不同剂量环磷酰胺对雏鸡法氏囊免疫抑制的影响

该研究旨在探究不同剂量环磷酰胺（CTX）对岭南黄鸡法氏囊免疫抑制的影响,为后续探究如何提高法氏囊免疫力提供动物模型参考。该试验将120只1日龄岭南黄鸡随机分成4组（对照组、CTX20组、CTX40组和CTX80组）,每组3个重复,每个重复10只。所有组饲喂基础日粮,CTX20组、CTX40组和CTX80组雏鸡在19、20、21日龄时分别肌肉注射20、40、80 mg/kg BW的CTX,对照组注射等量的生理盐水,最后一次注射7天后,每组随机选取15只雏鸡无菌采集法氏囊和血清进行组织学观察、Tunel检测、实时荧光定量PCR和ELISA检测。组织学观察结果显示,CTX处理可以诱导法氏囊小结间空隙增大、髓质中细胞密度降低、髓质区纤维增生、细胞核溶解、核固缩、坏死细胞数量增加等现象。Tunel检测结果显示,CTX可以诱导法氏囊细胞凋亡（P<0.05）,其中CTX40组内细胞凋亡率超过35%。实时荧光定量PCR检测结果显示,CTX处理可以诱导法氏囊内细胞凋亡相关基因Bcl-2和NF-κB mRNA表达量显著降低,TNF-α和Caspase3 mRNA表达量显著上升（P<0.05）。...     

熟地黄多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究

【目的】研究熟地黄多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节作用,为熟地黄多糖用于临床治疗免疫低下疾病或开发相关保健食品提供科学依据。【方法】选用36只昆明系小鼠,随机分为6组：空白对照组、免疫抑制模型组、黄芪多糖组及熟地黄多糖低、中、高(分别灌胃熟地黄多糖50、100、200 mg/kg)剂量组(PRRPL、PRRPM、PRRPH),每组6只。除空白对照组外,其余各组小鼠均腹腔注射80 mg/kg环磷酰胺,建立免疫抑制模型。造模后各组小鼠分别灌胃相应药物,1次/d,连续15 d,测定小鼠体重、腹腔巨噬细胞吞噬能力、免疫器官系数、脾淋巴细胞增殖及细胞周期、血清细胞因子含量,观察脾脏和胸腺组织形态学、肠道派氏节数目等免疫指标。【结果】与空白对照组相比,模型组脾脏指数极显著升高(P<0.01),脾脏红髓、白髓界限不清,脾淋巴细胞数量减少;胸腺指数降低,皮质、髓质不清,结构破坏;脾淋巴细胞增殖能力、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、γ-干扰素(INF-γ)水平均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);脾淋巴细胞滞留在G0/G1期。...     

不同剂量环磷酰胺对肉仔鸡免疫抑制的影响

350只肉仔鸡随机分成5组,第1组为对照组,第2至5组为处理组。14日龄开始,对照组胸肌注射0.5ml的生理盐水,第2至5组分别按40、80、120、160mg/kg的剂量,同部位注射生理盐水稀释的环磷酰胺(CY)0.5ml,1次/d,连续注射3d。21、35、42、56日龄时每组随机抽取10只鸡进行屠宰取样,测定各组鸡的器官指数,另取3只鸡,测定脾脏淋巴细胞增殖转化。试验结果表明:一定剂量的环磷酰胺能显著降低肉仔鸡早期的体质量,且效果与注射剂量呈依赖关系,降低鸡早期脾脏指数和法氏囊指数,显著减少由ConA诱导的脾脏淋巴细胞增殖转化。     

由法氏囊病毒引起鸡的免疫抑制

1法氏囊 禽类法氏囊是雏鸡免疫系统的中枢免疫器官.它是鸟类特有的免疫器官,所以值得特别关注.许多研究已搞清了其生理学作用.雏鸡前3周是法氏囊快速发展时期,在这个时期法氏囊迅速增殖,3周龄后法氏囊就逐渐退化,研究表明,大约在12周龄,法氏囊就完全退化.     

