pH值和渗透压对中蜂精子活力影响的研究

本文以三羟甲基氨基甲烷为基础溶液,用氯化钾和氯化钠混合液调节溶液渗透压,用盐酸和氢氧化钠调节pH值,研究了pH值和渗透压对中蜂精子活力的影响。结果表明,在中性三基缓冲液中,精子活力最高;pH<4.0,精子死亡;pH≥8.0,精子活力下降。精子在高渗(OP≥470毫渗摩尔/升)三基缓冲液中的活力强于在低渗(OP≤330毫渗摩尔/升)三基缓冲液中。pH值和渗透压对精子活力有显著的互作效应。     

红景天多糖对藏猪精液4℃保存效果的研究

试验旨在研究红景天多糖对4℃藏猪精液品质和抗氧化保护作用影响,采用电刺激法采集健康藏猪精液,在改进的猪精液低温稀释液为基础液中,每1 000 m L添加红景天多糖0、3.0、5.0、7.0、9.0、11.0 g,将藏猪种公猪新鲜精液做4倍稀释后于4℃环境保存至第5天,以藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为评价精液品质指标,以超氧化物歧化酶(Superoxidas dismutase,SOD)活力和丙二醛(Maleic dialdehyde,MDA)含量为评价抗氧化保护作用指标,探讨红景天多糖对4℃藏猪精液品质影响。结果显示:藏猪精液4℃保存到第5天时,9.0 mg/L红景天多糖添加组的精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率这4个指标均极显著好于其他组(P0.01)。7.0 mg/L和11.0 mg/L添加组除精子活力差异显著外,其他指标差异不显著(P0.05)。同时发现,9.0 mg/L红景天多糖添加组精子超氧化物歧化酶活力最高,5.0 mg/L、7.0 mg/L和11.0 mg/L组间无差异;精子MDA含量以9.0 mg/L红景天多糖添加组为最高,较7.0 mg/L和11.0 mg/L、5.0 mg/L、3.0 mg/L和对照组差异极显著(P0.01),7.0 mg/L和11.0 mg/L添加组无差异。总之,在改进的猪精液稀释液中添加9.0 mg/L的红景天多糖可明显改善4℃环境保存藏猪精液品质和抗氧化保护作用,该试验研究为今后藏猪精液低温保存的生产应用奠定了基础。     

半胱胺对4℃保存藏猪精液指标的影响

试验旨在研究半胱氨酸对4℃藏猪精液品质和抗氧化保护作用影响,采用电刺激法采集健康藏猪精液,在改进的猪精液低温稀释液为基础液中,每1 000 m L添加半胱氨酸0、0.02、0.04、0.06、0.08 g,将藏猪种公猪新鲜精液做4倍稀释后于4℃环境保存至第5天,以藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为评价精液品质指标,以超氧化物歧化酶(Superoxidas dismutase,SOD)活力和丙二醛(Maleic dialdehyde,MDA)含量为评价抗氧化保护作用指标,探讨半胱氨酸对4℃藏猪精液品质影响。结果显示:半胱氨酸0.06 g/L添加组藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率均极显著好于其他试验组(P0.01),0.06 g/L半胱氨酸添加组的精浆超氧化物歧化酶活力含量均显著好于其他试验组(P0.05),0.08 g/L半胱氨酸添加组的精浆丙二醛含量均显著好于其他试验组(P0.05);同时发现,0.08 g/L半胱氨酸添加组精子超氧化物歧化酶活力最高,各组间差异不显著,精子丙二醛含量0.06 g/L半胱氨酸含量最高。总之,在改进的猪精液稀释液中添加0.06 g/L半胱氨酸后将藏猪种公猪精液做4倍稀释,可明显改善4℃环境保存藏猪精液品质和抗氧化保护作用,该试验研究为今后藏猪精液低温保存的生产应用奠定了基础。     

不同浓度海藻糖对伊拉兔精液常温保存效果的影响

为研究海藻糖对伊拉兔精液常温保存效果的影响,在伊拉兔精液稀释液中添加不同浓度(0、50、100、150 mmol/L)的海藻糖进行常温保存试验,检测伊拉兔精子活力和前向运动率.结果显示,在伊拉兔精液稀释液中添加海藻糖保存24 h后,0 mmol/L、50 mmol/L和100 mmol/L三组精子活力差异均不显著(P>...     

