金黄色葡萄球菌及其肠毒素等指标在发酵牛肉加工过程中变化规律的研究

作者对自然状态发酵牛肉、接种金黄色葡萄球菌的发酵牛肉和接种发酵剂(植物乳杆菌、戊糖片球菌)与金黄色葡萄球菌的发酵牛肉中金黄色葡萄球菌及其肠毒素等指标在加工过程中的变化规律做了研究。研究结果表明,自然发酵牛肉中没有金黄色葡萄球菌及其肠毒素;接种发酵剂和金黄色葡萄球菌的发酵牛肉中金黄色葡萄球菌先是上升然后快速下降,且金黄色葡萄球菌肠毒素为阴性;接种金黄色葡萄球菌的发酵牛肉中金黄色葡萄球菌及其肠毒素都显著高于接种发酵剂的发酵牛肉(P＜0.05)。由试验结果可知,发酵剂植物乳杆菌和戊糖片球菌对金黄色葡萄球菌有很强的抑制作用。     

金银花提取物对常见致病菌的体内外抑菌活性测定

为了观察金银花提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门杆菌等致病菌的抑菌活性,试验采用试管二倍稀释法测定金银花提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门杆菌的体外抑菌活性;采用相同浓度致病菌灌注小鼠,然后再用金银花提取物灌注治疗,测定小鼠十二指肠、空肠、回肠和盲肠中肠道菌群数量。结果表明:无论是体外还是体内,金银花提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门杆菌均具有抑制作用,且对金黄色葡萄球菌和沙门杆菌的抑制作用最强,对大肠杆菌的抑制作用最弱;灌注金银花提取物后,可显著降低各致病菌致病后小鼠的死亡率。说明金银花提取物对常见的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门杆菌等致病菌具有较明显的体内外抑菌作用。     

黄芩苷对猪致病菌的体外抗菌试验

采用微量稀释法分别测定黄芩苷对链球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、巴氏杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)值。结果显示,黄芩苷对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC为16μg/m L,对链球菌的MIC为64μg/m L,对沙门氏菌和巴氏杆菌无明显抑菌性。说明黄芩苷对猪大肠杆菌、金黄色葡萄球菌具有抗菌活性,对链球菌的抑菌性较差,对沙门氏菌和巴氏杆菌无明显抑菌性。     

肉鸡发生的梭状芽胞杆菌病

浮肿性皮炎(笼养病)的病原菌,一般认为有金黄色葡萄球菌或腐败梭状芽胞杆菌,或腐败梭状芽胞杆菌与金黄色葡萄球菌的混合型。在日本、川岛、铃木等已报道了由腐败梭状芽胞杆菌所引起的浮肿性皮炎。     

重组溶葡萄球菌酶粉的抑杀菌效果试验

在实验室条件下,对金黄色葡萄球菌、链球菌(无乳链球菌和停乳链球菌)、化脓隐秘杆菌用不同规格的重组溶葡萄球菌酶粉以常规使用剂量进行抑杀菌实验.结果表明:重组溶葡萄球菌酶粉在常规药物剂量下,对金黄色葡萄球菌具有良好的抑杀菌效果,对链球菌、化脓隐秘杆菌有一定的抑杀效果.     

不同产源艾纳香油抗菌活性筛选及其对金黄色葡萄球菌抗菌作用的研究

旨在筛选抗菌效果好的艾纳香油,寻找其抗菌活性物质,分析其对金黄色葡萄球菌抗菌作用.通过对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞杆菌、无乳链球菌、白色念珠菌体外抗菌试验筛选不同产源(A1?A5)和自制的艾纳香油(B1?B9、T),采用GC-MS分析主要化学成分,并检测其部分化合物对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌的最小抑菌浓...     

