酮病复方制剂的应用效果研究

为了解酮病复方制剂(KTP)对荷斯坦奶牛酮病的治疗效果,本研究经临床和实验室检查筛选,选取广西某牛场16头荷斯坦奶牛,酮病组奶牛8头,临床健康奶牛8头作为对照组,按照治疗方案,对酮病奶牛每天灌服400mL KTP治疗,连续5天,对照牛不做处理。结果表明,在治疗前,酮病组血酮含量极显著高于对照组,血糖含量极显著低于对照组(p<0.01),酮病组的血酮含量在治疗后极显著低于治疗前,血糖含量极显著高于治疗前(p<0.01)。治疗后两组牛血糖、血酮差异不显著(p>0.05),KTP对奶牛酮病具有显著的治疗效果。     

奶牛酮病与肝功和氧化应激之间的关系

为了了解奶牛酮病与机体肝功和氧化应激之间的关系,选取产后14~21 d的奶牛48头,分成酮病组(K组,24头)和健康对照组(C组,24头),分析血液能量代谢指标、肝功指标以及抗氧化指标。结果表明:与健康对照组比较,酮病组奶牛β-羟丁酸和游离脂肪酸含量极显著升高(P0.01),而葡萄糖含量显著降低(P0.05);天门冬氨酸转移酶活性和直接胆红素含量极显著升高(P0.01),总胆红素含量显著升高(P0.05),而胆碱酯酶活性极显著降低(P0.01),总蛋白含量显著降低(P0.05);超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量显著增高(P0.05)。说明酮病组奶牛机体处于能量负平衡状态,机体肝功发生异常,遭受氧化应激。     

牛乳清酮体和抗氧化水平及其相关性研究

为了探讨荷斯坦奶牛乳汁酮体与部分氧化/抗氧化指标的水平以及它们间的相关性,本研究选择广西某奶牛场泌乳早期的荷斯坦奶牛98头,分别采集乳样,测定乳清中酮体(KET)、总抗氧化能力(TAC)与丙二醛(MDA)水平、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)与过氧化氢酶(CAT)的活力,分析各指标间的相关性。按乳酮含量分组,分析各组指标的水平及其相关性。结果:乳清KET、TAC、MDA、GPX和CAT水平分别为13.8±6.7 mg/dL、5.0±3.1 U/mL、2.2±1.8 nmol/mL、56.1±47.1 U/mL和3.0±2.0 U/mL。高乳酮(≥20 mg/dL,n=18)组奶牛各项指标(除CAT外)的水平均高于中乳酮组(乳酮:10~19.9 mg/dL,n=47)和低乳酮组(乳酮10 mg/dL,n=33)的水平,各组KET间存在极显著差异,中、低乳酮组的TAC间差异显著。相关性分析发现全部被检牛KET与TAC间(r=0.237)、TAC与MDA间(r=-0.233)存在显著相关性。高乳酮组MDA与TAC(r=-0.586)、MDA与KET(r=-0.482)存在显著负相关(p0.05),对照组(乳酮20 mg/dL)TAC与KET间存在极显著正相关(r=0.298,n=80,p0.01)。结论:高乳酮对奶牛乳清氧化/抗氧化指标间的相关性会产生明显影响,使TAC与KET相关性变弱,使MDA与TAC负相关性显著增强,使KET与MDA由显著的正相关变为显著负相关。     

酮病奶牛血清中NO含量及NOS活性变化的研究

为了深入研究酮病的发生机理,选择荷斯坦奶牛作实验动物,应用酮粉法和改良式水杨醛比色法随机检测分组,Ⅰ组为10头阳性牛、Ⅱ组为10头对照牛。应用硝酸还原酶法测定血清中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性。实验结果表明对照组奶牛血清中的NO含量及NOS活性均显著大于阳性组。由此可知,酮病可导致奶牛血清中NO含量降低、NOS活性下降。     

