健康羚牛肠道芽孢杆菌的分离与鉴定

为了研究羚牛肠道微生态环境,试验对健康羚牛新鲜粪便进行了细菌培养和鉴定。结果表明:共分离出3株革兰阳性长杆菌,均具有芽孢;其中2株菌为兼性厌氧菌,1株为需氧菌,都可在pH值为5.7的培养基和7%NaCl培养基中生长,但对糖和盐的利用具有特殊性;通过细菌形态观察和生化试验最终确定这3株菌依次为苛求芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和栗褐芽孢杆菌。     

发酵饲料用具有潜在益生功能芽孢杆菌的筛选及性质研究

试验旨在筛选1株发酵饲料用拮抗大肠杆菌、沙门氏菌、痢疾杆菌的益生芽孢杆菌菌株。通过十字划线法和平板扩散法进行拮抗大肠杆菌、沙门氏菌、痢疾杆菌菌株的筛选,将筛选出的具有较强抑菌活性的菌株进行菌种鉴定,研究其在不同pH值、温度、胆盐浓度下的生长势,以及代谢产物的酶活力。结果表明:筛选得到3株可同时拮抗大肠杆菌、沙门氏菌以及痢疾杆菌的芽孢杆菌菌株,分别为B-1d、B-2d、A14,经过形态学观察和16S rDNA序列分析初步确定B-1d为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),B-2d、A14为莫哈韦芽孢杆菌(Bacillus Mojave)。3株菌均可以在27～47℃正常繁殖,在pH值4.5～6.5之间能正常生长,在0.6 g/L的胆盐下仍可以生长,还代谢产生蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶。试验得到了3株具有潜在益生功能的发酵饲料用芽孢杆菌菌株。     

不同条件下巨大芽孢杆菌BM1259的生长特性研究

本试验以巨大芽孢杆菌BM1259为实验材料,探究巨大芽袍杆菌在不同环境条件下的生长情况。实验设4种不同条件:不同碳源、不同装液量、不同接菌量、不同pH值,每个处理重复三次,摇床培养48小时,在12小时、24小时、36小时分别用波长660nm的分光光度计记录数据,取数据的平均值。结果表明:葡萄糖和蔗糖对巨大芽孢杆菌的生长曲线没有明显影响;相同装液量中接菌量3p.EE大芽砲杆菌的生长曲线最快达到峰值;不同pH值中,pH为7时巨大芽孢杆菌的生长曲线最快达到峰值。     

刺参“腐皮综合征”拮抗菌CN101发酵条件的优化

探讨一株刺参"腐皮综合征"拮抗菌株CN101的发酵条件,为微生物饲料添加剂的研究奠定基础。本试验以菌体生物量OD_(600)值为检测依据,采用单因素试验和正交试验的试验方法对拮抗菌进行发酵培养基的筛选和发酵条件的优化试验。结果表明,培养基中的不同碳源、氮源、无机盐及其组合对拮抗菌株CN101的生长具有显著的影响,适宜的复合碳源为乳糖.蔗糖3.1、复合氮源为蛋白胨.豆饼粉1.2、无机盐组合为MgSO_4+MnSO_4+NaCl,复合氮源含量对菌体生长的影响最大;菌株CN101最适宜的发酵温度为25℃、初始pH值为7.5,供氧量对菌体生长的影响显著。拮抗菌CN101发酵的最佳培养基配方为乳糖15g、蔗糖5g、蛋白胨2.5g、豆饼粉5g、MgSO_(4)0.25g、MnSO_40.25g、NaCl0.25g、蒸馏水1000ml,最佳发酵条件为接种量1%、装瓶量10%～20%、温度25℃、初始pH值为7.5。研究结果为利用CN101菌株研发微生物饲料添加剂及生产应用提供了科学依据。     

