小麦体细胞胚培养的研究进展

禾本科植物主要是通过体细胞胚发生途径再生植株,体细胞胚的研究对植物基因工程及农作物品种改良等都具有重大意义.而小麦作为人类的主要粮食作物之一,其高效再生体系建立的研究显得尤其重要.研究不同激素、不同有机附加物对小麦体细胞胚发生的影响,为建立良好的小麦体细胞无性系提供了理论依据.     

油棕体细胞胚的诱导和次生胚的增殖研究

油棕体细胞胚的诱导是油棕体胚发生技术体系中最关键的培养过程,通过建立油棕次生胚增殖培养方法可有效地实现油棕组培苗快速的增殖繁育。本研究通过系统的对油棕体细胞胚发生及次生胚再生途径中若干影响因子的比较研究,建立油棕体细胞胚和次生胚再生体系。结果表明:油棕体细胞胚再生体系在不同基因型的油棕品种内诱导率存在较大差别,其中植物外源激素二氯苯氧乙酸(2,4-D)对油棕胚诱导效果较好;油棕次生胚增殖在不同基因型的油棕品种内差异不显著,木本植物培养基(WPM)在油棕次生胚增殖中培养效果最好。     

植物体细胞胚发生的研究进展

体细胞胚发生是植物界的一个普遍现象,具有广阔的应用前景和巨大的潜在经济价值。从体胚发生的形态学研究、内源激素变化、抗氧化物酶活性变化、蛋白质和糖代谢以及基因表达等方面进行了综述,以期为进一步深入研究体细胞胚的发生发育规律及植物高效再生体系的建立提供参考。     

体细胞胚发生与遗传变异的研究进展

文章针对体细胞胚发生与遗传变异的国内研究现状进行综合阐述。重点讨论了植物体细胞胚发生过程中多糖、蛋白质、核酸的生理生化变化。植物外植体、激素、培养基对体细胞胚发生产生的影响。以及体细胞遗传变异的机理,包括变异类型和主导因素。     

高等植物体细胞胚胎发生的研究进展

植物体细胞胚胎发生是一个复杂的发育过程,受到多种内、外因素的影响与调节,研究体细胞胚胎发生诱导与调节是一个基本的理论问题。通过介绍高等植物体细胞胚胎发生过程中生长素对胚胎发育的影响以及体胚发生中的基因表达,展示体胚发生已经成为研究植物胚胎发生发育的一条重要途径。同时体胚发生中分离到的基因研究为理解细胞分化与发育,形态发生与建成以及植物合子胚的发育提供了重要参考。     

影响胡萝卜体细胞胚建成关键因素的研究进展

利用体细胞胚对胡萝卜进行离体再生,具有数量多、速度快、成苗率高、染色体稳定等优点。影响胡萝卜体细胞胚发生的因素很多,主要集中于基因型、外植体、激素配比、基本培养基等方面。对影响胡萝卜体细胞胚建成关键因素进行综述,以为提高胡萝卜体细胞胚的诱导频率、建立高效的胡萝卜离体再生体系和以胡萝卜为受体的植物遗传转化体系提供参考。     

魔芋再生植株形态发生途径的细胞组织学观察

本研究发现魔芋再生植株的形态发生途径除愈伤组织发生不定芽生根外，还有愈伤组织发生不定根再生芽、发生小块茎出芽、形成体细胞胚和块茎休眠芽萌发直接成苗等４种．还发现魔芋体细胞胚的发生不同于植物组织培养中体细胞胚形成的一般情况，它有时发生在芽苞片切口处和愈伤组织表面，有时发生在愈伤组织内部，前者由多细胞的拟分生组织发育而成，后者起源于单个胚原始细胞．胚原细胞分裂产生二细胞原胚，之后无序分裂发育形成具有明显珠芽结构的块茎原始体．     

云杉属树种体细胞胚成熟影响因素研究进展

云杉属树种体细胞胚胎发生及植株再生能力受多种因素的影响。体细胞胚萌发困难的一个重要原因就是体细胞胚没有经过一个完整的成熟过程。体细胞胚的成熟受到多方面因素的影响,包括物理因子、糖类、PEG、基因型、植物生长调节剂、成熟时间和各种离子等因素。综述了云杉属树种体细胞胚成熟影响因素的研究进展,发现只有云杉属树种体细胞胚真正成熟并同步萌发,才可以利用云杉属树种体细胞胚进行工厂化育苗。     

