干酪乳杆菌功能及应用的研究进展

益生菌作为一种无毒、无害、无残留、无耐药性的绿色饲料添加剂,已成为抗生素替代品的一个热门研究方向。干酪乳杆菌作为最早录入《饲料添加剂品种目录》的益生菌之一,可对动物机体产生多种显著的益生功效,在实际生产中也被广泛应用。文章主要对干酪乳杆菌的分类、功能特性、在生产上的应用现状及前景进行了综述。     

一株干酪乳杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

本研究旨在分离既能用于微生态制剂又能用于青贮饲料发酵剂的优良乳酸菌,采集规模化牛场青贮饲料,取梯度稀释液涂布MRS平板,进行厌氧培养,筛选优势菌株,观察其菌落形态,并进行生化试验和特异性PCR鉴定。研究自筛乳酸菌的生长曲线、产酸曲线、培养温度及培养基初始pH对菌株生长的影响,并研究其抑菌特性、药物敏感性和安全性。试验筛选到1株菌落形态圆形、边缘整齐、表面光滑、乳白色、镜检为革兰氏阳性的无芽孢杆菌。生化结果显示,分离菌株可厌氧生长,运动性试验、过氧化氢酶试验、硝酸盐还原试验、明胶液化试验、吲哚试验结果均为阴性,15种糖醇发酵试验结果符合干酪乳杆菌生化特征。用干酪乳酸杆菌特异性引物对菌株进行PCR鉴定,琼脂糖凝胶电泳结果显示在727 bp处出现特异性扩增条带,与生化鉴定结果相符,将分离菌株命名为RS1。RS1在0~4 h时发酵液pH变化不明显,处于生长延迟期;4~16 h时发酵液pH下降较快,进入对数生长期;16~36 h时发酵液pH下降缓慢,进入稳定期。RS1在培养温度为20~50 ℃范围内均能生长,适宜生长温度为25~40 ℃;在培养液初始pH 1.0~9.0条件下均能生长,最适pH为6.0~8.0;对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为23 mm,对大肠杆菌的抑菌圈直径为17 mm;对恩诺沙星和头孢他啶耐药;经14 d灌服小鼠生长状况良好。上述结果表明,本试验筛选到的干酪乳杆菌RS1安全、无致病性,在微生态制剂及生物饲料添加剂领域具有潜在的开发价值。     

嗜酸乳杆菌、双歧杆菌和干酪乳杆菌的选择性计数

LC培养基只能计数干酪乳杆菌，MRS－水杨素（或山梨醇）培养基可以计数嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌，而MRS培养基可以计数嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和双歧杆菌，于是通过减法原则就能从混合物中单独计数它们。另外，MRS－NNLP培养基也可用于选择性计数双歧杆菌。     

菊粉对植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌生长的影响

试验初步研究菊粉对植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌生长的影响。在MRS 培养基中添加1%、2%、3%和4%的菊粉,测定2株菌生长的OD600nm位和pH。结果表 明,当菊粉添加量为1%时,促进植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌的生长,植物乳杆菌 生长OD600nm最高为2.799,pH从5.98降到3.59;保加利亚乳杆菌生长OD600nm最高 为3.051,pH从6.55降到4.74。     

饲用干酪乳杆菌的生物学特性研究

针对一株干酪乳杆菌生长特性、泌酸能力、耐酸性、胆盐耐受性和抑菌能力进行研究,旨在为微生态饲料添加剂的研发提供理论依据.结果表明:干酪乳杆菌在24 h时菌体质量浓度达到最高值,在28 h时产酸量最高,pH在3.80左右维持稳定;干酪乳杆菌分别经pH 2.0和1.0％胆盐处理3h后存活率分别为81.29％、150.81％;该菌株对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌均具有较好的抑菌性能,抑菌圈直径分别为17.47、18.53、16.36 mm.     

一株植物乳杆菌的分离鉴定及其生长特性研究

从健康仔猪肠道内容物中分离筛选得到一株抗逆性较好、产酸及抑菌能力较强的菌株LYP06-2,结合其生理生化特性及16SrDNA序列分析,鉴定该菌株为乳杆菌属的植物乳杆菌（Laetobaeillus plantarum）。菌株LYP06-2在pH2．0的人工胃液中处理3h后存活率为31．3％,人工肠液中存活率为33．0％,胆盐浓度为0.3％时存活率为3．7％,对大肠杆菌K88、K99具有较强的抑制作用,也有较强的产酸能力,这为将来规模化生产有效的微生态制剂产品奠定了基础。     

一株干酪乳杆菌的分离鉴定及其对禽致病性大肠杆菌的拮抗作用

为探讨干酪乳杆菌对禽致病性大肠杆菌是否具有拮抗作用,本研究从酒糟发酵物中分离获得1株菌,通过形态观察、16S rRNA鉴定分析,证实分离菌株为干酪乳杆菌。将其与禽致病性大肠杆菌按1∶1的比例接种到MRS液体培养基中,测定不同时间段内大肠杆菌总数。同时以干酪乳杆菌饲喂不同日龄的鸡,6 h后再用禽致病性大肠杆菌攻毒,测定不同时间段内01 g盲肠内容物中大肠杆菌总数。体外试验结果显示,干酪乳杆菌能明显抑制禽致病性大肠杆菌的生长;体内试验表明,干酪乳杆菌对禽致病性大肠杆菌具有一定的拮抗作用。本研究为干酪乳杆菌的实际应用提供了理论依据。     

