嗜酸乳杆菌的体外抑菌研究

[目的]为研究嗜酸乳杆菌的抑菌机理提供一个好的途径。[方法]以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌株,用MRS培养基培养分离纯化嗜酸乳杆菌,利用单层琼脂平板扩散法检测嗜酸乳杆菌在不同pH值条件下对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌作用。[结果]在37℃的恒温箱中培养24 h后,通过测量抑菌圈大小,可以得知嗜酸乳杆菌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有明显的抑菌作用。在适宜的酸性条件下,嗜酸乳杆菌对大肠杆菌的抑制作用明显,且随着酸度的增强其抑菌效果愈加明显。嗜酸乳杆菌对金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,但pH值的变化对其抑菌效果影响不大。[结论]在适宜的生长条件下,嗜酸乳杆菌对一些致病菌具有抑制作用。     

提高嗜酸乳杆菌产酸速率的研究

由于嗜酸乳杆菌对人体的健康具有潜在的有益作用,因而对其应用也为人们所关注。但它与其它肠道菌(如双歧杆菌)一样,在乳中的产酸速率较低(18～24h产1.8％乳酸),因而给工业化生产带来了     

嗜酸乳杆菌体外黏附山羊子宫内膜上皮细胞条件的优化

[目的]优化嗜酸乳杆菌对永生化山羊子宫内膜上皮细胞体外黏附的条件.[方法]通过革兰氏染色法,研究山羊子宫内膜上皮细胞的生长状态,嗜酸乳杆菌菌液浓度、菌体生长状态和pH值以及孵育时间对菌体黏附性能的影响.[结果]当山羊子宫内膜上皮细胞培养48 h,嗜酸乳杆菌菌液浓度为1.0×109mL-1,pH值为4.0,孵育时间120...     

一株猪源发酵乳杆菌的体外特性研究

采用全自动曲线分析仪测定了猪源发酵乳杆菌X6的不同接种量、不同初始pH的生长曲线;采用琼脂平板扩散法检测该菌的抑菌能力,探讨该菌在不同高温下的存活时间;在体外模拟了该菌对人工胃液和人工肠液的耐受性.结果表明:在接种量1%、初始pH 5.3的条件下,该菌的生长情况最佳;该菌能够抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的生长;该菌在50、55、60℃处理2min时,存活率分别为99.19%、91.94%、80.65%;该菌在人工肠液和pH 3.0的人工胃液中存在4h后活性几乎不受影响,活菌数在109 CFU/mL以上,说明该菌具备作为益生性饲料添加剂的基本条件.     

骆驼刺源产乳酸的嗜酸乳杆菌分离鉴定及菌种特性

从骆驼刺青贮中分离到1株革兰氏阳性杆菌,经菌落形态特征鉴定、生理生化特征鉴定及16S rDNA序列分析,鉴定为嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）。     

新疆酸马奶中嗜酸乳杆菌的发酵特性研究

[目的]从新疆传统酸马奶以及市售酸奶中分离鉴定出嗜酸乳杆菌,从中筛选出具有潜在益生特性的菌株进行发酵特性研究,寻找具有优良发酵特性的嗜酸乳杆菌菌株.[方法]利用MRS培养基活化嗜酸乳杆菌,并采用平板菌落计数法测定发酵乳中嗜酸乳杆菌的活菌数,同时利用pH计和NaOH标准溶液滴定酸度以测定发酵乳在发酵过程以及冷藏期间的酸度变化.[结果]发酵24h,嗜酸乳杆菌G14、S22和G13先后到达发酵终点的顺序依次为G14＞ S22＞ G13,其中嗜酸乳杆菌G14的产酸能力最强,发酵乳的滴定酸度为94.83°T,pH值为4.30.4℃冷藏期间,嗜酸乳杆菌G14和S22发酵乳的后酸化程度较菌株G13低.冷藏16d时,各菌株仍具有较高的对数存活率,且菌株G13、S22和G14的对数存活率分别为79.18;、80.12;和85.57;,存活能力的顺序依次为G14＞ S22＞ G13.[结论]嗜酸乳杆菌G14产酸能力最强,最先到达发酵终点.冷藏过程中,嗜酸乳杆菌G14和S22的发酵乳后酸化程度较低,且嗜酸乳杆菌G14的对数存活率最高.     

