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本综述阐明了胚胎玻璃化冷冻原理,比较了玻璃化冷冻技术各种方法及其优缺点,分析了胚胎玻璃化冷冻的影响因素,展望了玻璃化冷冻技术的应用前景。 相似文献
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哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
玻璃化(vitrification)是指利用物理学原理将高浓度的抗冻保护剂急速降温后,由液态转化为外形类似玻璃状的稳定而透明的非晶体化固体状态的过程。玻璃化的固体保留了液体正常的分子和离子分布,可以视为一种无序黏稠的超冷液体,因而避免了细胞内形成冰晶而对细胞产生伤害。1985年,Rall等率先将玻璃化冷冻方法用于小鼠胚胎的冷冻保存,推动了该方法在哺乳动物胚胎冷冻保存的方面的应用。之后,玻璃化冷冻保存不断改进, 相似文献
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牛胚胎玻璃化冷冻保存研究初报 总被引:11,自引:0,他引:11
传统的胚胎冷冻方法需诱发结晶,按一定速率降温,不仅程序复杂费时间(需几小时),而且还得使用价值昂贵的胚胎冷冻仪。为此,1985年Rall等人首先发明了玻璃化冷冻法[1],不使用冷冻仪,将冷冻时间缩短(约为30min)。但他们选用的是以大约7mol/L二甲基亚砜为主的抗冻剂,因其化学毒性大,对胚胎的存活带来一定影响[2,3]。1986年Scheffen等人,利用丙三醇及丙二醇为抗冻保护剂,因化学毒性仍较大,冷冻保存后的胚胎成活率仍不稳定[4]。针对化学毒性问题,1990年Kasai等人利用化学毒性… 相似文献
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本文就胚胎玻璃化冷冻保存的原理、冷冻保护剂的作用和冷冻方法及近期国内牛胚胎玻璃化冷冻的研究进展情况进行了详细的综述. 相似文献
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哺乳动物卵母细胞和胚胎的超低温冷冻保存技术,是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等生物技术不可缺少的部[1].Rall和Fahy于1985年首次报道了用玻璃化方法来冷冻保存小鼠胚胎,这种方法不仅大大简化了冷冻过程,而且减少了由于细胞冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤,提高了冷冻效率[2]. 相似文献
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为了创立在用户庭院就能应用的玻璃化保存性别控制胚胎的冷冻剂稀释处理方法,采用细管内3种不同液体层构成(A、B、C)法,对新鲜分割胚一步法稀释后的存活能力进行了研究;其次用特定细管最小容量冷却法与上述3种不同液体层构成中效果较好的B法对玻璃化冷冻溶解的新鲜分割胚、体外受精分割胚及冷冻溶解的体外受精分割胚进行一步法稀释后的存活能力予以对比。结果,3种不同液体层构成间胚胎的存活能力无显著差异,B法较高;应用特定细管最小容量冷却法在冷冻溶解的新鲜分割胚、体外受精分割胚及冷冻溶解的体外受精分割胚一步法稀释后的存活能力均显著高于B法。结果表明,特定细管最小容量冷却法是更有效的保存方法。 相似文献
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胚胎冷冻保存一般指0~-80℃的温度下保存胚胎,而超低温冷冻保存则是在极低的温度(液氮-196℃、液氦-269℃)下保存动物胚胎。处于超低温下的胚胎,其新陈代谢几乎完全暂时停止,因而可以达到长期保存的目的。朱等(1998)对小鼠扩张囊胚在液氮中冷冻保存1h、1年和2年,解冻后的囊胚恢 相似文献
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转基因兔胚胎玻璃化冷冻保存的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
在25℃条件下,将兔体外受精精子载体转基因兔桑椹胚置于含有40%乙二醇、18%Ficol、0.3mol蔗糖的mPBS溶液(EFS40)中平衡2分钟,然后直接投入液氮,成功地进行了玻璃化冷冻保存。解冻后桑椹胚发育至囊胚和孵化囊胚的比例分别为65.81%和39.24%,与未经冷冻的鲜胚发育比例(71.05%和43.42%)相比,没有明显的差异。78枚经玻璃化冷冻和解冻的桑椹胚移植给5只受体,其中2只妊娠,共产下8只活仔兔。 相似文献
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自 2 0世纪 70年代小鼠的胚胎成功冷冻以来 ,在动物胚胎冷冻保存方面进行了广泛的研究。目前 ,胚胎的冷冻保存已成为胚胎移植的常规技术环节之一。本文就动物的胚胎冷冻保存的原理、冷冻保护剂的选择和主要的冷冻方法及影响冷冻效果的因素等方面进行了详细的综述。并就各冷冻方法的优缺点进行了探讨 ,旨在使胚胎冷冻保存技术在畜牧业生产中得到更为广泛的应用和推广。 相似文献
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自1985年胚胎玻璃化冷冻(v itrification)保存技术发明以来,玻璃化法先后在小鼠、兔、绵羊、牛、猪、山羊等动物胚胎上获得成功,近年来有关哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存的研究主要集中在冷冻和解冻方法上,相继发明了一些新的玻璃化冷冻方法:冷环玻璃化法(cryo loop)和开放式细管法(open pu lled straw,OPS),并且对解冻后细管内直接脱除防冻剂进行了广泛深入的研究,使得冷冻胚胎移植更易于在生产上推广应用。现将胚胎玻璃化冷冻的原理、冷冻保护剂、冷冻方法、解冻后保护剂脱除方法的最新研究进展作一综述。 相似文献
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卵母细胞冷冻保存技术在动物种质资源保存、濒危动物保护等方面具有独特的作用,猪卵母细胞的冷冻保存仍是一项世界性难题,尚处于摸索阶段。现就猪卵母细胞冷冻保存的现状、冷冻原理与方法及冷冻损伤等问题进行综述。 相似文献
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猪胚胎冷冻保存研究现状 总被引:1,自引:0,他引:1
猪胚胎超低温冷冻对地方猪种的长期保存意义重大。长期以来,由于猪胚胎脂质含量较高等原因,进展一直较为缓慢(相对于牛、羊等动物)。近年来,由于玻璃化冷冻技术(特别是OPS玻璃化冷冻技术)的突破,使胚胎超低温冷冻保存成功率大幅度提高。本是法国国家农业科学院Francoise Berthelot教授对该领域的最新研究进展作的总结。 相似文献
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1 玻璃化冷冻的基本原理 所谓的玻璃化冷冻就是在完全的玻璃化状态下冷冻保存细胞、组织或器官.为了在一定冷冻速度下形成玻璃化,需要使用高浓度的可渗透性低温保护剂. 玻璃化冷冻法是根据物理学原理,将高浓度的低温保护剂(约7 mol/L)在超低温环境下凝固,形成无规则的玻璃化固体,这种固态物质能保持液态时的正常分子与离子分布,因而在细胞内发生玻璃化起到保护作用.这种方法不仅大大简化了冷冻过程,而且减少了由于细胞冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤.此外,这种方法采用迅速通过临界温度区,从而减轻了一些动物胚胎冷冻中常见的冻伤现象. 相似文献
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胚胎冷冻保存技术在大多数哺乳动物上已获得成功,牛胚胎冷冻已经进入商业化应用阶段。猪胚胎由于其特殊的低温生物学特性,冷冻保存研究进展缓慢。本文综述了猪胚胎在冷冻过程中的细胞生物学变化,以及近几年猪胚胎冷冻保存研究所取得的显著进展。 相似文献