鸡新城疫卵黄抗体效价动态变化情况研究

选取150日龄健康产蛋母鸡40羽,肌肉注射鸡新城疫Lasota疫苗2倍剂量/羽,10 d后再注射鸡新城疫油乳剂灭活苗4倍剂量/羽,自由采食和饮水。分别收集免疫前、免疫后10、20、30、40和50 d,母鸡所产鸡蛋提取卵黄抗体,测定不同时间卵黄抗体效价。结果发现免疫前卵黄抗体效价较低,鸡新城疫Lasota疫苗免疫后卵黄抗体效价开始缓慢升高,鸡新城疫油乳剂灭活苗加强免疫后卵黄抗体效价大幅度提高,并在二免后20 d卵黄抗体效价达到高峰,维持一段时间后卵黄抗体效价开始逐步下降。表明收集鸡新城疫疫苗二免后20 d左右的鸡蛋提取卵黄抗体效价高。     

猪圆环病毒2型高免卵黄抗体的研制与应用

为制备猪圆环病毒2型(porcine circovirus serotype2,PCV-2)高免卵黄抗体,并对其治疗效果进行研究,通过自制猪圆环病毒2型(PCV-2)灭活苗,免疫SPF产蛋鸡,收集高免蛋,制备PCV-2高免卵黄抗体,对高免卵黄抗体进行无菌检验、活体动物安全性检测,用琼脂扩散方法进行效价检验和人工感染保育猪治疗试验,并将其应用于临床实践,观察其治疗效果。结果抗体效价达到1∶64;人工感染治疗试验治愈率达100%;临床试验治愈率为96%,应用效果良好。     

抗兔瘟精制卵黄抗体的研制

选用免疫原性好的兔瘟抗原加工成浓缩兔瘟灭活组织疫苗,按特定的免疫程序接种健康商品鸡群,通过血凝抑制试验检测免疫鸡群血清和卵黄的兔瘟抗体效价,适时收集高免卵黄,选用特定的抗体分离提纯工艺,研制对兔瘟有预防和治疗双重作用的精制卵黄抗体。经实验室生物学检验,本品使用无刺激,作用迅速,对兔瘟早期治愈率为80%,对兔瘟紧急预防有效率为100%。     

抗猪繁殖与呼吸综合征病毒卵黄抗体的制备及临床应用

制备猪繁殖与呼吸综合征病毒高免卵黄抗体,研究其治疗效果。以猪繁殖与呼吸综合征灭活苗免疫产蛋鸡,采用ELISA方法检测卵黄抗体效价,收集高效价卵黄,采用氯仿抽提和硫酸铵盐析法纯化卵黄抗体。ELISA方法测定收集抗体效价为1∶8 000,测定纯化的抗体浓度为7.85mg/mL,微生物学检验及安全性试验表明制备的卵黄抗体安全可靠,人工感染治愈率和临床应用治愈率分别为100%和89.1%,表明制备的卵黄抗体对猪繁殖与呼吸综合征具有显著的治疗效果。     

抗鸡白痢沙门氏菌病卵黄抗体粉饲料添加剂的研制

采用吉林市郊区数家鸡场分离鉴定的致病性鸡白痢沙门氏菌,经固体增菌培养纯化后甲醛灭活,制成油佐剂灭活抗原免疫健康蛋鸡;用平板凝集试验检测卵黄抗体效价,当抗体效价达到1:320倍时,收集免疫鸡蛋分离卵黄,减压低温干燥制成卵黄抗体细粉并进行效价测定和安全检测。最后将卵黄抗体细粉以不同比例加入雏鸡饲料,对试验雏鸡进行预防量饲喂后强毒菌攻毒试验、强毒菌攻毒后治疗量的饲喂试验及小区域雏鸡饲喂试验。结果表明,卵黄抗体粉预防添加量为3%和卵黄抗体治疗添加量为6%时,攻毒保护率、治愈率分别为77.50%和72.50%;饲料添加组较同期普通饲养组总发病率降低7个百分点,抗生素用量降低33%,增重率提高6%。     

鸭坦布苏病毒冻干高免卵黄抗体的研制

本研究用鸭坦布苏病毒病灭活苗三次免疫SPF蛋鸡,收取高免鸡蛋,制备成冻干高免卵黄抗体;用鸡胚中和试验和间接ELISA方法进行效价检测。试验结果显示,第3次免疫后2周,卵黄抗体中和效价为1∶103.5,4、5周达到最高值1∶104.5;间接ELISA方法检测冻干前后的抗体效价结果均为阳性;对鸭坦布苏病毒强毒的攻毒保护率达100%,可为鸭坦布苏病毒的防控提供一种有效的冻干高免卵黄抗体制剂。     

