陆地棉新品种在体细胞培养中愈伤组织褐化机理研究

对陆地棉新品种百棉1号和百棉3号的115d正常愈伤组织与褐化愈伤组织的可溶性糖、丙二醛(MDA)、棉酚含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)活性进行测定,结果表明,褐化愈伤组织的PPO活性、棉酚含量和MDA含量均高于正常的愈伤组织,而褐化愈伤组织的SOD活性、CAT活性和可溶性糖的含量均低于正常的愈伤组织。当细胞膜遭到破坏时,MDA的含量升高,遭到破坏的膜使PPO与棉酚在有氧条件下结合生成醌类物质,导致愈伤组织的褐化。而愈伤组织的褐化促使了SOD、CAT活性下降和可溶性糖含量降低。     

李树嫩枝扦插生根过程的生理变化

以＂秋凌＂果用李品种为试材,于2008年6月3日在全光照弥雾沙床上进行嫩枝扦插,观测扦插后的生根过程及生根过程中可溶性糖含量、可溶性蛋白质含量及过氧化物酶（POD）活性等生理物质的变化。结果表明：嫩枝扦插生根过程中,先插条基部皮孔变大发白,然后下切口处形成愈伤组织,同时插条基部近先端长出乳白色的根。此过程中,可溶性糖和可溶性蛋白质的含量先下降再上升,下降的时期与愈伤组织和根形成的前期相对应,上升时期发生在愈伤组织和根形成后。过氧化物酶活性的变化为中间突然升高的单峰曲线。过氧化物酶活性突然上升的阶段与插条大量愈伤组织形成和生根前夕的时间基本一致。     

欧洲卫矛愈伤组织分化及其生理生化特性

以欧洲卫矛生长健壮的叶片愈伤组织为材料,通过不同激素配比筛选出适宜其分化的培养基,将愈伤组织置于不同条件下培养。结果表明,适宜欧洲卫矛愈伤组织分化的培养基为MS+1.0 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA;欧洲卫矛愈伤组织适宜在光照条件下进行培养,生长周期为28 d,28 d后愈伤组织出现不同程度的褐化;可溶性糖含量先升后降;SOD和POD活性均出现2个峰值,可溶性蛋白变化趋势与POD变化趋势基本一致;可溶性蛋白在分化中起重要作用,且光照条件下,可溶性糖和可溶性蛋白含量、SOD和POD活性均高于黑暗条件下,PPO在培养后期活性下降,可能与愈伤组织褐化有一定关系。     

长期继代培养过程中楸树愈伤组织的分化能力

以长期继代培养的楸树愈伤组织和新诱导的楸树愈伤组织为试验材料,利用石蜡切片比较分析它们的组织形态特征,并测定过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）和淀粉酶的活性,以及可溶性蛋白与可溶性糖的含量,以探究楸树愈伤组织长期继代培养后分化再生困难的形成原因。组织形态学观察分析发现,继代培养7 a的白色颗粒状愈伤组织细胞中淀粉粒含量丰富,分布均匀,仍为胚性愈伤组织;新诱导的浅绿色愈伤组织存在明显的细胞分化中心,有均匀分布的淀粉粒,为早期胚性愈伤组织;新诱导的黄白色致密愈伤组织为非胚性向胚性转化的愈伤组织,新诱导黄白色疏松愈伤组织为非胚性愈伤组织。生理生化指标测定分析发现,继代培养7 a的楸树胚性愈伤组织中可溶性糖和可溶性蛋白的含量均显著高于新诱导出的3种愈伤组织,但其同工酶活性却较低,表明在长期继代培养的过程中,楸树愈伤组织的生理生化代谢活性降低。由此推测生理生化代谢活性的下降可能是造成楸树胚性愈伤组织长期继代培养后分化再生困难的重要因素。     

影响油棕叶片愈伤组织诱导因素研究

研究不同取材部位、激素组合配比等因素对3个不同油棕品系叶片愈伤组织培养的影响。结果表明:不同部位的油棕叶片以及不同品系的油棕愈伤组织诱导存在极显著差异;试验以MS培养基+5 mg/L 2,4-D+10 mg/L TDZ+6 g/L琼脂+30 g/L糖配比获得较好的愈伤诱导率;添加2%活性炭可以有效抑制油棕叶片愈伤组织褐化。     

