猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)是严重危害养猪业的一种较新的重要病原。近年来国内外学者对其研究不断深入 ,在病毒分子生物学方面取得了重要进展。PRRSV基因组的结构与功能得以明确 ,基因组所编码的蛋白及蛋白结构和 PRRSV的基因变异进一步得以认识。此外 ,PRRSV与其它病原体之间的相互作用愈来受到重视 ,关于此方面的研究也不断增多。这些研究为 PRRS疫苗的设计及制定全面、有效的防制措施提供了科学依据     

猪繁殖与呼吸综合征病毒对受精卵发育的影响

１４头同期发情青年母猪排卵后３２小时，取出受精卵进行微注射或在（Ｂｅｌｔｓｖｉｌｅ）胚胎培养液－３（加或不加猪繁殖与呼吸综合征病毒，ＰＲＲＳＶ）中培养７２小时。使用猪肺泡巨噬细胞分离病毒，反转录酶聚合酶链式反应和荧光抗体技术检测样品中的病毒。结果与对照组相比，微注射或加有ＰＲＲＳＶ的胚胎培养均未明显抑制体外猪胚胎发育（分别为Ｐ＝０．７５和Ｐ＝０．１４）。用１０～２０ＴＣＩＤ５０的病毒微注射或大浓度病毒处理胚胎进行培养，在胚胎中均检测不出ＰＲＲＳＶ。本试验得出结论是：４～１０－细胞期猪胚胎对ＰＲＲＳＶ体外感染不敏感。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是严重威胁养猪业发展的一种重要的病原。近几年来,国内外学者对其进行了深入的研究,尤其在病原的分子生的学方面取得了许多新的进展。病毒的基因组结构及其所编码的蛋白质的功能已基本搞清,这些研究为进一步研究有效的基因工程疫苗、有效控制该病的发生提供理论依据。     

用微量细胞培养ELISA测定HCLV TCID_(50)

应用猪瘟兔化弱毒制备的猪瘟兔化疫苗常因为剂量不足而引起免疫失败。究其原因主要是因为兔检(RID)合格的猪瘟兔化苗批间差异较大,质量不稳定。为此建立微量细胞培养ELISA用以测定HCLV TCID50,并获得成功,可以替代RID测毒。     

猪繁殖与呼吸综合征疫情与猪繁殖与呼吸综合征病毒基因型的相关性研究

本试验在暴发猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的广东某猪场进行,猪群暴发PRRS后立即封群。为研究猪场PRRS疫情和PRRSV基因型之间的相关性,在母猪饲料中全群添加抑制PRRS的泰万菌素100 mg/kg~200 mg/kg,持续90 d。统计猪场PRRS暴发到平稳期间的临床数据,并用RT-PCR检测的方法检测分娩母猪血清、脐带血、弱残仔猪和保育死淘猪病料。结果显示,猪群PRRS暴发时,存在PRRSV经典毒、高致病性野毒和高致病性疫苗毒3种毒株亚型;猪群PRRS平稳时,猪群只检测到PRRSV疫苗毒株1种亚型。表明猪群感染PRRSV类型越单一,猪群PRRS越平稳。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的研究进展

单克隆抗体在兽医领域的应用价值越来越受到研究人员的重视。本文概述了近年来猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）结构蛋白单克隆抗体的研究概况，以及它们在该病病毒分子生物学研究中的应用。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒蛋白质研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种折叠的正义RNA病毒,属于动脉炎病毒科(Arteriviridae),尼多病毒目(Nidovirales)。除了动脉炎病毒科,尼多病毒目还包括冠状病毒科(Coronaviruses)。15.1~15.2 kb长的PRRSV基因组通过互相重叠的开放性阅读框编码蛋白质。ORF1a翻译过程中产生pp1a多聚蛋白。ORF1b表达产生了 pp1ab多聚蛋白。pp1a和pp1ab经病毒蛋白酶处理后又生成了14个非结构蛋白。一些非结构蛋白为蛋白酶(NSP1、NSP1β、NSP2和NSP4)、RNA-依赖性RNA聚合酶(NSP9)、解旋酶(NSP10)和核酸内切酶(NSP11)。ORFs2-5编码GP2-GP5,ORF6编码M,ORF7编码N蛋白。ORF2b完全包括在ORF2内,表达小的非糖基化E或2b蛋白。相当一部分的囊膜蛋白是nidoviruses所特有的,所有的结构蛋白都是感染所必需的。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染机理及其研究进展

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）往往与其它疾病混合感染或继发感染,从而引起不同的临床症状和病理变化。和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)发生混合或继发感染的病原微生物,包括猪链球菌、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、出血败血性巴斯德氏菌、胸膜肺炎嗜血杆菌和猪流行性感冒病毒。总的来说,混合感染比病毒单一感染导致的临床症状更显著。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究概况

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒感染引起的高度传染性免疫抑制疾病,以成年猪生殖障碍、早产、流产和死胎,以及仔猪呼吸异常为特征,给生猪养殖业带来很大的经济损失。文章从PRRSV的基因组结构、非结构蛋白、结构蛋白和遗传变异等方面系统综述了该病的分子生物学研究概况,并提出研究和防控方向,为该病的有效预防和控制提供理论基础。     

基于两种动物模型测定猪伪狂犬病病毒LD_（50）与TCID_（50）比较研究

伪狂犬病活疫苗作为一种安全有效、全国广泛推广使用的疫苗,其效力检验十分必要,而伪狂犬强毒毒价测定则是效力检验的一个必要前提。本实验选用BHK-21细胞及家兔和小鼠实验动物,来检测PRV的TCID50和LD50,旨在找出基于家兔和小鼠两种实验动物PRVTCID50和LD50之间的关系,以简化该苗的效力检验过程。结果表明：用兔子做效力检验时,可以用TCID50代替测LD50。     