环磷酰胺对大鳞副泥鳅免疫抑制的研究

为探讨环磷酰胺(CYP)对大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)的免疫抑制作用,分别以100、200、300mg/kg体重的剂量对大鳞副泥鳅腹腔注射CYP,对照组注射等量的0.85%灭菌生理盐水,在注射CYP后第8天,测定泥鳅的红细胞数(RBC),白细胞数(WBC),血清一氧化氮(NO)含量,补体C3含量,溶菌酶(LSZ),酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、肝胰脏超氧化物岐化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果显示:与对照组相比,300 mg/kg组的RBC、WBC、血清LSZ、ACP、AKP活性及补体C3含量分别显著降低73.5%、81.0%、52.2%、29.0%、47.9%和48.6%(P0.05);血清NO含量和肝胰脏MDA含量分别显著增加144.0%和50.8%(P0.05);肝胰脏SOD活性降低不显著(P0.05)。由此表明,CYP可抑制大鳞副泥鳅的免疫功能。     

谷氨酰胺对环磷酰胺免疫抑制的调节作用及其机制研究

本文通过研究环磷酰胺（CY）免疫抑制的机制,来进一步探讨谷氨酰胺（Gln）在促进机体免疫功能及其对环磷酰胺免疫抑制的干预作用和机制。本试验选择1日龄艾维菌肉仔鸡320只,分4个处理组,环磷酰胺的注射剂量分别为0、2、4、8mg／kg,免疫抑制于试验第3周进行。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,其余分别在基础日粮上添加质量分数为0．1％、0．2％、0．4％的Gln进行饲喂,建立谷氨酰胺对环磷酰胺免疫抑制的调节作用的动物模型。研究结果表明,日粮中添加Gln可以改善试验组肉仔鸡的生长性能,使肉仔鸡外周血中T淋巴细胞的转化率、相关组织器官免疫指数、白细胞数和血清中IL-2的含量显著升高;同时,外周血中淋巴细胞凋亡率和血清sIL-2R、丙二醛（MDA）含量显著降低。因此,在此模型中,补充Gln可以有效地调节和提高肉仔鸡的免疫功能,提高试验组肉仔鸡的生长性能。预防免疫抑制的发生。     

解淀粉芽孢杆菌SC06对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠免疫功能的影响

通过连续3 d腹腔注射免疫抑制剂环磷酰胺(CTX)建立BALB/c小鼠免疫抑制模型,研究解淀粉芽孢杆菌SC06对其体液和细胞免疫功能的影响。结果表明:相比对照组,CTX会显著降低小鼠血清抗体滴度、溶血空斑数、吞噬细胞呼吸爆发活性及单核巨噬系统廓清指数K(P0.01),降低其体液和细胞免疫功能;同时显著提高小鼠脾脏CD3+、CD4+细胞数和CD4/CD8(P0.01),降低Th1和Tc1细胞数(P0.01),抑制细胞免疫反应,但对NK细胞杀伤活性和淋巴细胞增殖功能无影响(P0.05);解淀粉芽孢杆菌SC06能显著提高CTX降低的吞噬细胞呼吸爆发活性及单核巨噬系统廓清指数K(P0.01),其他体液和细胞免疫指标相比CTX组无显著差异(P0.05)。以上结果说明,解淀粉芽孢杆菌SC06对免疫抑制小鼠的体液及细胞免疫功能起到部分恢复和增强功能。     

三肽囊素对环磷酰胺诱导的鸡红细胞免疫功能低下的阻断作用

本文研究了三肽囊素对环磷酰胺诱导的墟岗黄鸡红细胞免疫功能的抑制模型的影响。180只一日龄墟岗黄母鸡随机分成对照组,三肽囊素组,三肽囊素 环磷酰胺组,环磷酰胺组四个组,三肽囊素组和环磷酰胺 三肽囊素组每只鸡肌注0.01mg/kg剂量的三肽囊素;环磷酰胺组和环磷酰胺 三肽囊素组每只鸡肌注40mg/kg剂量的环磷酰胺,对照组鸡注射等量的生理盐水。结果表明,14日龄和35日龄时各试验组鸡的红细胞总数没有显著差异,而在56日龄时,环磷酰胺组显著低于其它三组(P<0.05);从14日龄开始,环磷酰胺纽的RBC-C3bR花环率显著低于其它三组,而环磷酰胺组的RBC-IC花环率显著高于其它三组,并持续到实验结束。结果提示,三肽囊素可阻断由环磷酰胺诱导的鸡红细胞免疫功能低下。     

