山羊卵巢卵母细胞的体外受精试验

将18枚细胞质均匀、包有完整致密卵丘细胞的山羊小卵泡(2～5mm)卵母细胞培养于含有hCG(20μg/mL)和FCS(10％)的TCM_(199)中30h,然后用经含有肝素(20μg/mL)和BSA(10mg/mL)的BO液诱导获能的山羊新鲜精子进行授精处理,授精后8h,转移入含有10％FCS的TCM_(199)中继续培养12h,结果有10枚卵子成熟,成熟率为55.6％,7枚卵子受精,受精率为70％。把7枚原核期受精卵移植给3只同期发情的受体山羊,2只妊娠,妊娠率为66.7％,并获得一只雄性试管山羊胎羔,胎龄为52d。     

山羊外源基因转移技术

对24头供体山羊进行超数排卵处理,16头超排有效。在第1次配种后48h左右取卵,共收集到卵155个。回收率79.08％(155/16)。平均每头供体排卵12.25个(196/16)。在Normarski干涉相差显微镜下观察65个单细胞受精卵及29个2～4细胞期胚胎的原核及细胞核,并分别注射人生长激素基因(p~(SMGHI)/BamHI),其中91枚移植到经同期发情处理的14头受体中。结果7头妊娠,共产活羔11头,死胎1头。经用Digoxigcnin标记核酸探针对转移基因羊检测,4头整合了外源基因。整合频率为33.33％(4/12)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)对仍存活的2头未整合、2头整合羊检测是否表达外源基因,全为阴性。     

母羊的发情鉴定与输精

1 母羊的适配年龄及最佳配种时间 海门山羊母羊适配年龄一般在1～1.5岁.3～5岁繁殖力最强,山羊配种最佳时间为发情后12～24h,老母羊12～18h,青年母羊20～24h.母羊的发情周期为15～17d.     

汉白猪同期发情和超数排卵的研究

猪发情周期第13～15d,肌注PGF_(2)和肌注FSH+PGF_(2)进行同期发情处理。两组分别于注射后57.23±12.15h(n=13)和62.06±11.95h(n=17)发情,同期化都在±1d内,两组间差异不显著。用FSH+PGF_(2)+hcG方法超数排卵,FSH总剂量分别为440和360IU。两组头均采卵数为35.00±28.02枚(n=4);而总剂量 200IU组仅为4.00±1.41枚(n=2)。未进行超数排卵处理,而是自然发情配种的,头均采卵数为6.88±4.02枚(n=8)。第一次配种后18～30h(26.33±4.04)采卵为原核期卵。     

改进山羊超数排卵方法的研究

实验以黑龙江地方山羊为实验材料 ,应用国产激素研究了单纯使用 FSH和 FSH结合PMSG,以及氯前列烯醇 (PG)和孕酮 (Pr)的超排和发情同步效果。结果显示 ,单纯用 FSH处理的山羊 (N=6 )平均排卵 6 .83± 1.19个 ,平均获卵 5.83± 1.0 1个 ,获卵率在 85.30 % ;用 FSH结合 PMSG处理的母羊 (N=17)平均排卵 13.94± 1.11个 ,平均获卵 10 .59± 0 .97个 ,获卵率为 78.2 0 % ;t检验证明 ,两种处理山羊的排卵和获卵数差异均显著 (P <0 .0 5) ;说明 FSH与PMSG联合使用大大提高了山羊的排卵和获卵数。尽管 PG和 Pr两种同步发情方法都使山羊在开始超排处理后 72到 96 h之间发情 ,但用 PG处理的超排山羊 (N =2 0 )发情时间更为集中 ,大多数 (70 % )都于注射 PG后 2 4～ 30 (开始超排处理后 72～ 78) h开始发情。注射 h CG(发情 )后2 4～ 30 h,70 %以上的卵母细胞都具有第一极体 ,为新排的卵母细胞 ;到 h CG后 36～ 4 0 h,只有不到 4 0 %的卵子有第一极体     

