激素对2种红豆杉离体胚培养的影响

研究了不同浓度的6-BA、GA3、和BR 3种激素对红豆杉离体胚培养的影响,并建立了2种红豆杉的离体胚培养和植株再生系统。结果表明,6-BA对2种红豆杉种胚的萌发促进作用最大,BR次之,GA3最小。南方红豆杉种胚萌发的最佳激素组合为1.5 mg/L 6-BA 1.7×103ng/L BR 2 mg/L GA3。短叶红豆杉种胚萌发的最佳激素组合为1.0 mg/L 6-BA 1.7×103ng/L BR 4 mg/L GA3。     

百合幼胚离体培养的研究

对百合败育胚离体培养的影响因素进行研究的结果表明：pH值对百合幼胚的萌发及成苗有一定的影响，以pH值5.0为最好；活性炭的浓度对其影响不明显，培养基中加入氨基酸类物质使胚萌发及成苗比率均高于对照，加入维生素类物质对胚的影响不大。     

荔枝幼胚的离体培养

把３个不同胚胎发育类型荔枝，品种乌叶，兰竹，绿荷包的幼胚置于含有不同生长调节剂的ＭＳ培养基上进行培养，结果表明：授粉后１５ｄ的胚胎人工培养十分困难，而授粉后３０－４０ｄ的幼胚，在ＭＳ基本培养基附加一定浓度的ＢＡ，ＮＡＡ，ＧＡ以及ＡＢＡ等的不同组合培养基上，均可诱导形成细胞团，并能进一步形成胚状体或芽状体，部分育型品种兰竹，有胚胎败育早期但未死亡１／２ＭＳ附加低浓度的细胞人裂素及生长素等的培养基上，     

百合杂种胚的离体培养

以剥除胚乳的两个百合杂交组合的杂种胚，进行离体培养，５ｄ后即开始萌发，１５ｄ后，萌发率达８８％。在不同激素含量的培养基比较试验中，发现以ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ激素浓度培养基培养效果最好，其中，７５％的种胚长成完整植株，１２．５％的种胚长出幼芽，培养过程中，无根的幼苗生长至３ｃｍ左右，约５张叶片时，转移至ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的培养基上，２￣３周后，有８０％的幼苗长出根。     

牡丹胚离体培养的研究

[目的]探寻牡丹胚离体培养的最佳培养基。[方法]比较牡丹离体胚在添加有不同浓度的6-BA和NAA组合的MS基本培养基上的生长情况,筛选出最佳培养基。[结果]6-BA促进子叶生长,当浓度增大时对根的生长有抑制;NAA促进愈伤组织形成,抑制根的生长。[结论]0．2mg／L6-BA可以促进牡丹胚的胚轴、真叶、根的生长,有利于幼苗形成。     

椰子胚的离体培养研究

以椰子成熟胚为外植体,得出其胚培养和植株再生的最适培养条件如下:①胚的启动培养最适培养基为Y3+6-BA0.5 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1+蔗糖60 g·L-1+活性炭2.5 g·L-1的液体培养基;②继代培养最适培养基为Y3+6-BA1.0 mg·L-1+NAA1.0 mg·L-1+蔗糖60 g·L-1+活性炭2.5 g·L-1+琼脂7.0 g·L-1;③最适生根培养基为Y3+IBA2.0 mg·L-1+NAA2.0 mg·L-1+6-BA1.0 mg·L-1+蔗糖45.0 g·L-1+活性炭2.5 g·L-1+琼脂7.0 g·L-1.试管苗经练苗移栽后,成活率达90 %以上.     

荔枝幼胚的离体培养

把3个不同胚胎发育类型荔枝(Litchi chinensis Sonn.)品种乌叶、兰竹、绿荷包的幼胚置于含有不同生长调节剂的MS培养基上进行培养。结果表明:授粉后15d的胚胎人工培养十分困难,而授粉后30-40d的幼胚,在MS基本培养基附加一定浓度的BA,NAA,GA以及ABA等的不同组合培养基上,均可诱导形成细胞团,并能进一步形成胚状体或芽状体,部分败育型品种兰竹,在胚胎败育早期但未死亡的幼胚,以及完全败育型品种绿荷包,在授粉后30d的胚珠,经培养亦能形成胚状体,胚状体在MS或1/2MS附加低浓度的细胞分裂素及生长素等的培养基上,增殖能力甚强,甚至不加任何附加物的情况下亦能增殖。高浓度的附加物则不利于胚状体的增殖。从胚状体诱导成苗有待进一步研究。     

