RNA加尾和引物延伸法检测黑腹果蝇3种microRNA表达量

采用RNA加尾和引物延伸real time PCR法实时定量检测了黑腹果蝇Drosophila melanogaster的bantam、mir14、mir-2a共3种microRNA(miRNA)在各发育阶段组织中的相对表达情况,发现3种miRNA在不同发育时期的表达差异明显,其表达变化规律与文献报道基本一致,验证了该法的可靠性.这种"加尾和引物延伸"方法,仅需1~10 ng总RNA或等同物,检测范围可达7个数量级,为昆虫miRNA研究提供了可靠的定量检测方法.     

miRNA对完全变态昆虫发育的调控作用研究进展

昆虫尤其是完全变态昆虫的发育过程是一个复杂的网络调控过程,仍有很多问题尚待解决。miRNA是近年来发现的在真核生物中普遍存在的一类19~25 nt微小RNA分子,在转录后水平上发挥重要作用,广泛参与多种重要生物学过程。综述了近年来miRNA在调控完全变态昆虫(果蝇、家蚕、伊蚊、按蚊等)胚胎发育、组织分化以及变态发育等方面的研究进展,以期为深化理解昆虫变态发育机制、发现新的生物防控靶标分子奠定基础。     

红花石蒜mago nashi(Lrmago)基因的克隆及分析

发育过程中的卵子形成、胚胎发生和种系决定中起到至关重要的作用,同时还参与mRNA定位和细胞生长[1-3].Mago nashi最先被确定为果蝇中一种严谨的母体效应基因,Mago 蛋白参与调节细胞生长并在生物体各部位表达,可与RNA结合蛋白Y14相结合.     

RNA干扰技术在害虫防治中的应用及其安全性

RNA干扰（RNA interference, RNAi）是一种在生物体内高度保守的、由20～30个核苷酸（nucleotide, nt）组成的小分子非编码RNA引发的基因沉默现象。在昆虫等真核生物中,干扰小RNA(small interfering RNA, siRNA)、微RNA(microRNA, miRNA)和PIWI蛋白互作RNA(PIWI-interacting RNA, piRNA)等小分子非编码RNA在RNA干扰中发挥着重要作用。RNA干扰在害虫防治中的应用主要体现在基因功能研究、转基因抗虫植物及新型核酸农药研发等方面。RNA干扰技术及其产品在应用之前,需严格评价其在非靶标效应、靶标害虫的抗性及环境持久性方面的安全风险。本文就RNA干扰技术的作用机制、RNA干扰在农林害虫防治中的应用及其安全性等方面进行了综述,以期为RNA干扰技术在害虫防治中获得更广泛的应用提供一定的理论依据。     

microRNA研究概况及其在农业生产中的应用前景

microRNA（miRNA）是一类小分子的非编码RNA,在不同物种的基因进化上高度保守,其表达在生物发育过程中具有明显的组织特异性和时间特异性。生物体内绝大多数基因均可能受到miRNA的调控,并且同一miRNA可能调控多个功能相似甚至功能完全不相关的基因的表达。本文概述了miRNA的特征、在动物和植物细胞内的形成过程...     

家蚕的变态发育过程及其激素调控

家蚕是鳞翅目昆虫的模式生物,是一种完全变态昆虫,一个生活世代要经历卵、幼虫、蛹、成虫4个显著不同的发育阶段。在变态过程中家蚕的外部形态、内部结构、生活方式及生理机能等诸多方面都要发生改变。该文综述了家蚕的变态发育过程及在变态发育中的激素调控,以期为阐述家蚕变态发育过程和调控方式以及对鳞翅目害虫的防治提供参考。     

植物microRNA及其在植物生长发育中作用的研究进展

microRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约21～25 nt的非编码小分子RNA。miRNA广泛分布于植物中,在植物生长发育的整个生活史中都有着重要的作用。文中主要介绍了植物miRNA的特点、生物合成、作用机制及其在植物发育中的作用。     

昆虫蜕皮基因的研究进展及应用前景

蜕皮是昆虫发育过程中一种重要的生理行为,研究与昆虫蜕皮相关的基因不仅有助于了解昆虫蜕皮发育机理,还有利于寻找新的杀虫靶标;对昆虫蜕皮基因的研究已经成为昆虫发育生物学和新型杀虫剂开发领域的热点,具有重要的理论意义和应用前景。系统归纳了目前已报道的几类昆虫蜕皮基因及其功能,分析和探讨了这些基因在植物保护方面的应用前景。     