NaCl和Na2CO3胁迫对枸杞愈伤组织生理效应的影响

以枸杞愈伤组织为材料,研究了NaCl和Na2CO3胁迫下对枸杞愈伤组织生长量、放氧速率(O2-.),丙二醛(MDA)含量,过氧化物酶(POD)活性,过氧化物歧化酶(SOD)活性,脯氨酸含量和可溶性蛋白含量的影响及比较。结果表明:NaCl胁迫下O2-.、MDA含量、POD活性、SOD活性、脯氨酸含量、可溶性蛋白含量都增加;Na2CO3胁迫下O2-.、MDA含量、POD活性、脯氨酸含量增加,但SOD活性和可溶性蛋白含量呈下降趋势。说明枸杞愈伤组织抗碱性远小于抗盐性。     

盐胁迫对流苏树愈伤组织生理生化特性的影响

以流苏树愈伤组织为材料,测定其在不同浓度(0、50、100、150、200 mmol/L)Na Cl胁迫下的可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸、丙二醛(MDA)含量和过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果显示:可溶性糖和脯氨酸含量先下降后上升,其中50 mmol/L Na Cl处理组的流苏树愈伤组织中的可溶性糖和脯氨酸含量均低于对照组;可溶性蛋白含量整体上先升高再下降;MDA含量初期迅速升高,中后期缓慢下降,对照组持续下降;SOD活性表现为迅速增强后稍有减弱;POD活性初期明显减弱,中后期明显增强,对照组变化较处理组不明显。     

继代次数对吉粳88愈伤组织生理生化指标及细胞形态的影响

[目的]研究继代次数对吉粳88愈伤组织生理生化指标及细胞形态的影响。[方法]以继代次数为单因素变量,测定吉粳88愈伤组织中可溶性蛋白含量、过氧化物酶活性、可溶性糖含量以及丙二醛含量,并通过临时装片观察细胞形态。[结果]随着继代次数的增加,愈伤组织的分化率和再生率呈下降趋势;可溶性蛋白含量基本保持在2.92 mg/g FW左右,无明显变化。MDA含量呈先增加后减少的趋势。POD活性和可溶性糖含量与愈伤分化率极显著相关。细胞形态观察发现,随着继代次数增加愈伤组织逐渐由胚性愈伤转化为非胚性愈伤。[结论]在悬浮培养体系建立时,以D4、D5、D63代为宜,为吉粳88再生体系的建立和优化指明了方向。     

陆地棉愈伤组织诱导及体细胞胚发生的生化机制研究

对陆地棉愈伤组织诱导及体细胞胚发生过程中的主要生化物质(可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、SOD活性和IAA氧化酶活性)的测定表明,各个时期的可溶性蛋白含量、SOD活性是不同的,在愈伤组织形成初期较低,随着愈伤组织的生长及胚状体的形成,可溶性蛋白含量、SOD活性逐渐上升,在120d时达最大值;而可溶性糖含量在60d时有一个高峰值,在120d时达到最低值;IAA氧化酶活性在60d、120d时酶活较高,90d的酶活较低。     

陆地棉品种在体细胞培养中愈伤组织褐化的生化基础研究

对陆地棉品种713、百棉1号、百棉3号的115d正常愈伤组织与褐化愈伤组织的可溶性蛋白、SOD酶、CAT酶、IAA氧化酶、PPO酶及棉酚的测定结果表明,愈伤组织褐化与PPO的活性和棉酚的含量有关,褐化导致了SOD酶、IAA氧化酶和CAT酶活性的降低及蛋白合成的减少。     

水曲柳体胚发生过程中不同状态类型外植体的生理生化状态

以水曲柳Fraxinus mandshurica幼嫩合子胚子叶为外植体诱导水曲柳体胚发生,对该过程中外植体的不同状态类型分别取样,检测这些不同状态类型外植体的多糖含量、可溶性蛋白质含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)活性等生理生化指标,分析不同状态类型外植体生理生化与体胚发生、愈伤组织发生、外植体褐化、外植体生长等方面的关系,以便为分析水曲柳体胚发生机理和改善其体胚发生技术提供依据.研究结果表明,不同状态类型外植体的生理生化状态与体胚发生、愈伤组织发生、外植体褐化和生长发育存在非常有趣的相关关系,值得进一步深入解析.     

