杉木愈伤组织的继代增殖与植株再生

通过建立杉木愈伤组织增殖和植株再生体系,旨在为杉木体细胞杂交和遗传转化等基因工程研究提供高效受体系统。以杉木子叶、下胚轴诱导的愈伤组织为材料,研究了不同激素组合及浓度、培养条件对愈伤组织的继代及植株再生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对愈伤组织的继代有显著影响,2,4-D有利于降低继代过程中的褐化现象,NAA、KT有利于愈伤组织的继代增殖。DCR+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)和DCR+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+KT1.5 mg·L~(-1)+NAA 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织继代增殖的最佳培养基。暗培养和800 lx光照强度是愈伤组织继代的最佳培养条件。愈伤组织在继代30~45 d期间内需转移至新培养基。愈伤组织在MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)再生芽诱导率最高,诱导率为80%。经过一次继代的愈伤组织比未经过继代的单个再生芽数多,平均可达3~4个。再生苗在1/2MS+IBA 1.0 mg·L~(-1)培养基中生根率高达89.5%。     

亳菊茎尖愈伤组织诱导与再生植株的研究

[目的]研究亳菊茎尖组织培养技术,为亳菊产业化生产提供科学依据。[方法]在不同的MS培养基中,考察不同浓度的6-BA、NAA对亳菊茎尖愈伤组织、丛生芽、再生植株诱导的影响。[结果]茎尖诱导愈伤组织的最佳培养基为MS＋1.00 mg/L6-BA＋0.30mg/L NAA,以MS＋0.50 mg/L6-BA＋0.10 mg/L NAA为芽的诱导培养基,芽诱导率达100%;最佳的生根培养基为1/2MS＋0.30 mg/L IBA。[结论]通过亳菊茎尖愈伤组织培养技术,可以达到快速繁殖的目的。     

小麦根愈伤组织诱导再生植株

以６个人工合成小麦品系和对照品种“中国”春种子根为外植体,分别接种在含２,４－Ｄ,２,４,６ｎｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上,于２０℃和２５℃连续照明条件下进行培养。各种处理和培养条件下,都诱导出愈伤组织。在培养温度２０℃,２,４－Ｄ４ｎｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基中,供试品系再生率显著高于其它培养条件下的再生率,结果表明：此处理是诱导根愈伤组织分化再生植株的最适培养基和培养温度。     

石竹愈伤组织诱导及植株再生

通过诱导愈伤组织再分化和直接诱导不定芽这两种途径获得了石竹的再生植株，比较了不同植物生长调节剂配比在离体培养中的效应。认为6-BA是诱导长期培养的愈伤组织再分化最有效的外源激素，适宜的质量浓度范围在0.5-2.0mg/L之间，当6-BA为1.0mg/L，NAA为0.3mg/L时，愈伤组织不定芽分化频率最高，小苗生长状况也最好；将6-BA与NAA，IBA，Ad等生长调节剂混合使用可提高诱导效果，增殖继代培养基中6-BA的质量浓度在0.1-0.3mg/L之间为宜，浓度过大，虽然芽增殖数量增多，但苗的畸形化和愈伤化现象严重。     

新疆紫草愈伤组织诱导及植株再生研究

以新疆紫草根、下胚轴、子叶、真叶为外植体,MS附加各种激素进行愈伤组织诱导及其分化、植株再生研究。研究结果表明:①根、胚轴、子叶、真叶的平均出愈率差异不大,但出愈速度差异明显;子叶出愈快,愈伤生长量最大;不定芽分化率依次为下胚轴>根>真叶>子叶。②诱导脱分化的效应KT优于6-BA;降低2,4-D浓度有利于愈伤组织的增殖。激素与外植体有互作效应。③真叶在MS NAA0.5 mg/L KT0.4 mg/L的培养基上能直接形成丛生芽。④不定芽在MS IAA0.5 mg/L KT1.0 mg/L培养基中生根率为83.3%;由此建立了新疆紫草再生体系。⑤不同外植体均可诱导出红色愈伤,颜色深浅依次为真叶>子叶>胚轴>根,且激素可以调控不同外植体愈伤红色的程度;同时红色愈伤能分化产生红色不定根。利用进一步优化的体系可进行快繁并提取愈伤组织中的紫草素。     