不同剂量环磷酰胺对昆明小鼠肝肾组织的损伤作用研究

为研究不同剂量的环磷酰胺对小鼠肝肾组织及功能的损害程度,试验选取40只5周龄健康雌性昆明小鼠,随机分为5组,除对照组外,其余4组小鼠连续3 d分别腹腔注射40、80、120及160 mg/（kg·BW）环磷酰胺溶液,注射后第7天采集肝脏和肾脏组织样品及血清,制备石蜡组织切片及透射电镜切片,观察肝脏和肾脏的组织学变化,检测血清中甘胆酸（CG）、胆碱酯酶（ChE）、血清前白蛋白（PA）、总胆汁酸（TBA）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、血清肌酐（SCr）、尿酸（UA）含量/活性。结果显示,环磷酰胺可引起小鼠肝肾组织病理损害,呈剂量依赖性,肝脏比肾脏更早出现损伤。石蜡切片及透射电镜切片观察结果显示,环磷酰胺对肝脏的毒性作用主要表现在肝索紊乱、肝血窦扩张、微胆管淤胆、门管区及中央静脉周围炎性细胞浸润及纤维增生、组织间出血、肝细胞出现脂肪变性及气球样变性,凋亡及坏死细胞增多。肾脏组织损伤主要表现在出血及纤维增生,肾小管上皮细胞胞浆空泡样变、线粒体损伤、核固缩,上皮细胞基底膜增厚。环磷酰胺对膀胱的损害不严重。与对照组相比,40~160 mg/（kg·BW）剂量组小鼠血清中ChE活性及PA水平,120~160 mg/（kg·BW）剂量组AST活性,80~160 mg/（kg·BW）剂量组BUN水平及80 mg/（kg·BW）剂量组UA水平均显著升高（P<0.05）;其余生化指标与对照组差异不显著（P>0.05）。以上结果表明,环磷酰胺注射剂量在80~120 mg/（kg·BW）时可引起昆明小鼠肝脏和肾脏组织及细胞明显的病理损伤。该研究结果可为选择合适的环磷酰胺注射剂量用以制备动物肝脏免疫抑制模型提供试验依据。     

单次大剂量和多次小剂量环磷酰胺腹腔注射对小鼠免疫抑制模型的影响

试验旨在研究环磷酰胺不同剂量、不同给药次数对建立的小鼠免疫抑制模型免疫指标变化的影响。选择7周龄雄性昆明小鼠200只,随机均分为5组：对照组（生理盐水组,0 mg/g环磷酰胺）、环磷酰胺3次注射低剂量（0.04 mg/g）和高剂量（0.08 mg/g）组、环磷酰胺1次注射低剂量（0.10 mg/g）和高剂量（0.16 mg/g）组。3次注射组在试验第1天按照给定剂量腹腔注射环磷酰胺,连续注射3 d;对照组按照相同方法每天腹腔注射等体积生理盐水;1次注射组仅在试验第1天按照给定剂量腹腔注射环磷酰胺1次。试验期间每天对小鼠称重,在试验的第1、2、4、6、9、10、11天从各组分别选取8只小鼠采取尾静脉血检测血常规,并在试验的第1、4、6、9、11天从各组分别选取8只小鼠处死,测定股骨骨髓有核细胞、胸腺指数、脾脏指数等指标。结果表明,所有剂量环磷酰胺均可成功建立免疫抑制模型。抑制效果上,0.08 mg/g 3次注射对白细胞、骨髓有核细胞、体重增重、脾脏、胸腺的免疫抑制效果最好,0.16 mg/g 1次注射对红细胞免疫抑制效果最好。抑制周期上,环磷酰胺对白细胞、骨髓有核细胞、脾脏免疫抑制周期较短,对红细胞、胸腺的免疫抑制周期较长;1次注射均较3次注射更早且显著地出现白细胞免疫亢进,而脾脏免疫情况则刚好相反。综上,环磷酰胺不同给药剂量及给药次数对动物不同免疫部位的免疫状态及免疫抑制周期均会产生不同的影响。本研究可为药理试验中针对不同免疫指标进行观测时提供适当的检测剂量及检测时间参考。     

Experimental rabies in skunks: effects of immunosuppression induced by cyclophosphamide.

Striped skunks (Mephitis mephitis) were inoculated with street rabies virus and immunosuppressed with several doses of cyclophosphamide. Control skunks were inoculated with street virus only. The skunks were killed in terminal stages of the disease and several tissues were collected for examination by immunofluorescence, light microscopy and viral titration. Sera collected at euthanasia from most of the principals did not contain detectable rabies neutralizing antibodies, whereas high titers occurred terminally in controls. Immunofluorescence was much more entensive in submandibular salivary glands of cyclophosphamide-treated than control skunks. Similarly, virus was isolated from this tissue more consistently and at higher titer from principals than from controls. Immunofluorescence was extensive in brains of all skunks (both groups), but virus was isolated consistently only from brains of cyclophosphamide-treated skunks. Most of the cyclophosphamide-treated skunks had very few inflammatory cells in brain and cerebrospinal ganglia. Neuronal degeneration occurred in dorsal root ganglia of both principals and controls. The results suggest that the immune response has no effect on the development of rabies-induced aggressive behavior, that the immune response may inhibit salivary gland infection and that it is not essential for the development of neuronal degeneration in dorsal root ganglia.     