新奇的调控分子——microRNA

microRNA(miRNA)是一类内源性表达的在转录后基因调控中发挥重要作用的小分子非编码RNA。在动植物细胞中,miRNA通过翻译抑制和靶mRNA去稳定性来调控靶基因,从而调控生长、发育、分化、死亡等生物过程。综述了miRNA的发现、形成、特点及调控机制。     

昆虫酚氧化酶作用机制的研究进展

酚氧化酶（Phenoloxidse,PO）是昆虫体内一类重要的氧化酶,在昆虫的正常生长发育过程中具有重要的生理功能。阐述酚氧化酶在昆虫免疫防御及其他生理发育过程中的作用机制,以及可能影响昆虫发育和免疫的诸多因子与酚氧化酶间的关系,以期为进一步探究酚氧化酶对昆虫自身调控机制提供新的思路。     

血清microRNA在癌症诊断中的进展

microRNA是长约19到25单位的内生性的微小RNA,它通过与靶信使RNA的3’UTR的特异性结合从而调节靶基因的表达。大量的试验证明了其在肿瘤的发生发展中microRNA发挥了重大的作用。近年来,在血清中发现了稳定存在的microRNA,而对microRNA的研究主要聚焦在血清microRNA与疾病的关系上。通过对患者和正常血清microRNA的检测和对比后,发现了一批可以用于肿瘤临床检测的microRNA。作为新的检测生物标志物,血清microRNA具有方便、快捷以及较高的准确性等优点,甚至可以区分在临床很难诊断的早期肿瘤,诸如非小细胞肺癌、胃癌以及胰腺癌。     

miRNA在子宫内膜异位症中的研究进展

子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是育龄期妇女的常见病,发病机制尚不清楚。其病变广泛,极具侵袭性和复发性,常呈现恶性临床行为。微小RNA(microRNA,miRNA)在细胞增殖、分化和凋亡等生理病理过程中起着十分重要的调控作用。miRNA参与子宫内膜异位症细胞生长和增殖、黏附侵袭以及血管的形成,在子宫内膜异位症的发生发展、恶性转化、复发和不孕等过程中扮演重要角色。就miRNA在子宫内膜异位症发病机制中的作用及其诊断价值作一综述。     

植物长链非编码 RNA 的研究进展

长链非编码 RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一类长度大于200个核苷酸的非编码RNA,种类很多,能够在表观遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因表达,广泛参与生物的生长发育、抗逆、生理和病理过程。相比动物和人类,lncRNA 在植物中的研究相对较少,为深入了解植物长链非编码RNA 的作用机制和拓宽应用范围提供理论依据,对 lncRNA 的研究方法、转录表达与调控方式及其在植物生殖发育和胁迫应答方面的作用进行了综述。     

整合素及其在昆虫学中的研究进展

整合素是一类存在于细胞表面的重要黏附分子,通过其双向信号转导途径,介导细胞-细胞外基质与细胞-细胞间的黏附,在哺乳动物的许多生理、病理过程中起重要作用。昆虫整合素的研究主要集中在其对果蝇的生长发育及鳞翅目等昆虫先天性免疫反应的影响。     

循环microRNA在冠心病及其中医证候诊断中的作用

microRNA是一类长度约为22个核苷酸的内源性非编码RNA,并能以特定的方式与靶基因结合,从而抑制靶基因的翻译或使其降解。microRNA只有在受到致病因素（如环境因素）的影响以及病理状态下,其表达量才会发生改变,因此microRNA具有成为各种疾病的诊断生物标志物的可能。目前有大量研究表明microRNA参与冠心病发生发展,但其作用机制尚未完全阐明,本文从microRNA的特性、microRNA与冠心病、microRNA与中医证候等方面对近年来国内外的研究做一综述。     

