火焰南天竹组培快繁体系的探讨

以观赏灌木火焰南天竹幼嫩茎尖为研究对象,研究不同灭菌时间对成活率及污染率的影响,以及不同培养基和激素浓度对不定芽诱导、增殖和生根的影响。试验表明,在无菌环境下,用70%酒精消毒5 s,再用10%NaClO灭菌12 min的灭菌效果最佳;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1,最高诱导率为87%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IAA 0.1 mg·L^-1L +AC 1.0 g·L^-1,增殖系数最高可达5.29;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1 +AC 4.0 mg·L^-1,生根率最高可达98%。将火焰南天竹组培苗移入泥炭土∶蛭石∶珍珠岩为8∶1∶1的混合基质中成活率较高,最高可达94%,且组培苗长势良好。     

优异党参种质“凤党”离体繁殖技术

以“凤党”优株种子离体培养的无菌苗茎段为外植体，研究植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及再分化的影响。结果表明，愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA，芽分化的最适培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-16-BA，生根的最适培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^-1 NAA+0.2 mg·L^-1 IBA，愈伤组织诱导率、芽分化率及生根率分别可达91%、100%和97%。建立的离体再生植株快速繁殖体系，为“凤党”优异种质推广利用和工厂化育苗奠定了基础。     

蝴蝶兰组培快繁技术研究

通过组织培养的方法诱导蝴蝶兰花梗上的腋芽萌发,可以得到无菌的蝴蝶兰不定芽。以不定芽上的幼叶为外植体,建立蝴蝶兰的无菌培养体系。结果表明:诱导腋芽萌发的培养基为MS+5 mg/L 6-BA;利用幼叶进行原球茎诱导的最佳培养基为MS+5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.1 g/L活性炭(AC)+150 mL/L椰汁(CM);原球茎增殖的培养基为3 g/L花宝一号(HyponexNo.1)+5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA+150 mL/L CM;生根培养基为3 g/L Hyponex No.1+0.1 mg/L6-BA+1 mg/L NAA+0.5 g/L AC+100 mL/L土豆汁。     

楸树优良品种‘朝霞’增殖及生根培养的研究

以‘朝霞’楸带腋芽的茎段为试验材料,通过正交试验设计,研究基本培养基、植物生长调节剂成分及含量对不定芽增殖及生根的影响。结果表明,继代培养阶段,基本培养基类型是影响增殖系数的主要因素,不定芽增殖最佳培养基为:DKW+6-BA1.6mg·L^-1+NAA0.01mg·L^-1,增殖系数高达3.1。生根培养阶段,经极差分析和方差分析得知生根率最高的培养基为WPM+NAA0.1mg·L^-1,生根率高达97%,添加物活性炭对根数的增加有抑制作用,‘朝霞’楸最适生根培养基为WPM+NAA0.1mg·L^-1+活性炭0g·L^-1。本研究旨在筛选楸树优良品种‘朝霞’楸不定芽增殖和生根培养基,为建立‘朝霞’楸再生体系提供技术支持。     

樱花组培快繁体系建立及优化的研究

通过研究不同灭菌时间对3种樱花外植体成活率的影响、不同6-BA和NAA浓度对樱花芽诱导和增殖的影响、IBA和活性炭对樱花生根的影响,以及不同移栽基质对樱花组培苗成活率的影响,建立樱花组培快繁体系。结果表明,3种樱花外植体用10% NaClO表面消毒10 min、以MS为基本培养基、诱导和增殖培养添加6-BA 1.0 mg·L^-1和NAA 0.2 mg·L^-1为最优外源激素浓度;增殖培养基中添加活性炭1 g·L^-1,可显著提高樱花增殖系数;生根培养基用1/2MS+IBA 1.0 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1+3%蔗糖+0.7%琼脂(pH值5.8),生根率最高达到93%,在移栽基质(泥炭土:蛭石:珍珠岩3:1:1)中樱花组培苗成活率最高可达84%。     

‘凤丹’牡丹组织培养研究

以‘凤丹’牡丹芽为材料,对其外植体消毒、褐化防治、组培苗扩繁和生根技术进行研究。结果表明:用75% 酒精消毒30 s,0.1% 升汞消毒8 min消毒效果最佳,外植体的污染率和成活率分别为32.31%和64.32%;其最适初代诱导和继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1和MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PIC (毒莠定,Picloram) 1.0 mg·L^-1,增殖系数为4.84;生根培养基为1/2MS+CaCl₂ 220 mg·L^-1+IBA 3.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,生根率为74.30%;低温结合3 mg·L^-1硝酸银培养可使褐化率降至29.15%。     