延龄草愈伤组织的诱导及植株再生

[目的]建立延龄草愈伤组织诱导、增殖和分化再生体系。[方法]以延龄草块根、根尖为外植体,应用正交试验方法设计植物生长调节剂组合和质量浓度配比,研究植物生长调节剂对延龄草愈伤组织形成、增殖和分化的影响。[结果]1/2MS是最适合延龄草块根、根尖诱导愈伤的培养基,添加6-BA 1.2 mg/L和IAA 0.6 mg/L的1/2MS培养基最适合于愈伤组织的诱导,其中以根尖愈伤组织的诱导效果最好,在添加6-BA 0.5 mg/L、IAA 0.6 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高,附加6-BA 1.2 mg/L、IAA 1.0 mg/L的1/2MS培养基为生根适宜培养基。[结论]延龄草的块茎和根尖外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

贝母愈伤组织的诱导及植株再生

通过对三种野生贝母的离体培养,研究了贝母基因型、温光条件、激素配比对贝母愈伤及不定芽的影响.结果表明,在对贝母鳞茎外植体适当的低温暗处理后,再转入光下培养,可明显减轻外植体的褐化;不同基因型对贝母愈伤组织所诱导差异不大,进一步证明贝母愈伤组织的诱导,不依赖于基因型;贝母愈伤组织和不定芽的诱导需要不同的激素配比,诱导贝母愈伤组织的最佳培养基为(MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L),诱导不定芽的最佳培养基为(MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L),平均每个外植体均产生2～3个不定芽,且粗壮、移栽成活率高.建立了完整的不依赖于基因型的贝母植株再生体系.     

大穗结缕草愈伤组织诱导及植株再生研究

为获得大穗结缕草离体繁殖的最佳条件,以大穗结缕草不同器官作为外植体,MS为基本培养基,研究了不同消毒方法对外植体除菌效果的影响,不同外植体以及不同激素组合对愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明:在光强1 500~2 000lx,16h光照/8h黑暗,(23±2)℃培养条件下,大穗结缕草外植体,经70%酒精浸泡45s,0.1%HgCl2浸泡8min,污染率低,易于愈伤组织的诱导。以种子胚作为外植体最有利于愈伤组织的培养,愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+2,4-D(2.0 mg·L-1)+6-BA(0.2 mg·L-1)+TDZ(1.0mg·L-1)。     

菊花幼嫩花瓣愈伤组织的诱导和植株再生

以菊花幼嫩花瓣作为供体材料,ＭＳ作为基本培养基,在激素组合为６ＢＡ１～３ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ或２,４ Ｄ１～３ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１ｍｇ／Ｌ的范围内均能诱导出愈伤组织,但以ＭＳ附加６ＢＡ２ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ的诱导率最高,可达１００％。将愈伤组织转移到ＭＳ＋６ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０２ｍｇ／Ｌ的培养基上,分化芽的频率为７７８％。将３ｃｍ左右的茎段转移到不含激素的ＭＳ培养基或ＭＳ＋ＮＡＡ０１ｍｇ／Ｌ的培养基上,生根率可达９５％以上。     

玉米成熟胚和茎尖愈伤诱导及其植株再生能力比较

以3种不同基因型的成熟胚和茎尖两种不同外植体为材料，对它们的愈伤组织诱导，继代培养和分化进行了研究。结果表明：玉米的成熟胚和茎尖愈伤诱导率相关，但两种外植体诱导出的愈伤组织状态明显不同，茎尖诱导出的愈伤组织状态普遍比成熟胚的好；两种外植体的愈伤分化率差异明显，成熟胚愈伤组织最高分化率为2．13％，茎尖愈伤组织最高分化率可达21.2％。     

芝麻菜愈伤组织诱导及植株再生*

 以芝麻菜(Eruca sativa Mill)无菌苗的下胚轴、子叶和子叶柄作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对其愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明,分别以MS+0.8mg／L 2,4-D,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.1mg／L 6-BA,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.2mg／L 6-BA为下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织诱导培养基时,效果较好,出愈率依次为86.3%,78.2%,97.6%;将下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织分别转移到分化培养基MS+3.0mg／L 6-BA+0.1mg／L　NAA,MS+3.0 mg／L 6-BA+0.2mg／L NAA上再生不定芽,效果最佳,不定芽再生频率分别为72.7%,63.6%,69.2%。将不定芽切下转移至1／2 MS+0.5mg／L IBA培养基上诱导生根,生根率达81％以上。     

水稻成熟胚愈伤组织诱导及其植株再生

利用水稻成熟胚为外植体,接种在NB培养基上,分别附加不同的外源激素,以诱导愈伤组织并促其分化,最终获得水稻再生植株.结果表明:2,4-D对愈伤组织诱导起决定性作用,当它与低浓度的6-BA配比时更有利于前期愈伤组织的诱导,而高浓度的6-BA则有利于后期芽丛的分化.     

