神经生长因子诱导PC12细胞对细胞周期的影响

目的:观察神经生长因子(NGF)诱导PC 12细胞周期的变化,以建立体外神经元样细胞周期的研究模型。方法:用流式细胞仪检测不同质量浓度NGF诱导及50μg/L NGF诱导不同天数PC 12细胞的细胞周期。结果:(1)不同质量浓度NGF诱导PC 12细胞7d,细胞百分比G0/G1期升高,S和G2/M期降低,25,50,100μg/L NGF诱导组与阴性对照组,50与25,100μg/L NGF诱导组比较,差异有显著性(P<0.01或P<0.05);(2)50μg/L NGF诱导PC 12细胞不同天数的细胞百分比,G0/G1期从诱导第1天始升高,至7d达到最高,9d又有下降,S期从诱导第1天开始降低,至7d最低,9d又有上升,诱导1,3,5,7,9d与基础组比较,差异有显著性(P<0.05或P<0.01);G2/M期从诱导3d降低,至7d降至最低,9d又有升高,诱导3,5,7,9d与基础组比较,P<0.01。G0/G1期、S期、G2/M期细胞百分比,诱导9d与诱导7d比较,差异有显著性(P均<0.01)。结论:未经NGF诱导的PC 12细胞具有有丝分裂能力,经NGF诱导的PC 12细胞逐渐减少增殖,大部分细胞停滞在G0/G1期,趋向于神经元样分化,50μg/L NGF诱导7d的PC 12细胞可用于神经元样细胞周期模型的实验研究。     

三氧化二砷对大鼠成骨细胞增殖及BMP-2的影响

[目的]观察不同剂量三氧化二砷(As2O3)对体外培养的大鼠成骨细胞增殖、骨形成蛋白-2(BMP-2)基因表达的影响。[方法]不同浓度(10、1、0.1μmol/L)的三氧化二砷作用于体外培养的成骨细胞48和72 h后,观察成骨细胞的形态,采用MTT法检测成骨细胞的增殖,并通过RT-PCR检测成骨细胞BMP-2基因的表达情况。[结果]10μmol/L As2O3组可见部分成骨细胞变圆变小,细胞核固缩、碎裂,细胞膜皱褶、凹陷;1μmol/L As2O3组成骨细胞数目众多和分裂相明显;0.1μmol/L As2O3组成骨细胞间连接紧密。10μmol/LAs2O3组大鼠成骨细胞OD值明显低于对照组,而72 h OD值低于48 h OD值,有显著性差异(P0.01);1μmol/L组As2O3OD值明显高于对照组,而72 h OD值高于48 h OD值,有显著性差异(P0.01);0.1μmol/L As2O2组72 h OD值与48 h OD值无显著差异(P0.05),且OD值与对照组无显著差异(P0.05)。RT-PCR结果表明,10μmol/L组72 h BMP-2基因表达明显低于48 h,且BMP-2的表达明显低于对照组,有显著性差异(P0.01);1μmol/L As2O3组72 h BMP-2基因表达与48 h无显著差异(P0.05),且BMP-2基因表达与对照组(P0.05);0.1μmol/L As2O3组72 h BMP-2基因表达明显高于48 h,且BMP-2的表达明显高于对照组,有显著性差异(P0.01)。[结论]As2O3对体外培养大鼠成骨细胞增殖和BMP-2 mRNA表达具有双向调节作用,并且呈剂量-时间依赖性。     

L-精氨酸加用谷氨酰胺对大鼠重度烧伤后早期肝脏功能的影响

目的研究L-精氨酸(L-Arg)、谷氨酰胺(G1n)及两者合用(L-Arg G1n)对保护大鼠重度烧伤后早期肝脏功能、扩张肝脏血管、缓解内毒素血症的作用。方法180只SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、生理盐水组(B组)、L-Arg组(C组)、Gln组(D组)和L-Arg Gln组(E组),每组36只。每组分为8、16、24、48h四个时相点,每个时相点9只大鼠。A组大鼠进行模拟的烫伤,其他组大鼠制作重度烧伤模型。A、B组使用生理盐水5mL腹腔注射,C组使用L-Arg300mg/kg腹腔注射,D组使用G1n300mg/kg灌胃,E组同时使用L-Arg300mg/kg腹腔注射和G1n300mg/kg灌胃。在各时相点,检测NO2-/NO3-和内毒素含量。结果NO2-/NO3-含量:C、E组NO2-/NO3-升高明显,与同时相点A、B、D组比较差异有统计学意义(P<0.01);B、D组肝组织中NO2-/NO3-轻度升高,但与A组比较差异也有统计学意义(P<0.05)。门静脉血浆内毒素的含量:B组门静脉血浆内毒素明显高于其他组同一时相点的大鼠(P<0.01),E组门静脉内毒素含量较低,与其它组同一时相的大鼠比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论对重度烧伤早期大鼠,采用L-精氨酸 谷氨酰胺对保护肝功能与缓解内毒素血症的作用较佳。     

