胶体金技术在免疫学检测中的应用

胶体金技术是80年代首先于免疫学领域发展起来的一门新技术。最初该方法仅用于免疫电镜技术,现在已经发展到被动凝集试验、光镜染色、免疫印迹、免疫斑点渗滤法、免疫层析技术、生物传感器、PCR技术及染色体的基因定位的检测等生物学各个领域。目前已广泛应用于临床诊断,对医学临床检验、食品加工等产生了巨大影响。该方法最大特点是简单快速、准确直观,特别适合于广大基层单位、医院、野外作业人员以及大批量时间紧的检测和大面积普查等,因此该技术具有巨大的发展潜力和应用前景。现将胶体金技术在某些领域的主要应用做一综述,希望能够给从事相关研究的工作者提供一些帮助。     

免疫胶体金技术的应用及研究进展

免疫胶体金标记技术与免疫荧光、免疫酶、免疫铁蛋白等标记技术相比具有独特的优越性和更广泛的用途.本文综述了免疫胶体金技术的原理、特点、应用及研究进展.     

免疫胶体金技术及在养猪业中的应用

免疫胶体金标记技术与其他三大标记技术相比具有独特的优越性和更广泛的用途,并日益受到研究者和广大工作人员的青睐.本文综述了免疫胶体金技术的原理、操作、特点、在养猪业中的应用及前景.     

应用胶体金免疫电镜技术检测鸭肝炎病毒

本研究应用胶体金免疫电镜技术和直接电镜（ＤＥＭ）、免疫电镜（ＩＥＭ）比较观察了鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）ＱＬ＿７９弱毒株和Ｒ＿８５９５２标准强毒株。ＱＬ＿７９株和Ｒ＿８５９５２株的形态结构是一致的，球形，大小为２０～４０ｎｍ。胶体金免疫电镜技术可作为检测ＤＨＶ的常规方法，具有简便、快速、灵敏、直观等特点。     

胶体金免疫技术在猪瘟诊断上的应用进展

胶体金免疫技术是一种新型免疫学检测技术.它具有简便、快速、特异性强、敏感性高、结果判断直观等优点.在猪瘟的快速诊断中得到了广泛应用,显示出了良好的应用前景.论文就胶体金免疫技术及其在猪瘟快速诊断上的应用现状及发展前景作一简要综述.     

胶体金免疫技术在猪瘟诊断上的应用进展

胶体金免疫技术是一种新型免疫学检测技术。它具有简便、快速、特异性强、敏感性高、结果判断直观等优点。在猪瘟的快速诊断中得到了广泛应用,显示出了良好的应用前景。论文就胶体金免疫技术及其在猪瘟快速诊断上的应用现状及发展前景作一简要综述。     

免疫胶体金技术基本原理及其在疾病检测中的应用进展

近年来胶体金标记技术迅速发展,应用范围也逐渐扩大,不仅应用于光镜和电镜水平定位、定性及定量研究含有抗原物质的组织、细胞及亚细胞结构,还应用于免疫转印、流式细胞术、液相免疫测定、固相斑点金/银染色、免疫层析法(immunochromatography)和快速免疫金渗滤法(Dot immuogol     

免疫胶体金技术的基本原理及其在兽医临床中应用的研究进展

免疫胶体金技术是二十世纪八十年代发展起来的一种新型免疫标记技术,现在已广泛应用到生物医学的各个领域。应用该技术制成的胶体金试纸条具有简便、快速、灵敏、特异性高等优点。目前,该技术在兽医临床上已应用在畜禽某些疾病的诊断、抗原抗体的检测、重金属中毒检测及畜禽产品药物残留检验中,并在兽医学领域中展现了广阔的应用前景。本文综述了该技术的原理、特点、应用现状及发展前景？     

小鼠肝炎病毒金标快速检测方法的建立

本试验旨在探讨一种能够快速、简便及特异检测MHV病毒的金标检测方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗小鼠肝炎病毒(MHV)抗体,选择优化层析条件,建立双抗体夹心模式的免疫层析法试纸条对MHV进行检测。20 nm左右的胶体金颗粒、5.05 μg为最低稳定抗体量(稳定0.5 mL胶体金)、M135层析材料、3%BSA是最佳封闭液。640 μg/mL抗体蛋白为最适检测线包被浓度,而800 μg/mL抗体蛋白为质控线最适包被浓度。此试纸条能10 min快速特异地检测出MHV抗原,阳性时检测线和质控线均显示红色,阴性时则只有质控线显示红色。结果表明,胶体金免疫层析方法能快速、特异、稳定地检测MHV抗原。     