家畜基因工程获新进展——山羊转基因喜获产羔

由江苏农学院和中科院上海细胞所合作研究的“山羊转基因研究”课题,日前受体已顺利产出第一批羔羊。应用本地山羊经同步发情、超排,在取得原核期卵后把P~(MSGHI)(人生长基因)经微注射导入雄原核,然后移入同步发情受体共14头,结果7头妊娠,其中1头流产、1头产4只、1头产3只(1只产出时     

波尔山羊胚胎移植技术研究

选择 1～ 2岁的波尔山羊为供体 ,在发情周期第 9～ 14天 (发情的当天为 0天 )的任何一天连续 3天每天上、下午肌肉注射FSH。在开始注射FSH的第二天上、下午 ,同时肌肉注射氯前列烯醇总量为 1 5ml,进行超排处理。经处理的母羊发情后配种 2～ 3次。在第一次配种后的第 6～ 6 5天手术冲胚、手术移植。 1999年 11～ 12月超排供体 15只 ,冲出胚胎 111枚 ,其中可用胚胎 10 4枚 ,变性胚 3枚 ,未受精卵 4枚。将 10 4枚胚胎移植给 10 3只受体羊 ,结果有 5 5只羊妊娠 (3个情期不返情 ) ,妊娠率为 5 3 4%。     

黄牛同期发情和超数排卵及取卵时间的研究

本地黄牛24头,利用二次PG(15-甲基前列腺素F_(2a))调整,进行同期发情,3个不同剂量组的效果表明:中等剂量每次5支(7.2mg)的效果较好达87.5％。不同年龄组比较发现:2.5～4.5岁黄牛同期发情效果(89％)明显高于4.5～8.5岁黄牛(57％)。进一步利用PMSG(孕马血清)超排处理表明:反应良好、一般,无反应各占1/3,且以3～5岁牛超排效果好;分析超排牛的排卵规律发现:排卵5个以上的牛排卵相对集中,排卵持续时间约在24h左右。进一步对卵子发育情况加以分析,发现要取到原核期前的受精卵,取卵时间宜在最后一次PG后74～76h或出现发情后的26～40h。且以后者推算为佳。     

布尔山羊冻配技术要点

掌握适宜的配种时间。布尔山羊属季节性发情动物，发情季多集中于9～11月，发情周期平均为21天，发情期持续时间平均为37小时，排卵发生于发情期末。为了掌握适宜的配种时间，应在发情12-24小时作第一次输精，间隔10-12小时后作第二次输精(即一个发情周期输精两次)，这样，输精时间被控制在发情范围30～48小时之内，保证了授精率。     

在农村条件下对外种母猪发情配种的探讨

在农村条件下对引进的长白、大约克、杜洛克等外国品种母种猪进行配种试验。结果表明,青年母猪发情45h后、3岁以上母猪发情35h后进行配种效果较好,一个发情期2-3次配种优于一次配种,其受孕率、产仔数均较佳。     

Virus Location and Lymphocyte Apoptosis in Lymph Nodes of Piglets Infected with PCV-2

