花生条纹病毒（红安分离物）cp基因的克隆和序列分析

从湖北省红安县花生种传苗中得到花生条纹病毒（Peanut stripe virus, PStV）分离物（PStV-Hongan），提取感病叶片的总RNA，RT-PCR扩增了其外壳蛋白基因（cp），克隆至pGEM-Teasy载体，转化大肠杆菌并鉴定。阳性质粒序列测定结果表明，该cp含有861个核苷酸，编码分子量为32.4kDa的蛋白。该株系cp与PStV其它株系核苷酸序列同源性为94.6%~98.8%，氨基酸序列同源性为96.2%~99.3%。株系间cp核苷酸序列系统进化树结果表明，Hongan株系与中国其它株系亲缘关系较近，而与东南亚其它株系关系较远。     

花生条纹病毒株系生物学特性及壳蛋白基因序列分析

根据在花生上的症状,将５个ＰＳｔＶ中国分离物划分为轻斑驳,斑块和坏死三个株系类型。在其它鉴别寄主上,５个ＰＳｔＶ上分离物有相似所症状。轻斑驳株系对花生主茎高度影响不明显,荚果减产２１．０％－３５．６％,种子带毒率高。而斑块型株系分别降低花生高度和荚果产量９．２％－１６．３％,和３０．３％－５４．４％,种子带毒率低。     

芝麻品种(系)对花生条纹病毒抗性鉴定

1986、1990—1992年4年,采用田间自然诱发和人工接种方法共鉴定212份芝麻品种(系)对花生条纹病毒的抗性。结果表明,品种(系)间抗性差异显著,发现3个高抗品种,2个发病较轻的品系,参试10个芝麻推广品种均不抗病。     

花生条纹病毒在芝麻上流行研究初报

调查和试验结果说明：感染ＰＳｔＶ的花生是芝麻黄花叶病毒病主要初浸染源．桃蚜传毒效率最高，为３５％，豆蚜、大豆蚜和棉蚜传毒效率均很低．病害流行与蚜虫发生密切相关．供试的１０个芝麻栽培品种均不抗病，但存在一定成株期抗性。自花生条纹病毒（ＰＳｔＶ）感染的芝麻病株上收获的种子，种植后未发现病毒种传现象。     

河北省藁城花生病毒病的RT-PCR检测及外壳蛋白基因序列分析

采用RT-PCR技术对采自河北省农林科学研究院粮油作物研究所藁城堤上试验基地的12份花生叶片样品进行花生病毒病的检测,结果表明:从表现花叶和矮化症状的10份样品中检测到花生条纹病毒(peanut stripe virus,PStV),检出率高达90%,未检测到花生矮化病毒和黄瓜花叶病毒;对其中2个PStV分离物cp基因序列分析的结果表明,该cp全长864 bp。这两个分离物与已报道的PStV其他株系的cp核苷酸序列相似性分别为94.4%~99.2%和94.7%~99.7%,氨基酸相似性分别为95.5%~99.7%和95.8%~100.0%。PStV cp核苷酸序列构建的系统进化树中,这两个分离物与中国大陆其它分离物及美国分离物亲缘关系较近,而与中国台湾、泰国和越南分离物亲缘关系较远。     

抗花生条纹病毒的花生种质鉴定

1982年美国佐治亚州首次发现花生条纹病毒(PStV)。PStV能以蚜虫、带毒率高的种子及其它寄主传毒。虽然曾有过PStv能使花生减产20％以上的报道,但该病对花生生产的潜在威胁目前尚无法预测。花生栽培种和其它种质系对PStV的抗性未见报道。鉴于花生区系和无毛区系有抗PMV的种质,因此对其部分种质进行了PStV抗性鉴定。     

花生肌动蛋白基因的克隆及序列分析

以花生(Arachis hypogaeaL.)为材料,研究肌动蛋白(actin)基因序列。分离了高纯度RNA。以RNA为模板,以RT-PCR方法,克隆了花生actin基因cDNA序列,长度为384 bp,编码128个氨基酸残基。此cDNA序列(命名为Ahactin)与几种高等植物actin氨基酸序列相似性大于80%。     