补饲不同剂量黄芪对家兔分类白细胞的影响

[目的]了解黄芪对动物机体血液生理的影响。[方法]将32只本地健康杂交家兔,随机分成4组,1、2、3组为试验组,4组为对照组,依次在各组基础日粮中分别添加102、03、00、g黄芪粉,研究黄芪对家兔外周血液中白细胞影响情况。[结果]血液中的淋巴细胞除3组与4组差异不显著(P>0.05)外,其他各组间存在显著性差异,1组与2、3、4组差异显著(P<0.05);2组与3、4组差异极显著(P<0.01)。单核细胞除1组与23、组差异不显著(P>0.05)外,其他各组间差异极显著(P<0.01)。嗜中性粒细胞1组与2组差异显著(P<0.05),1组与3、4组差异极显著(P<0.01);2组与3、4组差异极显著(P<0.01);3组与4组差异不显著(P>0.05)。血液中的嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞各组间差异不显著(P>0.05)。[结论]家兔补饲黄芪粉后各类白细胞百分含量与对照组相比均有不同程度的变化,其中以添加20 g黄芪粉对增加家兔免疫能力及抗病力效果较好。     

西沙比利联合复方芦荟胶囊治疗老年功能性便秘的临床观察

目的 观察西沙比利联合复方芦荟胶囊治疗老年功能性便秘的疗效.方法 将96例功能性便秘患者随机分为3组,分别为西沙组、芦荟组和联合组,每组32例.各组的治疗方案是:西沙组给予西沙比利,芦荟组给予复方芦荟胶囊,联合组给予西沙比利联合复方芦荟胶囊,均连续治疗4周.比较3组的疗效.结果 3组患者治疗前便秘症状及疗效评估问卷得分情况差异无统计学意义(P＞0.05).治疗4周后问卷结果显示:(1)所有患者的排便困难、过度用力排便,粪便性状,排便时间,下坠、不尽、胀感,频率和腹胀问题较治疗前改善(P＜0.01);(2)联合组的改善情况均优于同期的西沙组与芦荟组(P＜0.01);(3)治疗后芦荟组粪便性状改善情况均优于同期的西沙组(P＜0.05);(4)西沙组腹胀改善情况均优于同期的芦荟组(P＜0.01).结论 西沙比利联合复方芦荟胶囊治疗老年性功能性便秘疗效较好.     

水稻近等不育系的涵义、选育及应用前景

采用一种新方法,将表达增强型绿色荧光蛋白的大肠杆菌作为吞噬源,研究克氏原螯虾血细胞暴露于不同浓度的微囊藻毒素(Microcystin,MC)4 h后血细胞吞噬能力的变化,荧光倒置显微镜下观察具有吞噬能力的血细胞,以及血细胞对表达绿色荧光蛋白的大肠杆菌的整个吞噬过程.结果显示,各组血细胞的吞噬百分比没有显著性差异,空白组(L-15血细胞培养液+甲醇)中血细胞的吞噬百分比与对照组(L-15血细胞培养液)相比有上升趋势;处理组1(L-15血细胞培养液+1 μg/L MC-LR)、处理组2(L-15血细胞培养液+10 μg/L MC-LR)、处理组3(L-15血细胞培养液+100μg/L MC-LR)和处理组4(L-15血细胞培养液+1 000μg/L MC-LR)血细胞的吞噬百分比与对照组相比有下降趋势,并存在一定的剂量效应.对照组与空白组、4个处理组的吞噬指数均有显著性差异;其中对照组与处理组1～3的差异极显著,而空白组和4个处理组间没有显著性差异,处理组之间均没有显著性差异.结果表明,增强型绿色荧光蛋白能在大肠杆菌内稳定、持续地表达,可利用其直接观察血细胞的吞噬和包囊过程,能迅速、准确地得出吞噬百分比及吞噬指数;微囊藻毒素作用后,血细胞的吞噬指数显著降低,进而影响克氏原螯虾的免疫能力.     