冬小麦未熟胚离体培养研究

通过两件对8个品种（系），1817个幼离体培养的结果发现，幼胚在培养基上放置的方向与其是诱导出愈伤组织，还是直接萌发出芽有着十分密切的关系。利用麦基一号培养基，完全没有必要附加激素即可正常进行小麦幼胚离体培养，辐射处理剂量对冬小麦幼胚离体培养有一定的影响。该试验还证培养基的组分是提高未熟胚诱导成苗率的关键。也验证不同品种（系）辐射处理冬小麦种子的剂量和培养其中的激素，都会对未熟胚的离体培养产生重要影响。     

新疆伊贝母菌核病的初步研究

为摸清伊贝母菌核病在伊犁巩留县的发生规律,为开展综合防治提供依据,通过田间调查及室内分离培养等方法,确定伊贝母菌核病病原为Stromatinia rapulum (Bull) Boud,属于子囊菌亚门、盘菌纲、柔膜菌目核盘菌科、座盘菌属。病原在15～20℃条件下培养,第10天开始产生菌核,在20℃时产生的菌核数量最多。4月底至五月中旬均可发生,在低温多湿、地势低洼、排水不良的条件下极易发生。以菌丝或菌核在土壤病残体或病鳞茎上存活,成为初次侵染。     

伊贝母植物ISSR-PCR反应体系的建立与优化

采用CTAB法提取叶片DNA,通过单因素试验,研究了Taq DNA聚合酶用量、dNTP、引物和Mg(2+)浓度4种因素对伊贝母ISsR-PCR扩增的影响.结果表明,适于伊贝母ISSR-PCR的反应体系为25μL总体积中含1 x PCR反应缓冲液(无Mg(2+)1.0 U Taq DNA聚合酶、0.6 mmol/L dNTPs、0.4μmol/L引物、1.5 mmol/L MgCl2.     

青钱柳离体胚的组织培养研究

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计方案对影响其萌发和成苗的4种因素进行了研究.结果表明:低温侣(4℃)层积有利于青钱柳离体胚的萌发.基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和生长的关键因素,低温层积后的离体胚适宜培养基组合为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L、萌发率达97.5%,适宜成苗的培养基组合为改良MS+NAA0.5mg/L、成苗率达93.33%,而6-BA对离体胚成苗则有抑制作用.     

不同微生物菌肥用量对伊贝母各组成要素的影响

【目的】研究伊贝母高产优质条件下的微生物菌肥最佳施肥量。【方法】采用单因素试验设计,设微生物菌肥5个施肥量处理,分别为0、2、4、6、8 kg/667 m~2,在伊贝母的生育过程中,萌芽期、现蕾期、始花期的微生物菌肥施用比例分别是10%、20%、30%和40%。测定分析伊贝母的植株高度,植株鲜重、鳞茎鲜重、产量及土壤有机质、全氮含量、pH。【结果】随着微生物菌肥施用量的增加,各个时期的伊贝母植株高度、植株鲜重、鳞茎鲜重和伊贝母产量均呈现先增加后降低趋势;随着微生物菌肥施用量的增加,萌芽期和始花期土壤有机质、土壤全氮含量和土壤pH变化不显著,现蕾期时,除了土壤有机质和土壤全氮含量没有差异外,其余均有差异;当微生物菌肥施用量为4.29 kg/667 m~2时,伊贝母产量最高,为538.55 kg/667 m~2;萌芽期时,应施用0.29 kg/667 m~2伊贝母,鳞茎鲜重相对较重;现蕾期时,应施用0.23 kg/667 m~2伊贝母,鳞茎鲜重相对较重;始花期时,应施用1.02 kg/667 m~2伊贝母,鳞茎鲜重相对较重。【结论】以微生物菌肥基施为主,生育期开沟追施微生物菌肥,可获得伊贝母增产增效。     

菠萝百合组织培养技术研究

以菠萝百合花序上胚珠为外植体,接种于3种诱导培养基中,发现加有少量激素的MS+NAA 0.01mg/L及MS+6-BA 0.01mg/L培养基上的胚珠萌芽率明显高于未加激素的MS培养基。以启动培养获得的叶片及小鳞茎纵切块为外植体,接种到3种继代培养基中,发现两种外植体在3种继代培养基上均能分化出不定芽,MS+6-BA 1mg/L+NAA 1mg/L(S3)为最适初次继代培养基。以S3培养基为基础,设计了6种配方进行第二次继代培养研究,发现MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1 mg/L(T4培养基)上发育的不定芽数最多、质量最好,可作为最适继代培养基。离体生根研究发现:培养基中添加NAA比IBA生根质量更好,最适生根培养基为MS+NAA 0.1mg/L。至此,建立了菠萝百合组培快繁技术体系。     