一种侵染花生的新病毒鉴定初报

从广东省广州市郊花生上分离获得1个新的病毒分离物，病毒粒体为球状，直径约100nm。该病毒分离物在人工接种鉴定的4科13种植物中，能侵染3科11种植物；与花生芽枯病毒(PBNV)抗血清有弱阳性反应；病毒SRNA 3’端813个核苷酸序列与PBNV和西瓜银叶斑驳病毒(WSMoV)同源性为80％左右，与TospovirW属中其它病毒同源性为39％～65％。初步明确该病毒分离物为Tospovirus属的一种新病毒，暂定名为花生坏死斑点病毒(peanut necrotic spot virus，PNSV)。     

PVY株系间的分子变异及分子鉴定方法

马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)株系分化现象明显,难于准确鉴定.本研究利用核酸序列分析工具对PVY主要株系的全基因组序列、cp基因序列和P1基因序列进行了系统分析,探明了PVY主要株系的分子特征.结果表明,具有PVYN株系血清型的PVYN、PVYNIN株系与具有PVYO株系血清型的PVYO、PVYN...     

芝麻赤霉素合成相关基因鉴定与表达分析

赤霉素的生物合成是多种酶促反应的过程,与植物植株发育、逆境响应密切相关。为分析芝麻基因组中赤霉素合成相关基因的分布、结构和活性特征,本研究以芝麻基因组序列和不同组织转录组为对象,通过生物信息学方法,从中共鉴定出32个赤霉素合成相关基因,分属7个不同的基因家族,分布在除5号染色体外芝麻所有的染色体上。不同基因家族蛋白质肽链长度存在较大差异,其中CPS家族的蛋白质序列最长,平均包含776个氨基酸残基;KAO家族蛋白序列长度的变异最大,在401-834个氨基酸之间。所有芝麻赤霉素合成相关基因编码的蛋白质预测为亲水性蛋白。与拟南芥、水稻、大豆、葡萄、高粱、番茄等物种相比,芝麻中赤霉素合成相关基因数目处于中等水平,但CPS家族中芝麻的基因数目明显多于其他物种,进化分析表明,在分析的7个物种中,芝麻与番茄具有较近的进化关系。在不同组织中,7个相关基因家族表达模式不同。KS家族基因在种子、茎尖和叶片中表达相对较高;CPS家族基因在心皮和种子中活性较强,但在茎尖和叶片中几乎没有表达;KAO和KO家族基因在不同组织中整体上具有相对较高的活性,而KS、GA3ox家族的基因在不同组织中整体表达量较低。就不同组织而言,种子中的GA合成相关基因活性整体较高;而在根尖、茎尖、叶片等与芝麻植株形态建成密切相关的3个组织中,这些基因表达以根尖较突出、其次为茎尖,在叶片中的活性整体较低。本研究为解析芝麻赤霉素合成相关基因的结构特征及其在不同组织中的作用特点提供了基因信息和理论参考。      

花生（Arachis hypogaea L.）游离小孢子培养获得愈伤组织研究

本文通过镜检花粉各发育时期及其与花蕾、花药形态的相关性,探讨了花生基因型、液体培养基及附加激素浓度对愈伤组织诱导率的影响。结果表明,当花蕾纵径长为2.48~2.96mm,小孢子基本处于四分体时期;长度在3.26~4.16mm时,以单核期为主;5.38~9.9mm,为双核期。在小孢子单核靠边期取材诱导率最高,达9.38%。本实验所用的六个花生品种中,四粒红的单蕾产胚数最高,达到0.1个胚/蕾 (MS培养基) 和0.05个胚/蕾(NLN培养基);在附加4mg/L2,4-D,3mg/L6-BA和0.3mg/LNAA改良的MS液体培养基上且当小孢子密度为2.5×105个/mL时,花生品种四粒红的愈伤组织诱导率最高,为12.5%。     

花生普通花叶病毒病发生和流行规律研究

试验说明,花生在花针盛期以前为花生矮化病毒（ＰＳＶ）易感病时期,随后抗性有所增强。ＰＳＶ可以通过花生种传,但种传率很低,仅０．０２％。不同种类蚜虫对ＰＳＶ传毒效率有明显差异,在测定的４种蚜虫中,豆蚜（Ａｐｈｉｓｃｒａｃｃｉｖｏｒａ）传毒效率高,其他种类蚜虫传毒效率低。１９８８～１９９４年在河南开封田间观察说明,由ＰＳＶ引起的花生普通花叶病毒病在花生上流行受花生苗期和花针期田间迁飞蚜虫数量和花生苗期降雨量的影响,并根据上述３因素７年次资料配合的病害流行预测式,其回报可靠度的置信范围在９８．５７％左右,经相关检验,估计值与实侧值达极显著水平。     