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒概论

猪繁殖与呼吸障碍综合征（PRRS）是一种全球性疾病,它给养殖业造成巨大经济损失。据统计在美国每年因该病给养猪业造成的损失多达5．6亿美元。现已证实PRRS是由一种有囊膜的单链正股RNA病毒,即猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）引起的。传统的方法（如疫苗和动物隔离）并不能有效地控制该病,这使人们逐渐把目光聚焦到该病的净化上。了解PRRSV在动物间的传播规律以及阻止该病传播的措施对净化该病起至关重要的作用。本文综述了该病原的一些特点,包括病因学、临床症状、直接和间接传播途径,同时讨论了该病控制、预防和净化措施。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒与免疫抑制(续)

2 PRRSV 对细胞的影响 2．1 PRRSV 引发的细胞凋亡近来研究发现由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5编码的糖蛋白 GP5在 cos—1细胞表达时能诱导体外培养的细胞发生细胞凋亡。Sur 等(1997,1998)研究发现     

猪繁殖与呼吸综合征病毒人工感染试验

为探讨单纯猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染与猪"高热病"及猪群死亡率的关系,用经检测为PRRSV阳性的猪病料接种2头断奶仔猪,每日测定体温,将发病猪处死剖检,用PCR方法进行PRRSV检测和ELISA检测抗体,发现攻毒猪均迅速出现持续高热症状,无死亡趋向,剖检试验猪以肺脏损伤为主,无细菌的继发感染,PCR检测P...     

核酸杂交技术在禽白血病病毒TCID_(50)测定中的应用

为探索核酸杂交技术在测定J亚群禽白血病病毒(ALV-J)细胞半数感染量(TCID50)中的可行性,将ALV-J传染性克隆r NX0101株以10倍梯度稀释后按常规方法接种已长满单层鸡胚成纤维细胞(CEF)的96孔板,在维持7 d后收集细胞培养上清。上清液部分按照试剂盒说明书进行p27抗原的ELISA检测,另一部分提取RNA后以鸡致病性外源性禽白血病病毒特异性核酸探针交叉斑点杂交检测试剂盒进行Dot-blot检测,每孔中细胞固定后以ALV-J特异性单克隆抗体进行IFA检测,确定病毒感染孔后按照Reed-Muench法分别计算三种方法测定的TCID50。结果显示ELISA法、IFA法和Dot-blot法在确定病毒感染中能够相互验证和补充,该病毒在CEF的TCID50分别为10-4.7TCID50/0.1 m L、10-5.2TCID50/0.1 m L和10-5.3TCID50/0.1 m L。表明采用Dot-blot法测定ALV-J的TCID50是可行的,不仅能够排除内源性的干扰,并且比ELISA和IFA具有更高的灵敏度。     

板蓝根、黄芪对猪繁殖与呼吸综合征病毒的体外抑制作用

为了解中草药黄芪、板蓝根对病毒增殖的抑制作用,对黄芪、板蓝根及二者联合使用在Marc-145的单层细胞上对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)增殖的抑制作用进行了研究。结果表明,板蓝根能够显著抑制PRRSV体外增殖,对PRRSV的最小直接杀灭浓度为0.195 mg/mL,最小阻断浓度为0.097 mg/mL;黄芪对PRRSV增殖的抑制作用较弱。板蓝根、黄芪联合使用时对PRRSV的抑制作用显著增强,板蓝根对PRRSV的最小直接杀灭浓度降为0.097 mg/mL,最小阻断浓度降为0.049 mg/mL。     

不同抗原收获方式对猪繁殖与呼吸综合征病毒含量的影响

抗原收获是疫苗生产中的一个重要环节.本文通过对比猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原收获时上清液与细胞液之间的病毒含量以及冻干后的病毒含量,筛选出较为优势的抗原收获方式.结果表明,从病毒含量上分析,收获上清液与细胞液这两种收获方式差异不显著;从生产工艺上分析,收获上清液更有利于提高生产效率,方便临床使用.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒入侵宿主细胞途径研究进展

病毒入侵宿主细胞是其完成自身复制周期的首要步骤。全面解析病毒入侵宿主细胞途径可深入揭示病毒感染及其致病机制,有助于制定更为有效的抗病毒策略。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是具有囊膜的单股正链RNA病毒,对全球养猪业造成巨大的经济损失。以往研究报道PRRSV主要通过网格蛋白介导的内吞途径(CME)入侵宿主细胞。近年来研究发现,除CME外,PRRSV还会采取其他途径入侵宿主细胞。本文通过总结PRRSV入侵宿主细胞途径的最新研究进展,以期加深人们对PRRSV的认识,并为防控该病毒提供新的思路。     

甘草酸二钾体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的活性

利用细胞病变(CPE)抑制试验和MTT法,通过抗病毒试验来评价甘草酸二钾对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染Marc-145细胞的保护效果,并通过复制抑制、吸附抑制和直接杀灭3个试验探讨了甘草酸二钾体外抑制PRRSV的作用方式.结果表明,在安全浓度范围内,甘草酸二钾能够显著抑制CPE的产生(抑制率≥100％).在直接杀灭和复制抑制试验中均表现出较高的抑制率,但在吸附试验中却没有阻断病毒对细胞的吸附,初步推测甘草酸二钾可干扰PRRSV的复制或可直接将其灭活,或两种作用同时存在.说明在体外试验中甘草酸二钾具有良好抗PRRSV活性,可以作为潜在的抗病毒试剂供进一步研究使用.