胞虫的分子分类和分子检测方面的研究概况.     

鸡球虫分子检测及遗传变异的研究进展

鸡球虫病是由艾美耳球虫所引起的一种呈世界性分布的寄生原虫病,给世界养禽业造成巨大的经济损失.传统的病原检测方法费时且不够稳定.近年来,新的分子技术不仅为鸡球虫病的诊断提供了快速、灵敏、特异、稳定的检测方法,而且以其为基础可用来建立可靠的种、株鉴定及耐药株与敏感株间差异分析的方法,为球虫群体生物学、流行病学、疫苗研究及遗传变异和耐药机制的相关研究等提供了重要手段.本文对鸡球虫分子检测技术和遗传变异方面的最新研究进展作一概述.     

鸡球虫重组活载体疫苗研究进展

对细菌和病毒为载体的鸡球虫重组活载体疫苗研究进行了综述,旨在为鸡球虫病的免疫预防提供新思路和参考.     

新城疫病毒检测方法研究进展

新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种禽类急性、高度接触性、致死性传染病,被国际动物卫生组织(OIE)列为危害禽类的A类传染病之一.由于该病毒毒力存在差异,容易出现毒力返强或是导致发生非典型症状,快速、可靠、准确的诊断方法对于新城疫的监测和控制具有重要意义.本文从病毒的分离与鉴定、电镜技术、血清学方法以及分子生物学诊断技术4个方面介绍了新城疫病毒的检测技术,为今后兽医临床上检测新城疫病毒提供一定的参考.     

乳铁蛋白检测方法研究进展

乳铁蛋白是一种重要的多功能蛋白,具有抗菌、抗肿瘤、抗过敏、调节免疫等多种生物学活性,相关基础研究及产品开发已经引起了广泛关注.因此,乳铁蛋白检测方法也备受关注.尤其是不同方法各自的优势、灵敏度、准确度及稳定性等方面具有一定的差异,这也直接影响着该方法的适用范围.本研究对适合不同类型生物样品中乳铁蛋白的检测技术进行了阐述,主要有分光光度法、高效液相色谱法、酶联免疫吸附法、高效亲和色谱法、高效毛细血管电泳法以及表面等离子共振技术等检测技术,并分析比较了这些检测技术的不同优缺点,以期能为乳铁蛋白的研究与开发实践中选择恰当的检测方法提供一定的参考.     

牛传染性鼻气管炎检测方法的研究进展

牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)是引起牛传染性鼻气管炎的病原。文中介绍了牛传染性鼻气管炎的各种检测方法的研究进展,包括病理组织学诊断、病毒的分离鉴定、免疫学检测和核酸分子检测,为牛传染性鼻气管炎的检测提供了有价值的参考。     

鸡卵黄抗体研究进展

当用某种抗原免疫产蛋母鸡时,可产生相应的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)储存于卵黄中。母鸡经免疫应答后,可从其不断产出的鸡卵黄中得到大量的、均一的、高效的IgY。IgY类似哺乳动物的IgG,但又有其独特的优点。本文对IgY的性质、免疫程序、分离提纯方法及其在检测诊断上和疾病防治方面的应用作了较详细的论述。可以预见,随着研究的进一步深入,IgY的应用将不断扩大。     

成都地区鸡球虫种类的初步调查

我们于2000年9－11月对成都地区5个郊县或郊区9个鸡场的47只鸡进行了鸡球虫种类的初步调查，发现成都地区鸡球虫种类有世界公认的7个种中的6个种，即：柔嫩，毒害，和缓，早熟，巨型及布氏艾美氏球虫，调查结果为我成都地区鸡球虫的预防用药提供了科学依据。