魔芋愈伤组织诱导、分化及植株再生的初步研究

采用白魔芋(Amorphophallusalbus)块茎为外植体,以MS培养基为基本培养基,在不同生长调节剂组合的诱导培养基和分化培养基上进行培养。试验结果显示,在MS+0.5mg·L-16 BA+0.5mg·L-1NAA、MS+0.5mg·L-16 BA+0.5mg·L-12,4 D及MS+1.0mg·L-16-BA+1.0mg·L-12,4 D的培养基上容易诱导愈伤组织(诱导效率分别为92%、96%和93%),且愈伤组织容易分化;在分化培养基MS+1.0mg·L-16 BA+0.1mg·L-1NAA及MS+1.0mg·L-16 BA+0.5mg·L-1NAA上,愈伤组织容易分化(分化效率分别为86%和52%)。将在MS+1.0mg·L-16 BA+0.1mg·L-1NAA培养基上分化出的不定根和不定芽转至MS培养基上,30d后培养出完整植株。     

杜仲愈伤组织的诱导及植株再生的研究

在附加不同浓度ＮＡＡ,６—ＢＡ的ＭＳ培养基上对杜仲的下胚轴和子叶进行愈伤组织的诱导并获得两类不同的愈伤组织,一类是白色的结构松散的非胚性愈伤组织,虽然能继代培养,但在附加较高浓度的６─ＢＡ的ＭＳ培养基上都不能再生植株;另一类是黄绿色的结构紧密的有颗粒状突起的胚性愈伤组织．在附加适量的６—ＢＡ的ＭＳ培养基上能较容易再生小植株。实验表明,杜仲的下胚轴和子叶在附加１．０ｍｇ／ＬＮＡＡ和１．０ｍｇ／Ｌ６—ＢＡ的ＭＳ培养基上能１００％诱导成胚性愈伤组织;胚性愈伤组织在附加０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ和２．５ｍｇ／Ｌ６—ＢＡ的ＭＳ培养基上培养,植株再生频率高达９２％;小植株转移到附加１．５ｍｇ／Ｌ的ＩＢＡ的１／２ＭＳ培养基上,１５ｄ左右长出较粗的根。     

杉木萌芽更新数量特征的初步研究

采用随机抽样的方法对杉木林采伐迹地上杉木萌芽更新状况进行调查分析。结果表明,杉木伐桩粗度和高度对杉木萌芽条的数量有显著影响,但对萌芽条长度和直径影响不显著。就伐桩粗度而言,中径级(10-30 cm)伐桩的萌芽条数量、长度和直径均较大;次大径级(30-40 cm)伐桩的萌芽直径最大,但萌芽条数量和长度较小;而小径级(0-10 cm)和大径级(40-50 cm)伐桩的萌芽条数量、长度和直径均不理想。就伐桩高度而言,低根桩(0-5 cm)的萌芽条数量、长度和直径均最大。     

甜玉米成熟胚愈伤组织的诱导及植株再生特性的评价

以45种基因型甜玉米的成熟胚为外植体材料,分析出愈率、愈伤组织增殖量、芽点数与植株再生的关系.结果表明,出愈率与再生能力有较大的相关性,愈伤组织增殖量、芽点数次之.利用主成分坐标分析并在此基础上对不同基因型甜玉米的再生能力进行聚类,并按欧氏距离将45种不同基因型玉米划分为2个大组群.通过对不同基因型玉米成熟胚培养特性的分析,探讨了各指标对于植株再生的意义,从供试材料中筛选出了愈伤组织诱导率和绿苗分化率均较高的材料,如选系B12-2-2和A50.     

白羊草茎段愈伤组织诱导和植株再生

首次采用白羊草拔节期茎段为外植体,通过对其组织培养中愈伤组织诱导和植株再生情况进行研究,从而筛选出其在组织培养过程中较合适的激素组合。结果表明,茎段作为外植体时,愈伤诱导在仅附加2,4-D 2.0 mg/L诱导培养基中的诱导率高于2,4-D和6-BA的激素组合;诱导出的愈伤组织转入MSB+6-BA 0.07 mg/L+NAA 0.05 mg/L分化培养基中,分化率显著高于其他激素组合。