围产期酮病奶牛高糖现象的研究

在黑龙江省某集约化奶牛场随机选取产后14、21 d的69头奶牛,旨在调查产后酮病奶牛的高血糖现象。根据血浆β一羟丁酸(BHBA)浓度,将试验牛分成酮病组(K)和健康对照组(C)。在酮病组中将产后14d和21 d都发病的分为病程长组(LTK),否则分为病程短组(STK)。检测所有试验牛血浆中GLU,游离性脂肪酸(NEFA)、BHBA和肝功指标。结果显示,围产期高血糖现象主要集中在STK组中;LTK组BHBA极显著高于STK组和C组。LTK组和STK组NEFA极显著高于C组,而LTK组与STK组之间差异不显著。LTK组GIU显著低于C组和STK组,而STK组与C组之间无显著差异。结论是肝功正常的酮病奶牛病程短,血糖维持正常,具有高糖现象;反之,肝功异常的酮病奶牛病程长,血糖水平低于正常。因此,患病奶牛的病程长短与奶牛血糖的调节能力及肝脏的功能状况密切相关。     

酮病奶牛血清中NO含量及NOS活性变化的研究

为了深入研究酮病的发生机理，选择荷斯坦奶牛作实验动物，应用酮粉法和改良式水杨醛比色法随机检测分组，Ⅰ组为10头阳性牛、Ⅱ组为10头对照牛。应用硝酸还原酶法测定血清中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性。实验结果表明对照组奶牛血清中的NO含量及NOS活性均显著大于阳性组。由此可知，酮病可导致奶牛血清中NO含量降低、NOS活性下降。     

荷斯坦奶牛酮病对抗氧化系统影响的研究

为了探讨酮病对抗氧化系统的影响 ,以荷斯坦奶牛为实验动物 ,应用酮粉法和改良式水杨醛比色法随机检测结果 ,一组为 1 0头阳性牛 ,另一组为 1 0头对照牛。应用DTNB显色法测定血清中GSH Px活力 ,应用黄嘌呤氧化法测定血清中T SOD活力 ,应用硫代巴比妥酸法测定血清中MDA含量。结果表明 ,酮病奶牛血清中GSH Px活力极显著降低 (P <0 .0 1 )、T SOD活力显著降低 (P<0 .0 5) ,血清中MDA含量显著增高 (P <0 .0 5)。因此酮病影响奶牛抗氧化系统 ,这一结论对揭示奶牛酮病的发生机理具有重要的意义     

"酮病制剂1号"防治奶牛酮病效果观察

选取高产奶牛20头,根据乳酮阳性,血浆β-羟丁酸和血糖浓度分为健康牛,亚临床酮病牛和临床型酮病牛。将试验奶牛分4组,每组5头,Ⅰ组为亚临床酮病给药组,Ⅱ组为临床酮病给药组,Ⅲ组为酮病未给药对照组,Ⅳ组为健康未给药对照组。再给“酮病制剂1号”前后测定各组奶牛泌乳量、血浆β-羟丁酸及血糖指标。结果表明：“酮病制剂1号”使产后酮病奶牛泌乳量增加不显著（P〉0．05）;给药后,亚临床酮病Ⅰ组与临床酮病Ⅱ组奶牛血浆β-羟丁酸显著降低（P〈0.01）,血糖浓度显著增加（P〈0．01）;未给药酮病Ⅲ组和对照Ⅳ组奶牛血浆β-羟丁酸和血糖给药前后差异不显著。结论：“酮病制剂1号”通过降酮升糖的途径发挥防治奶牛酮病的作用。     

酮病奶牛血清中钙、磷含量变化的研究

为深入研究酮病的发生机理,选择荷斯坦奶牛作试验动物,应用酮粉法和改良水杨醛比色法随机检测分组,Ⅰ组为10头阳性牛,Ⅱ组为10头对照牛。分别应用甲基麝香草酚蓝比色法测定血清中钙和无机磷的含量。结果表明,对照组和阳性组钙、磷含量差异不显著。由此可知酮病对奶牛血清中钙、磷含量影响不明显。     

