茶叶多酚氧化酶及其同工酶的研究进展

多酚氧化酶（PPO）是茶树生理与茶叶加工中的一类重要氧化还原酶,也是茶黄素及其组分酶促合成中的关键酶。从PPO结构分类、同工酶、PPO与茶叶品质关系、PPO分离纯化及酶促合成茶黄素等方面进行综述,以期为茶树品种适制性评价、茶黄素及其组分高效制备以及PPO同工酶酶源筛选与利用提供科学依据。     

垂直平板凝胶电泳“分割法”测定多酚氧化酶同工酶分子量

茶树鲜叶中所含的酶类一般为多谱带同工酶,如现已分离的酯酶、过氧化物酶、多酚氧化酶等,这就给测定其分子量带来较大的困难,首先是需用多柱串连分离洗脱,且所得的酶活力低,不利下一步测定,也很难把同工酶分开;其次是在用圆盘电泳或柱洗脱体积计算法及平衡密度梯度离心法等方法测定分子量时工作繁杂。因此,在高压液相色谱分离检测方法还不能普及之时,用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板“分割法”测定同工酶的分子量值得探讨。此法可将酶的分离与分子量测定一步完成,方法简单,设备易得,结果也较理想。本文介绍采用此法测定鲜叶和萎凋叶的多酚氧化酶分子量。     

几种番荔枝属果树的酯酶和多酚氧化酶同工酶分析

应用垂直板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对番荔枝属的7种果树共14份材料进行酯酶和多酚氧化酶同工酶分析.结果表明,2种同工酶共表现出23条酶带,其中酯酶同工酶9条,多酚氧化酶同工酶14条,不同番荔枝种间酶谱差异较大.2种同工酶酶谱除不能区分2份红毛榴莲和2份毛叶番荔枝外,对其余的10份材料均可区分.实验用几个番荔枝种间的遗传距离在0.000～0.895之间.聚类结果将14份番荔枝材料分成了2类.     

多酚氧化酶的性质及其在茶叶加工中的研究进展

多酚氧化酶是茶叶加工中一类重要的氧化还原酶。文章归纳了多酚氧化酶的结构性质和酶学性质,重点阐述了其在红茶、绿茶、乌龙茶和黑茶加工中的研究现状,并展望了其未来的研究方向,以期为深入研究和应用多酚氧化酶提供参考。     

日本百项茶叶科研成果（续）：茶叶多酚氧化酶的性质和作用

茶叶中有20多种黄烷醇类化合物，它们与叶片的颜色有密切关系。绿茶浸出液中的黄烷酮配糖体中最主要的成分是一种新化合物——Theiferin。它包括A、B两种。茶叶中已鉴定有20种儿茶素类化合物。最近，在茶叶中发现了对过敏有高抑制活性的3＂-甲基-EGCG，在红茶品种红誉的叶片中发现有EGCG-3-O-（4＂-O-甲基）。     

固定化多酚氧化酶的化学性质研究

本文研究了固定化多酚氧化酶的性质,结果表明茶叶多酚氧化酶经包埋交联固定化以后贮存稳定性增加,最适ｐＨ在移至７．０,最适温度上升至４０℃,酶对金属离子（Ａｌ＾２＋,Ｃｕ＾２＋）适应性增强,对抑制剂敏感性下降。     

梨多酚氧化酶同工酶组成及其对茶黄素合成的影响

用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶的方法,研究了不同品种梨（丰水梨、贡梨、雪梨、水晶梨、香梨）果实多酚氧化酶同工酶的酶带特征。结果表明,不同品种梨多酚氧化酶同工酶具有相似的酶带,但酶带数目、驸值及相对分子质量均存在种间差异;丰水梨有11条同工酶带,贡梨7条,雪梨5条,水晶梨和香梨分别为6条和4条;     

浅析茶多酚氧化酶研究的几个问题

茶多酚氧化酶（简称ＰＰＯ）是茶叶中一种重要酶类，也是研究最多的酶类，但ＰＰＯ细胞定位、ＰＰＯ的提取与纯化和ＰＰＯ催化生化机理等方面仍存在一些有待深入一步研究的问题。本文对这些问题作了简介，对ＰＰＯ深一步研究提出了意见。     

茶幼果多酚氧化酶的提取与贮存研究

本文研究了茶幼果多酚氧化酶的提取与贮存方法。     

茶树多酚氧化酶研究进展

多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO)是茶树(camellia sinensis)中普遍存在的一种酶,是红茶制作中品质形成的关键酶类。多酚氧化酶可催化氧化儿茶素类物质形成茶黄素类(TFs)色素,而后者对红茶色、香、味等品质形成具有关键作用。     