2苹果品种叶片胚状体再生体系的建立

以苹果“富士”和“鲁加6号”为材料,建立叶片胚状体再生体系。结果表明:先经胚性细胞诱导培养基MS+BA1.0 mg·L^-1+NAA5.0 mg·L^-1+TDZ0.5 mg·L^-1诱导胚性细胞,再置于胚胎发育培养基MS+BA1.0 mg·L^-1+NAA0.1 mg·L^-1上进行暗培养,最佳时间为10 d,2品种叶片再生率分别为96.7%和100%。经胚状体不同时期形态学组织学观察,显示胚状体发育时期经历原胚、球形胚、心形胚、子叶形胚、鱼雷形胚、成熟胚等阶段。“鲁加六号”苹果最佳生根培养基为1/2MS+IAA0.1 mg·L^-1+IBA0.1 mg·L^-1,生根率达86.7%。     

2001杨组培再生体系建立

以2001杨的春季新发嫩枝茎段、叶柄、叶片为外植体,尝试在MS和WPM基本培养基中添加多种组合激素,探索不定芽诱导、丛生芽伸长和生根最优条件,建立组织培养与植株再生系统。结果表明:MS培养基的诱导分化效果比WPM好;在MS+TDZ 0.025 mg·L^-1+6-BA 0.05 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1的培养基上,不定芽诱导分化效果最好,茎段和叶柄诱导分化率可达90%,叶片诱导分化率 60%;丛生芽转入MS+KT 0.25 mg·L^-1+GA3 1.00 mg·L^-1+果糖30.00 g·L^-1的培养基中茎伸长效果最佳;每个叶片外植体诱导茎伸长的芽平均达6.4个,芽数量最多;不定芽在1/2MS+IAA 0.02 mg·L^-1+IBA 0.02 mg·L^-1+AC 3.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1培养基上形成的根条数多,生根率达90%。     

侧柏茎段培养快速繁殖技术研究和黄帝手植柏克隆

以3个不同年龄段的侧柏茎段为外植体,探讨基本培养基、植物生长调节剂、大量元素对侧柏茎段培养快繁的影响,研究侧柏茎段培养快速繁殖技术,并分析年龄对培养各阶段的影响,进而建立了黄帝手植柏克隆繁殖技术体系。结果表明,在试验范围内,各年龄段的侧柏茎段消毒效果均随消毒时间延长而提升,黄帝手植柏最佳升汞消毒时间为8 min;各年龄段的侧柏外植体在不同培养基上启动率均大于90%,选择MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.1 mg·L^-1 6-BA作为黄帝手植柏适宜启动培养基,启动率可达100%;50 a侧柏适宜在较高激素浓度的增殖培养基上培养,800、3 000 a侧柏适宜在中等激素水平的培养基上培养,黄帝手植柏适宜增殖培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.2 mg·L^-1 6-BA,30 d增殖系数为2.52;随着侧柏年龄增大,茎段生根更加困难,800、3 000 a侧柏在培养基MS+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA上有较好的生根效果,黄帝手植柏适宜生根培养基为MS+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA。本研究初步建立了黄帝手植柏茎段培养技术体系,为黄帝手植柏的克隆和种质资源保存奠定了技术基础。     

重瓣空心泡组织培养快繁体系的建立

重瓣空心泡(Rubus rosifolius var.coronarius)为悬钩子属植物,自然状态下以根蘖繁殖,繁殖周期长。本研究以重瓣空心泡的带节茎段为外植体建立无菌培养体系,并探究不同细胞分裂素种类和浓度对其诱导和增殖的影响,以及基本培养基和生长素组合在生根诱导中的作用和褐化的控制,以优化组织培养快繁体系。结果表明,重瓣空心泡茎段可被有效诱导腋芽再生,6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)促进增殖的效果优于激动素(KT),但浓度过高会引起玻璃化。因此,其最佳诱导和增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,增殖系数可达9.67,且生长健壮。减少培养基营养可促进生根,添加活性炭(AC)可有效减轻植株基部褐化,最佳生根培养基为1/4 MS+IBA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+活性炭1.0 g·L^-1。重瓣空心泡组织培养快繁体系的建立可缩短繁育周期,保持优良性状,促进其产业发展。     

山桐子离体培养植株再生

以种子和叶片为外植体,研究了离体条件下外植体类型及植物生长调节剂对山桐子器官发生和植株再生的影响。结果表明:种子为诱导愈伤组织的适宜外植体; 在MS+1.0 mg·L^-16-BA +1.0 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上,愈伤诱导率达96.8%; 继代培养在MS+0.08 mg·L^-1 TDZ + 1.5 mg·L^-16-BA +0.05 mg·L^-1 NAA 培养基上能成功的诱导芽的分化,诱导率达48.3%以上; 芽增殖的适宜培养基为1/2MS +0.03 mg·L^-1 TDZ +2.0 mg·L^-16-BA +0.1 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂,增殖系数为4.83; 在1/2MS+ 0.5 mg·L^-1 IBA +2%蔗糖+0.6%琼脂培养基上,无根苗生根率达88%。     

