多年保存天牛科标本的DNA微量提取方法

本文首次采用磁珠DNA提取法对多年保存的昆虫标本DNA进行微量提取。通过对实验结果和所测基因片段进行分析,发现磁珠DNA提取法对于多年保存,DNA微量且已出现断裂的标本具有良好的提取效果,完全满足后续实验需要。     

利用96孔板建立除草剂微量活体筛选方法初探

以马唐、稗草、反枝苋3种杂草为指示植物,采用96孔板建立了化合物除草活性微量活体筛选方法。从6种培养基中筛选出最适合3种指示杂草生长的Ⅰ号培养基,以传统盆栽法为对照,进行了96孔板苗前处理微量活体筛选方法(以下简称96孔板法)的研究。结果表明:96孔板法以指示杂草的株高受抑制情况作为评价指标较为合适;3种供试除草剂采用96孔板法对3种指示杂草所表现出的杀草活性要高于盆栽法;乙氧氟草醚、二甲戊灵、氟乐灵盆栽法的EC50和EC90值分别是96孔板法的1.44~21.47倍和1.47~32.84倍;采用96孔板法,乙氧氟草醚对马唐和反枝苋、二甲戊灵对稗草的活性最高,EC50值分别为0.79、0.73和0.45 μg/mL,EC90值也分别只有3.13、1.72和1.36 μg/mL。96孔板法达到了微量、敏感、节省时间和空间的要求,是发现先导化合物除草活性较适宜的微量活体筛选方法。     

微量滴度酶标板法测定棉蚜(Aphis gossypii Glover)酯酶特性与有机磷抗性的关系

通过生物测定表明高密棉蚜对有机磷的抗性高于北京棉蚜,用紫外分光光度计比色法(A法)及微量滴度酶标板法(B法 )测定高密棉蚜及北京棉蚜的α-乙酸萘酯酯酶活力和α-乙酸萘酯酯酶动力学。北京棉蚜和高密棉蚜的α- NA酯酶活力分别为 2.23、4.48(A法 )和1.13、3.30(B法)μmol·mg-1pro.·min-1,高密、北京棉蚜的酶活之比为 2 .00(A法 )、2 .92(B法) ;北京棉蚜、高密棉蚜的Km值分别为:6.06×10-5、7.51× 10-5(A法 )和 7.66×10-5、8.87×10-5 (B法) mol·L-1,Vmax值为2.53、5.82(A法)和1.28、3.61(B法)μmol·mg-1·min-1。比较紫外分光光度计比色法及微量滴度酶标板法的测定结果,表明微量滴度酶标板法的测定结果是可靠的。     

小麦白粉病菌基因组DNA的微量提取及ISSR-PCR反应体系的优化

为了寻找适合小麦白粉菌基因组DNA微量提取的方法,本试验利用改进的CTAB法、电钻微量研磨一管法、FastPrep DNA试剂盒法和Chelex-100法分别提取小麦白粉菌基因组DNA。比较得出,在微量提取时,CTAB法的提取率较高;在分生孢子量较多时,FastPrep DNA试剂盒方法提取的DNA质量较高,这两种方法提取的DNA均适用于ISSR-PCR。采用正交设计L16(45)法优化了适合于小麦白粉病菌群体的ISSR体系,确定了25μL时优化的反应体系:1×buffer、模板DNA0.5ng、dNTP0.14mmol/L、TaqDNA聚合酶1U、引物1.4μmol/L、Mg2+1.8mmol/L。利用该体系筛选出了一批多态性较好的ISSR引物,为小麦白粉病菌遗传多样性研究奠定了基础。     

鸭病毒性肝炎病毒微量血清中和试验研究

本文应用鸭病毒性肝炎病毒及其阳性血清在鸭胚肝细胞单层上进行微量血清中和试验，设定了两板法的试验方法，并确定了中和抗体滴度在１：４以下为阴性、１：４（含１：４）以上为阳性的判定标准。通过鸭胚中和试验、特异性试验、免疫鸭病毒性肝炎抗体消长的测定等试验证明其敏感性和特异性都较鸭胚中和试验为高。从不同鸭群采集的４５０份血清按本研究规定的方法进行微量血清中和试验，其结果证明了本试验所确定的判定标准是可靠的。     

生物素-亲和素酶联免疫吸附测定法检测水稻白叶枯病菌的研究

 以单克隆抗体为第二抗体的ELISA双夹心法对于检测水稻白叶枯病菌具有简便快速准确的优点,但对于检测病种所带微量细菌,其灵敏度仍嫌不足。     

毒死蜱原药中微量甲苯气相色谱分析方法的研究

本文采用气相色谱法,以外标法定量检测毒死蜱中微量甲苯的含量,其方法的标准偏差为0.13;变异系数为0.16%;线性相关系数为0.9999;平均回收率为100.4%。     

免疫检测技术在农药残留分析中的应用

免疫检测法(Immunoassay)是将免疫反应与现代测试手段相结合而建立的超微量测定技术。免疫是机体识别和排除进入体内的抗原性异物的保护性反应。免疫反应,即抗体抗原反应,不仅发生在生物体内,在体外亦能进行,而且反应是高度特异性的,遵循质量作用定律。现代测试仪器快速灵敏,对于一些物质如荧光素、放射性同位素、酶等,在极微量时都可检出。因此上述两个方面的结合,建立了一系列的免疫检测方法,如用荧光素标记抗原或抗体的荧光免疫法(FIA),用放射性同位素标记抗原的放射免疫法(RIA),用酶标记抗原或抗体的酶免疫法(EIA)等。这些方法选择性强,灵敏度高,简单快速,迅速发展成为现代生物化学、医学、临床化学和药物化学等研究领域的重要工具。     

