日粮添加高水平硫酸锌和纳米氧化铜对鸡脏器组织锌铜沉积的影响

 【目的】研究高锌（硫酸锌）常铜（纳米氧化铜）日粮对鸡脏器组织铜锌含量的影响,探讨Zn2+与纳米氧化铜在消化道吸收时的互作关系。【方法】选取1日龄SPF白莱航蛋用公雏120只,随机分为4组,每组5个重复。1组为对照组,饲喂基础日粮（以纳米氧化铜的形式添加铜8 mg•kg-1）;2—4组为高锌组,以ZnSO4•7H2O的形式分别在基础日粮中添加锌250、500和1 000 mg•kg-1。【结果】日粮添加锌250—1 000 mg•kg-1,受试鸡肝、腺胃、十二指肠和空肠中锌和金属硫蛋白含量显著高于对照组（P＜0.01或P＜0.05）,鸡十二指肠铜含量极显著高于对照组（P＜0.01）。日粮添加锌1 000 mg•kg-1时,空肠铜含量极显著高于对照组和日粮锌添加组（锌添加量分别为：250和500 mg•kg-1,P＜0.01）。试验至42 d,日粮添加锌500和1 000 mg•kg-1时,鸡肝脏铜含量极显著高于对照组和日粮锌添加组（锌添加量为：250 mg•kg-1,P＜0.01）。日粮锌水平与鸡肝脏、十二指肠、空肠和腺胃锌含量呈显著正相关（P＜0.05）,与十二指肠、空肠铜含量呈显著正相关（P＜0.05）,与肝脏铜含量呈正相关（P＞0.05）,与十二指肠、腺胃和空肠金属硫蛋白含量呈正相关（P＞0.05）。肝脏金属硫蛋白含量和铜含量呈极显著正相关（P＜0.01）;十二指肠、空肠金属硫蛋白含量和铜含量呈正相关（P＞0.05）。【结论】日粮添加高水平硫酸锌没有拮抗鸡对纳米氧化铜的消化吸收,纳米氧化铜在消化道可能是以纳米颗粒的形式吸收。     

纳米氧化铜和纳米铜对肉仔鸡铜表观消化率的影响

[目的]为了研究在肉鸡饲料中添加纳米氧化铜和纳米铜对饲料中粗蛋白和微量元素铜、锌、铁、锰表观消化率的影响。[方法]选20羽20日龄AA商品肉仔鸡随机分为4组,1～4组在基础日粮中分别以硫酸铜、氧化铜、纳米氧化铜、纳米铜的形式添加铜8mg/kg,研究纳米氧化铜和纳米铜对肉仔鸡铜表观消化率的影响,试验期为9d。[结果]与硫酸铜、氧化铜相比,添加纳米氧化铜极显著提高铜的表观消化率(P<0.01),添加纳米铜显著提高铜表观消化率(P<0.05);添加纳米氧化铜能够显著提高锌、锰的表观消化率(P<0.05);添加纳米氧化铜和纳米铜对粗蛋白的表观消化率无显著影响(P>0.05)。[结论]纳米氧化铜和纳米铜的铜表观消化率极显著高于硫酸铜和氧化铜;添加纳米氧化铜可显著提高锌、锰的表观消化率。     

纳米氧化铜与纳米氧化铁悬浮液对黄瓜霜霉病的抗性及防效

【目的】探明纳米氧化铜（CuO NPs）和纳米氧化铁（Fe2O3 NPs）对黄瓜生理特性的影响及对黄瓜霜霉病的抗性,为黄瓜生产上应用纳米材料防治黄瓜霜霉病提供参考依据。【方法】在黄瓜真叶期采用叶面喷雾法研究不同浓度（10 μg/mL,50 μg/mL,100 μg/mL）CuO NPs和Fe2O3 NPs悬浮液喷施后再接种接种霜霉病病原菌后对黄瓜叶片丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）和叶绿素（Chl.a＋Chl.b）含量的影响,以及对黄瓜霜霉病的防治效果。【结果】CuO NPs和Fe2O3 NPs对黄瓜霜霉病的防效分别为40.75%～72.23%和58.73%～71.24%;除100 μg/mL CuO NPs处理外 ,其余处理叶片叶绿素含量均有提高,CuO NPs处理和Fe2O3 NPs处理分别较超纯水处理提高25.000%～36.583%和13.224%～48.263%;除CuO NPs处理GSH含量在病原接种后96 h受抑制外,2种纳米材料其余各处理黄瓜叶片的MDA含量随时间推移较CK逐渐下降,GSH含量较CK逐渐提高。其中,50 μg/mL CuO NPs和100 μg/mL Fe2O3 NPs对黄瓜霜霉病病原菌的抗菌效果最佳;100 μg/mL CuO NPs悬浮液处理对黄瓜叶片产生毒害,进而对霜霉病菌的抑制效果显著减弱。【结论】CuO NPs和Fe2O3 NPs对黄瓜霜霉病均具有一定防治效果,在适宜浓度范围内可提高病菌侵染后的叶绿素含量和GSH含量,并降低MDA含量。2种纳米材料可根据当地黄瓜霜霉病发生具体情况选择适宜浓度进行使用。     