茶叶多酚氧化酶的序列分析与结构预测

调用生物信息学方法对已在国际互联网上的生物数据库(DDBJ、Uni-Prot)注册的茶树多酚氧化酶基因的核酸及氨基酸序列进行分析,并对其组成成分、信号肽、跨膜拓扑结构域、疏水性/亲水性、蛋白质二级及三级结构进行预测与推断。结果表明:茶多酚氧化酶不具有信号肽,存在卷曲螺旋,为位于细胞质中的无跨膜的亲水性不稳定蛋白,无规则卷曲是其蛋白质结构的主要结构元件,α-螺旋与β-折叠分散于整个多肽链中,并存在2个结构功能域。     

多酚氧化酶固定化载体研究进展

固定化酶技术是当今酶工程的研究核心,它很好的实现了酶半衰期的延长、稳定性的提高、重复利用及产物与酶的分离。茶叶多酚氧化酶是茶树中含有的一类重要的氧化酶类,在茶叶加工、深加工以及茶饮料领域有着非常重要的作用。目前酶固定化的载体有无机载体、有机载体、复合型载体以及纳米载体。本文总结了酶固定化载体的性能要求,并概述了目前多酚氧化酶固定化酶的各种载体材料。具有功能基团的纳米载体材料将是多酚氧化酶固定化载体未来发展的主要方向。     

不同荔枝品种采后果皮褐变与多酚氧化酶关系的研究

以无核荔枝、妃子笑、紫娘喜3个荔枝品种为试材,研究了不同耐贮性荔枝品种果实采后果皮多酚氧化酶活性与果皮褐变之间的关系,结果表明,在相同贮藏阶段,3个荔枝品种中无核荔枝褐变指数最高,妃子笑次之,紫娘喜最低。不同处理条件下妃子笑、紫娘喜果皮PPO酶活性均呈先上升后下降的趋势,常温贮藏时无核荔枝果皮PPO活性逐渐下降,低温贮藏则先下降后上升再下降。果实贮藏前期,PPO结合酶、游离酶与总酶活性以无核荔枝最高,妃子笑次之,紫娘喜最低。新采收果实中,紫娘喜果皮PPO同工酶仅2条带,妃子笑3条,而无核荔枝有4条。不同处理对同工酶带数无影响,但低温减少了无核荔枝某些阶段果皮PPO同工酶带数。不同品种荔枝果皮褐变进程差异与果实贮藏前期果皮PPO酶活性差异及同工酶带数有关。     

红茶制造中多酚氧化酶同工酶谱与活性的变化

本文运用聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳技术和酶活性测定相结合的方法,初步探明了红茶萎凋、揉捻、发酵和干燥工序中多酚氧化酶(PPO)活性及同工酶谱的变化动态,以及酶试液制备方法对PPO活性及同工酶的影响,发现造成萎凋期间PPO活性变化两种研究结果的原因,在于酶制液的制备方法不同。同时,在鲜叶和萎凋叶中发现了第7条小分子PPO组分。本试验还证明了红茶中残余酶活性的存在,并探讨了残余酶在贮藏中可能发生的作用。文中还探讨了PPO各组分在红茶制造中作用的大小,从酶学角度论证了萎凋工序的重要性。     

小麦多酚氧化酶研究进展

综述了小麦多酚氧化酶(PPO)的测定方法、生理功能、酶学特性和基因及其表达。PPO主要位于小麦种(果)皮中,是一类铜结合酶,其活性中心为铜结合区(CuA和CuB),不同植物PPO的铜结合区的氨基酸序列同源性较高。PPO由核基因编码,受多基因控制,有多种同工酶。PPO是导致面制食品的酶促褐变的主要原因,与小麦的抗病性密切相关。     

尿素溶液在测定多酚氧化酶活性上的应用

目前,测定多酚氧化酶活性最常用的方法是根据多酚氧化酶在适宜的pH值和温度条件下,催化对苯二酚,使之氧化生成有色产物,由单位时间内形成产物在460nm处的吸光值来确定酶活性的高低。为了使反应达成一致,反应进行到规定的时间后,需加入酶抑制剂来终止酶促反应。目前,常用的终止剂是1mol/L偏磷酸溶液,然而,笔者在实践中发现,当反应体系中加入1mol/L偏磷酸溶液后,虽能使酶蛋白变性失活,终止酶促反应,但同时也使酶蛋白沉淀并产生胶体颗粒,引起反应体系混浊,严重影响比色效果,导致测定结果不稳定,造成偏差。