梵净山石斛无菌播种及快繁技术

以梵净山石斛成熟的蒴果为外植体,研究不同培养基、激素浓度处理对梵净山石斛种子萌发、原球茎增殖、不定芽分化与生根的影响。结果表明,梵净山石斛无菌播种最佳的培养基为KN+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+10%CM+AC 1.0 g·L^-1,萌发率达到95.5%;原球茎增殖最优培养基为B5+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+AC 0.5 g·L^-1;筛选出不定芽分化最适培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1,不定芽增殖最适培养基为1/2MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1;小苗生根适宜的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1。     

白花悬钩子的叶片组培快繁与植株再生研究

为获得一套完整高效的白花悬钩子(Rubus leucanthus Hance)组培快繁技术体系,以叶片为外植体,系统研究了外植体不同灭菌时间、不同植物激素配比及浓度对愈伤组织诱导及丛生芽分化、增殖和生根的影响,并进行了组培苗移栽。结果表明：最佳的外植体灭菌方式为2%NaClO溶液2 min+0.1%HgCl₂溶液5 min,实现了污染率最低(23.33%)、存活率最高(73.33%);最佳的丛生芽分化诱导培养基为MS+3.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 KT+0.5 mg·L^-1 NAA,愈伤组织诱导率为100%,芽诱导率为93.33%;6-BA与KT对增殖系数有显著影响,最佳的继代增殖培养基为MS+2.5 mg·L^-1 6-BA+1.5 mg·L^-1 KT+0.4 mg·L^-1 NAA,培养20 d的增殖系数达7.84;最适的生根培养基为1/2MS+1.0 mg·L^-1 IBA,生根率为10...     

唐古特瑞香愈伤组织培养与再生体系建立

以唐古特瑞香幼嫩叶片为材料,进行愈伤组织诱导与植株再生试验,以期建立唐古特瑞香再生体系,为其无性系的快速繁殖奠定基础。将幼嫩叶片进行表面灭菌后接种于初代培养基中,初代培养时,存在褐化现象,愈伤诱导前需进行除褐培养,除褐后的外植体经愈伤诱导、不定芽分化、增殖培养、生根培养和幼苗出瓶移栽的试验过程,筛选出了最佳培养方案。除褐培养基以MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+PVP 200 mg·L^-1效果较好,在此培养基上连续转移3次后褐变消失。愈伤诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L^-1+2,4-D 2.0 mgL^-1,诱导率95.5%;芽苗分化培养基为MS+ZT 2.0 mg·L^-1+TDZ 0.1 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,分化率93.2%,平均芽数为8.66条;不定芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+IBA 0.3 mg·L^-1,增殖倍数为12.21,平均苗高4.81 cm;生根培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg·L^-1,生根数平均为3.83条,生根率为88.72%以上;组培苗移栽于珍珠岩中生长良好,成活率达90%以上。本研究初步建立了唐古特瑞香再生体系,为其无性繁殖奠定了理论基础。     

手参愈伤组织培养及植株再生

以手参为对象,研究了外植体和植物生长调节剂对愈伤组织诱导,以及植物生长调节剂对不定芽分化及生根的影响,初步建立了其组织培养再生体系。结果表明,以茎尖外植体愈伤组织诱导率最高,在MS附加0.5 mg·L^-1 NAA的培养基上,诱导率可达60%;愈伤组织在MS附加0.1 mg·L^-1 NAA培养基上增殖效果较好;不定芽分化诱导以MS附加0.1 mg·L^-1 TDZ最高,可达53.3%,在MS附加0.1 mg·L^-1 TDZ和0.1 mg·L^-1 NAA的培养基更适合芽的增殖和生长;生根诱导以1/2MS培养基附加0.5 mg·L^-1的NAA的诱导率最高,可达30.6%。     

滇杨组织培养再生及遗传转化体系建立

【目的】建立高效的滇杨Populus yunnanensis离体叶片再生及遗传转化体系,有助于滇杨基因工程育种研究。【方法】以滇杨叶片为外植体,研究不同植物生长调节剂组合对叶片愈伤组织和不定芽诱导及生根的影响,从而获得滇杨再生组培苗;进一步以农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导法探讨菌液吸光度、侵染时间和共培养时间等对滇杨遗传转化效率的影响。【结果】滇杨愈伤组织诱导的最适培养基为1/2 MS+0.005 mg·L^-1噻苯隆(TDZ)+0.010 mg·L^-1萘乙酸(NAA),诱导率达91.7%;不定芽诱导的最佳培养基为1/2 MS+0.002 mg·L^-1 TDZ+0.010 mg·L^-1 NAA,诱导率为75.0%;生根最适培养基为1/2 MS+0.010 mg·L^-1 NAA+0.100 mg·L^-1吲哚乙酸(IBA),生根率高达96.7%,平均生根数为2.57条。利用pBI121-GUS载体转化滇杨,最适转化菌液吸光度D(60...     