中药复方宫炎净注射液的体外抑菌试验

为了研究中药复方宫炎净注射液对奶牛子宫内膜炎的抗炎治疗作用,试验选用针对导致奶牛子宫内膜炎的主要病原菌(大肠杆菌、沙门杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌),采用琼脂平板扩散法研究中药复方宫炎净注射液的抑菌效果。结果表明:中药复方宫炎净注射液对大肠杆菌、沙门杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌高度敏感,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门杆菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.160 9 mg/mL,而对链球菌的MIC为0.321 8 mg/mL。说明中药复方宫炎净注射液具有较强的抑菌作用,可用于临床治疗奶牛子宫内膜炎。     

中药复方宫炎净注射液的体外抑菌试验

为了研究中药复方宫炎净注射液对奶牛子宫内膜炎的抗炎治疗作用,试验选用针对导致奶牛子宫内膜炎的主要病原菌（大肠杆菌、沙门杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌）,采用琼脂平板扩散法研究中药复方宫炎净注射液的抑菌效果。结果表明：中药复方宫炎净注射液对大肠杆菌、沙门杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌高度敏感,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门杆菌的最小抑菌浓度（MIC）为0.160 9 mg/mL,而对链球菌的MIC为0.321 8 mg/mL。说明中药复方宫炎净注射液具有较强的抑菌作用,可用于临床治疗奶牛子宫内膜炎。     

免疫层析法快速检测金黄色葡萄球菌的研究

为建立一种快速检测金黄色葡萄球菌的新方法,本研究采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,用胶体金标记鼠抗金黄色葡萄球菌凝集因子A(C1fA)重组蛋白特异性抗体,从抗金黄色葡萄球茵IgG包被于硝酸纤维素膜,制成免疫层析快速检测试纸条.该方法可以在10min内完成对含金黄色葡萄球菌奶样的检测;敏感度为1×104 cfu/mL以上,与PCR方法进行对比检测,相差一个数量级;与大肠杆菌、链球菌、李氏杆菌、巴氏杆茵及蜡样芽孢杆菌均无交叉;稳定性和重复性较好.该试纸条检测金黄色葡萄球菌临床样品表明其具有特异性好,灵敏度较高的特点.     

不同花期的金银花体外抑菌效果比较

研究不同花期金银花体外抑菌效果。采用水提工艺提取金银花中的药物有效成分,过滤减压浓缩制成提取液,用药敏试纸纸片测定其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌的抑菌效果。结果表明,二白期的金银花抑菌效果最好,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌均有抑菌作用。     

唾液乳杆菌的生长特性及抑菌作用

为了探讨唾液乳杆菌的生长特性及抑菌作用,测定2株唾液乳杆菌的生长曲线,并选用口腔变形链球菌、牙龈卟啉单胞菌及金黄色葡萄球菌为指示菌,采用牛津杯法进行体外抑菌实验.结果表明:2株唾液乳杆菌分别在接种2h和4h进入对数生长期,8h进入对数生长末期,14h和16h进入稳定期;2株唾液乳杆菌菌液及代谢产物对口腔变形链球菌、牙龈卟啉单胞菌及金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,对口腔变形链球菌及牙龈卟啉单胞菌的抑菌作用强于金黄色葡萄球菌;2株唾液乳杆菌菌体及调整pH值为7.0的代谢产物没有抑菌作用;2株唾液乳杆菌的抑菌能力主要来自菌体的代谢产物,代谢产物中起抑菌作用的成分为酸或酸依赖性物质.     

抗菌肽Gal-4体外抑菌活性的初步鉴定

为了鉴定抗菌肽Gal-4的体外抑菌活性,试验采用打孔法和细菌生长曲线法鉴定抗菌肽Gal-4对金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌的抑菌活性。结果表明:抗菌肽Gal-4对两种受试菌均表现出良好抑菌活性,两种受试菌的对照孔均未出现抑菌圈,而试验孔出现了较大的抑菌圈,其对金黄色葡萄球菌的抑菌活性要强于多杀性巴氏杆菌,随着抗菌肽Gal-4浓度的增大其抑菌活性也逐渐增强。说明抗菌肽(Gal-4)对金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌均有抑制效果。     

