禽流感病毒的分离与鉴定技术

禽流感病毒的诊断一般是通过鸡胚分离病毒,检测其血凝活性,并应用琼脂扩散试验或其他试验确定其是否为禽流感病毒,再进一步进行亚型鉴定、致病力测定。如果是H5或H7亚型,还应采用PCR等方法对血凝素裂解位点的氨基酸序列进行测定。     

鹅常见病毒的分离与鉴定

根据流行特点、临床表现和病理变化可对鹅的传染病做出初步诊断,但疾病的确诊需借助于病毒的分离鉴定、血清学方法、直接病毒抗原检测等实验室手段.病毒分离培养与鉴定常采用的方法有动物接种、胚胎培养和细胞培养三种.接种是最原始的培养方法,可根据病毒侵袭部位来选择适当途径.接种后每日观察动物发病情况,如动物死亡则取病变组织制成悬液,继续接种动物传代,以使病毒更大量繁殖.不发病判为阴性.胚胎对多种病毒敏感,根据病毒种类选择接种部位,如流感病毒接种於羊膜腔和尿囊腔.接种后继续培养孵育,以胚胎发生异常变化或羊水、尿囊液中出现红细胞凝集现象等作为病毒存在或增殖的指标.细胞培养是目前分离病毒的主要方法.组织培养是用离体组织块或分散的活细胞.下面以小鹅瘟病毒、鹅副黏病毒、禽流感病毒、鸭瘟病毒等为例,简要介绍鹅常见病毒的分离与鉴定.     

朗德鹅雏鹅的饲养

朗德鹅,原产于法国西南部的朗德地区,由此而得名。朗德鹅体型中等,羽毛灰褐色,而在腹部毛色较浅呈银灰色。耐粗饲、适应性强、饲养周期短、患病少,成活率高达90％以上。一只鹅年产羽绒量达350～450 g,体重达7～8 kg,是当今世界最适于生产鹅肥肝的鹅种。出生70 d左右可作商品鹅出售,90～120 d即可获多种产品,市场前景广阔。     

黑龙江省鹅副黏病毒的分离与鉴定

鹅副黏病毒病是自 1997年以来出现的一种新的鹅的病毒性急性传染病。国外学者认为禽副黏病毒一般不会感染鹅 ,即使感染也不会发病。但我国学者王永坤和辛朝安分别报道了由鹅副黏病毒引起的疾病爆发 ,他们分别在江苏和广东等地的病例中分离到了对鹅具有强致病力的副黏病毒。随后 ,在上海、安徽、吉林、山东、浙江、江西、福建、广西、四川等地也陆续报道发生鹅副黏病毒病。 2 0 0 1年 5月 ,我们在黑龙江省铁力市某鹅场的发病鹅中分离到 1株对禽类高致病率、高死亡率的病毒。经过流行病学调查、动物回归感染试验、病毒形态结构观察和血清学检…     

朗德鹅与太湖鹅杂交一代生产性能观察

<正> 朗德鹅产于法国的朗德省,腹体长,颈粗短,个体大,增重快(10周龄体重达4.6公斤以上)。全身羽毛为灰褐色,颈背部近黑色。颈羽卷曲,喙和蹼均为桔红色,无瘤。成年公鹅活重7～8公斤,母鹅活重     

鹅细小病毒广西株的分离鉴定

将广西某养鹅场5日龄发病的雏鹅肝脾处理后接种于10日龄的鹅胚,分离到一株病毒,对死胚收集的尿囊液进行荧光PCR确诊后,对其VP3基因进行扩增测序,通过与GDFSH株(Guangdong)、82-0308株(Taiwan)、HLJ01株(Heilongjiang)和HBZF07株(Hebei)VP3基因序列分析,核苷酸序列同源性在96.2%以上,从分子水平上鉴定该分离株是鹅细小病毒.     

朱鹮低致病性禽流感病毒的分离与鉴定

为了掌握朱鹮禽流感病毒流行情况,利用鸡胚分离方法从病死朱鹮脑组织标本中分离出禽流感病毒毒株,并将所分离的病毒进行血凝试验、血凝抑制试验、鸡胚最小致死量平均死亡时间(MDT)、半数致死量(LD50)及1日龄鸡脑内接种致病指数(ICPI)试验.结果表明,所分离的病毒均能够凝集鸡、肉鸭、绵羊、山羊、猪、人、兔等的红细胞,且这...     

鹅源大肠埃希菌的分离与鉴定

从临盏床疑似大肠埃希菌感染的病雏鹅的组织分离到31株细菌,通过培养特性和生化试验确定其中27株为大肠埃希菌。血清学试验表明,其中7株（25．93％）为026型,6株（22．22％）为078型,4株（14．81％）为01型,3株（11．11％）为018型,2株（7．41％）为0117型,5株（18．52％）未能定型。应用PCR方法检测了27株大肠埃希菌的F1菌毛与毒力岛HPI基因,结果表明24株（88．89％）为F1^＋大肠埃希菌,7株（25．939／5）为HPI^＋大肠埃希菌（其中4株为F1^＋）。药敏试验表明,所有菌株均对头孢唑林、呋喃妥因敏感,部分菌株对庆大霉素、环丙沙星敏感,而对多黏菌素、四环素、林可霉素均为耐药。     

鹅副粘病毒的分离和鉴定

采集疑似鹅副粘病毒病的鹅病料,通过鸡胚接种传代分离到1株病毒(HZ株).该分离病毒经鸡红细胞凝集(HA)试验、凝集抑制(HI)试验、电镜形态学观察等,结果表明与NDV极为相似,属禽Ⅰ型副粘病毒.经动物回归试验,结果说明分离到的副粘病毒为临床疫病病原,毒力较强,能使15日龄的鹅、鸡、番鸭等禽类感染发病,发病率与死亡率均为100%.     