虾青素对大强度运动致大鼠骨骼肌氧化应激损伤及细胞凋亡的影响

目的研究黄芪甲苷对力竭运动致大鼠骨骼肌损伤及细胞凋亡的影响。方法将40只SD大鼠随机分为安静对照组、力竭运动组及黄芪甲苷100和200 mg/kg组,除安静对照大鼠外,均需通过跑步训练建立力竭运动模型,黄芪甲苷组大鼠给予药物干预。结果与安静对照组比较,力竭运动组大鼠乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性、丙二醛(MDA)含量、骨骼肌细胞凋亡率及Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (caspase-3) mRNA表达均极显著增加(P<0.01),过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性、B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2) mRNA及磷脂酰肌醇3激酶p85亚基(PI3Kp85)、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达均极显著降低(P<0.01);与力竭运动组比较,黄芪甲苷100和200 mg/kg组大鼠的LDH和CK活性、MDA含量、骨骼肌细胞凋亡率及Bax和caspase-3 mRNA表达均显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),CAT和SOD活性、Bcl-2 mRNA及PI3Kp85、p-Akt和mTOR蛋白表达均显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论黄芪甲苷对力竭运动致大鼠骨骼肌损伤具有保护作用,该作用与抑制氧化应激及通过激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制骨骼肌细胞凋亡有关。     

跑台运动对慢性应激致抑郁模型大鼠学习记忆及前额叶皮质c-fos表达的影响

目的:探讨4周中等强度跑台运动对慢性不可预知性应激致抑郁大鼠开场实验及空间学习记忆能力、血清皮质醇和前额叶皮质(PFC)自由基代谢及c-fos表达的影响.方法:将30只大鼠随机分为对照组、应激模型组及应激运动组3组,每组10只.应激模型组及应激运动组大鼠每日进行慢性不可预知性应激1次,连续28天,同时应激运动组大鼠进行4周跑台运动.跑台运动结束后检测所有大鼠血清皮质醇水平及PF区自由基含量,运用开场实验测试大鼠主动活动能力及探索行为,Y迷宫实验测试大鼠空间学习记忆能力,采用免疫组织化学结合图像半定量方法对PF区c-fos神经元的数量、面积及灰度进行测量和分析.结果:(1)与应激模型组比较,应激运动组大鼠穿越格数、直立次数及修饰次数显著增多(P＜0.01,P＜O.05),中央格停留时间缩短(P＜0.05),粪便颗粒减少(P＜0.05);(2)与应激模型组比较,应激运动组大鼠血清皮质醇水平下降(P＜0.05),PF区SOD活性增强(P＜0.05),MDA含量下降(P＜0.05);应激运动组大鼠在Y迷宫训练中达到标准时训练时间缩短,电击次数减少(P＜0.05),Y迷宫记忆能力测试中,应激运动组大鼠错误次数少于应激模型组;(3)与应激模型组比较,应激运动组大鼠PFC区原癌基因c fos免疫阳性神经元面移积及数量表达均增加(P＜0.05),灰度值虽降低,但没有显著差异(P＞0.05).结论:长期跑台运动可提高抑郁大鼠的学习记忆能力,可能与跑台运动降低抑郁大鼠血清皮质醇水平、增强脑抗氧化能力及上调前额叶皮质c-fos的表达有关.     