免疫胶体金技术影响因素分析

免疫胶体金技术以其快速、准确、简捷的特点,受到国内外科研工作者及基层工作人员的普遍关注。笔者从耗材的选择、胶体金的制备及标记、膜包被条件、缓冲液和产品保存及验证等方面分析免疫胶体金技术的影响因素,为制备胶体金检测产品提供理论依据和技术参考。     

猪瘟抗体检测试纸条与ELISA试剂盒的检测结果比对试验

四川成都某生物技术有限公司研发了一款检测猪瘟抗体的免疫胶体金试纸条,为检验此产品,选取美国产、武汉产ELISA试剂盒与其做对比试验,比较猪瘟抗体检测的特异性、敏感性和符合率。结果表明:成都产试纸条同批次产品性能稳定,总符合率与美国产、武汉产ELISA试剂盒间差异不显著。     

Establishment and Application of Colloidal Gold Immune Chromatography Test Method for Detection of Canine Parvovirus Hemagglutination Inhibition Antibody Titer

The study was aimed to use colloidal gold immune chromatography technology to establish a rapid method for detection of canine serum canine parvovirus (CPV) hemagglutination inhibition (HI) titer and CPV vaccine immunization effect assessment.Double antibody sandwich method and monoclonal antibodies of anti-CPV hemagglutination antigen were used to prepare CPV antigen test strip.Canine serum with different proportion respectively was mixed with quantitative CPV antigen for full reaction,then dropped the mixture into the CPV colloidal gold test strip,so according to the highest serum dilution ratios when the test strip line T (line T) vanishes,it was to judge CPV antibodies in serum of the HI titer.This method had been used to detect 86 canine serum samples,at the same time,analyzing and comparing it with traditional hemagglutination inhibition test method.The results showed that the CPV antigen detection test strip was successfully prepared,and the reaction conditions and results of the test strip for detecting the titer of CPV-HI in canine serum were determined.The results indicated that when detecting CPV antigen after the dilution of different ratios of canine serum,the highest serum dilution ratios when the strip line T vanished and the HI titer had positive correlation.The highest dilution ratios of canine serum multiplied by 4 was the HI titer.The results of two methods had 90.7% consistency.This experiment established the colloidal gold immune chromatography test strip for the detection of CPV-HI titers method initially.This CPV-HI detection provided a simple and fast test method for the effect evaluation of CPV vaccine immune.     

犬细小病毒血凝抑制抗体效价胶体金免疫层析检测方法的建立及应用

试验旨在利用胶体金免疫层析技术建立快速检测犬血清中犬细小病毒（canine parvo virus, CPV）血凝抑制（haemagglutination inhibition, HI）抗体效价的方法,用于CPV疫苗免疫效果评价。采用双抗体夹心法,以抗CPV血凝相关抗原的单克隆抗体制备CPV抗原检测试纸条;将犬血清进行不同比例系列稀释后,分别与定量CPV抗原充分反应,滴入CPV胶体金试纸条,根据试纸条检测线（test line,T线）消失时的血清最高稀释倍数判断血清中CPV抗体的HI效价;用此方法检测86份犬血清样品,并与传统血凝抑制试验方法进行分析比较。结果显示,成功制备CPV抗原检测试纸条,确定了试纸条检测犬血清CPV-HI效价的反应条件和结果判定标准。结果表明,在检测不同稀释倍数犬血清反应后的CPV抗原时,能使试纸条T线消失时的血清最高稀释倍数与HI效价具有正相关性,犬血清最高稀释倍数乘以4即为HI效价;两种方法的符合率达90.7%。本试验初步建立了胶体金试纸条检测CPV血凝抑制效价的方法,为检测CPV-HI效价提供了一种操作简单、快速的试验方法,可用于CPV疫苗免疫效果评价。     