亚临床酮病奶牛的氧化抗氧化状态和乳品质

为研究亚临床酮病奶牛的氧化应激状态及其对奶牛乳品质的影响,分别选取21头亚临床酮病奶牛和21头健康奶牛,通过尾静脉采集非抗凝血,用于氧化抗氧化指标的检测;同时收集新鲜乳样,用于乳成分的检测。结果表明,与健康奶牛相比,亚临床酮病奶牛的总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶、乳蛋白和总固形物活性、血清葡萄糖显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),乳脂肪比、非酯化脂肪酸、β-羟基丁酸、丙二醛含量显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01)。由此可见,亚临床酮病奶牛体内存在氧化应激,主要抗氧化酶活性降低,并且氧化应激状态显著高于健康奶牛,乳品质低于健康奶牛。     

黑龙江省某集约化牛场酮病奶牛血液生化指标变化

通过酮病奶牛与健康奶牛的血液生化指标分析,阐明酮病奶牛血液病理学变化,为酮病预防提供科学依据。随机选取黑龙江省某集约化牛场围产后期10头奶牛,根据血酮仪检测β-羟丁酸(BHBA)的浓度进行分组,检测2组的血液生化指标并进行相关性分析。结果:酮病奶牛血中BHBA和总胆红素(TBIL)含量升高,而游离脂肪酸(NEFA)和葡萄糖(Glu)含量降低,且差异极显著(P0.01),其中BHBA、NEFA都超出正常范围;碱性磷酸酶(ALP)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量显著降低,血肌酐(CREA)和L乳酸盐(L-ACT)显著升高(P0.05),而门氨酸氨基转移酶(AST)含量升高且超出正常范围;酮病组奶牛血钙(Ca)浓度降低且低于正常范围;且酮病组奶牛血浆中牛结合珠蛋白(HP)极显著高于健康组,血浆中白介素1β(IL-1β)酮病组高于健康组,但差异不显著。本研究表明酮病奶牛血液中能量代谢、肝功、矿物元素和炎性因子等指标发生了明显变化,结果为诊断与预防酮病提供了病理学基础。     

奶牛酮病红细胞膜上ATP酶活性变化的研究

为了深入研究酮病的发生机理,选择荷斯坦奶牛作为实验动物,应用酮粉法和改良式水杨醛比色法随机检测分组,Ⅰ组为10头对照牛、Ⅱ组为10 头阳性牛。应用试剂盒比色法测定红细胞膜上ATPase 的活性变化。结果表明,阳性组和对照组相比,红细胞膜上ATPase的活性显著下降(P <0.05)。说明奶牛酮病影响红细胞膜上ATPase的活性变化。     

亚临床酮病对泌乳早期奶牛繁殖性能和血液生化指标的影响

试验旨在探究围产期亚临床酮病与泌乳早期奶牛繁殖性能、卵泡发育之间的关系,并检测试验牛血液生化指标的变化。试验在黑龙江某大型集约化牛场开展,根据产后血酮水平确定亚临床酮病组(SCK)和健康组(C)奶牛共60头,根据试验牛产后50 d内发情状况,将SCK组再分为发情组(SCKE,16头)和乏情组(SCKA,14头),C组也同样分为发情组(CE,25头)和乏情组(CA,5头)。所有试验牛在产后50 d通过直肠检查和B超检查了解子宫复旧及卵泡发育状况,记录繁殖性能数据,并进行血液生化指标分析。结果表明:与健康组发情奶牛相比,亚临床酮病发情奶牛产后首次发情日期推迟约10 d(P0.05);产后50 d卵泡直径差异极显著(差值约4 mm)(P0.01)。亚临床酮病乏情奶牛子宫复旧延迟发生率显著高于健康组发情奶牛(P0.05);亚临床酮病奶牛血浆中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)含量显著低于健康奶牛(P0.05),而泌乳量极显著提高(P0.01)。与发情奶牛相比,乏情奶牛血浆中甘油三酯(TG)含量显著升高(P0.05);葡萄糖(Glu)、胰岛素(Ins)、雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)含量显著或极显著降低(P0.05;P0.01)。综合以上试验结果,奶牛患亚临床酮病而导致能量代谢指标异常是引起奶牛乏情、产后卵泡发育受阻和繁殖障碍的主要因素,进而导致奶牛繁殖力下降。     