反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Flt-1 mRNA表达的影响

[目的] 探讨ghrelin对蒙古绵羊脐静脉内皮细胞的血管内皮生长因子VEGF及其受体Flt-1 mRNA表达的影响.[方法] 试验分为4组: I组,空白对照组;II组,脂质体组(不加寡核苷酸);III组(SCON),20 μmol/L正义寡核苷酸组;IV组(ASCON),20 μmol/L反义寡核苷酸组.上述各组均在培养24、36、48 h后,采用实时荧光定量方法检测VEGF及其受体Flt-1 mRNA表达情况的变化.[结果] VEGF和Flt-1熔解曲线表明扩增效果好,培养24 h, VEGF mRNA I组相对表达量为0.076 9,II组为0.076 8,III组为0.076 9,3组之间无显著性差异(P＞0.05),IV组VEGF mRNA 相对表达量下降为0.024 2,且与I、II、III组有显著性差异(P＜0.05).培养36 h,前3组相对表达量分别为0.059,0.051,0.051 4,3组之间无显著性差异(P＞0.05),第IV组为0.024 2,与前3组比较有显著性差异(P＜0.05).培养48 h,前3组相对表达量分别为0.061,0.055 2,0.052 1,3组之间无显著性差异(P＜0.05),第IV组为0.011 5,与前3组比较有显著性差异(P＜0.05).培养24 h,Flt-1 mRNA I组相对表达量为0.078 6;II组为0.078 2,III组为0.078 1, 3组之间无显著性差异(P＞0.05),IV组Flt-1 mRNA 相对表达量下降为0.025 6,且与I、II、III组有显著性差异(P＜0.05).培养36 h,前3组相对表达量分别为0.078 1,0.078 4,0.078 2,3组之间无显著性差异(P＞0.05),第IV组为0.022 8,与前3组比较有显著性差异(P＜0.05).培养48 h,前3组相对表达量分别为0.069 1,0.078 0,0.069 3,3组之间无显著性差异(P＞0.05),第IV组为0.021 5,与前3组比较有显著性差异(P＜0.05).可见,VEGF受体Flt-1mRNA的表达与VEGF相似.二者均在 I组、II组表达量无差异,具有较高的表达量,随着时间的延长没有明显变化;在III组表达轻微下降,但与I组和II组无显著性差异(P＞0.05);IV组的表达量显著下降(P＜0.05),并且随着时间的延长至逐渐下降.[结论] 反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Flt-1的mRNA表达有下调作用.     

白内障与血液及眼球组织中锌含量关系的实验研究

目的探讨白内障与血液及眼球组织中锌含量的关系.方法用亚硒酸钠复制SD大鼠白内障模型,给预防组大鼠眼内补锌4周后,观察各组实验大鼠晶体的变化并测定其血液和眼球组织中的锌含量.结果模型组及预防组大鼠血液中的锌含量均明显低于正常对照组,其差异具有显著性(P＜0.01和P＜0.05);预防组大鼠眼球组织中的锌含量明显高于正常对照组,其差异具有非常显著性(P＜0.01).眼内补锌的预防组大鼠晶体混浊程度较模型组的轻.结论白内障大鼠血液中的锌含量降低,而眼球组织中的锌含量升高.锌对硒性白内障的发生和发展具有抑制和延缓作用.     

产销通路的建立及招商引资意见

针对大陆农业发展存在的不足有必要建立产销通路 ,并提及物流在流通环节的重要性。最后就大陆各地的招商引资提出了意见     

植物学与分子生物学研究创新型实验项目的设计与实施

以农杆菌渗入烟草表皮瞬间表达绿色荧光蛋白的观察实验为例,对植物学与分子生物学研究创新型实验的选题设计、教学过程和效果进行了探讨。该实验项目的实施培养了学生的团队精神、科学素养和创新意识,提高了实验设计和实际操作能力,是生物科学特色专业实验教学改革的有益尝试。     

耐低温兼性厌氧蛋白酶产生菌192的筛选、鉴定及酶学性质

为了提高厌氧水解效率,采用双层平板法筛选出一株耐低温兼性厌氧蛋白酶产生菌192.经形态、生理生化和16S rDNA序列分析鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),对其产酶条件进行了初步研究.结果表明,该茵的最适生长温度为30℃,生长8～12h达对数期,初始pH 7.5时酶活力最高.蛋白酶最适反应温度为45℃、pH 7.0,酶活力最高达39.3 U/mL.该酶在50℃以下,pH 6.0～9.0性能稳定.在60℃以上热稳定性很差,70℃保存lh酶活力全部丧失.     