不同施肥方式对伊贝母生长及土壤养分的影响

【目的】研究新疆伊犁地区伊贝母的最佳施肥技术模式。【方法】通过采用四因素三水平正交试验设计,设计微生物菌肥、磷肥,生物有机肥+有机物料腐熟剂,精制有机肥+有机物料腐熟剂4因素,在优化施肥(2水平)基础上,设计1水平(2水平×0.5)、3水平(2水平×1.5),正交处理共9个,对伊贝母生长及土壤进行了测定。【结果】不同施肥量处理下的伊贝母植株高度、伊贝母植株鲜重、鳞茎鲜重、土壤有机质、土壤全氮含量和土壤p H值均不同;随着伊贝母生育进程的推进,各个处理下的土壤p H均表现为萌芽期显著高于现蕾期和始花期,而土壤有机质和土壤全氮含量规律并不明显;不同施肥量处理下,伊贝母每667 m~2株数没有明显差异;在同一微生物菌肥施用量下,伊贝母产量的变化趋势无明显规律,处理8即微生物菌肥为6 kg/667m~2,磷肥为18 kg/667 m~2,生物有机肥+有机物料腐剂为16 kg/667 m~2,精制有机肥+有机物料腐剂为60 kg/667 m~2时,伊贝母产量最高为381.14 kg/667 m~2;在单一微生物菌肥施用量下,伊贝母产量的变化趋势无明显规律。【结论】以微生物菌肥、磷肥基施为主,配施生物有机肥、有机物料腐熟剂,生育期开沟追施微生物菌肥,可获得伊贝母高产。     

不同产地和生长年限伊贝母地上部位与鳞茎生物碱含量研究

[目的]研究不同产地和生长年限伊贝母地上部位与地下鳞茎总生物碱含量。[方法]采用酸性染料比色法测定总生物碱的含量。[结果]在不同产地和生长年限的伊贝母中,其地上部位与地下鳞茎的生物碱含量存在差异,4年生的伊贝母总生物碱含量比3年和5年的含量高,地上部位中总生物碱含量为地下鳞茎中的1.258~2.870倍,新疆伊犁州新源县中的伊贝母总生物碱含量均比其他产地的总生物碱含量低。[结论]不同产地和生长年限伊贝母中总生物碱含量因产地及生长年限不同而存在差异,但总体上地上部分的总生物碱含量高于地下鳞茎,存在进一步研究与开发的价值。     

伊贝母鳞茎层积过程中核酸及超微结构的变化

采用５℃层积下的伊贝母鳞茎，进行了核酸含量及更新芽超显微结构变化的研究，发现了伊贝母鳞茎休眠解除过程中的一些规律性变化。两次ＲＮＡ的积累时期，恰与电镜制片观察到的核糖体增加的时期相一致，还观察到了细胞中液胞，前质体的一些变化规律，并发现其与一些植物由营养生长锥向生殖生长锥转化时期所发生的变化相似。     

奶牛卵母细胞体外受精和胚胎培养研究

[目的]探讨适合于奶牛体外胚胎生产的最佳条件。[方法]以奶牛卵母细胞为试验材料,研究不同温度、运送时间对奶牛卵母细胞成熟的影响,并比较在相同培养条件下孤雌激活和体外受精对奶牛卵母细胞胚胎发育的影响。[结果]卵巢在37—42℃运输后的成熟率（11．3％）明显低于20—30℃、30-37℃的成熟率（79．3％,85．1％）,20～30℃、30～37℃组间差异不显著;运送时间6h后的卵母细胞成熟率（53．2％）明显低于4h内、4—6h的成熟率（85．6％,77．8％）,4h内、4～6h差异不显著;孤雌激活和体外受精胚胎在相同条件下的卵裂率（72．41％,68．18％）、8细胞率（45．24％,47．22％）、囊胚率（25．60％,18．89％）差异均不显著。[结论]卵巢在30℃左右4h内运回实验室最适宜,而孤雌激活和体外受精胚胎在相同条件下发育率差异不显著。     

猪体外胚胎生产的研究进展

与牛羊等动物的体外胚胎生产（in vitro production，IVP）技术相比，猪IVP技术尚不成熟。猪IVP主要存在卵母细胞的细胞质成熟差、多精子受精率高和胚胎质量差的问题，这严重制约了该繁殖生物技术在转基因猪生物反应器领域的应用。笔者在查阅近10年的国内、外相关研究后，从如何优化猪卵母细胞的体外成熟（in vitro maturation，IVM）、体外受精（in vitro fertilization，IVF）和胚胎的体外培养（in vitro culture，IVC）3个方面进行了探讨。