嗜酸乳杆菌不同成分体外抗TGEV作用的研究

文章探讨嗜酸性乳杆菌不同成分在抗猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)中的作用,并分析益生菌抗病毒可能存在的机制。试验分离嗜酸乳杆菌不同成分和TGEV氨肽酶受体抑制剂Bestatin,按照感染后处理组、处理后感染组和同时感染处理组试验。采用MTT法,在猪睾丸细胞(ST)上评价各成分对TGEV抑制作用。在Bestatin封闭ST细胞基础上添加S-层蛋白,研究二者联合作用。结果表明,抑制率大小顺序:S-层蛋白菌体脱S-层蛋白菌体代谢产物牛血清白蛋白。S-层蛋白对TGEV抑制作用与Bestatin相当。由此可知,嗜酸乳杆菌S-层蛋白对TGEV在ST细胞上的复制有抑制作用。氨肽酶抑制剂Bestatin预先处理ST细胞对S-层蛋白抑制TGEV的感染具有协同作用。     

嗜酸乳杆菌抗酸抗胆汁盐能力的研究

采用MRS培养基,模拟人体胃酸环境(pH1.5～4.5)和十二指肠高胆汁盐环境(1～4g/kg)对嗜酸乳杆菌的抗性进行了研究。结果表明,嗜酸乳杆菌在pH2.5～4.5时具有较强的生存能力,37℃培养6h活菌数仍达107mL-1以上,pH1.5条件下仍有部分存活。在1～3g/kg胆汁盐条件下培养4h,活菌数仍达106mL-1以上,且能在4g/kg胆汁盐中存活。回归分析的F检验值达极显著水平。     

嗜酸乳杆菌促生长物质及增菌培养基优化研究

研究了在MRS培养基中添加不同营养物质对嗜酸乳杆菌生长的影响,进一步采用正交试验优化筛选了嗜酸乳杆菌的增殖培养基。结果表明,在MRS培养基中添加菊粉、乳清粉、酪蛋白水解物、胡萝卜汁可显著促进试验菌株的细胞生长,而乳糖、西红柿汁、啤酒的添加相对而言对菌的增殖影响不大;利用L9(34)正交试验筛选出增殖因子的最佳配比为:菊粉0.5%,乳清粉0.5%,酪蛋白水解物0.5%,胡萝卜汁5%。最后使用优化出的增菌培养基测定生长曲线,同时测定pH和滴定酸度的变化,确定增菌培养终止时间为10 h,此时活菌数可达2.59×1010cfu/mL,较对照MRS培养基的活菌数提高了22.72倍。     

产共轭亚油酸嗜酸乳杆菌菌株的诱变育种

本研究采用的嗜酸乳杆菌HS111和嗜酸乳杆菌HS112经紫外诱变、亚硝基胍紫外复合诱变处理后,嗜酸乳杆菌HS111共轭亚油酸产量提高了19μg/ml,而嗜酸乳杆菌HS112较原来出发菌株共轭亚油酸产量提高了27.7μg/ml,两菌株均具有良好的应用前景。     

鸡源益生嗜酸乳杆菌分离及生物特性初探

从10日龄健康雏鸡的小肠中成功分离筛选出有抑菌作用的嗜酸乳杆菌M16.拮抗病原菌试验表明,该菌株的代谢产物在体外具有抑制杀灭鸡大肠埃希氏菌O-78、鸡白痢沙门氏菌O-79和金黄色葡萄球菌C58000的作用,是微生态制剂可选用的优良菌株.     