鹅链球菌的分离与鉴定

安徽某种鹅场70—120日龄种鹅发生以败血症为特征的急性传染病。从该鹅场采集病料对该病病原进行分离，细菌学检验，并进行生化试验，动物接种试验等，证实为链球菌病。     

一株鹅副粘病毒的分离鉴定及其生物学特性研究

从江苏某地患病鹅群的脑、脾病料组织中分离到一株病毒。经过试验鉴定,该分离株具有血凝性,且可被ND标准阳性血清所抑制和中和,不能被A(IH5亚型与H9亚型)和EDS-76标准阳性血清抑制。人工感染雏鹅,引起100%的发病和死亡,并与自然病例有相似的症状和病变。该病毒的最小致死量病毒致死鸡胚的平均时间(MDT)为50.4h,1日龄SPF鸡脑内接种分离病毒致病指数(ICPI)为1.85;6周龄SPF鸡静脉接种致病指数(IVPI)为2.42;对该病毒株F基因部分片段进行了序列测定分析,确定为强毒型鹅副粘病毒基因Ⅶ型,并暂命名为HQ-06。采用分离株制备成油乳剂灭活苗,免疫鹅群有良好的保护力。     

鹅呼肠孤病毒江苏分离株的分离鉴定

2010年3月起,我国江苏、浙江等地鹅场相继发生一种以雏鹅瘫痪、不能行动为主要特征的传染病,发病率为10%-50%,死亡率一般为10%-40%.由于该病流行日趋严重,病因未明,因此该病的病原学研究备受关注.本文对病料进行病原的分离鉴定,证实该病例感染有鹅呼肠孤病毒,将其命名为JS10.     

小鹅瘟病毒的分离与鉴定

用接种鹅胚的病毒增殖法,从具有小鹅瘟典型症状和病理变化的病死雏鹅的脏器中分离到一株病毒,并进行了鹅胚致病性试验、鹅胚中和试验、雏鹅感染试验和琼脂扩散试验.结果表明,所分离的毒株为小鹅瘟病毒.     

鹅副粘病毒病病原的分离及初步鉴定

1998年 3月 ,某养鹅专业户的 70 0只 30日龄鹅中出现多只发病 ,发病后 ,虽然立即注射小鹅瘟高免血清 ,2 ml/只 ,同时在饮水和饲料中添加氟哌酸、环丙沙星、恩诺沙星等药物进行治疗 ,但疗效不明显。病鹅在发病后 3天开始出现死亡 ,至发病 7天 ,死亡达到高　　收稿日期 :1998- 0     

鹅大肠埃希菌的分离及PCR鉴定

对江西南昌某养鹅场送检的病死雏鹅进行病理剖检,病原分离鉴定及药敏试验。分离得到一株纯培养细菌,革兰染色为G-杆菌,根据细菌培养特性及生化鉴定结果初步确定为大肠埃希菌。根据Gen-Bank上发表的大肠埃希菌16Sr RNA基因编码区rsmC基因,利用NCBI上的引物设计软件,设计一对特异性引物,通过PCR方法鉴定以及动物试验,确诊分离到的菌株为致病性大肠埃希菌。药敏试验结果表明,分离菌对阿莫西林/棒酸、头孢孟多、氧氟沙星、左氧氟沙星4种药物高度敏感,对环丙沙星、洛美沙星中度敏感,而对其他16种药物表现耐药,多重耐药现象严重。     

鹅源沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验

为了对辽宁省某养鹅场10日龄患病鹅作出正确诊断和治疗,利用实验室诊断和药物敏感试验对病菌进行分离培养与鉴定。结果表明,该病病原为沙门氏菌,对培氟沙星、环丙沙星、痢特灵等药物高度敏感,对卡那霉素等药物中度敏感,对磺胺嘧啶钠等药物不敏感。选用敏感药物进行治疗,收到良好效果。     

鹅粪便中特基拉芽孢杆菌和类肠膜魏斯氏菌的分离鉴定

【目的】从鹅粪中分离芽孢杆菌属和乳杆菌属细菌,为鹅源功能菌研究和合理用药提供参考。【方法】收集30只50周龄健康北方白鹅的直肠粪便,利用特异性培养基和生化反应试验分离筛选菌株,筛选的菌株通过DNA提取、PCR扩增16S rDNA测序鉴定后,与GenBank中参考菌株进行比对构建进化树,进行相似性比对确定菌株种类。培养48 h后检测细菌的生长特性、最适酸碱度和温度,以pH 7.0、无胆盐环境下细菌生长状态为对照,检测其耐酸耐胆盐能力,并进行药敏试验检测其对抗菌药的耐受性。【结果】经分离筛选共获得9株细菌,通过生化试验最终选出2株菌,根据进化树的进化距离和相似性比对确定其分别是特基拉芽孢杆菌CC2FG2和类肠膜魏斯氏菌JY0R2。生长特性结果显示,特基拉芽孢杆菌CC2FG2在培养基pH为6.5、温度为30℃条件下培养16 h的增殖效果最好,可以耐受1.2%胆盐,活菌数是无胆盐的69.2%,耐酸特性比较强,培养基pH为3.5的强酸环境下活菌数是pH为7.0的81.5%;抗菌药耐受性结果显示,其对氧氟沙星、诺氟沙星、卡那霉素、链霉素、克拉霉素、红霉素、复方新诺明和万古霉素敏感,对头孢呋辛,头孢...