The present study has been performed to understand the location of the virus, type of apoptotic cells, and their relation to lymph nodes of piglets infected with porcine circovirus type Ⅱ （PCV-2）. Nine 32-day-old conventional piglets free of infection with PCV-2 were used, and distributed into three groups： control group （n = 3）, piglets inoculated with PCV-2 alone （PCV-2, n = 3）, and PCV-2 inoculated and KLH immunostimulated group （PCV-2 ＋ KLH, n = 3）. Superficial inguinal lymph nodes from all piglets were collected for histological examination after 32 days postinoculation, and immunohistochemistry for PCV-2 detection. Location of apoptotic cells was detected with TdT-mediated dUTP nick end labeling （TUNEL） and cell cycle, and the apoptotic rates were measured by flow cytometry. The characteristic histopathological lesions of the piglets in PCV-2 and PCV-2 ＋ KLH were lymphocyte depletions in the cortex and paracortex of the lymph nodes, epithelioid-like macrophage infiltration, and intracytoplasmic inclusion bodies presented in epithelioid-like macrophages. PCV-2 was mainly found in epithelioid-like macrophages by immunohistochemistry. In the lymph nodes, lymphocytes presented higher apoptotic rates in the cortex by TUNEL, special B-cell areas, and similar apoptotic cells were found in this compartment in the control. The apoptotic rates of the lymph nodes were 0.41, 3.34, and 4.88% in the control, PCV-2, and PCV-2 ＋ KLH groups by flow cytometry, respectively. The apoptotic rates of lymph nodes for PCV-2 and PCV-2 ＋ KLH piglets were significantly higher than those for the control group （P〈0.05 and P〈0.01）. The proliferation index （PI） was 0.17_＋0.01, 0.12_＋0.01 and 0.12_＋0.04 in the control, PCV-2, and PCV-2 ＋ KLH group, the PI of the control group was higher than that of the other groups, but without the statistical difference. PCV-2 can induce lymphocyte depletion in lymph nodes of piglets by blocking cell proliferation and promoting apoptosis. This is one o     

不同授粉组合对‘富士’和‘新红星’苹果品质的影响

【目的】探讨不同授粉品种对苹果品质和香气物质成分差异的影响,为高效授粉树的选育和苹果品质的提高提供依据。【方法】采用自育高效授粉树‘红菱’‘红锦’‘红雾’的花粉,在‘富士’(Malus domestica‘Fuji’)、‘新红星’(M.domestica‘Starkrimson’)铃铛花期进行授粉,以授‘嘎拉’(M.domestica‘Gala’)花粉的果实为对照,对果实发育期间总类黄酮含量的变化进行研究,并在果实成熟时测定可溶性固形物、花色苷含量等品质指标及香气物质成分。【结果】不同的授粉品种条件下,‘富士’和‘新红星’苹果除可滴定酸外的各项品质指标均高于对照。‘富士’苹果经‘红菱’授粉后,其果形指数、硬度、花色苷、可溶性糖含量显著提高,分别为对照的1.12、1.15、1.28、1.12倍。‘新红星’苹果经‘红雾’授粉后,其单果重、果形指数、花色苷、可溶性固形物、可溶性糖含量均显著提高,分别为对照的1.22、1.12、2.48、1.10、1.11倍,其可滴定酸含量显著降低,仅为对照的75%。在果实发育的整个生长期内,不同授粉品种处理的‘富士’和‘新红星’苹果总类黄酮含量均高于对照,且不同品种间存在显著差异。在花后160 d,‘富士’经‘红菱’‘红锦’‘红雾’花粉授粉后,果实内总类黄酮含量与对照相比分别增长19.63%、28.72%、13.97%,‘新红星’在花后120 d分别增长14.18%、15.26%、4.24%,差异显著。‘红菱’‘红雾’‘红锦’和对照授粉处理的‘富士’和‘新红星’苹果总酯类挥发性物质的相对含量分别为50.20%、52.03%、42.68%、45.10%和71.08%、68.85%、71.83%、66.03%,‘红菱’授粉后‘富士’‘新红星’果实总酯类挥发性物质含量明显增加,其中2-甲基丁酸乙酯的含量分别为对照的1.14和203.91倍。‘富士’苹果中,‘红菱’‘红雾’‘红锦’授粉处理的果实乙酸-2-甲基丁酯的含量分别为对照的1.73、1.07、1.36倍;其己酸乙酯和乙酸丁酯的含量分别为对照的1.09、1.12、1.29倍和1.50、0.77、1.30倍。而在‘新红星’苹果中,经‘红菱’‘红雾’‘红锦’授粉后,乙酸-2-甲基丁酯和己酸乙酯的含量分别为对照的1.82、1.27、0.93倍和2.57、1.15、0.27倍;乙酸丁酯的含量分别为对照的7.83、3.48、3.30倍。此外,‘富士’和‘新红星’苹果经‘红菱’授粉后,其烃类物质含量明显高于对照,主要表现为法呢烯的增多。【结论】高效授粉树能显著提高‘富士’和‘新红星’苹果的外观和内在品质,并且与对照存在显著差异。不同授粉组合对‘富士’和‘新红星’苹果品质影响差异较大,经‘红菱’授粉,‘富士’和‘新红星’苹果品质有显著提高。     