纳米氧化铜对砷胁迫下水稻种子发芽及幼苗生长的影响

为了研究纳米氧化铜（nCuO）对砷（As）胁迫下水稻种子发芽以及幼苗生长的影响,在培养皿中进行12 d的种子发芽试验。结果表明：2 mg·L^-1砷处理下,添加低浓度纳米氧化铜（0.5和1 mg·L^-1）可以缓解水稻幼苗的砷毒害,添加高浓度的纳米氧化铜（10、20和50 mg·L^-1）会抑制水稻种子的发芽率和根长,降低干重。与单独砷处理相比,添加纳米氧化铜可以提高水稻叶片SOD活性(0.5、1和20 mg·L^-1)及CAT活性（1、10、20和50 mg·L^-1）。水稻地上部和根部砷含量随着纳米氧化铜的加入而降低。由此可见,不同浓度的纳米氧化铜对砷胁迫下种子发芽和幼苗生长的影响不同。     

纳米氧化铜对白菜种子发芽的毒害作用研究

纳米材料的生态毒性问题越来越受到人们的广泛关注。本文探讨了纳米氧化铜(22~75nm,平均43nm)对白菜种子发芽的影响,并以微米氧化铜和铜离子(Cu2+)进行对比分析。结果表明,各浓度处理(0.2、0.5、1、2、4、8mg·L-1)纳米氧化铜对白菜种子发芽率与对照相比均无显著差异(P>0.05),但在较低浓度下(0.4mg·L-1)对根伸长和芽伸长即表现出抑制作用。随着纳米氧化铜浓度增加,对根伸长抑制率显著提高,对芽伸长抑制率则缓慢提高,其半抑制浓度(IC50)分别为11.4mg·L-1和1309.4mg·L-1。100mg·L-1时,微米氧化铜对白菜根、芽伸长的抑制率都小于20%,其毒性小于纳米氧化铜;但纳米氧化铜的毒性并非其溶解出的铜离子所致。     

环境水体中纳米氧化铜对金鱼藻的毒性效应研究

采用模拟水体环境的方法,研究了低浓度(2～8 mg·L-1)纳米氧化铜(CuONPs)溶液对金鱼藻生长的毒性影响,并与相同浓度的微米氧化铜和可比剂量铜离子进行对比分析.实验结果显示在纳米氧化铜溶液的作用下,金鱼藻对Cu元素的积累量为相同浓度的微米氧化铜溶液作用下的6～12倍,金鱼藻体内的酶活性对纳米氧化铜溶液作用的浓度和时间均有明显反应.在作用20 d时,4mg·L-1的纳米氧化铜溶液作用下金鱼藻体内POD、SOD活性均达到最大值;在作用30 d时,同样浓度作用下金鱼藻的叶绿素含量达到峰值,其后逐步下降.对于8 mg· L-1纳米氧化铜溶液的可比剂量铜离子(0.23 mg· L-1)作用于金鱼藻,其POD活性、SOD活性和叶绿素含量的变化明显小于8 mg· L-1浓度的纳米氧化铜溶液.上述结果表明低浓度(4～8 mg·L-1)的纳米氧化铜溶液对金鱼藻生长有明显的抑制效应和毒害作用,纳米氧化铜对金鱼藻的生长表现出很强的纳米效应,其生长同时受到纳米氧化铜溶液作用时间的影响,但低浓度的微米氧化铜溶液对金鱼藻生长几乎不存在毒害作用.     