两株干酪乳杆菌生物学特性的研究

在模拟人体消化道环境中,对2株干酪乳杆菌耐酸、耐胆盐和耐NaCl等生物学特性进行了研究.结果表明,2株干酪乳杆菌在pH值为2.5～4.5的人工胃液或人工肠液中作用3h后均能生长,活菌数达到1010个/mL左右.此外,在胆盐浓度为2.5g/L或高盐浓度比例为7.5%的条件下亦能正常生长.该研究表明,这2株菌株在人体或动物中具有较好的适应性,可以作为益生菌用于食品工业.     

植物乳杆菌的研究进展

植物乳杆菌来源广泛,作为益生菌家族的一员,其具有调节肠道菌群平衡、参与机体免疫应答和降低胆固醇水平等多种益生功能,在食品工业中有着广泛应用。本文综述了植物乳杆菌的益生功能机制并列举了代表性菌株,对植物乳杆菌在乳品领域的应用发展限制因素进行阐述,同时提出了目前的常见解决方法,为植物乳杆菌在实际中的应用提供参考。     

干酪乳杆菌高密度发酵工艺优化

为探究一种新型干酪乳杆菌高密度发酵工艺,首先通过单因素试验、正交试验对干酪乳杆菌发酵液不同类别的基础成分进行测试,分析并选出最优组合;其次通过对比试验分别对干酪乳杆菌发酵过程中向发酵液中补充的促生长因子、碳源、氮源及p H调节剂的浓度进行测试筛选。结果表明：发酵最优工艺为：在无氧密闭的环境内以温度为37℃、p H为6.5、接种量为2%的初始条件进行发酵,在此条件下使用乳糖5 g/L、牛肉膏10 g/L、硫酸镁0.2 g/L、混合生长因子溶液(苹果汁：橙汁：山楂汁=3:2:1)10 mL/L的发酵液进行恒温无氧发酵;24 h后向发酵液中添加浓度0.3%的乳糖、0.8%的牛肉膏与4%的氨水,继续发酵24 h后收获菌种。在此发酵工艺条件下,收获的菌种密度可达到2.8×10¹⁰CFU/mL。     

抗真菌植物乳杆菌的筛选及其在酸乳保鲜中的应用

以33株具有潜在抑制真菌活性的植物乳杆菌为研究对象,分别与基础发酵剂复配制备酸乳,通过测定发酵酸乳在敞口室温条件下贮藏期间霉菌、酵母菌的菌数变化及酸乳的酸度,筛选具有良好保鲜效果的植物乳杆菌.结果表明:初筛所得9株植物乳杆菌(IMAU80152、10156、80091、50045、10155、80106、10216、10996、10239)可明显抑制真菌生长,复筛出IMAU80091和IMAU80106在酸乳中酸度变化程度显著低于其他菌株及商业保鲜菌(P＜0.05),当上述2株菌以1∶1复配发酵时抑制酵母菌效果显著优于商业保鲜菌(P＜0.05).复配发酵的酸乳样品贮藏21d后,滴定酸度为(138.24±1.19)°T,显著低于商业保鲜菌组(146.41±1.18)°T(P＜0.05).IMAU80091和IMAU80106复配组合可有效抑制货架期内酸乳真菌污染,具有作为生物保鲜菌的优良特性.     

植物乳杆菌在瘤胃内发酵产共轭亚油酸的体外研究

在体外研究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)ANCLA 01发酵添加葵花籽油的瘤胃液,达到提高共轭亚油酸(CLA)产量的目的。结果表明:油脂的添加可以提高发酵液CLA产量,在3%的接种量和4mg/mL的油脂添加量条件下,过滤除菌瘤胃液组CLA的产量显著高于其他试验组(P<0.05)。在灭菌瘤胃液组,植物乳酸菌的生长良好,但CLA的产量低于过滤瘤胃液组。     

应用陶瓷膜浓缩植物乳酸杆菌发酵液的研究

对Membralox1P1960GL/SD/100nm陶瓷膜在植物乳酸杆菌发酵液浓缩过程中的应用进行了实验研究。确定了陶瓷膜的操作条件和再生方式。在过膜压力1.0bar、切向流5m/s条件下,浓缩倍数达到15倍时,平均过膜通量保持在160L/m·2h以上。     