激素和有机质对铁皮石斛×重唇石斛F1代增殖的影响

[目的]探讨激素(6-BA、NAA)和有机质(香蕉泥)对铁皮石斛×重唇石斛F₁代增殖的影响,为其F₁代增殖和再生体系的建立提供参考。[方法]以铁皮石斛×重唇石斛F₁代原球茎和小苗为外植体,采用三因素三水平正交试验探讨激素(6-BA、NAA)和有机质(香蕉泥)对原球茎和小苗增殖的影响。[结果](1)F₁代原球茎增殖的适宜培养基为：1/2MS+2 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖+1 g·L^-1 AC+5.6 g·L^-1琼脂粉。培养30 d后原球茎的生长速度为55.49,3种因素的主次关系为：6-BA>NAA>香蕉泥。(2)F₁代小苗增殖的适宜培养基为：1/2MS+1 mg·L^-1 6-BA+0.6 mg·L^-1 NAA+100 g·L^-1香蕉泥+30 g...     

匍茎百合再生体系的建立及多倍体诱导

为了保护匍茎百合(Lilium lankongense)的野生种质资源并提供简单有效的快繁方法,以匍茎百合为植物材料,建立以鳞茎为外植体的高效再生体系,并利用秋水仙素处理种子,诱导出多倍体植株。通过调节培养基中的植物生长激素和蔗糖的质量浓度,确定了匍茎百合不定芽诱导、小鳞茎膨大和生根的最佳培养基。结果表明：最佳不定芽诱导培养基为MS培养基+6-苄氨基嘌呤(6-BA)1.0 mg·L^-1+萘乙酸(NAA)0.7 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1,不定芽诱导系数为2.33,显著高于其他处理组合;最佳小鳞茎膨大培养基为MS培养基+蔗糖60 g·L^-1,可显著提高小鳞茎的直径和鲜质量;最佳生根培养基为0.5倍浓度的MS培养基+萘乙酸(NAA)0.4 mg·L^-1+吲哚丁酸(IBA)0.1 mg·L^-1,可显著增加根长和根数。用质量分数为0.03%的秋水仙素浸泡18 h,种子的成活率最高,为93.15%,再通过形态学、生理学和流式细胞仪鉴定,最终鉴定出4个四倍体植...     

白果蒲桃组织培养技术

[目的]优化白果蒲桃种子无菌播种及组织培养的最佳条件。[方法]应用正交设计及多重比较等方法,开展白果蒲桃无菌体系建立、种子萌发诱导、不定芽增殖及生根培养等研究。[结果]以白果蒲桃种子为外植体,0.1%Hg Cl2的最佳消毒时间为30 min,最佳萌发培养基为:MS+0.2 g·L-1活性炭+0.4 g·L-1蛋白胨+30 g·L-1蔗糖+5.0 g·L-1琼脂,萌发天数为32.4 d,萌发率达94.5%,苗生长健壮;最佳增殖培养基为:1/2MS+0.8 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA+30 g·L-1蔗糖+5.0 g·L-1琼脂;不定芽最佳生根诱导培养基为:1/2MS+0.4 mg·L-1IBA+0.2 mg·L-1NAA+0.2 g·L-1活性炭+15 g·L-1蔗糖+7.0 g·L-1卡拉胶,平均根数为3.5根,平均生根率达70.9%。[结论]以白果蒲桃种子为外植体,可建立白果蒲桃组织培养技术体系,为其优良品种的选育提供参考。     

虾脊兰原球茎诱导及植株高效再生体系研究

以野生虾脊兰(Calanthe discolor)未成熟蒴果为材料,MS为基本培养基,探讨不同光照度、热激和不同培养基配方对虾脊兰种子萌发、原球茎发生及植株再生的影响。结果表明,未完全成熟的种子在1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯+1.0 g/L活性炭培养基中萌芽率最佳;在1 500 lx光照度条件下培养时种子萌发速率较快。通过黑暗条件下35℃热激5 d有利于已萌动种子脱分化形成原球茎。使用MS+3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖培养基诱导原球茎形成胚性愈伤组织效果最好。MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯培养基分化形成植株分化率最高,1/2MS+0.2 mg/L IBA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+0.1 g/L活性炭培养基则为最佳生根培养基,生根率100%,植株根系发达,长势健壮。该研究建立了虾脊兰无菌快繁体系,为保护野生虾脊兰资源和种苗人工繁育提供了有效技术途径,也为其遗传转化研究奠定基础。