不同碳氮源及其比例和培养基初始pH值对少孢节丛孢菌菌丝生长的影响

为研究不同碳源、氮源、碳氮比值及培养基初始pH值对少孢节丛孢菌菌丝生长的影响,采用10种碳源和8种氮源物质进行了试验,结果表明:在固体培养基上,少孢节丛孢菌菌丝生长的最适碳源和氮源分别是蔗糖和蛋白胨;在液体培养基内,最适碳源和氮源分别是红薯滤液和硫酸铵.当固体培养基中碳氮比为5:1、液体培养基中碳氮比为10:1时,茵丝生长最快.在初始pH值为3.7时,液体和固体培养基中的菌丝均不能生长;固体培养基中最适合的初始pH值范围是7.0～8.0,以pH值为7.5时菌丝的生长率最大;液体培养基中最适合的初始pH值范围是5.0～7.0,以pH值为7.0时菌丝生长最佳.说明不同的碳源、氮源、碳氮比及培养基初始pH值对少孢节丛孢菌菌丝生长率的影响是不同的.而且固体培养基和液体培养基中最适碳氮源、碳氮比、初始pH值也存在差异.     

不同氧需求特性菌株在模拟肠道厌氧条件下的增殖

文章旨在研究丁酸梭菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌3种典型的不同氧需求特性益生菌在模拟肠道条件下的增殖情况,为益生菌在动物生理条件下的应用提供试验依据。将冻存的丁酸梭菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌活化后,初始菌数分别为104、106、106 cfu/ml,接种至相应的培养基中,维持pH值,置于厌氧培养箱中进行培养,每隔特定时间测定一次菌数,直至菌数不再变化时停止检测,作菌株生长曲线。试验结果表明:枯草芽孢杆菌维持在106数量级,几乎不能生长繁殖;地衣芽孢杆菌由106数量级增殖到108数量级,在培养20 h时接近增殖高峰;丁酸梭菌由104数量级迅速增殖到108数量级,在培养12 h时接近增殖高峰。由试验可以得出:丁酸梭菌更适合动物肠道厌氧环境,可在动物肠道迅速大量增殖代谢,最大限度发挥益生作用。     

山羊支原体山羊肺炎亚种M1601生长曲线与pH值的测定

为了研究山羊支原体山羊肺炎亚种分离株M1601株在Thiaucourt肉汤培养基中的生长及繁殖特性。利用活菌计数方法对其在不同培养阶段的生长滴度及pH值进行了测定,并绘制了生长曲线。结果表明,传代稳定的M1601在Thiaucourt肉汤培养基中培养6～60h为对数生长期．pH值逐渐下降：培养60～72h进入稳定期．pH值降为6．27．培养72h进入衰亡期。这为山羊支原体山羊肺炎亚种培养特性研究和疫苗生产工艺研究提供了参考数据,以便在生产上更合理地应用其生长规律。     

支原体培养基质控菌株菌种代次与生长曲线研究

为探究支原体液体培养基和固体培养基质控菌猪鼻支原体生长规律,以活菌浓度,菌液pH值为指标,比较了不同代次与不同传代方式猪鼻支原体生长情况。结果显示:3%与10%浓度传代,0~48 h内,活菌浓度持续上升,菌液pH值持续下降,3%浓度传代的支原体生长较均匀,更利于菌种生长;1~5代支原体活菌浓度无显著差异;通过0.3 mL菌液加9.7 mL培养基传代,20组菌液平均浓度为(24.4±5.7)×10~8CFU/mL,通过0.9 mL菌液加29.1 mL培养基传代,菌液平均浓度为(7.2±2.1)×10~8CFU/mL,两种浓度差异极显著,前种传代方式更有利于支原体生长。本次试验为支原体液体和固体培养基的质控工作标准化提供参考。     

增殖纳豆芽孢杆菌的豆渣培养基的优化

以豆渣为基质增殖纳豆芽孢杆菌,考察了豆渣含量、NaCl含量、初始pH值和碳源等对纳豆芽孢杆菌生长的影响,采用正交实验设计优化了培养基组成。结果表明:发酵培养基的最佳组成(W/V)为12.5%豆渣、NaCl0.35%和麸皮0.3%,初始pH值6.0;用此培养基发酵,发酵液活菌数达到12.5×108CFU/mL。     