甲基异柳磷在花生中残留分析方法的研究——通用微量残留净化器的应用

本文研究了甲基异柳磷在花生中的残留分析方法.根据吹扫蒸馏法原理,使用通用微量残留净化器,进行样本净化,样本中的高沸点杂质留在净化管内,农药则由载气流带出而起到净化作用。该法具有高效、迅速、简便等特点,回收率及最低检出浓度均达到要求。     

GC／MS法测定鼠药中的氟乙酰胺

本文介绍了用于ＧＣ／ＭＳ法测定鼠药中的微量氟乙酰胺，并研究其质谱特性。     

生物素—亲和素酶联免疫吸附测定法检测水稻白叶枯病菌的研究

以单克隆抗体为第二抗体的ELISA双夹心法对于检测水稻白叶枯病菌具有简便快速准确的优点,但对于检测病种所带微量细菌,其灵敏度仍嫌不足。我们在常规ELISA间接法的基础上,建立了一种亲和素—生物素化辣根过氧化物酶复合物酶联免疫吸附测定法(ABC-ELISA),并初步用于水稻白叶枯病菌的检测,取得一定效果。     

3种杀螨剂生物测定方法的比较研究

在杀螨剂研究中,常规的玻片浸渍法或叶片浸渍法都无法满足微量物质的快速测定工作。在玻片浸渍法的基础上,采用玻璃点样毛细管对螨体直接施药,解决了这一问题。文中比较了玻片浸渍法,叶片浸渍法及玻片毛细管法3种测定方法对用4种溶剂和水提取的黄花蒿的提取物和常用杀螨剂哒螨灵对朱砂叶螨的作用效果,结果证实了采用玻片毛细管法测定的结果与玻片浸渍法的结果相近,但其用药量降低了1000倍,这对植物源杀螨剂以及生物农药研究都有重要意义。     

农药残留检测技术进展概况

50年代农药残留量分析方法局限于化学法、比色法和生物测定法，检测方法缺乏专一性，灵敏度也不高。50年代未根据有机磷和氨基甲酸酯类农药的毒理学原理，使用胆碱酯酶抑制法，灵敏度高，适应性广，但缺乏专一性。60年代色谱技术的发展，使薄层色谱法在农药残留分析中广泛应用。而气相色谱法的出现推动了农药残留分析的高速发展。高效能的色谱柱可将各组分或杂质分离。高灵敏度和专一性强的检测器解决了早期不能检出的微量农药、代谢物和降解产物的分析。80年代以来，对热不稳定极性农药及其代谢物的残留应用液相色谱分析。有的农药采用往前…     

黏虫微量筛选方法的研究

用微量筛选方法和常规筛选方法筛选24种商品药剂,结果表明常规筛选出线的药剂要在微量筛选浓度下出线,活性必须达到C级。又分别用2种方法筛选了24个新化合物,结果表明,常规筛选出线的化合物在微量筛选时仍能出线,证实了100mg/L浓度下活性为C级的微量筛选出线标准是可行的。     

西瓜细菌性果斑病菌快速免疫PCR检测

对种子携带的西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp. citrulli)进行简单抽提和纯化,不经过DNA提取而以病原菌为模板进行PCR检测.结果显示,对带菌种子提取液采用直接PCR法最低检出限为3600个细菌/mL,而免疫PCR最低检出限可达到600个细菌/mL.免疫PCR法可以有效富集病原后再扩增,方便快速,成本低,灵敏度高,适用于种子携带微量的西瓜细菌性果斑病菌的快速鉴定.     

国外一种迅速发展的施药方法——茎干注射

国外一种迅速发展的施药方法──茎干注射陈福良（中国农业科学院植物保护研究所１０００９４）茎干注射法，即利用特殊注射工具，在压力作用下，将药液注射进植物茎干内。这种施药方法最早应用于化学除莠，７０年代以来，逐渐应用于病虫害防治，施用植物生长调节剂和微量...     

在进口塞马中检出马病毒性动脉炎病

１９９５年１０月，新疆喀什某公司从吉尔吉斯进口６匹赛马，根据条款进行了马病毒性动脉炎应用微量中和试验检查，发现５匹马血清ＥＡＶ抗体阳性，抗体从１：８－１：３２。而条款要求ＥＡＶ血清抗体滴度１：４为阳性。     

石泉县中部地区土壤微量营养元素空间分布特征

以石泉县研究区678个表层(0-20cm)土壤样品微量营养元素(Fe2O3、Mn、Zn、Cu、Mo、B)的实测含量为对象,采用地统计学与GIS相结合的方法,对土壤微量营养元素的含量及空间分布特征进行分析.结果表明:研究区土壤微量营养元素含量的平均值均高于全国平均值,Mn平均值低于区域背景值,但相差不大.趋势效应参数分析...     

微量林丹的离子阱气——质联用分析条件研究

以离子阱质谱分析微量林丹 ,通过对离子扫描范围、扫描周期、扫描次数、选择离子范围等条件的改变 ,分析信噪比及相似度的变化 ,探讨以气相色谱—离子阱质谱联机分析微量林丹的条件