A、J亚群禽白血病病毒感染肉用种鸡的诊断

通过流行病学调查、剖检病变和组织病理学观察,结合PCR技术检测病原核酸,确诊肉用种鸡群发生了由ALV—A和ALV—J感染而导致的淋巴细胞性白血病和骨髓细胞瘤型白血病。在检测的6只病鸡中,6只病鸡均感染了ALV—J,2只病鸡感染了ALV-A.     

禽白血病马立克氏病在鸡群中感染的调查研究

本文采用鸽抗 SR—RSV 血清,通过琼脂扩散法检测羽髓,对贵州省的4个养鸡场,9个不同日龄的鸡群进行了禽白血病感染情况的调查。共采集424只鸡的样本,禽白血病病毒(ALV)抗原的阳性率平均为11.1%。对 ALV 抗原阳性的12只鸡捕杀后进行病理组织学检查,全部呈现淋巴细胞白血病的病理变化。本文首次在贵州省的4个养鸡场中从血清学、病理学上确诊了 ALV 感染的存在。同时,对两个鸡场的弱小鸡群及同批出壳的正常鸡群,进行了禽白血病及马立克氏病感染情况的比较分析。     

禽白血病病毒斑点杂交检测方法的建立

为建立禽白血病病毒(ALV)斑点杂交检测方法,本研究采用RT-PCR技术扩增ALV群特异性p27抗原基因的部分片段,并以纯化的p27PCR产物为模板,合成地高辛标记探针,以此建立了ALV的斑点杂交检测方法。用该方法对4份疑似感染ALV的现地病鸡组织样品和18枚鸡胚进行检测,结果表明所有样品均为阳性,而且与PCR检测结果的符合率达到100%。该方法具有良好的特异性和敏感性,适应于ALV临床大规模检测。     

ALV-A诱发蛋鸡髓细胞瘤和淋巴瘤混合型禽白血病自然病例初报

湖北某蛋鸡场发生肿瘤性疾病,剖检可见病鸡肝、肾、脾肿大,肝脏表面有大小不等的灰白色结节,其中2只(2/7)病鸡肠系膜明显增厚并布满大量灰白色结节。取病变组织制备石蜡切片,HE染色,部分病鸡(4/7)可见髓细胞瘤及淋巴细胞瘤。采集病变组织进一步进行PCR、病毒分离和IFA等实验室检测,结果病料组织DNA中仅检测出A亚群禽白血病病毒(ALV-A)核酸序列,未检测出其他亚群ALV;用病料制备组织悬液接种的DF-1细胞,IFA呈ALV-A阳性、ALV-J阴性。将分离的病毒静脉接种无外源性ALV感染的13日胚龄蛋鸡鸡胚,可复制出与自然病例类似的肿瘤。结果表明,分离的病毒为ALV-A,病鸡确诊为由ALV-A引起的髓细胞瘤和淋巴细胞瘤混合型禽白血病。这是在国内首次发现ALV-A诱发蛋鸡髓细胞瘤和淋巴瘤混合型禽白血病的自然病例。     

2014年广西地方鸡群病毒性肿瘤病例的检测分析

2014年,广西地区部分鸡群发生了以内脏出现各种肉眼可见肿瘤、生长阻滞、消瘦和采食量下降为特征的病例。通过对病鸡进行肉眼剖检观察,对病料组织分别进行肿瘤病毒PCR检测、DF-1细胞分离培养及其细胞培养上清进行禽白血病病毒(ALV)p27抗原检测,结果显示12批病例中,单独感染ALV的鸡群有5群,单独感染马立克氏病病毒(MDV)的鸡群有1群,ALV与MDV的二重混合感染鸡群有4群,MDV和网状内皮组织增殖病病毒(REV)的二重混合感染的鸡群有1群,ALV、MDV和REV的三重混合感染有1个鸡群。表明ALV的感染及其与其他肿瘤病毒的共感染是当前临床肿瘤病例的主要病因。     

禽白血病A亚群病毒引起的淋巴细胞性白血病诊断

采用病理组织学方法和分子生物学技术对某肉种鸡场的感染鸡进行实验室诊断,在肿胀的肝、肾和法氏囊组织切片中观察到成淋巴细胞增生病变。针对禽白血病病毒(ALV)群特异性抗原P27基因进行RT-PCR扩增,肾、肺、肝、脾病料样本中ALV病原核酸的检出率分别为100%、100%、90%和50%。将扩增的目的基因序列与GenBank公布的ALV参考毒株相应序列进行比较,核苷酸序列的同源性达到93.6%~97.7%。取ALV囊膜糖蛋白gp85基因的扩增产物进行酶切分析,扩增的目的片断中存在BglⅡ和SspⅠ酶切位点,BamHⅠ不能切割PCR产物。试验结果证实本次疫病是由ALV-A亚群病毒引起的淋巴细胞性白血病。     