维生素E对4℃保存藏猪精液品质和抗氧化保护作用的影响

试验旨在研究维生素E对4℃藏猪精液品质和抗氧化保护作用影响,采用电刺激法采集健康藏猪精液,在改进的猪精液低温稀释液为基础液中,每1 000 m L添加维生素E 0、3.0、4.0、5.0、6.0 g,将藏猪种公猪新鲜精液做4倍稀释后于4℃环境保存至第5天,以藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为评价精液品质指标,以超氧化物歧化酶(Superoxidas dismutase,SOD)活力和丙二醛(Maleic dialdehyde,MDA)含量为评价抗氧化保护作用指标,探讨维生素E对4℃藏猪精液品质影响。结果显示:维生素E 5.0 g/L添加组藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率均极显著好于其他试验组(P0.01)。精浆超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量以5.0 g/L维生素E添加组为最高;同时发现,5.0 g/L维生素E添加组精子超氧化物歧化酶活力与其他各组间差异不显著。总之,在改进的猪精液稀释液中添加5.0 g/L的维生素E可明显改善4℃环境保存藏猪精液品质和抗氧化保护作用,此试验研究为今后藏猪精液低温保存的生产应用奠定了基础。     

丁羟基甲苯抗猪精子氧化损伤作用

分别在稀释、离心猪精液中添加0.2、0.4、0.8、1.6 mmol/L丁羟基甲苯(Butylated hydroxytoluene,BHT),15℃保存,检验保存35、d后精子TMS、PMI和NAR(%)、测定MDA浓度;确定并选择最佳BHT浓度用于猪精液冷冻保存,检验解冻后TMS、PMI、NAR和Mt-MP(%)、测定MDA浓度。结果显示:BHT显著提高稀释精液、离心精液各项指标百分率(P0.05),且MDA浓度显著降低(P0.05),BHT最佳浓度分别为0.8、1.6 mmol/L;0.8 mmol/L BHT显著提高冷冻-解冻精液各项指标百分率(P0.05),且MDA浓度显著降低(P0.05)。结果表明,BHT能通过抑制精子质膜氧化损伤,提高猪精液保存效果。     

不同浓度羧甲基壳聚糖对猪精液17℃保存效果的影响

为了探讨不同浓度的羧甲基壳聚糖(carboxymethyl chitin, CMCS)对猪精液常温保存效果的影响，试验采集了4头健康的2～3岁长白猪精液，利用未添加CMCS的Modena稀释液和添加不同浓度(30,50,70,100μg/mL)CMCS的Modena稀释液进行稀释，然后将稀释的猪精液在17℃环境中保存5 d,于保存第0(添加当天),1,3,5天测定精液精子活力、线粒体活性率、质膜完整率、精液pH值和渗透压指标，筛选CMCS的最佳添加浓度。结果表明：在常温保存过程中添加CMCS对猪精液具有保护作用，在精液保存第5天时，添加70μg/mL CMCS精液的精子活力、线粒体活性、质膜完整率最高，显著高于未添加和其他浓度(P<0.05);添加70μg/mL CMCS精液的渗透压最高，显著高于100μg/mL浓度(P<0.05),与未添加和30,50μg/mL浓度差异不显著(P>0.05);添加30,50,70μg/mL CMCS精液的pH值差异不显著(P>0.05),但均显著高于未添加和100μg/mL浓度(P<0.05)。说明CMCS在猪精液常温保...     

不同浓度维生素E对沂蒙黑猪精液冷冻保存效果的影响

为了探讨在冷冻稀释液中添加不同浓度维生素E对沂蒙黑猪精液冷冻保存效果的影响，试验将6头沂蒙黑猪的精液混合后分成6组，分别为对照组(冷冻保存液)和在冷冻保存液中添加100,200,300,400,500 mg/L维生素E的试验组，先用液氮保存，然后将每组精液解冻后检测精子活力及运动参数、顶体完整性、质膜完整性、DNA完整性、过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、线粒体膜电位(MMP)和活性氧(ROS)水平，以此来评估维生素E对精液品质的影响。结果表明：与对照组相比，200 mg/L组和300 mg/L组精子活力及各项运动参数均显著提高(P<0.05),其中300 mg/L组提高最显著；100 mg/L组和400 mg/L组精子运动参数也提高，而500 mg/L组精子活力及各项运动参数均显著降低(P<0.05)。与对照组相比，100 mg/L组、200 mg/L组和300 mg/L组精子质膜完整性、顶体完整性、DNA完整性及MMP水平均显著提高(P<0.05);而500 mg/L组精子质膜完整性、顶体完整性及MMP水平均显著降低(P&l...     