《机械原理》与《机械设计》实验教学改革实践

《机械原理》和《机械设计》两门课程的实验教学在培养学生的综合设计、创新设计能力等方面,有其他课程不可替代的重要作用,针对两门课程传统实验教学中存在的问题,提出了以独立设课为中心的实验教学改革和实践方案,取得了显著的效果。     

苦荞的成分功能研究与开发应用

苦荞具有丰富的营养价值 ,它既能食用 ,又能防病、治病 ,为许多其它主要食物所不及。我国有丰富的苦荞资源 ,对苦荞的深入研究和开发应用有利于改善和提高人们的食物结构 ,同时也有助于促进贫困山区的脱贫致富。本文就苦荞的营养价值、药用价值和开发应用等方面的问题进行了阐述     

副猪嗜血杆菌分离鉴定与PCR检测方法的建立及应用

从养猪场送检的猪肺病料中分离到3株疑似副猪嗜血杆菌(HPS)可疑菌株。经形态镜检、染色特性、生化和部分生物学特性试验,初步鉴定为HPS。在细菌学鉴定基础上,设计合成3对引物,分别以3株分离菌株的DNA为模板进行PCR扩增,结果均扩增出822 bp8、24 bp和1.9 kb的预期特异性条带。以HPS GD株作为参考阳性菌株,以P1、P2为引物,设计优化PCR反应程序,建立HPS PCR检测方法,并应用于临床病料检测。结果表明,所建立的HPS PCR检测方法特异与敏感性高、适用性强,可应用于HPS感染的诊断和检测。     

万寿菊病虫害的发生与防治措施

万寿菊又名金盏花、臭芙蓉 ,千寿菊、蜂窝菊 ,属菊科万寿菊属一年生草本植物。黑龙江省八五三农场人工栽培万寿菊主要是取其花朵作为提取黄色素的原料。在正常条件下 ,种植万寿菊可实现公顷产鲜花 2 2 .5t以上、产值可达 135 0 0元左右、利润可达6 0 0 0元左右 ,经济效益较好。     

秸秆切碎灭茬机的设计与试验

针对双轴击切式破碎秸秆和根茬所存在的问题，本文提出单轴压切原理和非等长刀切碎模型，并对秸杆切碎灭茬机的关键参数进行了优化设计。该机田间试验表明切碎率达91．4％，根茬破碎率达86．5％。该机的应用必将促进一年两熟平作旱区保护性耕作技术的发展。     

土壤铅、镉单一和复合污染及与钙、锌交互作用对韭菜生长和铅镉积累特性的影响

通过盆栽试验研究了重金属铅、镉单一和复合污染及其与常量元素钙、微量元素锌的交互作用对韭菜植株生长发育和Pb、Cd在其根、叶中迁移富集规律的影响。韭菜中Pb、Cd的含量用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测得。结果表明,韭菜对Pb或Cd的吸收量与土壤单一Pb或Cd污染程度正相关;Pb/Cd之间存在复杂的交互作用,低浓度复合时相互促进吸收,高浓度复合时优先吸收Cd而抑制韭菜对Pb的吸收;锌在高浓度Pb/Cd污染时表现出优良的拮抗作用,可有效降低Pb、Cd的生物有效性并促进韭菜生长。韭菜根是富集Pb、Cd的主要部位,但受代谢方式、迁移率等因素的影响,因而在根、叶中的分布存在差异;根与叶中Cd的浓度比为1.5左右,Pb浓度比主要为2.5~4.5之间,显示Cd更易迁移至韭菜叶组织中。     

秦川牛GH 、INS 的测定及体尺、体重分析

随机选取14头秦川牛(其中1.5岁的公、母牛各4头,2.0岁的公、母牛各3头),按性别分为两组。采用放射免疫法测定血液中生长激素(GH)、胰岛素(INS)的水平,并对每头牛的体高、体斜长、胸围、胸深、尻宽、腰角宽等体尺指标及体重进行测量并分析,结果表明:在1.5时公、母秦川牛体内的生长激素和胰岛素差异不显著(P>0.05);而在2.0岁时公、母秦川牛体内的生长激素和胰岛素差异显著(P<0.05);并且随着年龄的增加,秦川牛体内的生长激素呈下降趋势而胰岛素则呈增加趋势,且生长激素和胰岛素呈差异不显著的负相关(P>0.05)。通过对体尺指数进行分析得出:较1.5岁而言,2.0岁秦川牛体躯发育程度更大,胸围更宽,尻部增幅明显,骨骼等体躯部分生长速度相对减慢,而肌肉等体量部分增长速度则相对加快,符合肉牛的生长发育规律以及秦川牛中、晚熟的特点。将实测体重与经济性能划分标准比较,发现秦川牛仍属于役肉兼用型品种,但经过近几年的选育,体重有了很大的增加。