自然发酵泡菜汁中植物乳杆菌的分离鉴定与体外益生特性研究

利用MRS固体培养基从自然发酵的泡菜汁中分离到1株优势乳酸菌,将其命名为菌株R1,经16S rRNA基因序列分析,并结合生理生化特性和糖发酵试验将其鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。菌株R1具有很强的产酸能力,24 h内可使MRS液体培养基p H从6.14降为3.59。菌株R1的发酵上清液对痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鸡肠炎沙门氏菌、大肠埃希氏菌均有很好的抑制作用。体外益生试验表明,菌株R1能耐受0.3%的胆盐、p H 3.0的酸度以及60℃、30 min的热处理,对人工胃液和人工肠液也有很好的耐受性。菌株R1对头孢类和青霉素类抗生素较敏感,对诺氟沙星、卡那霉素、链霉素等抗生素不敏感。     

1株鲤鱼源植物乳杆菌的分离鉴定及其生物学特性分析

【目的】筛选具有优良益生特性的鲤源乳酸菌作为水产养殖用微生态制剂候选菌株。【方法】以鲤鱼肠道内容物及黏膜为菌株的分离来源,采用MRS培养基进行菌株分离纯化,经16S rRNA测序鉴定后,对分离菌株生长特性、产酸能力、耐酸、耐胆盐、抑菌特性、药物敏感性及安全性等生物学特性进行分析。【结果】试验成功分离到1株植物乳杆菌,将其命名为YY001,该分离株在MRS培养基上菌落形态为圆形、表面光滑、边缘整齐、呈乳白色,革兰氏染色为阳性、无芽孢、两端钝圆的短小杆菌;4 h后进入对数期生长,12 h后生长达到稳定期;具有较强的产酸能力,产酸曲线显示,0~12 h pH迅速下降,培养16 h的菌液pH达3.8;在pH 3.0和0.3%胆盐的条件下具有一定耐受性;该分离株对水产常见致病菌柱状黄杆菌、维气氏单胞菌和嗜水气单胞菌均具抑菌效果,且对柱状黄杆菌的抑菌效果最显著,抑菌圈直径达34.19 mm;药物敏感性试验结果显示,分离株对卡那霉素、链霉素和万古霉素耐药;每天一次连续1周灌胃10⁸CFU分离菌株对小鼠无毒害作用。【结论】本研究分离到的菌株YY001具有优良的生物学特性,可作为水产养殖用微生态制剂候选菌株,为后续制备鲤鱼用微生态制剂奠定基础。     

植物乳杆菌GUO致畸性研究

对实验室筛选得到一株具有降胆固醇作用的植物乳杆菌GUO进行致畸性试验,以测定该菌株的食用安全性。设低、中、高三个植物乳杆菌GUO剂量(即0.83mg/kg、1.67mg/kg、3.33mg/kg),另设蒸馏水阴性对照组和维生素A(13000μg/kg)阳性对照组对SD大鼠进行致畸试验。采用方差分析和卡方检验的统计方法分析得到致畸试验结果:阳性对照组和阴性对照组相比,孕鼠体重、连胎子宫重和增重,胎仔的吸收胎和死胎,体长,胎鼠骨骼发育及胎鼠内脏畸形均有显著性差异(P0.05),而各剂量组与阴性对照组相比,在上述方面均无显著性差异,说明植物乳杆菌GUO无致畸性。     

利用16S rRNA全长序列鉴定植物乳杆菌

从标明含有嗜酸乳杆菌的活菌胶囊中分离到一株乳杆菌Lal菌株，利用16S rRNA全序列分析法和传统分类法对Lal菌株进行分类鉴定表明：Lal菌株属于植物乳杆菌种新株系，该菌株现在已经被中国科学院北京微生物所菌种保藏中心收录保存，编号为ASl．2986。     

植物乳杆菌对断奶仔猪生产性能和血液生化指标的影响

通过断奶仔猪的饲养试验和消化试验来评定植物乳杆菌对断奶仔猪的营养价值。试验结果表明植物乳杆菌能显著提高断奶仔猪的试验末重,试验组比对照组提高13.85%(P<0.05);血清总蛋白试验组比对照组提高16.31%(P<0.05),而血清尿素氮试验组比对照组降低36.21%(P<0.05),可见植物乳杆菌能显著提高断奶仔猪血清总蛋白含量和显著降低血清尿素氮含量;试验组CD4 比对照组高22.22%,试验组CD4 /CD8 比对照组高16.95%,提高了断奶仔猪细胞免疫水平;试验组同对照组相比,空肠、盲肠乳酸菌数量分别提高了9.65%、18.11%,空肠、盲肠大肠杆菌数量分别降低了9.26%、12.32%,空肠、盲肠沙门氏菌数量分别降低了5.93%、17.58%,改善了肠道微生物环境;小肠绒毛长度试验组比对照组高44.36%,胃底腺胃小凹的深度试验组比对照组深17.74%。     

一株干酪乳杆菌的生物学特性研究

通过对一株具有降胆固醇功能的益生茵一千酪乳杆菌生物学特性研究。发现所筛选的干酪乳杆菌BDⅡ能够耐受2．5％的牛胆盐和6．0％盐，在pH2．5R MRS-broth中仍可以生长，并有抑制常见致病茵，对部分抗生素比较敏感的特性，对小白鼠安全无毒，可以用作微生态制剂和酸奶发酵剂的优良菌种。