谷胱甘肽对犬精液冷冻保存效果的影响

为探讨在冷冻稀释液中添加谷胱甘肽（GSH）对犬精液冷冻保存效果的影响,采用按摩法采集5只杂种土犬的精液,离心去精清后,在冷冻液中分别加入0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L的GSH,制成0.25 mL的冻精进行冷冻保存,以不添加GSH的处理组作为对照组。解冻后在含有5% CO₂的空气、37 ℃、相对饱和湿度条件下孵育10 h,分别在孵育0、2、4、6、8、10 h时检查精子活力。结果显示：冻融后0 h,0.5、1.0 mmol/L GSH处理组的精子活力较高,分别为0.36和0.38,均显著（P<0.05）高于对照组和2.0、2.5 mmol/L处理组,且两者之间差异不显著（P>0.05）;1.0 mmol/L处理组的精子顶体完整率最高,为85.10%,显著（P<0.05）高于对照组,同时,其精子畸形率最低,为23.00%,显著（P<0.05）低于对照组。冻融后体外孵育2、4 h时,0.5、1.0 mmol/L处理组的精子活力均较高,其中,0.5 mmol/L处理组在体外孵育4 h时,其精子活力仍可达到0.30;孵育6 h时,1.0 mmol/L处理组精子活力最高,显著（P<0.05）高于对照组和2.0、2.5 mmol/L处理组;孵育8 h时,各GSH处理组的精子活力均显著（P<0.05）高于对照组;在孵育至10 h时,各GSH处理组的精子活力较其他孵育时间均有较大幅度的下降,未检测到对照组中有呈直线运动的精子。综上提示,在犬精液冷冻液中添加0.5~1.0 mmol/L的GSH能够显著提高冻融后的精子质量和体外存活时间。     

采精时间对种鸡精液品质的影响

为了研究采精时间与精液品质的关系,本试验采用400日龄健康黔东南小香鸡30羽,分别在早上8:00、中午12:00、下午17:00、采食前30min、采食后30min采精液,观察其精液的品质(射精量、pH、密度、活力),统计分析时间节律与精液品质的关系。结果表明:射精量、精液pH、精液密度为早上8:00时最优,而精子活力在中午12:00时最高;射精量、精液pH和精子活力三项指标在采食前后30min之间无差异(P0.05),采食后精液密度显著高于采食前(P0.05)。     

稀释液渗透压与pH值对黑凤鸡精液低温保存活力的影响

为推广鸡精液稀释技术,对黑凤鸡精液稀释液pH值与渗透压进行优化。YHFB液的渗透压调整为340、294、261mOsm/kg,按1:2对原精稀释;pH值调整为7.38、7.29、7.11,按1:1对原精稀释;先添加精液与先添加稀释液,2种稀释顺序按1:2对原精稀释。稀释后的精液,置于6℃左右,定期检查精子活力。结果表明:用不同渗透压的稀释液稀释精液后立即测定的活力差异显著(P0.05),以261mOsm/kg组的活力最高,但24h及以后不同渗透压组的活力差异不显著;稀释后冷藏,3种不同pH值稀释液之间、稀释液与精液不同添加次序之间精子活力差异均不显著。因此,用YHFB稀释液对黑凤鸡精液进行稀释与冷藏,低渗透压(261mOsm/kg)较好,而pH值在7.1~7.4、精液与稀释液添加次序之间没有显著差异,能获得较好效果。     

谷胱甘肽对猪精液常温保存效果的影响

为研究谷胱甘肽(GSH)对猪精液常温保存效果的影响,在基础稀释粉Modena中加入0、1、5、10和15 mmol/L的GSH,每隔24h观察精子活率,统计精子有效保存时间,检测精液中丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力,分析GSH对猪精液常温保存效果的影响。结果表明,猪精液稀释中加入1 mmol/L和5 mmol/L GSH精子有效保存时间无明显差异(P0.05),精子有效保存时间为5 d,但是精子活率分别为0.607和0.630,且差异显著(P0.05);加入1 mmol/L的GSH能够减少精子的氧化损伤,明显降低精液中MDA、H2O2含量(P0.05),显著提高精液SOD活力(P0.05)。因此,稀释液中加入GSH可以提高猪精液常温保存品质,延长有效保存时间,GSH添加量为1 mmol/L。     