蛋鸡首免乙型脑炎病毒后卵黄抗体变化规律的研究

本试验旨在研究疫苗、免疫剂量和注射方式对卵黄抗体效价规律的影响,探讨制备抗猪乙型脑炎病毒卵黄抗体蛋鸡的最佳免疫程序。选用无免疫褐羽蛋鸡180只,随机分成18组,每组10只。1、2组均为对照组,注射无菌生理盐水;3~10组采用皮下和肌肉两种注射方式,并依次注射灭活苗0.2、0.5、1.0和1.5 mL;11~18组同样采取两种注射方式,依次免疫相同剂量弱毒苗。各试验组分别于免疫前1 d、免疫后第3、7、10、14、18、21和28天采集当日鸡蛋6枚,提取卵黄抗体,测定效价。试验结果显示,1~6、11、12组卵黄抗体效价均为0,未产生明显免疫应答;7~10组注射灭活苗后7 d,平均卵黄抗体效价达到峰值,抗体持续时间为14 d;13~18组注射弱毒苗后14 d达到最高值,抗体持续时间为21 d;注射剂量相同但注射方式不同的两组之间比较,卵黄抗体效价差异不显著（P>0.05）;相同注射方式,相同疫苗的各试验组间,随着免疫剂量的增加卵黄抗体效价逐渐加强,且差异显著（P<0.05）。以上结果表明,肌肉或皮下两种注射方式,蛋鸡产生明显免疫应答至少需要免疫灭活苗1.0 mL或弱毒苗0.5 mL。比较弱毒苗与灭活苗,灭活苗刺激机体产生的抗体速度较快,但维持时间较短;较少剂量弱毒苗就可刺激机体产生抗体,但速度慢、维持时间长。     

抗猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒卵黄抗体制备及其临床应用研究

本研究旨在制备猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒高免卵黄抗体,研究其治疗效果。以猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻二联灭活苗免疫产蛋鸡,琼脂扩散方法检测抗体效价达到1∶64时,收集卵黄,采用氯仿抽提和硫酸铵盐析法纯化卵黄抗体,进行微生物学检测、安全性试验,通过人工感染治疗试验和临床应用,观察其治疗效果。结果人工感染治愈率为100%,临床应用治愈率为88.0%,表明制备的卵黄抗体对猪传染性胃肠炎和流行性腹泻具有显著的治疗效果。     

鸡新城疫减蛋综合征和大肠杆菌病三联油佐剂苗免疫试验

应用鸡新城疫（ＮＤ）、减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）、大肠杆菌病三联油佐剂灭活苗进行田间免疫试验，结果表明该三联苗免疫鸡不仅抗体水平高，而且免疫持续时间长，具有与单苗同样的免疫效果。被检血清中ＮＤ抗体ＨＩ平均效价比卵黄高１￣２个滴度；血清与卵黄中ＥＤＳ－７６抗体ＨＩ平均效价基本相同（Ｐ〉０．０５），可用卵黄代替血清作为血清学检验材料。卵黄中未检出大肠杆菌凝集抗体。     

鸡抗小鹅瘟精致高免蛋黄抗体的研制

利用发生小鹅瘟死亡的鹅的病料分离病毒,经处理后制备抗原,以制备的小鹅瘟灭活油乳剂抗原对试验鸡颈部皮下注射0.5ml/只;2周后加倍量进行强化免疫;间隔2周后用灭活油乳剂抗原再次强化免疫1次,颈部皮下注射2.0ml/只;以后间隔8周进行1次强化免疫,每次颈部皮下注射2.0ml/只;用琼扩方法检测萃提蛋黄上清液中抗小鹅瘟特异抗体效价,直到抗体效价达到1：64以上即可集蛋,用于制备琼扩抗体效价达到1：32及以上小鹅瘟蛋黄抗体;并对抗体进行无菌检验、安全试验、效力试验、临床治疗试验等,效果明显。     

水貂肠炎病毒高免卵黄抗体的制备及应用

用水貂肠炎病毒免疫蛋鸡制备卵黄抗体,结果表明,经５次免疫制备的卵黄抗体,于最后一次免疫第１０天ＡＧＰ效价达１：３２,第３０天效价为１：８。该抗体较稳定。４℃保存１２０天,－２０℃保存１８０天效价不变。用该抗体治疗细小病毒肠炎病犬,治愈率达９３．９％,证实用水貂肠炎病毒制备卵黄抗体是成功的,可用于国小病毒肠炎的治疗。     