嗜酸乳杆菌生产特性的研究

以质量浓度 10 0 g/ L 脱脂乳为培养基 ,对嗜酸乳杆菌在乳中的生长能力、产酸能力、产香能力以及蛋白质分解能力进行了研究。结果表明 :在 37℃条件下 ,嗜酸乳杆菌可在乳中生长、繁殖 ,对数期细菌数达 10 9m L- 1 以上。在 10 %接种量条件下 ,36 h嗜酸乳杆菌可在乳中产生 10 3.2 5～ 10 8.5 6°T的酸度 ,p H值达 3.83～3.91,2 4～ 30 h产生 1.8716～ 2 .14 4 0 m mol/ m L双乙酰 ,3.2 32 2～ 3.6 84 4 m mol/ m L乙醛 ,使发酵乳具有良好的风味。同时 ,嗜酸乳杆菌具有较强的蛋白质分解能力 ,4 8h可以产生 171.6 7～ 182 .5 5μg/ m L的氨基酸 ,使发酵乳具有较高的营养价值     

嗜酸乳杆菌La-1产细菌素发酵条件的研究

合适的发酵条件能够有效地提高嗜酸乳杆菌La-1细菌素的产量。在已经确定碳源、氮源和复合维生素的基础上,采用正交试验的方法研究了以MRS为基础的发酵培养基中各营养成分的相互协同作用,10L发酵罐试验证实,优化后的培养基和各项优化技术参数能使细菌总数提高了53.6%,细菌素抗菌活性提高了35.3%,抑菌圈达到了25mm以上。     

两株发酵乳杆菌体外抗氧化活性研究

[目的]本文旨在研究分离自金华火腿中发酵乳杆菌Y4和Y41的体外抗氧化活性。[方法]分别制备发酵乳杆菌的无细胞提取物、发酵上清液和菌悬液,以维生素C为阳性对照,通过测定1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率、羟自由基(·OH)清除率、超氧阴离子自由基(O_2~)清除率和氧自由基清除活性来评价2株发酵乳杆菌Y4、Y41的自由基清除能力,并通过测定抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性探讨发酵乳杆菌的抗氧化机制。[结果]2株发酵乳杆菌的无细胞提取物具有较强的O_2~清除率和氧自由基清除能力,发酵上清液和菌悬液分别具有较强的DPPH自由基清除率和·OH清除率。菌株Y41的羟自由基及氧自由基清除能力均显著高于Y4(P0.05),其DPPH自由基清除率显著低于Y4;菌株Y41无细胞提取物O_2~清除率显著高于Y4,但发酵上清液清除率显著低于Y4。此外,2株菌株无细胞提取物中均检测到具有SOD和GSH-Px活性。[结论]2株发酵乳杆菌都具有较高的抗氧化活性,其中菌株Y41的抗氧化能力更强,其中无细胞提取物具有更高的氧自由基清除能力和SOD活性。     

一株植物乳杆菌对脂环酸芽孢杆菌的抑菌活性

【目的】筛选具有抑制脂环酸芽孢杆菌活性的乳酸菌,并对其抑菌活性进行研究,为延长果汁的保质期和提高产品的安全性提供理论基础。【方法】用琼脂扩散法,从50株分离自泡菜的乳酸菌中筛选具有抑制脂环酸芽孢杆菌活性的菌株,研究所获菌株发酵上清液(Cell-free supernatant,CFS)经不同pH(3,4,5,6,7)、温度(40,60,80,100,121℃)和酶(过氧化氢酶、链霉蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶、胰蛋白酶)处理后抑菌活性的变化;通过气相色谱-质谱分析乳酸菌代谢物中的组成成分;利用扫描电镜观察CFS处理后脂环酸芽孢杆菌的形态变化;将乳酸菌应用于苹果汁的发酵,并测定发酵过程中乳酸菌和脂环酸芽孢杆菌生长及6种有机酸含量的变化情况。【结果】筛选得到1株具有较好抑菌活性的植物乳杆菌(L10),其代谢物抑菌活性呈pH依赖性,具有温度和过氧化氢酶稳定性,但蛋白酶水解会降低其抑菌活性。植物乳杆菌L10代谢物中的成分主要是有机酸,并且含有环(亮氨酸-脯氨酸)和环(甘氨酸-脯氨酸)两种环二肽。CFS通过对脂环酸芽孢杆菌的细胞壁和细胞膜造成严重损害,导致细胞破裂,达到杀菌的目的。植物乳杆菌L10能够抑制苹果汁中脂环酸芽孢杆菌的生长,并且发酵后主要有机酸的含量发生显著变化(P0.05)。【结论】植物乳杆菌L10可以产生有机酸、细菌素等抑菌物质来杀灭脂环酸芽孢杆菌,可以应用于果汁的发酵及生物保存。     