纳米氧化铜表面超疏水膜的制备

通过控制氧化法在铜基底表面制得了氧化铜纳米花瓣膜,然后分别用十二烷基硬脂酸、硬脂酸、十二烷基硫醇和线性低密度聚乙烯对其表面进行修饰.结果表明:试验得到了超疏水复合膜,表面接触角均超过150°,滚动角小于5°.其中,十二烷基硫醇修饰时,可在短时间内(1h)得到疏水性较高的纳米复合膜,表面的接触角达到165°.通过晶型分析讨论纳米氧化铜的形成机理,并用X-射线粉末衍射(XRD)、接触角测量、表面反射红外光谱(IR)及扫描电子显微镜(SEM)对复合膜进行了表征分析,结果表明,试验成功制备了具有不同形貌的超疏水性纳米结构复合膜.     

五味子对产蛋期藏鸡肠道微生物菌群的影响

为研究五味子对产蛋期藏鸡肠道微生物的影响,探明中药五味子对家禽肠道微生物作用的机理,以40周龄藏鸡作为试验对象,对照组饲喂全价产蛋期日粮,试验组饲喂添加0.5%五味子的全价日粮,4周后收集藏鸡回肠内容物,对其中微生物的16S rRNA V3～V4可变区进行Illumina高通量测序和生物信息学分析。结果表明,饲料中添加五味子后藏鸡肠道微生物的OTU种类无显著变化,但相似性增加。藏鸡肠道微生物中厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、梭杆菌门为优势菌群,五味子组与对照组相比拟杆菌门相对丰度上调16.37%,主要是由拟杆菌门下的拟杆菌属和理研杆菌属的相对丰度上升引起,厚壁菌门相对丰度下调19.78%,这主要是由厚壁菌门下的的乳酸杆菌属和罗姆布齐亚菌属的相对丰度下调引起。五味子组氨基酸球菌科、考拉杆菌属的相对丰度与对照组相比上调差异显著(P<0.05)。五味子组与对照组相比肠道微生物物种α多样性有所升高,组内不同样本间微生物β多样性的差异性减小,但差异不显著。结果表明,产蛋期藏鸡饲料中添加0.5%五味子使藏鸡肠道微生物多样性增高,而个体间菌群差异性减小,部分有益微生物的生长得到了有效促进,有利于...     

阿特拉津对大鼠抗氧化功能及肝脏组织学变化的影响

探讨阿特拉津对大鼠抗氧化功能及肝脏组织学变化的影响,为阐明阿特拉津等环境激素损害动物机体的机理提供依据.选取雄性大鼠[(200±10)g]60只,随机分成对照组,正常饲喂,阿特拉津高、中、低3个剂量组,分别按照阿特拉津LD50值(1,780mg·kg-1)的1/8,1/16和1/32倍腹腔注射给药,采用紫外分光光度法、半定量RT-PCR技术等,检测大鼠血清抗氧化酶水平及肝脏金属硫蛋白-Ⅰ(metallothionein-Ⅰ,MT-Ⅰ)mRNA表达量的变化,并观察肝脏的组织学变化.结果表明:阿特拉津作用下,肝脏出现脂肪性病变;血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,随着给药时间的延长,3个剂量组均显著增加,低、中、高剂量组分别上升19.83%、1l.47%和8.81%;血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,两次给药后,各组均较一次给药后显著增加(p＜0.05),低、中、高剂量组分别升高185.04%、26.4%和1.95%.在阿特拉津作用下,肝脏中MT-Ⅰ mRNA表达量,随着给药剂量的增加而增加,一次给药后,低、中、高剂量组分别比对照组增加113.26%、163.98%和219.74%;二次给药后,分别增加146.03%、260.99%和247.81%,各剂量组二次给药后均显著高于一次给药后,低、中、高剂量组分别增加31.27%、55.61%和23.78%.     

