Ghrelin对大鼠胃蛋白酶和H+-K+-ATP酶活性的体外作用

从断奶大鼠中获得新鲜的胃粘膜,分离培养胃粘膜上皮细胞,培养30 h后,试验组换为分别含有1×10^-4、1×10^-3、1×10^-2和1×10^-1μmol/L生长素（Ghrelin）的新鲜培养液,对照组换为不含Ghrelin的正常新鲜培养液。继续培养4 h,收集培养液和细胞,分别测定培养液中胃蛋白酶活性和细胞中H^＋-K^＋-ATPase活性。试验结果表明：1×10^-3μmol/L的Ghrelin可显著提高胃蛋白酶的活性（P〈0.05）,1×10^-4、1×10^-3和1×10^-2μmol/L的Ghrelin显著提高胃黏膜上皮细胞中H^＋-K^＋-ATPase的活性（P〈0.05）。表明Ghrelin体外作用于胃粘膜上皮细胞可刺激胃蛋白酶和胃酸的分泌。     

饲料磷脂水平对巴丁鱼(Pangasius sutchi)鳃Na+-K+-ATPase 活性及细胞膜脂肪酸组成的影响

试验旨在研究饲料磷脂水平对巴丁鱼(Pangasius sutchi)鳃中的Na+-K+-ATPase活性及细胞膜脂肪酸组成的影响。对巴丁鱼(初始体重约1.45±0.08 g.尾-1)分别投喂5组饲料,各组饲料磷脂添加水平为0%(PL0组)、1%(PL1组)、2%(PL2组)、3%(PL3组)和4%(PL4组),饲养56 d。结果显示,鱼鳃中的Na+-K+-ATPase活性随着饲料磷脂水平的升高而下降(P<0.05);鳃膜脂肪酸组成发生显著变化:饱和脂肪酸(saturated fatty acids,SFA)含量以对照组(PL0组)的最高,与PL2、PL3组差异显著(P<0.05);PL0组的单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acids,MUFA)含量显著高于其余4组(P<0.05);PL3组的多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFA)含量最高,与PL0、PL1组有显著差异(P<0.05);PL0组的高不饱和脂肪酸(highly unsaturated fatty acids,HUFA)含量显著低于其他添加了磷脂的各试验组(P<0.05)。结果表明,饲料磷脂水平对巴丁鱼鳃Na+-K+-ATPase活性有一定影响,未添加磷脂的饲养条件下鳃Na+-K+-ATPase表现出较强的补偿能力,以维持稳定的生理水平及正常的基础代谢;巴丁鱼鳃细胞膜中的∑HUFA和∑PUFA含量显著高于对照组,有助于细胞膜更好地执行和完成正常生理功能。     

家蚕氟中毒对雌雄个体Na -K -ATPase活性的影响

为探明家蚕的耐氟性机制以及耐氟性在不同性别蚕体间的差异,以家蚕耐氟品种T6和氟化物敏感品种734为材料,从5龄起蚕开始分雌、雄喂食清水和经200mg/kg NaF浸泡的新鲜桑叶,检测家蚕头部酶液中Na+-K+-ATPase的活性变化,研究发现:敏感品系734各组酶活随处理天数的不同而不同,对照组在第3天酶活达到最低,而添氟组酶活则在第2天出现最低值,从第3天开始添氟组酶活均高于对照组;雌、雄间酶活亦有差异,734雌蚕对照组各天的酶活均高于雄蚕对照组,平均活力为雄蚕的1.6倍,而添氟组雄蚕的Na+-K+-ATPase平均酶活为雌蚕的1.11倍.耐氟品种T6各组酶活及其随处理天数的变化趋势均与对照组较为一致;雌、雄间酶活都有差异,雌蚕对照组Na+-K+-ATPase平均酶活是雄蚕对照组的1.11倍,雌蚕添氟组Na+-K+-ATPase平均酶活是雄蚕添氟组的1.10倍.推测氟化物处理后耐氟家蚕品种仍然能够保持Na+-K+-ATPase活力水平,从而表现对氟化物的耐受性;添氟前后雌雄间的Na+-K+-ATPase活性差异在2个蚕品种间有所不同,可能暗示T6耐氟性的产生与雌蚕的解毒能力增强有关.     

