复合菌群LF对DOP降解特性研究

从河底污泥样品中分离培养得到一株能以DOP为唯一碳源和能源的复合菌群,命名为LF,菌群LF能够高效降解DOP。本研究主要从pH、温度、含盐量、加菌量和底物初始浓度等五个方面确定富集物LF对DOP的最适降解条件,并考察菌群LF对DOP的降解性能。实验结果显示:LF降解DOP的最适pH为6.0,最适温度为30℃;在此最适pH、最适温度条件下,含盐量为1%时,菌群LF对DOP具有较高的降解活性;48 h内,菌体数量为6%时,菌LF降解率最高,为98%左右;72 h内富集物LF对不同初始底物浓度DOP一直保持有较高的降解率,初始浓度为1000 mg/L的底物DOP降解率最高。     

堆肥中高温纤维素降解菌的筛选和应用

选用PCS培养基和定期改变传代的方法,从高温堆肥样品中筛选出4组具有较强纤维素分解能力的混合菌群,从菌群的生长特性、纤维素酶活力和滤纸、水稻秸秆的降解能力等方面复筛出一组纤维素分解能力较强而稳定的混合菌群MixF-3。该混合菌群经72h能将滤纸完全崩解,崩解滤纸后的培养液pH值基本稳定在8.5左右。培养温度为55℃或65℃时有利于MixF-3复合菌群产生的纤维素酶活较快地达到最大值;55℃培养96h左右,培养液中最高酶活为91.05U/mL,培养7d对水稻秸秆的降解率为46.5%。将复合菌群MixF-3接种到猪粪和牛粪自然堆肥中,发现其能促进肥料快速升温,48h内超过65℃,加速了原料的快速腐熟,为进一步研究开发堆肥快速腐熟菌剂奠定了基础。     

茶叶联苯菊酯原位降解菌株的微生物学特性研究

对前期富集驯化筛选得到的茶园联苯菊酯降解微生物LB-1进行最佳培养基、生长条件以及对环境的适应性等微生物学特性分析。结果表明:菌株LB-1在牛肉膏蛋白胨加糖培养基、发酵温度30℃、p H值为7、装液量30m L的培养条件下生长最快。菌株LB-1在发酵培养基中呈S型生长,在高于2%的氯化钠浓度下大量死亡,表明LB-1对高盐环境不具备良好的适应性。     

猪粪中四环素类抗生素降解菌的筛选及其在堆肥中的应用研究

试验从新鲜猪粪中筛选耐高温的四环素类抗生素降解菌,经筛选、驯化后以一定比例添加到堆肥原料进行堆肥,探究其对四环素类抗生素的降解效果。结果表明,鹑鸡肠球菌、粪肠球菌、库特氏菌及屎肠球菌对四环素类抗生素4 d降解率可达到70%左右,且均能在符合堆肥升温期的理化特性43℃、pH=8的条件下迅速生长。外源添加筛选的4种降解菌到不同抗生素浓度的猪粪中进行堆肥处理后发现,其对于较高浓度(40 mg/kg)的四环素类抗生素具有更好的处理效果。在7 d土霉素降解量为74.26%,四环素的降解量为83.48%,金霉素降解量为96.75%,在14 d土霉素降解量为85.75%,四环素的降解量为90.95%,金霉素降解量为98.56%。     

鸭大肠杆菌O_(78)血清型强毒株分离鉴定及其高密度发酵新工艺

依据大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)持家基因PhoA PCR检测,从临床病料中分离鉴定出11株鸭致病性E.coli。经O抗原血清型鉴定以及毒力分析,筛选出1株O_(78)血清型鸭E.coli强毒株EC-KP120427。以此菌株为基础,使用单因素法以及正交法,获得O_(78)血清型鸭E.coli强毒株新型高密度发酵培养基,配方中初糖采用甘油替代葡萄糖,无机盐仅添加磷酸氢二钾,同时补充铁、锰、铝3种微量元素,在普通摇床上37℃培养菌液D_(600 nm)可达到9.0以上。使用赛多利斯5 L发酵罐,对EC-KP120427菌株进行发酵培养试验。使用优化的新型高密度发酵培养基,按1∶10比例接种对数生长期种子菌,菌液D_(600 nm)值为1.0、控制温度37℃、pH 7.0、调节空气通气量1.5～5.0 L/min、转速100～400 r/min、发酵至对数生长期以15 mL·h~(-1)·L~(-1)流速慢速流加50%葡萄糖溶液,培养菌液D_(600 nm)值可高达30.0以上,成功实现了O_(78)血清型鸭E.coli强毒株高密度发酵。本研究为致病性E.coli高密度发酵技术标准的建立奠定基础,同时为水禽E.coli细菌疫苗的改进提供了技术支持。     