猪SsMT-1A和SsMT-2A的原核表达及金属结合特性研究

【目的】通过对猪(Sus Scrofa)金属硫蛋白1A(metallothionein-1A of S. Scrofa, SsMT-1A)和2A(Metallothionein-2A of S. Scrofa, SsMT-2A)的生物信息学分析、原核表达和纯化,研究它们与Zn(Ⅱ)和Cu(Ⅰ)的结合特性。为饲料中添加Zn和Cu在促进猪生产性能的作用机制研究提供理论基础。【方法】首先,从NCBI中获得SsMT-1A和SsMT-2A的基因序列,利用ClustalX2和ExPASy分析两者的蛋白序列和结构差异,利用MEGA-X构建两者与其他物种MT蛋白分子的进化树。其次,构建pET-28a-SUMO-SsMT-1A/SsMT-2A原核表达载体,转化BL21(DE3)plysS,用IPTG诱导表达。利用Ni-NTA柱亲和层析和葡聚糖凝胶层析纯化重组蛋白。最后,利用大肠杆菌金属耐受性实验、圆二色光谱（circular dichroism, CD）、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix assisted laser analytic ionization time of flight m...     

纳米氧化锌对早期断奶仔猪生产性能的影响

选择120头21日龄早期断奶长大去势仔猪,随机分为5个处理,每个处理3个重复,每个重复8头猪,进行饲养试验。其中5个处理分别为对照组(100mg/kg Zn)、高锌对照组(3 000mg/kg Zn)和3个试验组。试验组添加水平分别为试验Ⅰ组250mg/kg纳米氧化锌,试验Ⅱ组375mg/kg纳米氧化锌,试验Ⅲ组500mg/kg纳米氧化锌。结果表明:试验组能提高仔猪日增重,分别比对照组提高10.0%,18.2%和11.6%;能降低仔猪料肉比(P>0.05),分别比对照组降低10.2%,11.2%,8.8%;在控制仔猪腹泻方面,与对照组相比差异显著(P<0.05),分别降低27.1%,30.8%,33.6%。     

鼻咽良恶性病变中NF-κB、c-Myc和hTERT的表达及意义

目的 :探讨 NF- κB、c- Myc、h TERT在鼻咽粘膜慢性炎和鼻咽癌中的表达及意义。方法 :用免疫组化 SP法检测2 7例鼻咽粘膜慢性炎和 30例鼻咽癌中NF- κB、c- Myc、h TERT的表达。结果 :NF- κB、c- Myc和 h TERT在鼻咽粘膜慢性炎组中的阳性表达率分别为 5 5 .5 %、74 .1%和 5 9.3% ;在鼻咽癌组中的阳性表达率分别为 83.3%、93.3%和 90 .0 % ,与鼻咽粘膜慢性炎组比较差异均有显著性 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ;在鼻咽癌中 NF-κB和 c- Myc、NF-κB和 h TERT的表达均呈显著正相关 (分别 P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。结论 :在鼻咽癌中 NF- κB、c- Myc和 h TERT均高表达 ,它们的过表达可能参与了鼻咽癌的发生和发展过程。     

oleosin-MT融合蛋白在拟南芥中的表达及鉴定

【目的】获得转金属硫蛋白(MT)基因的拟南芥植株,为利用植物生物反应器规模化生产MT奠定基础。【方法】利用融合PCR方法,扩增拟南芥MT基因与油体蛋白oleosin基因的融合基因,将融合基因克隆至表达载体pOP上,构建重组质粒pOP-oleosin-MT。采用冻融法将质粒pOP-oleosin-MT转入根癌农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化拟南芥,用PCR检测并筛选转基因拟南芥阳性植株,采用SDS-PAGE法检测oleosin-MT融合蛋白的表达,用邻苯三酚自氧化法和结晶紫法测定融合蛋白的体外抗氧化活性。【结果】成功构建了植物油体特异表达载体pOP-oleosin-MT,融合蛋白oleosin-MT在拟南芥种子中成功表达,其分子质量为26ku;总蛋白质量浓度达到50μg/μL时,超氧阴离子的清除率最高,为58.5%;总蛋白质量浓度为10μg/μL时,羟自由基清除率可达69.7%。【结论】成功获得转MT基因的拟南芥株系,并证明融合蛋白oleosin-MT在拟南芥中具有良好的体外抗氧化活性。     