玉竹多糖和板蓝根多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的调节作用研究

研究玉竹多糖和板蓝根多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的调节作用。将120只1日龄雏鸡随机分成6组,分别为空白对照组、玉竹多糖对照组、玉竹多糖调节组、板蓝根多糖对照组、板蓝根多糖调节组、免疫抑制对照组,除空白对照组外,其余各组在7日龄时饮水免疫鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(LaSota株+H120株)。测定免疫后不同阶段雏鸡新城疫疫苗抗体滴度、血清IgA含量和外周淋巴细胞OD570 nm值,以及脾脏指数和法氏囊指数。结果显示,环磷酰胺造模后,可见环磷酰胺抑制对照组抗体滴度持续处于较低的状态,血清IgA含量较低,外周淋巴细胞增殖受抑制,免疫器官指数较低;在免疫后14 d、21 d、28 d和35 d,玉竹多糖调节组和板蓝根多糖调节组血清抗体滴度显著高于免疫抑制对照组(P<0.05);在免疫后21d、35 d,玉竹多糖调节组和板蓝根多糖调节组血清IgA含量、外周淋巴细胞OD570 nm值和免疫器官指数显著高于免疫抑制对照组(P<0.05)。本试验结果表明,玉竹多糖和板蓝根多糖对环磷酰胺造模形成免疫抑制雏鸡免疫系统具有调节功能,可解除免疫抑制,使免疫系统恢复至正常水平,能够提高雏鸡新城疫疫苗抗体滴度、血清IgA含量,增强外周淋巴细胞增殖。     

酵母多糖对环磷酰胺所致免疫损伤大鼠的拮抗作用

为研究酵母多糖(YP)对环磷酰胺(CTX)所致免疫损伤大鼠的拮抗作用,本实验将80只雄性SD大鼠随机分为YP(50 mg/kg)+CTX组、YP(100 mg/kg)+CTX组、YP(200 mg/kg)+CTX组、CTX对照组和正常对照组。YP+CTX组按剂量灌胃并称重,CTX和正常对照组则灌胃给予等量生理盐水,连续给药10 d;在第8 d、9 d,除正常对照组外,其余4组腹腔注射CTX 100 mg/kg。第11 d采血及对相关的免疫器官组织进行检测。结果显示,YP(100 mg/kg)组平均日增重和饲料报酬比正常对照组显著增加(p<0.05);胸腺指数,血清中IgA、IgG、表皮生长因子(EGF)、碱性磷酸酶(AKP)含量及空肠SIgA水平显著(p<0.05)或极显著(p<0.01)高于CTX对照组;结肠壁中前列腺素E2(PGE2)含量与CTX对照组相比显著降低(p<0.05)。以上结果表明,YP能提高大鼠的生长性能;YP对CTX所致免疫损伤具有一定的拮抗保护作用,其中100 mg/kg剂量的YP效果最为显著。     

Dietary nucleotides protect thymocyte DNA from damage induced by cyclophosphamide in mice

The effects of dietary nucleotides on thymocyte DNA damages induced by cyclophosphamide (CP) in mice were examined. First, phase I experiment was conducted to determine the optimal timing of detecting thymocyte DNA damages induced by CP (150 mg/kg body weight) in mice. Thymocyte DNA damages was determined at 6, 12, 18, 24 h by single-cell gel electrophosphoresis assay (comet assay) after intraperitoneal injection of CP. The levels of DNA damage at 6, 12, 18, 24 h were all significantly higher than that of the control group (p < 0.01). The highest level of DNA damage appeared at 18 h and then decreased at 24 h. Therefore, 18 h was selected to determine DNA damages induced by CP in subsequent experiments. In phase II experiment, 30 male KunMing mice were divided into three treatments: negative control (NC), positive control (PC) and nucleotides group (NG). Mice in NC and PC were fed nucleotide-free diet, and mice in NG were fed nucleotide-supplemented diet (supplemented with 0.25% nucleotides, a mixture containing equal amounts of AMP, CMP, GMP and UMP). Mice in PC and NG groups were injected with CP (150 mg/kg body weight) at 21 days. DNA damage in thymocytes was evaluated at 18 h after CP treatment. The results indicate that dietary nucleotides do not affect the weights of the thymus and the spleen, or their organ indices (p > 0.05), but significantly decrease the percentage of comet cells and comet tail sizes (p < 0.01). This study demonstrates that dietary nucleotides could reduce the level of thymocyte DNA damage induced by CP in mice.     