中药保肝解毒汤对实验性铜中毒欧鳗鳃、肝、肾组织中Na+-K+-ATPase活性的影响

应用生物化学方法研究了由茵陈、龙胆、甘草、大黄及栀子组成的中药保肝解毒汤对铜中毒欧鳗鳃、肝、肾组织中Na -K -ATPase活性的影响。健康组欧鳗养于清水中,4个处理组先暴露于0.12mg.L-1Cu2 溶液4d,然后以其中一组作为阳性空白对照组不治疗,其余3组为中药治疗组,即保肝解毒汤治疗低剂量组(200mg.L-1)、保肝解毒汤治疗高剂量组(400mg.L-1)和降酶灵(所含成分为五味子)治疗对照组(100mg.L-1)。结果显示(:1)健康欧鳗鳃、肾组织中Na -K -ATPase活性分别是肝的3.61倍和3.50倍;(2)铜中毒可致鳃、肝、肾组织中Na -K -ATPase活性分别下降5.09%、85.98%和30.15%;(3)保肝解毒汤对铜中毒欧鳗肝组织中Na -K -ATPase活性的恢复效果最明显,肾组织次之,鳃组织则效果不明显;(4)3个治疗组中以治疗低剂量组和治疗对照组升高Na -K -ATPase活性的效果最为显著,治疗高剂量组效果较差。表明中药保肝解毒汤对铜中毒欧鳗肝、肾组织中Na -K -ATPase活性具有恢复作用,但剂量对其药效有影响。     

植物液泡膜H+-ATPase和H+-PPase研究进展

植物液泡膜 ATP 酶（H+-ATPase）和液泡膜焦磷酸酶（H+-PPase）是液泡膜上两个含量丰富的蛋白,其功能的正常发挥在植物生长发育过程中扮演着重要角色。液泡膜 H+-ATPase 和 H+-PPase 水解底物释放能量,同时产生大量 H+由胞质泵入液泡内,形成细胞质与液泡间的 H+ 电化学势梯度,为多种溶质分子的跨膜主动运输提供驱动力,维持细胞内的离子稳态和渗透平衡,为细胞内各种生理生化反应的正常运行提供保障。此外,液泡作为植物细胞离子养分的储存库,其膜上 H+-ATPase 和 H+-PPase 能够通过改变其活性来调控硝酸盐在胞质和液泡间的分配比例,进而影响植物的氮素利用效率。在逆境胁迫条件下,提高液泡膜 H+-ATPase 和 H+-PPase 的活性有利于提高植株对逆境的适应能力,从而减少逆境胁迫对植株生长发育造成的不利影响。介绍了植物液泡膜 H+-ATPase 和 H+-PPase 的结构特征及其在植物生长发育过程中的生理功能,并对其在植物抵御非生物逆境胁迫过程中发挥的重要作用进行阐述,为进一步提高作物的氮素利用率及逆境适应能力提供方向。     

盐胁迫下植物质膜和液泡膜H+-ATPase活性的研究进展

综述了植物质膜和液泡膜H+-ATPase的结构特征、生理功能和活性变化的研究进展。     

LAS、Cd~(2+)污染对鲫鱼鳃、肝脏SOD、Na~+-K~+-ATPase活性的影响

以鲫鱼为实验对象,采用不同质量浓度的LAS和Cd2+进行暴露实验,研究亚急性条件下,LAS、Cd2+及其复合污染对鲫鱼鳃、肝脏SOD、Na+-K+-ATPase活性的影响.结果表明:在单一LAS、Cd2+处理条件下,随LAS、Cd2+质量浓度增加,鲫鱼鳃、肝脏的SOD、Na+-K+-ATPase活性与对照组相比均呈浓度-效应关系;复合处理下,污染物质量浓度的不同组合对鲫鱼鳃、肝脏的SOD、Na+-K+-ATPase活性影响不同,其中当Cd2+质量浓度为0.4mg.L-1时,肝脏的SOD、Na+-K+-ATPase活性均随LAS质量浓度的增加而降低,各复合组的SOD、Na+-K+-ATPase活性均显著低于相应质量浓度的单一Cd2+处理组(P<0.05);2.0 mg.L-1Cd2+与5.0 mg.L-1LAS复合组鲫鱼鳃SOD、Na+-K+-ATPase活性、肝脏SOD活性显著低于相应质量浓度的单一Cd2+、LAS处理组(P<0.05).在一定质量浓度的组合下,LAS与Cd2+复合污染在SOD、Na+-K+-ATPase水平上表现为一定的协同作用.     