EGTA对猪精液液态保存的影响

猪精液液态保存体系中,钙离子浓度升高将降低精子活力,缩短精子体外保存时间。常用的金属螯合剂EDTA的溶解度较低,且容易发生沉淀,因此改进螯合剂对于改进猪精液保存液配方,提高猪精液液态保存质量十分重要。本研究中我们在精液液态保存液中分别添加不同浓度(1.5,3,6,12 mmol/L)的钙离子螯合剂EGTA,检测其对猪精子的活力、质膜完整性、顶体完整率、获能情况以及受精能力的影响。结果表明,精液保存液中添加EGTA能显著提高猪精子保存质量,其中添加3 mmol/L EGTA效果最好(P<0.05)。与对照组相比,添加3 mmol/L EGTA时,体外受精率和囊胚率显著提高(P<0.05)。因此,精液保存液中添加EGTA有助于提高猪精液液态保存的质量。     

稳定pH值对猪精液液态保存效果的影响

为了研究pH值变化对猪精液液态保存效果的影响,找到适合猪精液液态保存pH值,从而改进液态保存液的配方,提高人工授精效率,试验比较了不同pH值条件下猪精液液态保存效果,通过检测精子活力、存活时间、顶体完整性和质膜完整性等参数,研究pH值变化对猪精液液态保存效果的影响,并尝试改进保存缓冲液。结果表明:采用Androhep保存时,最佳初始保存pH值为6.40。在保存的第3天稳定pH值组能够显著提高精子活力(P0.05),用2-吗啉乙磺酸(MES)代替Androhep保存液中的4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES),在保存的第3天能显著提高精子活力、存活时间(P0.05),同时维持更高的质膜完整性,但是顶体完整性差异不显著(P0.05)。说明采用能够稳定pH值的保存液更有利于精液常温保存。     

中蜂精液漂洗提取技术的研究

用漂洗液I在25～30℃条件下漂洗中蜂精液,以2000转/分的速度离心10分,提取出精子密度为64.25万/微升的精液。继而以每只6微升的剂量对6～14日龄的处女王进行器械授精,获产正常受精卵蜂王6只,其子脾整齐成片,子圈明显,封盖正常,平均日产卵量与采用原精液注射的蜂王无明显差异。解剖33只注射后死亡的蜂王,其受精囊精子数平均为43.83万,精子转移率平均为8.8％,     

羧甲基纤维素钠对猪精液常温保存效果的影响

在猪人工授精技术中,良好的稀释剂是提高猪精子质量的关键因素之一。为探讨羧甲基纤维素钠(CMC)对猪精液常温保存效果的影响,本研究以传统的猪精液保存稀释剂Zorlesco(-BSA)为基础稀释液,通过添加不同浓度的CMC(0、8、16和24μmol/L)对原精液进行稀释和保存。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率和活力,低渗肿胀法(HOST)检测精子质膜完整性,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,在猪精液保存的前3d内,添加不同浓度CMC组的精子活率和活力与对照组相比较高,但差异不显著(P0.05);保存4~7d时,与对照组相比添加16μmol/L CMC组的精子活率和活力明显升高(P0.05)。在保存的前4d内,添加不同浓度CMC组的精子质膜完整率和顶体完整率与对照组相比差异不显著(P0.05),但在保存至5~7d时,添加16μmol/L CMC组的质膜完整率和顶体完整率显著高于对照组(P0.05)。猪精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率之间存在极显著的正相关关系(P0.01),在Zorlesco稀释剂中添加8~24μmol/L的CMC能显著改善和提高猪精子活率、活力、质膜完整性以及顶体完整率,其最佳添加浓度为16μmol/L。CMC可作为精液稀释剂中的悬浮剂,用于减缓精子沉降速率,提高猪精液保存质量。     