花生矮化病毒病抗性SSR标记

利用抗、感矮化病毒病的花生品种ICGV86699和远杂9102为亲本配制杂交组合,构建重组近交系群体（RIL）,采用SSR技术和BSA分析方法,结合F6世代各个家系接种病毒后ELISA的鉴定结果,得到1个与花生矮化病毒病抗性连锁的分子标记XY38。此标记与抗性基因间的遗传距离为7.5cM,具有作为抗性育种辅助选择技术的潜力。     

Fatty acid methyl ester from Neurospora intermedia N-1 isolated from Indonesian red peanut cake (oncom merah)

The objective of this study was to identify the Fatty Acid Methyl Ester (FAME) from Neurospora intermedia N-1 that isolated from Indonesian red peanut cake (oncom). FAME profiles have been used as biochemical characters to study many different groups of organisms, such as bacteria and yeasts. FAME from N. intermedia N-1 was obtained by some stages of extraction the orange spores and fractination using a chromatotron. The pure compound (1) was characterized by 500 mHz NMR (1H and 13C), FTIR and LC-MS. Summarized data's of 1H and 13C NMR spectra of compound 1 contained 19 Carbon, 34 Hydrogen and 2 Oxygen (C19H34O2). The position of the double bonds at carbon number 8 and 12 were indicated in the HMBC spectrum (2D-NMR). LC-MS spectrum indicates molecular weight of the compound 1 as 294 which is visible by the presence of protonated molecular ion [M+H] at m/z 295. Methyl esters of long chain fatty acids was presented by a 3 band pattern of IR spectrum with bands near 1249, 1199 and 1172 cm(-1). We suggested that the structure of the pure compound 1 is methyl octadeca-8,12-dienoate. The presence methyl octadeca-8,12-dienoate in N. intermedia is the first report.     

花生微卫星DNA分离方法的研究

比较了2种从AFLP扩增片段中分离花生微卫星DNA(SSR)的方法，结果表明，从预扩增的AFLP片段中富集SSR的方法简便，获得较多的含简单重复序列的片段；而从选择性扩增的AFLP片段中分离SSR后直接从电泳胶上切取差异片段进行测序的方法效率低，不适用于分离花生的微卫星DNA。     

花生(Arachis hypogaea L.)CaM cDNA基因的克隆

提取花生幼嫩叶片总RNA,以逆转录cDNA第一链为模板,合成5'端和3'端引物,PCR扩增并克隆得到花生钙调蛋白基因的2个异型基因.序列分析表明,PCaM-1和PCaM-2均由447个核苷酸组成,共编码148个氨基酸.2个cDNA的核苷酸序列同源性为84%,编码区的氨基酸序列同源性为96%,仅有5处替换:F-L、T-A、M-T、M-T和L-F.     

花生品种(系)对黄瓜花叶病毒抗性鉴定

1994～1995年连续两年田间调查和1996～1998年3年田间小区鉴定结果：在山东烟台地区,鲁花11号、1－10、福早1号、白沙1016和鲁花10号5个花生品种对CMV田间抗性表明,鲁花11号和1－10平均发病率显著低于鲁花10号、福早1号和白沙1016。在武汉小区鉴定的36个花生品种（系）中,低抗的3份（鲁花11号、中花4号和鲁花14号）,低感的11份,其余材料为中感和高感,未发现中抗以上材料。     

花生油酸亚油酸比值（O/L）的遗传分析

应用植物数量性状主基因+多基因混合遗传模型，对花生品种“青苗豆×全州麻壳”、 “富川大花生×隆安宝湾花生”和“汕油162×Sunoleic95R”三个不同杂交组合的F2分离群体的油酸/亚油酸比值进行了单个分离世代的数量性状分离分析，结果表明：“青苗豆×全州麻壳”、“富川大花生×隆安宝湾花生”两个杂交组合结果一致，O/L受一对负向完全显性的主基因控制，F2群体表现为由主基因型AA和Aa+aa按1：3比例的混合；另一个组合“汕油162×Sunoleic95R”的油酸/亚油酸比值受两对加性-显性-上位性主基因控制遗传，两对主基因间的基因效应差异不大。第一对主基因加性效应（da）1.3586和第二对主基因加性效应（db）1.3580几乎相同。三个组合的主基因遗传力分别为61.27﹪、64.09﹪和64.66﹪，多基因的遗传力分别为33.85％、34.52％和33.45％。