女贞子提取物对大鼠不同组织Na~+,K~+-ATPase活性的影响

通过女贞子提取物对大强度耐力训练大鼠不同组织Na+,K+-ATPase活性的影响,探讨女贞子提取物对大鼠运动能力的作用机制。以24只SD大鼠随机分为安静对照组、运动对照组和运动+女贞子组,每组8只。运动对照组进行6周大强度跑台训练,运动+女贞子组除大强度跑台训练外,每天灌服2 mL浓度为400 mg.kg-1女贞子提取物。安静对照组和运动对照组灌胃同体积0.5%Tween-80溶液。6周后安静对照组在安静时、运动对照组和运动+女贞子组进行一次力竭性运动后取材,测定不同组织Na+,K+-ATPase活性。结果:运动对照组和运动+女贞子组大鼠各组织Na+,K+-ATPase活性均显著低于安静对照组,运动+女贞子组大鼠不同组织Na+,K+-ATPase活性显著高于运动对照组;运动+女贞子组大鼠力竭运动时间比运动对照组延长23.09%。结论:补充女贞子提取物可以调节大鼠不同组织Na+,K+-ATPase活性,增加Na+,K+-ATPase活性,延长运动至疲劳的时间。     

不同光强下氮素形态对番茄根系质膜H+-ATPase和氧化还原系统活性的影响

对不同光强下氮素形态对番茄(Lycopersicon esculentum Mill)根系若干生理生化指标的影响进行了研究.结果表明,在强光下供应铵态氮植株比供应硝态氮植株的根系生长量和根系活力显著下降,而在弱光下则差异不显著.供应铵态氮植株根系质膜H+-ATPase和氧化还原系统活性显著高于供应硝态氮植株,且强光下差异更大,根系质子分泌速率也相应增加.     

拟南芥体内硝酸盐积累差异与细胞膜H+-ATPase的关系

以野生型拟南芥(WT)和叶柄硝酸盐积累减少的拟南芥突变体atnar1.4为材料,研究了叶柄与叶片硝酸盐的积累及细胞膜H+-ATPase.采用两相法分离了2种材料细胞膜并测定了细胞膜H+-ATPase活性,通过RT-PCR分析了WT与atnrt1.4叶柄及叶片中各个细胞膜H+-ATPase基因的表达,并采用Western blot分析了WT与atnrt1.4叶柄及叶片细胞膜上H+-ATPase的蛋白浓度.结果显示:atnrt1.4叶柄硝酸盐积累显著低于WT叶柄,仅为WT的58.6％;atnrt1.4叶柄中细胞膜H+-ATPase基因AHA3、AHA5、AHA10和AHA11的表达比WT显著降低;atnrt1.4叶柄细胞膜H+-ATPase蛋白浓度也显著低于WT叶柄.WT叶柄硝酸盐积累显著高于叶片,相应的细胞膜H+-ATPase的水解活性也显著高于叶片.上述研究表明:atnrt1.4叶柄硝酸盐积累减少导致其细胞膜H+-ATPase活性降低;拟南芥体内硝酸盐积累差异与细胞膜H+-ATPase活性有关.     

钾、钠离子与液泡膜H~+-ATPase研究进展

介绍了植物液泡膜H+-ATPase分子结构和功能,尤其重点阐述了K+、Na+与植物液泡膜H+-ATPase活性的关系。     

丁香酚对鲤鱼脑和脊髓中钠钾泵活性的抑制效果

为探明钠钾泵(Na+-K+-ATP酶)是否为丁香酚作用的靶位之一,以了解丁香酚的作用机制和进一步开发利用提供参考,将体重900~1 000g、体长40~45cm的鲤鱼随机分为对照组(10尾,不含丁香酚乳剂的水溶液)和丁香酚处理组(30尾),测定其不同麻醉时期(诱导期、麻醉期和恢复期)鲤鱼大脑、中脑、间脑、小脑、延脑和脊髓中Na+-K+-ATP酶的活性。结果表明:经丁香酚麻醉后不同麻醉时期鲤鱼各脑和脊髓中Na+-K+-ATP酶活性均不同程度下降,丁香酚的抑制作用随麻醉程度加深而加强,在麻醉期时抑制作用最强,与对照组比,丁香酚处理组各脑和脊髓中酶活性在麻醉期性均极显著下降(P0.01);与麻醉期比,恢复期除间脑和延脑外,其余各脑组织和脊髓中酶活性均呈极显著升高(P0.01)。在麻醉的各时期丁香酚对鲤鱼各脑和脊髓中的Na+-K+-ATP酶有明显的抑制作用,对鲤鱼的麻醉作用可能与其抑制脑Na+-K+-ATP酶的活性有关。     