胶体金技术在弓形虫病诊断中的应用

利用胶体金标记技术诊断弓形虫病的方法有免疫金银染色法(IGSS)、快速斑点免疫金渗滤法(DIGFA)和胶体金免疫层析法(GICA)。其中胶体金标记免疫层析技术作为一种新型的免疫学快速诊断和检测技术,不仅具有敏感、特异、便捷等特点,而且适合基层和现场使用,成为当今快速检测病原体及临床快速诊断疾病的主要技术手段,在生物医学各研究领域特别是在医学检验中得到了日益广泛的应用。论文对免疫胶体金技术在弓形虫病诊断中的应用和发展进行了综述。     

免疫胶体金法现场快速测定乳品中的三聚氰胺的应用研究

为了研究和验证免疫胶体金法快速检测乳制品中的三聚氰胺的效果,通过协同实验的方法,研究该方法的灵敏度、重复性、基质影响、特异性。利用随机于市场抽样乳品120件,分别用免疫胶体金法和国标法进行检测,验证该方法的假阴性、假阳性率。结果表明,用免疫胶体金法测定乳品中的三聚氰胺,检测限为0.5mg/kg,方法的稳定性较好,亚硝酸盐、三聚氰酸、L-脯氨酸对测定结果无干扰,但尿素对测定结果有干扰。免疫胶体金法测定乳品中三聚氰胺的假阴性为0%,假阳性率为0%。可见,免疫胶体金法快速检测乳品中三聚氰胺,方法简便、快速、准确、稳定,可作为乳品中三聚氰胺现场快速检测的一种有效手段。     

沙门氏菌胶体金免疫层析试纸条的研制与应用

本试验目的为提供一种食品中国家强制检验的沙门氏菌胶体金免疫层析试纸条,并对购自超市和农贸市场的肉蛋进行检测。该试纸条由吸收垫、样品垫、偶联垫和硝酸纤维素膜等组成,包被对照线和检测线,以及喷涂于偶联垫上的金标沙门氏菌多抗组装建立。结果表明该试纸条对沙门氏菌的最低检测量为1.07×107 cfu/mL,检测时间仅需5~10min。该试纸条特异性强,重复性好,可在4℃或室温存放9个月,检测结果稳定。     

Preparation and Primary Application of Immunity Colloidal Gold Test Strip for Fasciola gigantica

To establish a rapid, simple, sensitive and adapting field application assay for water buffalo Fasciola gigantica, the monoclonal antibodies of hybridoma cell strains 7D1 and 7D4 against excretory-secretary antigen(ES Ag) of Fasciola gigantica were prepared and purified. Meanwhile, the colloidal gold particle was prepared by the sodium cirrate reduction method, then the affinity purified 7D1 monoclone antibodies was labeled with the 30 nm colloidal gold particles. The 7D4 monoclonal antibodies and the goat anti-mouse IgG antibody using as secondary antibodies were coated on the surface of nitrocellulose filter(NC) membrane as the test line (T line) and control line (C line), respectively. The immune colloidal gold test strip was developed by optimizing the experiment conditions. The test results showed the prepared strip had a detecting prescribed minimum of 0.94 μg/mL of Fasciola gigantica excretory-secretary antigen, and it had no any cross reaction with the antigens of Eurytrema pancreaticum, Paramphistome, Chlamydia, Toxoplasma gondii and Trypanosoma evansi. Using the prepared strip to investigate the 334 fresh feces from buffaloes in Guangxi and the positive rate was 38.62%. These results indicated that this strip method was simple, rapid and easy determination, good specificity, high sensitivity, and adapted field application assay for Fasciola gigantica.     

大片形吸虫免疫胶体金检测试纸条的研制及初步应用

为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法,本试验利用抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到单克隆抗体7D1和7D4;采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒大小为30 nm的胶体金,再用胶体金标记纯化单克隆抗体7D1,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体7D4,经反应条件优化,组装成了大片形吸虫免疫检测试纸条。经测试该检测试纸条对ES抗原的检测下限为0.94 μg/mL,与胰扩盘吸虫、前后盘吸虫、支原体、弓形虫、伊氏锥虫均无交叉反应,特异性好。采集广西地区334份水牛新鲜粪样并用试纸条检测,阳性率为38.62%。结果表明,试纸条方法操作简单、快速、易于判定,特异性好,敏感性高,适合基层大面积普查和现场检测大片形吸虫。