抗牛多杀性巴氏杆菌高免卵黄抗体IgY的制备及间接血凝检测方法的建立

本研究通过自制牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌灭活菌苗免疫产蛋鸡,采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取卵黄抗体IgY,并采用间接血凝方法检测抗体效价。结果表明,抗原致敏红细胞的最佳浓度是800μg/mL,免疫后第7周抗体效价达到高峰,效价为1：1024,高效价持续5周开始下降,测定提取的IgY浓度为8.258mg/mL,无菌检测及动物安全性实验表明制备的卵黄抗体安全可靠。本研究制备了抗牛多杀性巴氏杆菌卵黄抗体,为防治由荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌所致的犊牛肺炎提供了新的手段。     

甘肃省肉仔鸡HPAIH5亚型母源抗体消长规律研究

用HI法对甘肃省肉仔鸡H5N1型禽流感（HPAI）母源抗体消长规律进行动态监测,结果显示,肉仔鸡母源抗体保护期长达67 d。其中,种蛋的母源抗体效价最高为9.48 log2,1日龄肉仔鸡母源抗体效价均值为7.95 log2,4 d降为7.81 log2,7 d母源抗体升至高峰,达8.57log2,接近父母代抗体效价8.80 log2;随后,抗体效价逐渐下降并略有波动;67-70 d,抗体效价迅速降至1.67 log2,79 d趋于消失,为1.83 log2。该测定结果提示,HI试验在HPAI诊断中意义不大,仅能作为参考,确诊需进行病毒的分离培养。     

兔病毒性出血症病毒高免血清的制备与应用效果

以兔病毒性出血症病毒组织灭活疫苗免疫家兔，经五次免疫之后，抗体效价可达12log2以上，采集兔血清，以此治疗攻毒兔，结果大部分兔都存活，临床应用效果表明：以此血清治疗自然感染兔病毒性出血症病毒的发病兔，治愈率达80％以上。     

禽流感血清抗体与卵黄抗体消长规律比较研究

应用禽流感病毒二价（H5、H9）油乳剂灭活疫苗免疫160日龄非免疫蛋鸡，免疫接种后分别于第0、7、14、21、28、35 d采集相应的鸡蛋和血清，采用血凝抑制(HI)试验监测血清及卵黄中H5、H9抗体的消长规律，结果表明：H5、H9血清抗体于免疫后7 d时开始产生，14 d时到中等水平，21 d时达到最高值，一直维持到35 d之后；而H5、H9卵黄抗体与血清抗体水平相比相对滞后7 d左右；卵黄抗体与血清抗体在28 d时均达到高峰值并一直维持到35 d之后，28 d后血清和卵黄抗体达到相同水平。本研究为临床上以禽流感卵黄抗体检测替代血清抗体检测及以后禽流感高免卵黄抗体的研究提供了依据和数据。     

Development and application of an ELISA for the detection of duck antibodies against Riemerella anatipestifer antigens in egg yolk of vaccinees and in serum of their offspring

A direct and an indirect antibody enzyme-linked immunosorbent assay for duck yolk IgY and duck serum IgY was developed and tested on egg yolk and serum of ducks vaccinated with Riemerella anatipestifer (Ra). Tests were performed either with primary antibodies labelled with horseradish peroxidase or with alkaline phosphatase-labelled secondary antibodies reacting with specifically bound rabbit anti-duck IgY antibodies, respectively. Ra-specific IgYs in egg yolk from three ducks increased rapidly at day 8 after the first of two vaccinations. In two ducks, the IgY titre persisted on a high plateau for 3 months. The concentration of Ra-specific IgYs in the serum of the progeny of vaccinees decreased between day 3 and day 10 after hatching. The fraction of total IgYs decreased less but also significantly. It was shown that antibodies were vertically transmitted and therefore protect offspring against Ra infection at least during the first week after hatching. The test design with anti-IgY rabbit antibodies is further suitable to detect other specific antibodies if respective antigens were fixed on solid phases.     

免疫增强剂提升猪用灭活疫苗免疫效力的研究

为评价免疫增强剂对猪细小-乙脑二联灭活疫苗的免疫效力提升作用,将免疫增强剂以伴侣形式与疫苗共同混合免疫5~6月龄阴性后备母猪和种公猪,检测其抗体水平。结果显示,免疫增强剂与疫苗混合免疫后1周抗体全部转阳,免疫后1~6月平均抗体效价均显著高于不含免疫增强剂的常规疫苗组,表明该免疫增强剂能够显著提升猪细小-乙脑二联灭活疫苗对后备母猪和种公猪的免疫效力。