鹿特异性复合麻醉剂对大鼠大脑皮层Na~+-K~+-ATP酶活性的影响

通过测定鹿特异性复合麻醉剂麻醉下大鼠大脑皮层Na~+-K~+-ATP酶活性的变化,探讨了其麻醉与大鼠大脑皮层Na~+-K~+-ATP酶的关系。将32只纯种SD大鼠随机分成对照组、诱导组、麻醉组和催醒组,对照组大鼠按30 m L/kg体重腹腔注射生理盐水,其余各组按30 mg/kg体重腹腔注射鹿特异性复合麻醉剂,于各时间点冰上采集各组大鼠大脑皮层,采用比色法测定其Na~+-K~+-ATP酶活性。结果显示,药物作用后大鼠大脑皮层Na~+-K~+-ATP酶活性显著低于对照组(P0.05或P0.01)。该结果提示大鼠大脑皮层Na~+-K~+-ATP酶活性变化与鹿特异性复合麻醉剂的麻醉作用具有相关性。     

半定量RT-PCR法检测低磷胁迫下大豆根系质膜H+-ATPase基因的表达

试验以大豆为材料,采用水培方法,以β-微管蛋白基因为内参基因,用半定量逆转录聚合酶链式反应(se-mi RT-PCR法)检测在低磷胁迫下大豆根系质膜H+-ATPase基因表达量的变化,以期建立适于检测该基因表达的semi RT-PCR试验体系。结果表明:在低磷胁迫2 h时,与对照相比基因表达量有所增加,在4 h时相对表达量达到最大,6 h略有下降。这表明大豆根系质膜H+-ATPase基因表达量的增加可能与适应低磷胁迫的逆境有关,半定量RT-PCR法可以用来检测特定基因在不同条件下的表达量。     

AMP和MH对菊花绿蕾期叶片叶绿体Ca~(2+)-ATPase、Mg~(2+)-ATPase及超微结构的影响

在秋菊姹紫嫣红品种的营养生长期,以氨卞西林钠(AMP,1 000mg/L)和不同浓度马来酰肼(MH 100mg/L、200mg/L和300mg/L)的水溶液进行叶面喷雾处理,初步研究了AMP和MH对菊花绿蕾期叶片光合速率、叶绿体Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase活性和叶绿体超微结构的影响。结果表明,AMP处理使菊花绿蕾期叶片上述生理指标均明显高于对照,叶绿体片层结构数量和密集程度明显增加,嗜锇颗粒减少。MH处理叶绿体Ca2+-ATPase和Mg2+-ATPase活性比对照明显降低,且随处理升高呈先降后升的变化趋势;在100~200mg/L MH浓度范围内,光合速率和叶绿体片层结构数量和密集程度均高于对照,嗜锇颗粒减少,且处理效应随处理浓度升高而有所减弱,在300mg/L处理下,光合速率低于对照且叶绿体片层结构趋于解体,嗜锇颗粒数量明显增多。     

盐度对青鳉鱼肠内Na+-K+-ATPase基因表达的影响

用实时定量RT-PCR(Q-RT-PCR)检测不同盐度对青鳉鱼肠内Na -K -ATPaseα和Na -K -ATPaseβ基因表达的影响。结果表明,青鳉鱼肠内Na -K -ATPaseα基因表达量在5 g/L1、5 g/L和25 g/L的盐水中不变,Na -K -ATPaseβ基因表达在15 g/L2、5 g/L的盐水中被显著抑制(P<0.05)。盐度升高抑制青鳉鱼肠内Na -K -ATPaseβ基因表达。     

套袋红富士苹果果实发育过程中Ca~(2+)-ATPase活性变化

以红富士苹果(Malus domesticaBorkh.cv.‘Red Fuji’)为试材,研究了发育过程中以及成熟后期套袋果实Ca2+-ATPase的活性变化。结果表明,发育初期,苹果果实的Ca2+-ATPase活性较高,随着果实生长发育,Ca2+-ATPase活性逐渐下降,在发育后期Ca2+-ATPase活性有所提高。与对照相比,套袋红富士苹果果实Ca2+-AT-Pase的活性呈现先降低后升高又降低的变化趋势。发育后期,摘除果袋后苹果果实的Ca2+-ATPase活性与对照相比有显著增加。与对照相比,套袋降低苹果果实的Ca2+浓度。由此表明,套袋可能通过影响钙素的吸收运转和Ca2+-ATPase活性而调控苹果果实的生长发育和品质形成。