不同温度LED光萎凋对铁观音MEP上游关键基因和香气的影响

【目的】萜类化合物是乌龙茶挥发性芳香物质的重要组分,2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸途径（MEP）上游关键基因直接参与调控萜类化合物前体物质的合成。而乌龙茶香气的形成与萎凋工序密切相关,光照和温度是影响萎凋的重要因子,探讨LED光与温度在乌龙茶萎凋过程中对香气的影响,为提高乌龙茶萎凋叶香气品质提供参考。【方法】基于转录组数据,根据KEGG筛选出响应光照的MEP上游关键基因（DXS、DXR、HDS、HDR）。对一芽三叶铁观音鲜叶进行LED白光和不同温度（20℃（L20）、25℃（L25）、30℃（L30）、35℃（L35）和40℃（L40））萎凋处理,黑暗下温度（20℃（D20）、25℃（D25）、30℃（D30）、35℃（D35）和40℃（D40））萎凋处理;分别测定铁观音萎凋叶的香气组分和MEP上游关键基因的相对表达量。【结果】L30处理萎凋叶各基因表达量达到最大值,萜类基因（DXS、DXR、HDS、HDR）表达量分别为XY组（对照）的4.31、5.28、11.77、1.59倍,为D30处理的2.24、2.39、1.86和1.60倍。D30组各基因表达量为黑暗处理组最大,依次为XY组的1.92、2.21、6.34和0.99倍。L20处理萎凋叶的α-法呢烯芳樟醇氧化物（I、II）含量最高,较XY依次提高了15.05%、4.92%和15.13%;L30处理萎凋叶的橙花叔醇、芳樟醇和香叶醇含量最高,较XY组依次提高了3.71%、6.14%和15.28%;LED组铁观音萎凋叶主要香气组分含量均高于相对应的温度处理组。通过主成分分析法建立数学模型,对萎凋叶香气组分进行评估,得出L20组萎凋叶得分最高,L30组萎凋叶次之;与香气分析得出结果一致。【结论】铁观音萎凋叶基因表达量与香气含量的变化趋势不存在同步性;L30处理萎凋叶基因表达量、主要萜类香气物质含量和主成分分析得分均较高,这与铁观音生产上的萎凋温度相一致。萎凋温度过高（40℃）不利于萎凋叶萜类关键基因的表达和萜类化合物的形成。     

喀斯特地区不同玫瑰混农林模式的土壤螨类群落结构特征

混农林业作为集约型土地利用和经营方式之一,运用于石漠化地区有利于土壤生物多样性的修复.2019年7月,对贵州省毕节市撒拉溪镇龙场村的玫瑰+大豆、玫瑰+苹果+大豆和玫瑰+玉米3种混农林模式样地中的土壤螨类进行了调查,以玫瑰单作为对照,共捕获土壤螨类1524头,隶属3目41科64属,以盖头甲螨属(Tectocepheus)...     

丙草胺与4种磺酰脲类除草剂混用对稻苗安全性的影响

室内测定了丙草胺分别与磺酰脲类除草剂甲磺隆、苄嘧磺隆、醚磺隆和吡嘧磺隆混用后，一叶一心期稻苗抑制50％株高的使用浓度(IC50)和抑制10％株高的使用浓度(IC50)，并用共害系数(CHC)对混用组合安全性的联合作用进行了评价．结果表明：所有混配处理的CHC10均小于12．0，表现出强烈的解毒效应；不同混用处理的CHC50值差异很大，丙草胺与甲磺隆混用的CHC50均小于25．0，解毒效应显著．丙草胺与苄嘧磺隆混配的CHC50为26．1—167．8，丙草胺与苄嘧磺隆混用的CHC50为52.2—115.5，丙草胺与醚磺隆混用的CHC50为80．0—110．2．     