纳米生物助长器对鸡生产性能的影响

选用1日龄肉仔鸡、43日龄商品代海兰灰育成鸡与40周龄商品代海兰白蛋鸡,测定了纳米生物助长器对育成鸡、肉鸡生长速度、料肉比、成活率,产蛋鸡产蛋率、料蛋比、蛋重、死亡率等指标的影响。结果表明,采用生物助长器的试验组育成鸡饲养只日平均采食量较对照组减少1.06%,体重增加5.26%,饲料转化率提高9.69%;肉鸡试验组较对照组出栏率提高2.89%,出栏重提高3.84%,料肉比降低8.47%,耗料量降低4.52%;蛋鸡试验组较对照组产蛋率提高2.46%,产蛋量增加5.57%,饲料转化率提高5.57%,鸡群死亡和淘汰率降低66.10%,鸡舍臭味均明显降低。     

食物源性铜、锌对鸡体内铜代谢的影响

实验结果表明:鸡饲料中添加的铜越多,向胆汁排泄的铜越多,肝脏对铜并无显著的积累作用。当鸡饲料中补充锌以后,可以诱导肠粘膜浆液中金属硫蛋白(MT)结合更多的铜。但若先以锌诱导MT合成,然后再同时补充铜时,与MT结合的铜并无明显增多,胆汁中排出的铜还略有下降,肝脏中亦无过多铜的积累作用。因而提示锌有占位性结合在肠粘膜浆液中MT上,妨碍了它进一步与铜结合。并减少铜的真性吸收。     

饲粮中不同锌源及锌水平对固始鸡和AA肉鸡肝脏金属硫蛋白含量及基因表达的影响

为了研究肉鸡肝脏中金属硫蛋白(metallothionein,MT)含量和MT mRNA表达水平作为评定锌源生物利用率的有效性,在固始鸡和AA肉鸡饲料中添加不同水平的饲料级硫酸锌(ZnSO4·H2O)、氧化锌(ZnO)和氨基酸络合锌(ZnAA),分别测定了2、3、4、5和6周龄末肝脏中MT含量和MT mRNA的表达水平。结果表明:品种间肝脏中MT含量和MT mRNA表达水平差异极显著,固始鸡高于AA肉鸡。锌源和锌添加水平对所测定指标产生显著影响,氨基酸络合锌显著高于硫酸锌,这两种锌源极显著高于氧化锌;随着锌添加水平增加,肉鸡肝脏中MT含量和MT mRNA表达水平提高,锌水平之间差异极显著。4周龄前,随着周龄增长,肝脏中MT含量和MT mRNA水平显著升高,而4周龄后随周龄显著降低。以肝脏中MT含量评定的锌源间相对生物利用率与以MT mRNA表达水平为指标评定的结果一致性较好,说明肝脏中MT含量和MTmRNA表达水平是评定锌源相对生物利用率的有效指标,相比较而言,MT含量受品种、周龄和锌添加水平的影响大于MTmRNA表达水平。     

铜缺乏奶牛肝脏金属硫蛋白的电泳特征

本实验选择铜缺乏区有明显临床症状的奶牛 6头 ,采集肝脏样品后用差速离心法分离肝脏金属硫蛋白 (MT) ,以Sephadex-G75进行柱层析纯化 ,将纯化后的 MT进行 SDS-PAGE不连续电泳 ,并作考马斯亮兰染色及扫描分析。将 6头健康奶牛的肝脏样品作为对照。实验结果表明 ,健康奶牛肝细胞浆 MT经不连续 SDS-PAGE电泳时可出现两条清晰的区带 ;发病奶牛的 MT除表现条清晰区外 ,同时在负极端条带前后位置均出现较为明显的杂带。发病奶牛的区带 及区带 的含量均显著大于健康奶牛。结论 :铜缺乏能够改变奶牛肝脏中 MT的代谢     

OsMT-1-4c 基因原核表达载体的构建、表达及重金属抗性研究

为研究水稻抗重金属的特性,构建了水稻金属硫蛋白(metallothionein,MT)原核表达载体PGEX4T-3-Os MT-1-4c,并转化到Rossetta菌株中诱导表达,得到大小为33.643 k Da的GST-Os MT-1-4c重组蛋白。将得到的沉淀用1×PBS溶解并在低温下超声破碎,离心并电泳检测,然后纯化得到融合蛋白。并在重金属Cd~(2+)胁迫下诱导表达重组载体和空载体菌株,发现能表达GST-Os MT-1-4c蛋白菌株比表达GST蛋白菌株抗重金属的能力强。