过瘤胃脂肪和过瘤胃葡萄糖防治奶牛隐性酮病的效果

为了解过瘤胃脂肪和过瘤胃葡萄糖对奶牛隐性酮病的防治效果,选取24头试验奶牛,分为4组,每组6头。其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组均为隐性酮病组,Ⅳ组为健康对照组。Ⅰ组日粮中添加过瘤胃脂肪200 g/(d.头),Ⅱ组日粮中添加过瘤胃葡萄糖200 g/(d.头),Ⅲ组为隐性酮病对照组,Ⅳ组为健康对照组,Ⅲ和Ⅳ组均饲喂基础日粮。结果表明,Ⅰ组奶牛血浆β-羟丁酸含量显著降低(P<0.05),血糖含量呈现上升趋势,但是试验后第15天显著升高(P<0.05)。Ⅱ组血浆β-羟丁酸呈现下降趋势,血糖呈现上升趋势。因此,添加过瘤胃脂肪和过瘤胃葡萄糖能对防治奶牛隐性酮病起到积极的作用。     

亚临床酮病奶牛血清中微量元素代谢水平的研究

本试验旨在研究荷斯坦奶牛亚临床酮病对血清中微量元素的影响,选择40头产后1～15 d的荷斯坦亚临床酮病奶牛,通过应用原子吸收光谱法测定血清中Cu、Fe、Mn、Zn、Se、Co含量,应用分光光度计和比色法测定血清中GSH-Px、T-AOC、T-SOD活力及MDA含量。结果显示,阳性组血清中Cu、Zn、Se、Co的含量在整个检测过程中均极显著低于对照组(P＜0.01);阳性组血清中Mn的含量在第1、5天的检测中显著低于对照组(P＜0.05),第10、15天极显著低于对照组(P＜0.01);阳性组血清中Fe的含量与对照组相比差异不显著（P＞0.05）;阳性组血清中GSH-Px、T-SOD、T-AOC的活性均极显著低于对照组(P＜0.01);阳性组血清中MDA的含量极显著高于对照组(P＜0.01)。结果表明,亚临床酮病直接影响奶牛抗氧化系统GSH-Px、T-AOC、T-SOD的活性,间接地影响血清中微量元素Cu、Mn、Se、Zn的含量。Co是维生素B₁₂的重要组成部分,维生素B₁₂在肝脏内的浓度下降,从而导致亚临床酮病血清中Co的含量降低。亚临床酮病奶牛肝脏和氧化酶受损,破坏Fe的结合,机体内贮存的Fe则可以释放出来,维持机体的需要,血清中Fe的含量没有显著的变化。     

亚临床酮病奶牛血液生化指标研究

为了阐明亚临床酮病对产后奶牛血液生化指标的影响，试验选择围产后期，胎次接近（1～3胎）的荷斯坦牛，根据血液β-羟丁酸（BHBA）浓度分为健康组（BHBA<1.2mmol/L）和亚临床酮病组（1.2≤BHBA<3.0 mmol/L），每组各6头。对两组奶牛血液生化指标进行分析比较。结果显示，亚临床酮病组奶牛血液中葡萄糖（Glu）含量、甘油三酯（TG）含量以及血钾（K）浓度极显著低于健康组（P<0.01）；游离脂肪酸（NEFA）浓度、总胆固醇（TC）含量极显著高于健康组（P<0.01）；高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）含量显著低于健康组（P<0.05），而低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）浓度显著高于健康组（P<0.05）；在奶牛肝功能指标中：亚临床酮病组谷丙转氨酶（ALT）活性极显著高于健康组；碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰转肽酶（GGT）、谷草转氨酶（AST）活性显著高于健康组；在奶牛抗氧化指标中：亚临床酮病奶牛超氧化物歧化酶（SOD）活性极显著低于健康组；丙二醛（MDA）含量显著高于健康组；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和总抗氧化能力（T-Aoc）...     