野桑蚕scalloped同源基因的克隆和序列分析

Hippo通路与昆虫的生长、发育和变态等过程密切相关,在动物不同物种之间高度保守。scalloped基因是Hippo通路元件Yki的偶联因子之一,参与调控基因的表达。克隆了野桑蚕(Bombyx mandarina)scalloped基因的完整开放阅读框(ORF)及其上下游的部分非编码序列。序列联配分析表明,与家蚕相比,野桑蚕scalloped基因序列存在多处的核酸片段缺失、插入及位点差异。结构域分析表明,野桑蚕Scalloped蛋白与家蚕、黑腹果蝇、小鼠和人的蛋白结构类似,均含有完整的TEAD蛋白家族典型TEA结构域和PDB结构域,但野桑蚕编码蛋白缺失蛋白C末端序列。系统发生树分析表明,昆虫Scalloped蛋白与脊椎动物TEF3可能存在共同的起源;家蚕Scalloped在进化中出现晚于野桑蚕且经历较多遗传选择过程。     

RNAi及其在害虫防治中的应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种由非编码的小分子双链RNA引发的序列特异性转录后基因沉默现象,普遍存在于线虫、真菌、昆虫和动植物等多种生物中。近年来,RNAi技术在昆虫中的成功应用为一系列新颖的、环境友好的害虫防治策略提供了理论依据。文章综述了RNAi技术的作用机制、dsRNA吸收机制及在害虫防治等领域的研究成果,并展望了该技术的应用前景。     

陆地棉胚珠及纤维发育过程中miRNA分离与鉴定

microRNA(miRNA)是生物中一类起负调控作用的非编码的小分子RNA,主要在转录后水平上调节生物体的生长与发育。直接克隆法是鉴定植物中miRNA最常用也是最有效的方法之一。利用直接克隆法分离了陆地棉开花后0~10 d(days post anthesis, DPA)胚珠中总RNA,从中筛选17~24 nt小分子RNA构建cDNA文库,对初筛得到的阳性克隆进行测序。通过与miRNA数据库比对,最终获得4个保守的miRNA。进一步对他们的转录表达进行分析,发现所有miRNA在棉花胚珠纤维不同发育时期均能表达。其中miR167a、miR172c和miR394b在棉花幼苗的根茎叶中有不同程度的表达。预测得到55个miRNA的靶基因,多数靶基因编码转录因子、代谢酶类以及发育相关蛋白,进一步证明miRNA参与调控棉花纤维的形态建成、发育等各项生理活动。     

miRNA在动物毛囊发育中的研究进展

microRNA (miRNA)是一类长度约20～25个核苷酸的内源性非编码小分子RNA,通过作用于靶基因mRNA的非翻译区抑制其翻译进而参与基因转录后调控,从而影响生物发育和疾病发生过程等。miRNA通过调节Wnt信号通路、BMP信号通路和细胞因子等表达参与动物毛囊的周期性生长发育、毛囊干细胞的增殖分化和凋亡以及被毛颜色的形成等。本研究从miRNA生物合成、miRNA对毛囊发育作用和对动物毛囊发育调控机制等方面进行详细阐述,旨在为深入了解miRNA调控动物毛囊的发育机制,并为今后指导毛用和皮用动物选育和提高生产性能提供参考。     

葱蝇Dorsal基因的克隆·表达及生物信息学分析

[目的]探讨Dorsal与葱蝇滞育发育的关系。[方法]以葱蝇(Delia antiqua)为试虫,采用RACE方法克隆了葱蝇Dorsal的全长cDNA序列;将该序列推导的氨基酸序列在GenBank搜寻同源序列,与搜寻到的14个代表性昆虫Dorsal序列进行相似性比较,并进行系统进化分析;采用半定量RT-PCR方法分析了Dorsal基因在葱蝇非滞育、夏滞育、冬滞育蛹中的表达情况。[结果]克隆了葱蝇Dorsal基因的cDNA序列,全长2 412 bp,开放阅读框1 974 bp,编码657个氨基酸,等电点PI约8.5,分子量72.9 kDa。与GenBank中的其他14个昆虫代表性Dorsal序列相似性比较和进化分析显示葱蝇的Dorsal与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)、拟暗果蝇(Drosophlia pseudoob-scura)的Dorsal序列相似性最大。半定量分析显示葱蝇Dorsal基因在葱蝇冬滞育、夏滞育、非滞育蛹滞育发育关键期的表达量均明显升高,尤其在滞育后期表达量最高,初步判断Dorsal基因与葱蝇滞育发育相关。[结论]为进一步开展Dorsal基因在昆虫滞育发育过程中的功能研究奠定了基础。