禽呼肠孤病毒与禽白血病病毒双重RT-PCR检测方法的建立及应用

根椐GenBank中禽呼肠孤病毒(ARV)、禽白血病病毒(ALV)基因序列,设计2对引物,在建立鉴别各病毒单项RT-PCR技术的基础上,优化双重RT-PCR反应条件,建立2种病毒的双重RT-PCR。对同一样品中的ARV、ALV核酸模板进行双重RT-PCR扩增,结果可同时扩增ARV 485 bp、ALV 673 bp的特异性片段,而对其他5种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,该双重RT-PCR技术能检出10 pg的ALV和10 pg的ARV模板。用31份临床病料对本研究双重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为100%。结果表明建立的双重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这2种病毒的同时检测和鉴别诊断。     

ARV、REV与ALV三重RT-PCR检测方法的建立

根椐GenBank中已发表的禽呼肠孤病毒（ARV）、禽网状内皮增生病病毒（REV）、禽白血病病毒（ALV）等3种病毒基因组序列,设计了3对分别与ARV、REV和ALV某段基因序列互补的引物。在建立各病毒单项RT-PCR技术的基础上,优化三重RT-PCR反应条件,建立了3种病毒的三重RT-PCR技术。结果表明,用这3对引物对同一样品中的ARV、REV、ALV核酸模板进行三重RT-PCR扩增,可同时扩增ARV的247bp,ALV的675bp,REV的467bp的特异性片段,而对其他6种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明,该三重RT-PCR技术能检出10pg的ALV、1pg的ARV和10pg的REV模板。用42份临床病料对本研究多重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为92%以上。表明建立的多重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。     

海兰商品蛋鸡白血病与马立克氏病混合感染案例分析

从临床流行病学、剖检症状、病理变化、马立克氏病、禽白血病、网状内皮组织增生症病毒特异基因的PCR检测等进行综合分析,以期对河南南阳地区某海兰蛋鸡场鸡群的疑似肿瘤疾病进行确诊。结果显示:鸡群大体正常,但零星出现死亡,死亡鸡极度消瘦,心、肝、脾、肺等脏器肿胀及个别病鸡脏器肿胀且有肿瘤结节。PCR检测结果显示:MDV阳性、ALV阳性、REV阴性,确诊鸡群感染马立克氏病病毒和禽白血病病毒。     

鸡淋巴细胞性白血病与鸡马立克病的病理组织学诊断

为了对鸡淋巴细胞性白血病、鸡马立克病的病变器官和组织学变化进行鉴别诊断,采用病理组织学诊断方法对患淋巴细胞性白血病和马立克病的病鸡病变器官进行病理组织学观察。通过试验结果可见,鸡淋巴细胞性白血病和马立克病均可在心脏、肝脏、脾脏、肾脏和法氏囊上产生肿瘤性和出血性病理变化,但肿瘤形态和组织成分有明显不同,因此可以通过病理组织学诊断方法对鸡淋巴细胞性白血病和鸡马立克病进行鉴别诊断。     

一例禽血管瘤型白血病的诊断

<正>禽白血病(Avian leucosis,AL)是由禽白血病病毒(Avian leucosisvirus,ALV)引起的家禽多种肿瘤性疾病的总称,主要以造血细胞恶性增生为特征的一类传染病,包括淋巴细胞性白血病、成红细胞性白血病、成髓细胞性白血病、骨髓细胞瘤病、血管瘤、内皮瘤、肾真性瘤、纤维肉瘤和骨化石症等。血管瘤型禽白血病是由ALV引起的肿瘤性疾病之     

鸡淋巴细胞性白血病与鸡马立克病的病理组织学诊断

为了对鸡淋巴细胞性白血病、鸡马立克病的病变器官和组织学变化进行鉴别诊断,采用病理组织学诊断方法对患淋巴细胞性白血病和马立克病的病鸡病变器官进行病理组织学观察。通过试验结果可见,鸡淋巴细胞性白血病和马立克病均可在心脏、肝脏、脾脏、肾脏和法氏囊上产生肿瘤性和出血性病理变化,但肿瘤形态和组织成分有明显不同,因此可以通过病理组织学诊断方法对鸡淋巴细胞性白血病和鸡马立克病进行鉴别诊断。     

浅谈禽白血病的检测方法

禽白血病是由禽白血病病毒(ALV)引起的一种传染性肿瘤病.ALV在鸡群中的存在分为A、B、C、D、J、E等多种亚型.近10年所报道的分离的ALV毒株大部分为J亚群,少部分为A、B亚群.目前国内外已经建立了很多ALV的检测方法,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光试验(IFA)、聚合酶链式反应(PCR)、原位杂交(ISH)、荧光定量RT-PCR(QRT-PCR)等.本文就目前国内外禽白血病的检测中较常用的一些方法做一简述.     