褪黑素对湖羊精液低温保存效果的影响

为研究褪黑素对湖羊精液4℃保存效果的影响,在前期筛选的湖羊精液稀释液中添加不同浓度(0.00、0.02、0.04、0.06、0.08 g/L)的褪黑素进行4℃冷藏试验,检测湖羊精子活力和顶体完整率,以及精液中过氧化氢酶(CAT)活力和丙二醛(MDA)含量。结果:与对照组相比,添加0.02 g/L褪黑素组在保存0、24、48、72、96 h的精液中MDA含量极显著降低(P0.01);0、24、48、72 h精液中CAT酶活力极显著提高(P0.01);48 h精子活力和顶体完整率极显著提高(P0.01)。综合比较表明,在湖羊精液稀释液中添加0.02 g/L褪黑素,在48 h内能够显著提高湖羊精液4℃稀释保存的品质。     

不同品种、季节和月龄对公猪精液品质的影响

【目的】探究不同品种、采精季节和采精月龄对法系公猪精液品质的影响,比较不同品种公猪精液的常温保存效果。【方法】选取278头法系杜洛克猪、长白猪和大白猪为试验对象,收集某种公猪站2021年17 960条精液记录数据,采用一般线性模型与方差分析探究品种、采精季节和采精月龄对精液体积、精液密度、精子活力及总精子数的影响;同时于夏季从各品种中分别选取15份精子活力≥90%、前向性运动≥80%精液,稀释后进行为期7 d的常温保存试验,比较不同品种公猪精液常温保存效果。【结果】长白猪精液体积、总精子数均显著高于杜洛克猪和大白猪(P<0.05),杜洛克猪精液密度显著高于长白猪和大白猪(P<0.05),精子活力显著低于长白猪和大白猪(P<0.05)。随着常温保存时间的延长,各品种公猪精液精子活力和前向性运动逐渐降低,其中长白猪精液在夏季常温保存效果最好,杜洛克猪最差。各品种公猪精液体积在秋、冬季均显著高于春、夏季(P<0.05),总精子数春、冬季均显著高于夏、秋季(P<0.05),精液密度在春季显著高于其他季节(P<0.05),各品种公猪精子活力均在冬季最高、夏季最...     

不同剂型及稀释精液平衡时间对藏獒冻精品质的影响研究

为了探讨每剂含不同前进运动精子数(≥1 000万个和≥2 000万个)和稀释精液不同平衡时间(1 h、2 h、3.5 h)对藏獒冻精品质的影响,试验比较了0.25 m L细管剂型藏獒冻精解冻后精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率、精子37℃存活时间。结果表明:每剂含前进精子数≥2 000万个与≥1 000万个相比,藏獒冻精解冻精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率差异不显著(P0.05);而每剂含前进运动精子≥2 000万个组的藏獒冻精解冻后37℃存活时间优于每剂含前进运动精子数≥1 000万个组,且差异显著(P0.05)。藏獒稀释精液平衡2 h组的冻精活力显著高于平衡1 h组和3.5 h组(P0.05),而平衡1 h组和3.5 h组间差异不显著(P0.05)。冻精顶体完整率以平衡2 h组最高,为(41.00±1.47)%,与平衡3.5 h组间存在显著差异(P0.05)。平衡2 h组的冻精畸形率低于平衡1 h组和3.5 h组。说明藏獒0.25 m L细管剂型以每剂含前进运动精子数≥2 000万个,稀释精液平衡时间以2 h为宜,可获得较好的冷冻效果。     

维生素E对猪精液常温负压保存效果的影响

为了探究不同浓度维生素E在负压(-0.04 MPa)条件下对猪精液常温(17℃)保存效果的影响，试验将猪精液分为A～D组，分别在含0,0.1,0.5,1 mg/mL维生素E的Modena基础稀释液中保存，用全自动精子质量分析仪检测猪精子质量指标及畸形率，用相应试剂盒检测总抗氧化能力(T-AOC)及H₂O₂含量，用酸度计检测猪精液pH值。结果表明：在精液保存至第7,11天时，C组精子活率显著高于其他各组(P<0.05),且在保存至第1～5天时精子活率高于60%;在精液保存期间，C组精子活力高于其他组，且在第9天显著高于其他组；在精液保存期间，C组精子平均直线速度、平均曲线速度、平均路径速度及鞭打频率均高于其他组，畸形率低于其他组；在精液保存至第9天时，C组精子T-AOC显著高于其他组(P<0.05);在精液保存至第9,11天时，C组H₂O₂含量显著低于其他组(P<0.05);在精液保存期间，C组pH值的下降趋势相较其他组最缓慢，pH值最高，使猪精子处于较为适宜的弱酸环境中。说明将0....