硝酸银对‘凤丹’牡丹愈伤组织褐变过程中酚类物质及相关酶活性的影响

以‘凤丹’牡丹组织培养获得的增殖幼苗为材料,在含有0~5.0 mg·L^-1硝酸银的初代培养基中进行培养后,通过测量总酚含量、单体酚种类及其含量的变化和相关酶活性变化,确定不同浓度的硝酸银对抑制愈伤组织褐化的作用。结果表明,培养基中加入硝酸银能明显减轻褐变,其中2.0 mg·L^-1的综合效果最好且对组培苗正常生长无影响;硝酸银对组培苗褐变过程中产生影响的单体酚有绿原酸、芦丁、香豆酸、对香豆酸、表儿茶素、二氢槲皮素。愈伤组织中总酚含量与褐变等级呈现极显著相关性（P<0.01）,过氧化物酶（POD）活性与褐变程度呈现显著负相关(P<0.05),多酚氧化酶（PPO）活性与褐变程度呈现显著正相关(P<0.05)。     

油茶扦插生根过程的生理生化基础研究

以湘林系列油茶Camellia oleifera品种XL1与XL4插穗为材料,研究了其扦插生根过程中可溶性蛋白、可溶性糖及过氧化物酶（POD）活性变化。结果表明:①油茶属于愈合组织生根类型;②XL1可溶性蛋白及可溶性糖在整个生根过程中始终高于XL4,可溶性蛋白均为N型变化趋势,可溶性糖呈现先上升后下降的趋势,两者的积累为不定根的形成提供营养物质;③XL4的POD活性始终大于XL1,POD活性在愈合组织形成期和不定根诱导期出现高峰,利于根原基的诱导;POD活性在愈合组织和不定根表达期下降,利于根原基发育及不定根的伸长。图4表1参20     

非洲菊叶外植体组培中影响褐化因素及机理初探

用5种不同成分的培养基分别在光照和黑暗条件下对非洲菊叶外植体进行组织培养,筛选出对褐化影响最重和最轻的分别是Fe盐加倍和1/2MS培养基。并对影响非洲菊叶片组培褐变中的几个相关酶活性和总酚含量变化做了一些初步研究,结果表明,随着褐化程度加深POD活性有下降趋势,PAL活性和总酚含量有上升趋势。为防止褐化,应在POD活性下降和PAL活性及总酚含量上升前加入抑制褐化的试剂。     

金边瑞香插穗形态、POD与可溶性蛋白含量变化研究

分析金边瑞香扦插生根过程中插穗形态变化、POD活性和可溶性蛋白含量的变化规律与生根的关系,为其生产和生根机理研究提供理论依据。结果表明,600 mg.L-1的NAA溶液能有效抑制金边瑞香插穗基部变褐和腐烂,促进愈伤和生根的发生,最高生根率达86.8%,生根率与皮层开裂呈正相关。生根过程中,插穗体内POD活性总体呈"升高-降低-升高"趋势,最高峰值较CK提早了8 d,与愈伤高峰出现一致;可溶性蛋白总体呈"降低-升高"趋势,各处理下降的速度较CK要快。     

低温胁迫对海南本地种油棕幼苗的生理生化响应

通过盆栽实验研究了低温胁迫对油棕幼苗生理生化特性的影响.结果表明,低温胁迫抑制了油棕幼苗的生长,随着处理时间的延长,相对电导率、伤害指数、丙二醛(MDA)、和脯氨酸含量均有不同程度的升高.超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性开始升高,后来随着胁迫时间的廷后而有所下降.由此可知,低温胁迫可能使油棕产生了不同程度的生理响应,通过增加相关的保护物质来提高植物的防御能力.该研究可为油棕抗寒育种提供理论基础.     

DPI对尾叶桉愈伤组织诱导和抗氧化酶活性的影响

将不同浓度DPI添加到尾叶桉(Eucalyptus urophylla)愈伤组织诱导培养基中,分析DPI对其愈伤组织诱导和SOD、POD、CAT、APX 4种抗氧化酶活性的影响。结果表明,高于1.5μmol/L的DPI显著抑制尾叶桉愈伤组织的诱导,0~0.25μmol/L的DPI能减轻褐化,0.1μmol/L DPI抗褐化效果最好,褐化率仅9.82%。0~0.25μmol/L的DPI处理后,尾叶桉APX活性随DPI浓度升高而升高,SOD、POD、CAT活性随DPI浓度升高呈先升高后降低的趋势。添加0.10μmol/L DPI可提高保护酶活性,减轻褐化,促进尾叶桉愈伤组织诱导。