一氧化氮供体SNP对不同苜蓿根瘤菌菌株生长的影响

为探寻提高苜蓿-根瘤菌共生固氮能力的途径,以苜蓿中华根瘤菌为材料,用SNP为外源NO供体,研究不同浓度外源NO对根瘤菌生长的影响及不同根瘤菌菌株对外源NO的敏感性差异,以期筛选出适宜根瘤菌生长的外源NO浓度和可与NO配施的根瘤菌菌株。结果表明:SNP浓度为0.08 mmol/L时根瘤菌数量显著高于其他处理,其D_(600 nm)值为0.9680;外源NO对于根瘤菌TA34的生长有明显的促进作用,D_(600 nm)值较CK提高了46.01%,而对WL68则具有较为显著的抑制性,D_(600 nm)值较CK降低了71.63%;不同菌种对于NO的敏感度不同,根瘤菌WL68对外源NO最敏感,而根瘤菌GL28对外源NO不敏感。     

响应面法优化纤维素降解菌的培养条件和酶活力测定条件

试验旨在优化纤维素降解菌CE41的培养条件和纤维素酶酶促反应的条件,实现菌株的高产和纤维素酶的高效酶促反应。通过单因素试验和响应面法得出CE41的最佳培养条件为温度最适值38.67℃、pH值6.93、接种量6.14 mL,此时酶活力最高,为27.556 U/mL;酶促反应的最佳条件为反应温度58.19℃、pH值5.09、CMC-Na浓度1.42%,此时酶活力最高,为28.402 U/mL。研究表明,试验结果可为后续研究奠定基础。     

1株藏猪源枯草芽孢杆菌BY-2的益生特性分析

评价了来自藏猪盲肠的1株生长快,能高效降解纤维素的细菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BY-2的益生特性。结果表明,BY-2能够耐受高温,在65~85℃条件下培养20min,其存活率均达到90%及以上,均显著高于BY-2在100℃条件下的存活率(59.1%)(P0.05)。BY-2在人工胃液中培养,随着pH值的升高存活率呈上升趋势,在不同pH1~4下培养长达4h时,存活率为73.78%~83.61%,其中pH1条件下BY-2的存活率显著低于pH2~4的存活率(P0.05)。人工肠液和不同浓度胆盐对BY-2的存活率均有影响,但胆盐浓度对BY-2存活率的影响差异不显著(P0.05),当在不同胆盐浓度的人工肠液中培养4h,BY-2的存活率均在75%以上。此外,BY-2的提取液对大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌均有强的抑制能力。由试验结果看,BY-2表现出强的抗逆特性及抗菌特性,具有作为猪源益生菌微生态制剂开发的潜力。     

产纤维素酶真菌的筛选与鉴定

为从秸秆中分离出能够降解纤维的菌株,试验采取秸秆样品接种马铃薯琼脂培养基,在室温环境下培养,取分离菌接种纤维素刚果红琼脂培养基,筛选能形成较大降解圈的细菌,并进行形态学和分子生物学鉴定,测定其纤维素酶性质。结果表明,经分子生物学鉴定,筛选菌为黑曲霉菌,该菌在室温环境能够生长,菌株降解圈直径(H)与菌落直径(C)的比值(H/C)为7.64。筛选菌在20 ℃环境下培养5 d酶活达到最高值,为42.18 U/mL。纤维素酶最适pH为7.0,最适反应温度为20 ℃,在20~40 ℃或pH 6.0~8.0环境下作用1 h,相对酶活力仍保持在90%以上。综上所述,本试验分离的黑曲霉菌株是低温产纤维素酶菌株,产酶能力较强,具有潜在的开发价值。     

不同培养条件对猪源链球菌生长状况的影响

为探究不同培养条件对猪链球菌2型生长状况的影响,笔者用紫外线分光光度计测定不同培养时间(2 h、4 h、8 h、10 h、12 h、14 h、16 h、18 h、24 h和36 h)、温度(4℃、30℃、37℃、40℃和45℃)、pH值(5、6、7、8和9)、Na Cl浓度(1%、2%、3%、4%和5%)条件处理下,THB液体培养基中菌液OD600值。结果显示,该菌生长前12 h为延迟期,12 h～18 h为对数期,18 h后为衰退期。该菌在温度为37℃、pH值为7、Na Cl浓度为2%时生长状况最好。本试验结果为工业化生产猪链球菌灭活疫苗及防控猪链球菌病提供了基础资料。