从一病例谈对J——亚群白血病的认识

禽白血病是病毒引起流行较广的肿瘤性疾病,感染率很高,临诊上表现形式多样,如淋巴细胞性白血病、成红细胞性的病等,鸡的经典白血病主要是由外源性的A和B亚群引起,少数由C和D亚群引起,E亚群为内源性病毒,由于内源性白血病病毒基因早在家鸡的祖代已整合到鸡的染色体上,并能随种系繁衍,因此内源性白血病病毒具有很弱的或无致瘤特性.所以,根除白血病,通常是指清除外源性白血病病毒感染.多年以来,利用剔除ALV感染种鸡以切断垂直传播的方法,到了八十年代中期,在世界发达国家的种鸡群中已基本消灭了这类经典的外源性ALV的感染.如海兰祖代鸡群(见海兰蛋鸡饲养手册).     

祖代肉用鸡群禽白血病病毒感染的实验室诊断

对疑似J亚群禽白血病病毒（ALV－J）感染的祖代肉用型种鸡群进行病原微生物学的实验室诊断。组织病理学检测结果表明，病鸡脾、肾病理组织切片上有大量增生的髓细胞，呈典型的髓细胞瘤病理显微变化。肾组织触片和组织切片用抗ALV－J特异性单克隆抗体G2进行间接免疫荧光反应（IFA）检测，结果呈阳性。病料接种鸡胚成纤维细胞（CEF）盲传3代后，分离到1株病毒（JS－Nt），经鉴定为ALV－J。这些结果证明该鸡群存在ALV－J的感染。     

禽白血病病毒研究进展

禽白血病是由禽白血病病毒 ( avian lekosis virus,ALV)引起的以造血细胞恶性增生为主的一类传染病 ,包括淋巴细胞性白血病 ,成红细胞性白血病 ,成髓细胞白血病和髓细胞样白血病 ,对养禽业危害最大的是禽淋巴细胞性白血病 ( lymphoid leukosis,LL)。自 1 90 8年首次报道并分离到 ALV以来 ,世界上许多国家都有该病的流行和发生 ,其垂直和水平传播引起临床和亚临床感染而造成较大的经济损失 [1 ,2 ]。近年来 ,随着分子生物学技术的广泛应用 ,在该病毒的囊膜基因、病毒受体、致病机理、内源性白血病病毒和培育 ALV抗性鸡等方面取得了不少…     

禽白血病抗原快速检测试纸条的研制及初步应用

禽白血病给养鸡业带来极大损失,目前检测该病病原的方法主要有ELISA、PCR及RT-PCR、原位杂交(ISH)、间接免疫荧光(IFA)等。本研究应用2株抗禽白血病病毒(ALV)p27蛋白特异性单克隆抗体5D3和4F12研制了ALV快速检测试纸条。结果证明该试纸条具有良好的特异性,与H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒、马立克氏病病毒、小鹅瘟病毒、鸡贫血病病毒没有交叉反应;采用p27表达蛋白检测试纸条灵敏性,检测下限达到70ng/mL;应用该试纸条检测71份临床样品,与商业ELISA试剂盒检测结果比较,二者符合率达到93%。该试纸条的研制,为基层快速检测ALV提供了条件。     

一例鹅感染禽白血病的诊断

<正>禽白血病是由禽白血病病毒(ALV)引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称。ALV为反录病毒科甲型反录病毒属的禽C型反录病毒群,病毒的天然宿主主要是鸡[1],火鸡、鹌鹑、鸽和鹧鸪也可感染,主要侵害造血系统,导致禽类造血组织中某些细胞大量增生,表现为淋巴细胞性白血病、成红细胞性白血病、成髓细胞性白血病、上皮肿瘤、结缔组织瘤、内皮肿瘤等。鹅感染ALV的情况也有报道[2]。1 发病情况某养鹅场饲养雏鹅3 000多只,2018年8月中旬4周龄     

实时荧光定量RT-PCR检测禽白血病病毒方法的建立与应用

建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法检测禽白血病病毒(ALV)。选取ALV病毒的LTR序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有ALV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度。阳性标准品在3.0×102~3.0×107个拷贝共6个数量级的范围内,定量PCR反应有"S"型扩增曲线,检测灵敏度最低为30个拷贝。根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线。该方法具有特异性,对新城疫病毒、禽流感病毒、传染性支气管炎病毒、传染性囊病病毒、鸡传染性贫血病毒和马立克病病毒核酸都没有扩增反应。实时定量PCR检测ALV的方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在禽病的快速检测上具有重要意义。     

禽白血病的防控

<正>禽白血病(Avian Leukosis)是由禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus,ALV)引起的禽类多种传染性肿瘤性疾病的统称,这些慢性传染性肿瘤病包括淋巴细胞白血病、成红细胞白血病、成髓细胞白血病、骨髓细胞瘤病、肾母细胞瘤、骨硬化病、血管瘤、纤维肉瘤等众多组织起源的良性和恶性肿瘤。禽白血病不感染人,我国将其列为二类动物疫病。到目前为止,该病已在全国呈泛滥之势,其发病范围广、宿主不断扩大、病情严重程