不同阶段肉仔鸡能量需要模型的建立

试验研究了0~8周龄肉仔鸡胴体与羽毛蛋白、脂肪的生长曲线及0~3、4~6和7~8周龄3个阶段每日摄入不同水平的能量及蛋白对其体蛋白、体脂肪沉积的影响,旨在确定胴体与羽毛蛋白、脂肪动态的沉积规律及日粮能量沉积为体蛋白及体脂肪的效率。试验1,包括3个饲养试验分别选取体重相近的0、21和42日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡324只,按性别及日粮随机分为18个处理,每处理3个重复,每重复6只鸡。肉仔鸡每日限量饲喂,饲喂水平分别为正常采食量的90%、70%和50%,每日定量供给肉仔鸡高、中、低3个水平的高蛋白质基础日粮及由饲喂水平决定的定量淀粉,进而使肉仔鸡每日采食能蛋质量比(代谢能/粗蛋白)不同的9种日粮;试验2,选取体重相近的0日龄AA肉仔鸡144只,按性别不同随机分为2个处理,每处理4个重复,每重复18只鸡。试验初和试验末分别进行屠宰,以测定肉仔鸡胴体和羽毛蛋白、脂肪和干物质含量。结果显示:1)Gompertz方程能很好的拟合不同性别肉仔鸡蛋白和脂肪的生长,不同性别间蛋白和脂肪极限重量、羽毛蛋白和脂肪的生长速率差异显著(P<0.05),而胴体蛋白和脂肪的生长速率差异不显著(P>0.05)。2)在0~3、4~6和7~8周...     

ICP-OES法同时测定果蔬中铅、砷、镉、铬、铜、锡含量

果蔬样品经混酸消化后,控制一定的酸度,定容后应用等离子体发射光谱法(ICP-OES)对果蔬中铅、砷、镉、铬、铜、锡六种有害重金属进行测定,研究了分析测定条件,方法简单快速。测定结果表明,五种元素的加标平均回收率在91.0%~107%之间。其RSD均小于3.5%。按该方法进行处理及测定铅、砷、镉、铬、铜、锡,在选择的测定条件下最低检出限分别为0.0006 mg/kg、0.0003 mg/kg、0.00003 mg/kg、0.00005 mg/kg、0.00003 mg/kg、0.0006 mg/kg。     

Characterisation of Neonicotinoid and Pymetrozine Resistance in Strains of Bemisia tabaci (Hemiptera: Aleyrodidae) from China

Four strains of the Q biotype and one of the B biotype of the whitefly Bemisia tabaci collected from China were characterised for resistance to four neonicotinoid insecticides and pymetrozine. Q biotype strains showed moderate to strong resistance to imidacloprid, thiamethoxam and acetamiprid, but little or no cross-resistance to dinotefuron. Resistance to neonicotinoids was consistently associated with resistance to pymetrozine, despite the latter having a distinct (though unresolved) mode of action. The single B biotype strain proved largely susceptible to all the insecticides investigated. Resistance in the Q biotype strains was associated with over-expression of a cytochrome P450 monooxygenase gene, CYP6CM1, whose substrate specificity presumably accounts for the observed cross-resistance profiles.     

贵州山区做好玉米区域试验的经验与方法

玉米区域试验是在不同生态条件下,对新育成品种的丰产性、稳产性、抗逆性、适应性及品质性状等进行全面鉴定和综合评价的中间环节,是新育成品种能否通过审定推广的重要过程,是农业科研与农业生产的重要纽带,是新品种是否能在本地区推广应用的科学依据,做好玉米区域试验事关重大.     

夹竹桃目植物新资料

本文根据国内外模式标本和文献资料,将亚洲、美洲和大洋洲夹竹桃目植物进行了部分整理和研究,对该目夹竹桃科和萝摩科18属37种作了订正,其中有11种分布新记录,17个新异名,建立15个新名称和1个新组合.