正交试验法优化窄叶鲜卑花叶片多糖提取工艺及抑菌活性研究

采用水提醇沉法提取窄叶鲜卑化叶片多糖,采用单因素试验和正交试验对窄叶鲜卑化叶片多糖的提取条件进行优化,并考察了该多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑制作用。结果表明,窄叶鲜卑花叶片多糖提取的最佳条件为料液比1∶10(g/m L)、水浴温度65℃、浸提时间2 h、微波功率640 W;窄叶鲜卑花叶多糖对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用,对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑制浓度为12.50 mg/m L,对大肠杆菌的最小抑制浓度为6.25 mg/m L。     

饲用地衣芽孢杆菌抗逆性与益生性的体外评价

为了探讨地衣芽孢杆菌的抗逆性与益生性,研究通过5个试验评定地衣芽孢杆菌的耐高温、耐酸性、耐胆盐、抑菌性和黏附性,于85℃水浴分别处理地衣芽孢杆菌2.5 min、5 min、7.5 min模拟制粒条件;利用pH值分别为2,3,4的人工胃液模拟胃液环境;用0.3%的胆盐模拟肠液环境;抑菌试验测定地衣芽孢杆菌发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制能力;以蛋鸡肠道上皮细胞为模型测定地衣芽孢杆菌的黏附能力。结果表明:85℃处理地衣芽孢杆菌2.5 min后活菌数最高,与对照组相比提高了2.25%(P>0.05);用pH值为2,3,4的胃液分别处理,与对照组相比活菌数分别提高0.77%(P>0.05)、1.54%(P>0.05)、1.34%(P>0.05);地衣芽孢杆菌发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌环直径分别为0和16.16 mm;在黏附性试验中,每100个蛋鸡肠道黏膜上皮细胞上平均可以黏附27个地衣芽孢杆菌。说明制粒过程、人工胃液、人工肠液不影响地衣芽孢杆菌的活菌数,地衣芽孢杆菌对金黄色葡萄球菌有显著抑制作用,使金黄色葡萄球菌基本不能在蛋鸡消化道内定植。     

乳铁蛋白抑制常见口腔及肠道致病菌的体外活性研究

试验旨在研究乳铁蛋白对常见口腔/肠道致病菌的抑制和细菌生物膜清除作用。选择重组人乳铁蛋白(rhLF)、牛乳铁蛋白(bLF)和蛋清溶菌酶(阳性对照组),对金黄色葡萄球菌等7种菌进行抑菌、细菌生物膜形成和清除等试验。结果表明:(1)最低抑菌浓度试验表明,rhLF、bLF对金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、沙门氏菌、牙龈卟啉单胞菌等具有较强的抑制作用;(2)抑菌圈试验表明,rhLF对金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌的抑制效果优于bLF,而对沙门氏菌、牙龈卟啉单胞菌的抑制效果差于bLF(P0.05);(3)生物膜形成抑制试验表明,不同浓度的rhLF对金黄色葡萄球菌的抑制作用均显著高于bLF(P0.05),浓度为5 mg/mL的rhLF抑制效果达到99%;(4)生物膜清除试验表明,不同浓度的rhLF对金黄色葡萄球菌的生物膜清除效果均显著高于bLF(P0.05),浓度为5 mg/mL的rhLF抑制效果达到56%。研究结果表明,乳铁蛋白对常见口腔/肠道致病菌,尤其对金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、沙门氏菌、牙龈卟啉单胞菌等,具有一定的抑制作用;同时对细菌生物膜形成具有抑制和清除作用。     

单味中药对3种细菌R质粒消除作用的研究

为了研究不同单味中药对大肠杆菌、沙门杆菌及金黄色葡萄球菌3种临床菌株R质粒的消除作用,试验以8种单味中药水煎剂为质粒消除剂,以临床分离的多重耐药大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及沙门杆菌为靶细菌,采用肉汤二倍稀释法和影印培养法,观察不同单味中药对大肠杆菌、沙门杆菌及金黄色葡萄球菌3种临床菌株R质粒的消除作用。结果表明:各单味中药对3种菌株R质粒有不同程度的消除作用(消除率为0.4%~5.0%),其中以黄连的平均消除率最高,为2.9%。耐药菌株经不同消除剂作用后表现为1~3条质粒条带消失。     