蒲翘散发酵条件的筛选及其产物对肉雏鸡生长性能的影响

为了研究蒲翘散最佳发酵条件及其发酵液对肉雏鸡生长性能的影响,采用单因素试验方法,选用枯草芽孢杆菌为发酵菌种,对蒲翘散发酵培养基pH值、温度、接菌量、转速以及发酵时间进行优化,再以该发酵液作为饲料添加剂,研究其对肉雏鸡生长性能的影响。结果显示,蒲翘散最佳发酵条件为:发酵培养基初始pH值5.2～5.4,温度35℃,接菌量2%,转速210 r/min,发酵时间24 h,发酵后总黄酮含量提高5.17%;与空白组相比,各试验组肉雏鸡平均日增重增加,料重比降低,脾脏和法氏囊指数增加。表明蒲翘散发酵液能提高肉雏鸡生长性能,促进免疫器官发育。     

枯草芽孢杆菌BHI344培养条件的优化

以牛肉膏蛋白胨培养基为初始培养基,探讨了不同培养时间、初始pH值、温度、接种量、碳源、氮源、无机盐源对枯草芽孢杆菌BHI344生长的影响,采用正交试验法优化了培养基的组成。结果表明:菌株BHI344产最大活菌数的培养条件为初始pH值7.6、接种量5%(V/V)、培养温度35℃、培养时间16h、牛肉膏2.0%(W/V)、葡萄糖1.5%(W/V)、氯化钙0.3%(W/V);以此条件培养,BHI344的活菌数能达到2.62×109CFU/mL。     

枯草芽孢杆菌-MBS的培养条件优化研究

为了给枯草芽孢杆菌-MBS的标准化生长提供依据,研究应用单因子优化试验和正交试验对枯草芽孢杆菌-MBS的培养条件进行初步优化。结果表明:枯草芽孢杆菌-MBS在改良BPG培养基中生长良好,优化后的培养基成分为葡萄糖3.8g、蛋白胨3.8g、牛肉浸膏3.8g、淀粉2.3g、NaCl3.3g、KH2PO43.3g;生长最佳条件是温度为42℃、培养时间为18h、起始pH值为8.0、接种量为1.5%、转速为240r/min,此时OD610值能达到1.886,菌数能达到2.83×1010个/mL。     

TS-01芽孢杆菌对低pH耐受性研究

试验对TS-01芽孢杆菌在不同pH培养基条件下,进行了耐酸性研究。结果表明,在pH超过4.0的环境中,TS-01芽孢杆菌的活菌数量基本不变,可保持较高的存活率。     

枯草芽孢杆菌的培养

细菌固体培养具有对设备条件要求低、耗能低、细菌繁殖量高的特点。枯草芽孢杆菌作为微生物饲料添加剂具有广泛的应用价值。本实验通过计数细菌的繁殖数量 ,探讨了最适于枯草芽孢杆菌生长的固体培养基的组成和收获时间。1　材料1 .1　菌种　枯草芽孢杆菌菌种购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。1 .2　培养基　营养琼脂培养基、营养肉汤培养基、固体培养基 ,全都自行制做。2　方法2 .1　菌种培养　将芽孢杆菌菌种在无菌条件下接种于营养琼脂培养基斜面上 ,然后在恒温箱内 37℃培养 2 4 h,即可见到一层白色圆整、边缘光滑的枯草芽孢杆菌菌落…     

地衣芽孢杆菌M109高密度发酵条件的优化

试验旨在筛选一株地衣芽孢杆菌M109(Bacillus licheniformis M109)进行培养基和发酵条件的优化。采用单因素试验方法筛选出最佳碳源和氮源的培养基,并利用正交试验方法确定其最佳的碳氮比。为了继续提高地衣芽孢杆菌M109的发酵水平,研究其在发酵过程中的生长曲线、pH和溶氧(DO)水平的变化曲线,通过对发酵过程中生长参数的测定,优化了地衣芽孢杆菌M109最佳的接种量和最适pH。结果发现,溶氧限制是地衣芽孢杆菌M109生长的关键因素;在限定通风量的条件下,通过调节搅拌转速的方法来提高培养基中的溶氧水平,提高发酵密度;通过流加培养基的方法也能提高地衣芽孢杆菌M109的发酵水平。因此,通过对培养基和发酵条件的优化,使地衣芽孢杆菌M109的发酵水平由最初的1.0×10⁹ CFU/mL提高到1.2×10¹⁰ CFU/mL,芽孢形成率为88%。     