荷斯坦奶牛蹄病与血清自由基代谢的关系

选择患蹄病的荷斯坦奶牛12头为试验组,并根据产奶量、胎次和泌乳期均相近的原则选择健康奶牛12头为对照组,检测了血清中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的含量和超氧歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活力和总抗氧化能力(T-AOC)等。结果表明:患蹄病奶牛血清中的MDA、NO显著高于健康牛(P<0.05),SOD、CAT显著低于健康牛(P<0.05),T-AOC也低于健康牛,但组间差异不显著(P>0.05),说明患蹄病的奶牛体内自由基代谢紊乱,其抗氧化能力已经不能有效地清除代谢产生的过量的自由基。     

奶牛酮病的监测研究

本试验随机选取南宁地区2个奶牛场41头黑白花奶牛进行奶牛酮病的监测研究,试验采用rothera法和水杨醛比色法分别定性和定量检测酮体,采用邻甲苯胺法定量检测血糖。结果表明:①甲奶牛场隐性酮病发生率、可疑隐性酮病发生率分别为20%和15%,乙奶牛场均为零。②甲奶牛场血酮、乳酮、血糖的含量分别为31.1±22.2、78.1±47.2及645.2±79.6 m g/L;乙奶牛场的分别为17.5±8.9、42.6±18.6及637±54.7 m g/L。乳酮及血酮含量在2奶牛场间均存在着极显著差异(P<0.01);而血糖均在正常值范围,两牛场间差异不显著(P>0.05)。最后还讨论分析了奶牛日粮营养,分析发现甲奶牛场日粮粗纤维含量严重不足。     

正常泌乳奶牛的血清瘦蛋白、血糖和血酮浓度及其相关性

随机选取正常的黑白花泌乳牛20头,按乳酮阳性分为阴性组(11头)和阳性组(9头)。对它们泌乳量、泌乳天数、血糖、血酮、血清Leptin等指标进行统计分析。结果显示血清Leptin、血糖、酮体等指标水平处于正常的范围,5项指标彼此之间的相关性不明显。但是,乳酮阳性组奶牛与阴性组比较,泌乳量降低,血清酮体升高,血糖水平降低,血清Leptin水平略高,除血清Leptin外,其余都差异显著(<0.05)。结果表明,正常的泌乳奶血清瘦蛋白等5项指标之间无显著的相关性,可能与多种因素有关,尤其是能量代谢的适应性调节。     

围产期酮病奶牛血液生化指标特征分析

试验随机选取产前奶牛29头,跟踪采集产前2周、产前1周、分娩当天及产后3,7,14,21 d的血浆样品,检测血浆相关生化指标变化特征,并记录泌乳量。任意采集时间点血浆β-羟丁酸(BHBA)≥1.2 mmol/L则为酮病组, BHBA<1.2 mmol/L则为对照组。结果显示:随机选取的牛群中酮病发病率为58.6%,酮病主要发生在产后7～14 d;酮病组奶牛产前血液相关生化指标与对照组相比无显著性差异;与对照组相比,酮病组奶牛分娩当天血钾水平升高,血磷水平显著降低;产后3 d酮病组奶牛血浆甘油三酯、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、BHBA、泌乳量显著高于对照组奶牛;产后7,14,21 d血浆BHBA、非脂化脂肪酸(ENFA)、TC、HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平极显著高于对照组奶牛,血糖水平显著低于对照组奶牛。二元Logistic回归分析显示:产后3 d血液TC、HDL-C、K、BHBA、泌乳量与奶牛酮病的发生显著相关。将显著性相关指标利用Logistic回归建模,最终建立了基于血液HDL-C、BHBA、泌乳量的奶牛酮病早期诊断模型,即y=17.95-9.81×HDL-C-2.71×BHBA-0.20×泌乳量,当y<0时存在发生酮病风险,模型早期预测奶牛酮病的准确率82.8%、灵敏度81.3%、特异性84.6%。