四种“爱丽丝”牌消毒剂对五种细菌的杀菌效果比较

采用定量悬浮试验法,选择大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌和无毒炭疽芽胞杆菌等菌株,对四种未知成份（５％浓度）的消毒剂进行了杀菌效果比较。结果表明,Ⅰ号消毒剂对各菌的杀灭效果均很差,Ⅱ号对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的杀灭效果最好,Ⅲ号对多杀性巴氏杆菌的杀灭效果最好,Ⅳ号对大肠杆菌和炭疽杆菌的杀菌效果最好。比较而言,Ⅱ号消毒剂的杀菌效果最好,Ⅲ号、Ⅳ号次之。     

葡萄叶总黄酮的提取及体外抑菌活性研究

为测定葡萄叶总黄酮体外抑菌活性,采用索氏提取器回流法提取葡萄叶总黄酮;采用K-B琼脂扩散法分别用大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌、枯草芽胞杆菌做抑菌试验;以抑菌效果最明显的金黄色葡萄球菌为指示菌,以总黄酮的提取率及抑菌圈直径为指标,单因素试验筛选葡萄叶总黄酮最佳提取工艺,乙醇浓度750mL/L、料液比1∶40、提取温度70℃、提取时间3.5h,在此提取条件下测得葡萄叶中总黄酮的平均提取率为7.16%;葡萄叶中总黄酮对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌具有较强的抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌抑菌活性最大,而对枯草芽胞杆菌的抑菌作用不太明显。     

盐穗木活性成分的提取及抑菌效果研究

为了解盐穗木的药用性能,试验将盐穗木全草经乙醇提取得到总浸膏,结合药敏试验对其进行效价测定。结果表明:盐穗木总浸膏对大肠埃希杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有一定的抑菌活性,对酵母菌、链球菌、普通变形杆菌无抑菌作用;不同季节盐穗木总浸膏的抑菌活性无差异。进一步提取得到有机酸、生物碱、酚类3种物质进行试验,结果有机酸与酚类抑菌作用不明显,生物碱有一定的抑菌作用。利用不同有机溶剂对生物碱进行分离,结果乙酸乙酯相抑菌活性明显,其他分离相抑菌效果均不明显。乙酸乙酯对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度为7.8 mg/mL,对大肠埃希杆菌的最小抑菌浓度为15.6 mg/mL。总浸膏对大肠埃希杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度为31.2 mg/mL。     

基于nuc基因的环介导等温核酸扩增可视化技术检测食源性金黄色葡萄球菌

金黄色葡萄球菌食物中毒主要是由食用被金黄色葡萄球菌及其所产生的肠毒素污染的奶、肉、蛋、糕点、剩饭等蛋白或淀粉含量丰富的食品引起,快速精准的金黄色葡萄球菌检测技术对于保障人们的健康和食品安全具有重要意义。本研究以nuc基因作为检测靶基因,建立了一种检测金黄色葡萄球菌的环介导等温核酸扩增(LAMP)技术。该方法检测金黄色葡萄球菌基因组DNA样品为阳性,而对单细胞增生李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、肠出血性大肠杆菌、空肠弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌和产气荚膜梭菌等食源性致病菌和猪链球菌、胸膜肺炎放线杆菌和多杀性巴氏杆菌等猪源细菌基因组DNA检测结果均为阴性,表明建立的LAMP方法具有较好的特异性。灵敏度的检测结果表明,LAMP的检测限可达5.6×10¹ CFU/mL,而常规PCR的检测限为5.6×10⁵ CFU/mL,即LAMP的检测灵敏度比常规PCR高出10 000倍。临床样品的检测结果表明,50份猪肉样品中有4份检出金黄色葡萄球菌。本研究为食源性金黄色葡萄球菌提供了一种快速、可视化、特异性好、灵敏度高、成本低的LAMP检测方法。