龙眼体细胞胚发生早期的蛋白质组学

【目的】通过龙眼（Dimocarpus longan Lour.）体细胞胚发生早期5个阶段的蛋白质组学研究,为植物胚胎发育相关蛋白基因分离和植物体细胞胚发生相关机制等的深入研究奠定基础。【方法】利用已建立的龙眼体细胞胚发生再生系统,经同步化培养获得龙眼体细胞胚发生早期5个阶段胚性培养物,并采用双向电泳和质谱技术对龙眼体细胞胚发生早期的蛋白质组变化进行分析。【结果】龙眼体细胞胚发生早期5个阶段的蛋白质2D表达谱可检测到1 203-1 798个蛋白点,其在龙眼体细胞胚发生早期各阶段大部分具有阶段差异表达特性,有小部分是阶段特异表达,根据其蛋白数目、表达丰度、分子量和等电点等变化,确定了龙眼体细胞胚发生早期的ECII到CpECGE阶段是体细胞胚发生早期的关键性阶段。成功鉴定45个差异蛋白,成功率为37%,其中以能量、碳水化合物代谢相关蛋白和氧化胁迫反应相关蛋白占多数,分别为22%和27%;通过其功能分析可以推断出,龙眼体细胞胚发生早期,能量和糖代谢是体细胞胚发生的基础,而氧化胁迫反应是体细胞胚发生的先决条件,并通过参与细胞骨架的稳定、氮代谢、信号转导、基因调控、蛋白质的翻译加工修饰和定位等功能的蛋白,构成一个庞大的龙眼体细胞胚发生蛋白质调控网络系统,保证体细胞胚的正常发育。【结论】对龙眼体细胞胚发生早期过程的蛋白质表达变化有了较全面的了解,蛋白质表达数量呈先减低后升高再减低的趋势,龙眼体细胞胚发生早期能量和糖代谢旺盛,氧化胁迫反应相关蛋白对体细胞胚早期的发生和发育有重要的调控作用。     

中国沙棘体细胞胚胎间接发生与植株再生

以中国沙棘组培苗茎尖为外植体,在1/4 MS基本培养基上,对愈伤组织、胚性愈伤组织及体细胞胚胎进行诱导,探讨植物生长调节剂配比对中国沙棘愈伤组织、胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生的影响。结果表明:在KT 1.0 mg/L + NAA 0.3 mg/L的最佳组合中,暗培养20 d后,愈伤组织的诱导率达到90.10%;暗培养30 d后,胚性愈伤组织的诱导率达到77.67%;将胚性愈伤组织转移到新鲜诱导培养基上,光培养20 d,平均体细胞胚发生数达到15.48。为了得到完整的再生小植株,将胚状体转移到不含任何生长激素的体细胞胚发育及植株再生培养基上,分析了KT和白砂糖不同浓度的组合对小植株再生的影响。结果发现:WPM + KT 0.05 mg/L + 白砂糖 20 g/L + 琼脂粉 6.5 g/L + CH 0.5 g/L处理上的植株再生率达到60.30%。该研究建立起了完整的中国沙棘体细胞胚胎间接发生的再生体系。      

影响棉花体细胞胚胎发生和植株再生的关键因素分析

[目的]棉花体细胞胚胎发生是转基因棉花新品种培育的重要条件,由于棉花不同品种中的基因型差别,棉花胚胎发生率及植株再生率较低.分析影响棉花体胚的成熟和萌发、体胚发生同步化控制、减少褐化率和畸形胚比例,以及提高植株再生率等主要因素,为解决棉花组织培养的关键问题提供参考.[方法]收集近年来棉花体细胞胚发生和应用研究进行总结与分析.[结果]分析了影响棉花体细胞胚胎发生和植株再生过程的主要限制性因素.[结论]明确了存在的主要问题及给出相应对策,为深入探讨棉花品种的体细胞胚的发生发育规律及高效组织培养体系的建立提供科学依据.     

Effect of Different Hormone Combinations on Somatic Embryogenesis in Cotton Cultivar Xinluzao 33(Gossypium hirsutum L.)

[Objective] This study was conducted to evaluate the efficiency of somatic embryogenesis and plant regeneration for an upland cotton cultivar Xinluzao33 under the induction of different hormone combinations and thus to determine the optimal hormone combination. [Method] Calli of Xinluzao33(Gossypium hirsutum L.) were induced from seedling hypocotyl tissue by a range of DK and BK combinations. Embryogenic calli and embryos were induced on callus-inducing medium(CIM) without any hormones. Callus appearance and quality were compared to determine which medium was the optimal for callus induction. Embryogenesis ratio was calculated to determine which medium was the best for somatic embryogenesis and plant regeneration. [Result] Callus induction rate was 100% in all the 12 hormone combinations.The calli were yellow or kelly, and their texture was loose or soft under low concentrations of DK combinations, green or white, variably compact under high concentrations of DK combinations. The calli induced by BK combinations were kelly or green, covering creamy white substance. The best medium for callus induction was DK6(0.05 mg/L 2, 4-D and 0.10 mg/L KT). Embryogenic calli were successfully induced from all the combinations. The efficiency of embryogenic callus induction,embryogenesis, and plantlet regeneration were significantly different among the 12 combinations. The result showed that the embryogenesis ratio was the highest in BK3 combination(0.50 mg/L IBA and 0.50 mg/L KT), 72.86% of embryogenic calli differentiated into somatic embryos after being cultured on CIM for 80 d, and80.93% of the somatic embryos finally regenerated into plants on SEM(somatic embryo induction medium). [Conclusion] These results indicate that hormone combination BK3(0.50 mg/LIBA and 0.50 mg/L KT) was the best medium for somatic embryogenesis and plant regeneration from Xinluzao33.     