一株香蕉枯萎病拮抗菌的鉴定及香蕉组培袋装苗防病试验

采用平板对峙法从海南省土壤中分离到5株对香蕉枯萎病有较强拮抗作用的芽孢杆菌,经形态特征及16S rDNA序列将菌株S40鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。菌株S40的拮抗试验表明,不同浓度的发酵滤液均可抑制病原菌菌丝生长和孢子的萌发和生长。组培袋装苗实验表明拮抗菌可明显推迟其发病和死亡时间,三种不同处理的相对防治效果分别为71.2%、83.3%和92.4%。     

产β-甘露聚糖酶环状芽孢杆菌发酵罐放大工艺研究

本文以环状芽孢杆菌WXY-100为研究对象,研究了该菌在50 L全自动发酵罐中更换C源、诱导剂量、纯氧的摄入、pH值的变化、补料、下罐时间等条件对发酵过程的影响。结果表明,发酵培养基的碳源改为甘油,在对数生长期末加入0.5%的诱导剂,对数生长期后半段摄入纯氧,对数生长期末(诱导点)将pH值从7.0升高为7.5,酶活相对较高;并在诱导后4～5 h为最佳下罐时间点;而补料的效果不明显。     

复合益生菌对大肠杆菌的抑制作用

面对抗生素作为饲料添加剂的毒副作用和禁用问题,研究高效复合益生菌来替代抗生素已变得越来越重要。为了获得抑制大肠杆菌生长的高效益生菌组合,本研究首先选用3种枯草芽孢杆菌(芽孢菌-1、芽孢菌-2、芽孢菌-3)进行组合,获得最佳配比后再与乳酸杆菌和酵母菌进行组合。通过测定菌液的pH值及大肠杆菌数来判断不同配比的复合菌对大肠杆菌抑制作用的强弱。结果表明,芽孢菌组合(芽孢菌-2和芽孢菌-3的比例为1∶1)、乳酸杆菌、酵母菌按0∶1∶1、1∶3∶0、2∶2∶3和2∶3∶2来制备复合菌剂时,对大肠杆菌的抑制效果最好,而且优于抗生素。而没有添加乳酸杆菌的几组复合菌对大肠杆菌的抑制效果明显较弱,说明乳酸杆菌的抑菌作用较好。     

蜡样芽孢杆菌分泌超氧化物歧化酶特性的研究

试验利用氮兰四唑(NBT)比色法测超氧化物歧化酶(SOD)活性,对一株用于生产的蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus,简称B.C菌)的SOD分泌特性做了初步研究。结果表明:培养温度、时间及培养基pH值、盐浓度对B.C菌分泌SOD都有不同程度的影响。菌株的繁殖速度随时间推移而变化,呈现先升后降的趋势,24h达到繁殖旺盛期;不同培养时间,菌体分泌SOD的活性不同。随培养时间延长,胞内酶活性表现出先升后降的变化趋势,20h时活性最高;随培养温度升高,菌株分泌SOD活性表现出先升后降的趋势;30℃条件下培养时,胞外胞内及总酶活性均为最高;培养基pH值在5.0～7.0范围内时,菌株胞内胞外及总酶活性变化不大,均处于较高值;培养基盐浓度为2%时,胞外酶活性最高,为1%时胞内酶及总酶活活性最高。     

1株牛蛙源贝莱斯芽孢杆菌的分离、鉴定及其生物学特性分析

试验从健康牛蛙（Rana catesbiana）肠道内容物中分离出12株内源菌,筛选对牛蛙病源性嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）、铜绿假单胞菌（seudomonas aeruginosa）的拮抗菌株后对其生物学特性进行分析,发现其中1株菌对蛙源嗜水气单胞菌、铜绿假单胞抑制效果最好,抑菌圈直径分别为12 mm和14 mm。通过革兰氏染色镜检、生理生化、16S rRNA鉴定、药物敏感性、生物学特性如菌液接种量、培养温度、转速、初始pH、生长特性等生物学特性进行分析。确定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）,并取名为G1。此菌株在LB培养基上菌落呈乳白色,向上凸起,表面湿润、光滑、不透明、有黏液性,是革兰氏阳性菌。菌液最适接种量为3%、培养温度为30℃、培养转速为180 r/min、初始pH为7和培养时间为18 h。