The effect of immunosuppression with cyclophosphamide on an experimental porcine enterovirus infection in piglets.

Eleven specific pathogen-free, five week old piglets were infected orally with the T80 strain of porcine enterovirus type 2. Three days after infection, five of the piglets were treated with cyclophosphamide, together with two of four uninfected control piglets. The treated, infected piglets developed severe diarrhea, and one showed signs of encephalomyelitis. These piglets showed no virological evidence of recovery from the infection, since the virus persisted throughout the intestinal tract, and they failed to mount a serological response. It was concluded that immunosuppression with cyclophosphamide impaired the normal recovery mechanisms in this infection, providing further evidence that the humoral immune response is an important defence mechanism against porcine enterovirus infection in piglets.     

The effect of immunosuppression on resistance to Rhodococcus equi in mice

Rhodococcus equi, a natural pathogen of horses, produces lesions in mice following experimental infection. The effect of various immunosuppressing agents on the sequential development of these lesions has been assessed by measuring the growth of R. equi following intravenous or intranasal challenge and by histological examination. Cyclophosphamide treatment of mice, challenged intranasally, resulted in the development of lesions not unlike that seen in experimental and natural infection in foals. Cortisone acetate also impaired bacterial clearance from the lungs and affected the accumulation of mononuclear cells at infective foci. Most of the agents chosen to impair macrophage function failed to affect the resistance of mice to R. equi. Carbon, carrageenan and silica failed to alter significantly the growth kinetics of R. equi. Dextran sulphate depressed the rate of pulmonary clearance of organisms and affected the ability of animals to eliminate R. equi following rechallenge. Overall, these results support other evidence that cell mediated immunity is involved in host resistance to R. equi and that activated macrophages play a role in acquired immunity to this organism.     

众欢防治桑树斜纹夜蛾的药效试验

斜纹夜蛾近年来己成为两广地区桑树重要的食叶害虫,幼虫啃食桑树嫩叶嫩头,有的啃伤枝条表皮,仅剩少量叶片主脉、枝条和树干,严重影响桑叶产量。斜纹夜蛾世代重叠,食性杂,抗药性强,防治难度大。为验证众欢对斜纹夜蛾的防治效果,珠海旺世有限公司联合广东化州合江蚕种场进行本试验。现将结果报告如下：     

鹿角盘不同提取部位对环磷酰胺致小鼠骨质疏松的防治作用

建立了环磷酰胺所致小鼠骨质疏松模型,利用空白对照组和葡萄糖酸钙阳性组做对比,以小鼠免疫器官脏器指数、股骨计量学、骨钙、磷、镁、骨羟脯氨酸含量为指标观察鹿角盘提取物对小鼠免疫功能、骨量的影响.结果:20mg/(kg·d)环磷酰胺可引起小鼠胸腺指数下降(P＜0.01),股骨干重、股骨横径减少(P＜0.01),股骨长减少(P＜0.05),骨钙、羟脯氨酸含量同时下降(P＜0.01),引起小鼠骨丢失;鹿角盘水提物和70％乙醇提取物均可增加小鼠股骨的干重和骨钙的含量,水提物高剂量组和70％乙醇提取物高低、高剂量组使骨羟脯氨酸含量显著提高.结果表明鹿角盘对以低转换型骨丢失为特征的骨质疏松具有一定的预防作用.     

当归补血汤对环磷酰胺所致家兔血细胞减少的影响

本文主要研究当归补血汤（DBT）对环磷酰胺（Cy）所致家兔血细胞减少的影响。将40只新西兰白兔（1．7—1．9kg）随机分为4组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组按75mg／kg体重腹腔注射环磷酰胺（Cy）,连续3d,诱发家兔血细胞减少。Ⅰ、Ⅱ组分别给予1mL／kg的当归补血汤和玉屏风口服液（YPF）,Ⅲ组为环磷酰胺对照,Ⅳ组等剂量注射生理盐水作为健康空白对照。试验期15d,观察药物对免疫抑制家兔血液学指标如白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、平均血红蛋白含量（HGB）、血小板计数（PLT）,以及体重的影响。结果显示：YPF和DBT对Cy造模家兔的血液学指标有一定程度的恢复作用,且DBT效果优于YPF,但均未能使WBC、RBC、HGB、PLT值达到正常水平;YPF和DBT对Cy造模家兔的体重增长无明显影响。本试验证明：“当归补血汤”能改善环磷酰胺所致血细胞减少家兔的血液学指标。效果优于临床常用的经典方剂“玉屏风”,但尚不能恢复到正常水平。