嗜酸乳杆菌代谢型培养基的研究

用氨基酸或有机酸替换MRS培养基中蛋白质含量高的的成分如牛肉膏、蛋白胨、酵母膏等,以研究嗜酸乳杆菌代谢型培养基。试验结果表明:用14%组氨酸、9.4%甲硫氨酸、9.4%酪蛋白、9.4%叶酸代替培养基中的蛋白成分,能满足嗜酸乳杆菌的生长。同时测定了嗜酸乳杆菌在代谢培养基中生长代谢培养基的pH值和滴定酸度的变化。     

8株乳酸菌的体外抗氧化能力

为了获得高抗氧化活性乳酸菌,测定了8株乳酸菌对DPPH·、羟自由基(·OH)和超氧阴离子(O-2·)3种自由基的清除能力,并对R36和R39组合的协同抗氧化能力进行了测定。结果表明,8株乳酸菌不同组分都有一定的抗氧化能力,乳酸菌的发酵上清液对自由基的清除能力均高于完整细胞和无细胞提取物,其中R36和R39对3种自由基的清除能力均较高,分别为51.09%、67.86%、72.02%和50.26%、67.67%、72.16%。二者组合时,发酵上清液对3种自由基的清除能力均显著提高,分别为59.36%、77.36%、81.02%。通过对自由基清除能力分析得出,R36和R39具有较高抗氧化活性,2者具有协同抗氧化能力。     

猪源性大肠杆菌分离鉴定及体外抑菌试验

试验从延边地区养猪场临诊上疑似大肠杆菌病的仔猪中无菌采集粪便和血样52份,进行大肠杆菌分离鉴定及致病性研究;通过纸片扩散法测定四环素、磺胺嘧啶钠及链霉素对分离株及标准菌株的抑菌效果,通过试管二倍稀释法及牛津杯法测定中药蒲公英、连翘及柴胡粗提物对分离株及标准菌株的最小抑菌浓度(MIC)及抑菌效果。结果表明:共分离鉴定28株大肠杆菌,分离率54%;79%分离株可致死小鼠;大肠杆菌对四环素及磺胺嘧啶钠敏感度较低,耐药率分别为89%和64%,对链霉素敏感度较高,耐药率为6%;蒲公英粗提物的MIC值为0.05g/mL,连翘与柴胡粗提物的MIC值均为0.1g/mL,3种中药粗提物均可抑制大肠杆菌生长,且蒲公英粗提物的抑菌效果最强。该试验结果表明:分离株对抗菌药的耐药性明显,中药体外抑菌效果明显,为延边地区仔猪腹泻性大肠杆菌病的防治及新药的开发提供依据。     

一株嗜酸氧化亚铁硫杆菌的生物学特性研究与分子鉴定

从贵州省六盘水市某煤矿矿井水中分离到1株脱硫菌SCJ,其最适生长温度为30℃,最适pH为2.0。SCJ菌株是化能自养菌,能分别利用亚铁、单质硫、葡萄糖生长,不能利用硫代硫酸钠或蛋白胨生长,具有较强的亚铁和硫氧化活性。以该菌株及其GenBank的近似16SrDNA序列构建系统发育树,鉴定SCJ菌株为嗜酸氧化亚铁硫杆菌Acidthiobacillus ferro-oxidans。