不同棉花愈伤组织状态与胚胎发生及其植株再生的关系

研究结果表明,能够分化出体细胞胚胎并再生成植株的4种愈伤组织状态为:直接产生胚性愈伤组织或体细胞胚胎簇状胚状体、淡黄色且疏松结构胚性愈伤组织、颗粒状疏松结构愈伤组织及褐化、生长缓慢的愈伤组织;难以分化出体细胞胚胎的4种愈伤组织状态为:易发生体细胞胚再愈伤化的愈伤组织、翠绿色表面有硬块状的愈伤组织、易诱导出胚性愈伤组织但不分化成苗的胚性愈伤组织、疯长型愈伤组织。     

棉花体细胞培养中染色体的变异

以陆地棉体细胞培养获得的胚性愈伤、体细胞胚和再生植株的根尖为材料,用饱和对氯二苯预处理,固定、酸解、染色,进行染色体制片,观察分析棉花体细胞培养中染色体数目的变异。结果表明:继代培养14 d的胚性愈伤组织在饱和对二氯苯处理3.5 h后制成的染色体涂片具有很好的观察效果;染色体数目变异主要集中在偏向于52条染色体,随着体细胞胚的发生、成熟、植株再生,具有正常染色体数细胞的比例逐渐增加,推测具有非正常染色体的细胞在体细胞胚的发育及植株再生过程中丧失了植株的分化能力。     

葡萄未成熟胚诱导体细胞胚发生和植株再生与遗传鉴定

以二倍体和四倍体葡萄杂交获得的未成熟合子胚为材料,诱导体细胞胚发生。采用的初生胚诱导培养基(SE培养基)为:NN69+1.80 mg.L-1NAA+0.4 mg.L-1水解酪蛋白+2 g.L-1活性炭+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂;次生胚诱导培养基分别为:3/4MS+0.35 mg.L-1IBA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂(扩繁培养基)和MS+1.5 g.L-16-BA+0.2 g.L-1IBA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂(胚状体萌发培养基)。结果表明:初生胚诱导率为11.11%和16.67%,体细胞胚在扩繁培养基上再生植株。利用流式细胞仪和SSR标记检测源自同一未成熟合子胚(胚珠)的不同株系的遗传稳定性,结果显示,所测植株均为三倍体,且都来自杂交所得的未成熟合子胚。本研究所建立的体细胞胚诱导方法及遗传稳定性检测技术,能够为植物材料保存、扩繁,转基因应用和研究植物发育及极性建成等提供途径。     

Conservation of Iris bismarckiana Regel （Iridaceae） Using Plant Regeneration via Somatic Embryogenesis

In an attempt to propagate and conserve the rare, showy bulbous plants of Iris bismarckiana, newly recorded to the flora of Jordan and to contribute to the conservation the wild lris species in Jordan, a simple rapid, time consuming protocol has been developed using plant regeneration via somatic embryogenesis. Somatic embryogenesis was induced in zygotic embryo culture on Murashige and Skoog （MS） medium supplemented with 2,4-dichlorophenoxy acetic acid （8 mg/L） as the sole plant growth regulator, where both embryogenesis calli and somatic embryos were induced. Separation of embryos from embryo clusters was necessary to enhance the frequency of germination. Germination was stimulated by separation of embryos successfully from embryo clusters and transferred onto fresh MS medium. Data obtained were analyzed as a complete random design with three replications. Calli fragments that were transferred to embryogenesis induction medium （EIM） produced white embryo-like globular structures within two weeks. Within three more weeks, clusters of structures at various stages of development could be found on the same callus. The applied technique is rewarding and encouraging for further research on the endangered wild species of Iris in Jordan.     

碳源对山核桃体细胞胚发生和植株再生的影响

以山核桃Carya cathayensis花后10～12周的幼胚为外植体,建立体胚发生及再生体系,同时分别对山核桃胚性愈合组织和体细胞胚诱导的碳源种类和质量浓度进行了比较分析。结果表明：接种在含葡萄糖培养基中的山核桃胚性愈合组织诱导率显著高于蔗糖、海藻糖和麦芽糖,诱导率达33.3%;在培养基中添加20 g.L-1葡萄糖,胚性愈合组织诱导率最高,达50.0%,显著高于其他处理。蔗糖为山核桃体细胞胚诱导的最佳碳源种类,体细胞胚诱导率显著高于葡萄糖、海藻糖和麦芽糖,诱导率达23.3%;在培养基中添加45 g.L-1蔗糖,体细胞胚诱导率最高,达30.1%,显著高于其他处理。体胚在WPM培养基（木本植物用培养基）附加5 g.L-1蔗糖的培养基上萌发率达20%,显著高于附加0,10,15,20,25,30 g.L-1蔗糖的体胚萌发率。     

蝴蝶兰组织培养与基因工程育种研究进展

综述了利用种子、花梗芽作为外植体通过愈伤组织、体细胞胚P、LB、原生质体途径再生植株技术以及基因枪和农杆菌介导的遗传转化体系建立的研究成果。